Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoide

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    21-May-2015
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    Science

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Introduction, réaction de Waaler-Rose, réaction au Latex : principe-réactifs-mode opératoire-lecture-interprétation.

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  • 1. Srodiagnosticde la polyarthriterhumatodePar S / AbdessemedAbdsalah

2. AbdsalahIntroduction La polyarthrite rhumatode est unemaladie inflammatoire du tissuconjonctif atteignant surtout lesynoviale des articulations, Sonretentissement fonctionnel est gravepuisquelle provoque souvent desdformations et des destructionsarticulaires irrversibles. 3. Cest une desaffectionsrhumatismalesdes plusrpandues,avec une netteprdominancefminine.Abdsalah 4. La dcouverte du Facteur Rhumatoideremonte 1940. Elle est due WAALERet sera complte par ROSE en 1948. Ces auteurs ont dmontr que lessrums de sujets atteints depolyarthrite rhumatode agglutinent leshmaties de mouton sensibilises par unsrum de lapin anti hmaties de mouton.Abdsalah 5. Les techniques classiques reposenttoutes sur des ractions dagglutinationspassives entre des Facteurs Rhumatoidesde classe igM et des igG fixes sur unsupport (hmaties ou particules delatex).Abdsalah 6. AbdsalahRaction de Waaler-Rosemodifie 7. AbdsalahPrincipe Des hmaties de mouton sontsensibilises avec du srum de lapinanti-hmaties de mouton (igG). La raction est base sur les propritshmagglutinantes spcifiques du FR,utilises dans les ractions typeWAALER-ROSE. 8. AbdsalahPrincipeHmatiessensibilisesFR declasse igM Agglutination 9. AbdsalahMatriel et ractifs- Hmaties test- Hmatie contrle- Compte gouttes dlivrant 50l/gouttes- Agitateur usage unique- Lame de verre quadrill 10. AbdsalahMode opratoireSur une lame de verre :-dposer sur la lame dans chaque case Tet R 50 l de srum examiner-Agiter soigneusement les suspensionsdhmaties tmoin et rvlateur. 11. - Ajouter dans la case T une goutte deractif tmoin A et dans la case R unegoutte de ractif rvlateur B .-Mlanger les deux gouttes en utilisant unagitateur usage unique.NB :AbdsalahLire les rsultats pendant les deuxpremiers minutes de la manipulation. 12. AbdsalahLecture Raction positive : case T : absence dagglutination Case R : agglutination visible loeil nu. Raction ngative : case T : Absence dagglutination Case R : Absence dagglutination 13. Raction dagglutination auAbdsalahLATEX 14. AbdsalahPrincipe Le test FR Latex est un testdagglutination rapide pour la dtectiondirecte et semi quantitative sur cartedes facteurs rhumatoides (FR). Lantigne, est une suspension departicules de latex recouvertes degamma globulines humaines, quisagglutinent en prsence des facteursrhumatoides prsents dans le srum despatients. 15. AbdsalahRactifsAntigne FR- Latex: 2,5 ml, Suspension departicules de latex recouvertes de gammaglobulines humaines, azide de sodium 0,95g/l la sensibilit de lantigne est calibrede manire dtecter environ 08UI/Mldune prparation internationale derfrence de srum de polyarthriterhumatode (WHO).Contrle positif: 1ml srum humain, azidede sodium 0,95 g/l.Contrle ngatif: 1 ml srum animal, azidede sodium 0,95 g/l. 16. Matriel Agitateur rotatifrglable 100 r.p.m Cartes tests Agitateurs usageAbdsalahunique 17. AbdsalahEchantillonsSrum : stable pendant 48h 2-8C. Les srums hmolyss et lipmiques nesont pas adquats pour le test ; ilsrisquent de donner des rsultatserrons. 18. AbdsalahProtocole Pralablement, sortir les ractifs et leslaisser squilibrer la temprature de lapice. Dposer 50l dchantillon et une gouttede chaque contrle dans les cerclesindividualiss sur la carte test. Agiter lgrement le flacon dantigneavant de lutiliser. Dposer une goutte deractif FR- Latex dans chaque cercleprs de lchantillon tester. 19. Mlanger avec agitateur usage uniquede manire recouvrir totalement lredfinie par le cercle. Utiliser un nouvelagitateur pour chaque chantillon. Faire tourner la carte 100 r.p.m.pendant 2 minutesAbdsalah 20. Lecture et Interprtation Apres avoir retir la carte de lagitateurrotatif, examiner loeil nu la prsenceou labsence dagglutination dans laminute qui suit . Une agglutination visible indique laprsence de facteur rhumatode08UI/ml.Abdsalah 21. Un srum positif doit tre titr. Pourtitrer, faire des dilutions de deux endeux dans une solution saline 9 g /l. le titre dun srum est dfini commetant la plus grande dilution donnant unrsultat positif. Le taux approximatif dun srum en FR(UI /mL) peut tre obtenu en multipliantle titre par la limite de sensibilit (08UI/mL).Abdsalah 22. AbdsalahLimites de la Mthode Un diagnostic ne peut reposeruniquement sur ce test qui doit venir encomplment dautres tests biologiques(ex : Waaler-Rose) et de lexamenclinique. Lincidence de rsultats positifs avecdes srums de sujet apparemment sainsest de lordre de 3-5%. 23. Des ractions positives peuvent treobtenues non seulement dans le cas depolyarthrite rhumatode, mais aussi demononuclose infectieuse, dhpatite, desyphilis, et de patients gs.Abdsalah 24. AbdsalahNotes la sensibilit du test diminue bassetemprature. Les meilleurs rsultats sonobtenus des tempratures suprieures 10C. une lecture diffre peut rsulter enune surestimation du titre de FR. 25. Abdsalah