Analyse Urinaire Sedimax mai 2011

Analyse urinaire par microscopie automatisée: expérience au laboratoire de la clinique Saint-Luc de Bouge

Jérémie Gras Médecin Biologiste

GLEM CHR - jeudi 5 mai 2011

Clinique Saint-LucLaboratoire de Biologie Clinique

5004 Bouge

PLAN

1. Contexte

2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX

3. Présentation de quelques cas

4. Evaluation technique

5. Comparaison des systèmes automatisés

6. Conclusions



5004 Bouge

• Laboratoire 24/7, fortement automatisé:• MPA• 2 Modulars PPEE• 2 Stagos on track

• Jusqu’à 1192 dossiers/ jours

• Volonté d’obtenir l’accréditation

1. Contexte


5004 Bouge

1. Contexte


5004 Bouge

Secteur sédiments urinaires en octobre 2010:

• Non automatisé

• Tigettes manuelles Roche, lecture manuelle, résultat recopié sur liste puis encodé dans le LIS

• Sédiments microscopiques

• Jusqu’à 120 sédiments pas jour

• Presque deux personnes occupées à temps plein

1. Contexte


5004 Bouge

Secteur sédiments urinaires en octobre 2010:

• Manque de traçabilité

• Manque de standardisation

• Risque important d’erreurs

• Prenant en termes de personnes

→ Tout cela a été pointé dans un audit interne d’octobre 2010

1. Contexte


5004 Bouge

De plus:

• Nécessité d’une pièce isolée pour la biologie moléculaire

• Rapprochement du laboratoire de chimie

• …sans perdre la proximité avec la bactério

1. Contexte


5004 Bouge

→ Décision d’automatiser le secteur

→ Décision d’évaluer la chaîne Menarini:

• « Continuous Loading, walk away » analyser

• Plate- forme microscopique

• Automatisation importante

1. Contexte


5004 Bouge

→ Décision d’évaluer la chaîne Menarini:

1. Contexte


5004 Bouge

1. Contexte


5004 Bouge

→ Pourquoi pas un Sysmex ?

• Automatisation incomplète

• A réamorcer si standby

• Soft subobptimal

• Maintien de deux plates-formes parallèles

1. Contexte


5004 Bouge

→ Pourquoi pas un IQ 200 ?

• Testé mais non-satisfaction des technologues

• Principalement, difficultés avec les images

1. Contexte


5004 Bouge

1. Contexte


5004 Bouge

SediMax AutionMaxPont

1. Contexte


5004 Bouge

AutionMax

1. Contexte


5004 Bouge

SediMax

Cuvette

→ Période d’évaluation:

• Passage de 336 échantillons patient

• Comparaison avec la microscopie et les tigettes manuelles

• Chaîne de démonstration

1. Contexte


5004 Bouge

→ Période d’évaluation:

• 336 échantillons patient • 23 « crowded »

• Sédiments non édités !

• Comparaison avec la microscopie et les tigettes manuelles

• Chaîne de démonstration

1. Contexte


5004 Bouge

→ Période d’évaluation: Globules rouges

1. Contexte

Tableau croisé RBC + or -, current method * RBC + or -, SediMax

RBC + or -, SediMax Total

Negative for RBC

with SediMax

Positive for RBC with

SediMax

RBC + or -, current method Negative for RBC with current

method

241 15 256

Positive for RBC with current

method

18 39 57

Total 259 54 313

Correspond à des pyuries concomitantes


5004 Bouge

→ Période d’évaluation: Globules blancs

1. Contexte

WBC + or -, SediMax Total

Negative for WBC

with SediMax

Positive for WBC

with SediMax

WBC + or -, current method Negative for WBC with current

method

169 56 225

Positive for WBC with current

method

6 82 88

Total 175 138 313


5004 Bouge

→ Période d’évaluation: CVs:

• CVs sur QC Kova-Trol:

• GB: 9,88 %

• GR: 8,88 %

• A comparer avec les 30-40 % de la microscopie manuelle

1. Contexte


5004 Bouge

→ Période de validation :

• Passage de 86 échantillons patient

• Comparaison

• Sur notre chaîne

• CVs sur Bio-Rad Quantify Plus:

• GB: 11,43 %• GR: 9,37 %

1. Contexte


5004 Bouge

→ Implémentation:• Percement d’une communication avec la bactério

1. Contexte


5004 Bouge

→ Implémentation:

• Utilisation d’un nouvel osmomètre Menarini

• Création d’un utilitaire LIS « gestion des échantillons d’urine)

• Protéines urinaires sur Modular: • Si tigette > traces• Si < 5GB

1. Contexte


5004 Bouge

PLAN

1. Contexte





6. Conclusions



5004 Bouge

1. Globules Blancs:

• Neutrophiles le plus souvent

• Rencontrés dans:– Infection urinaire – Glomérulonéphrite– Néphrite interstitielle– Polykystose– Problèmes urologiques



5004 Bouge

GB

GB

GB

GB

2. Globules Rouges:

• Globules rouges normaux: – Rencontrés dans:

» Lésions depuis les tubules rénaux jusqu’à l’urètre• Infections urinaires• Lithiases• Néoplasie de l’urothélium• Hématurie d’effort…

• Globules rouges dysmorphiques: origine glomérulaire– Rencontrés dans:

» Glomérulonéphrites» Autres atteintes glomérulaires



5004 Bouge

GRGR

GR

Globules rouges dysmorphiques

• Anomalies membranaires

• Acanthocytes


5004 Bouge

• Amas de globules rouges

3. Cellules épithéliales squameuses:

• Origine: vagin et urètre

• Peu de valeur diagnostique

• Rencontré:– Chez les femmes à l’état normal– Si toilette insuffisante– Vaginite



5004 Bouge

Cellule épithéliale squameuse

Cellule épithéliale squameuse

Amas de cellules épithéliales squameuses

4. Cellules épithéliales non squameuses:

• Type: – Cellules tubulaires rénales

» Rencontré dans: • Nécrose tubulaire• Néphrite interstitielle• Rejet de greffe

– Cellules épithéliales transitionnelles» Rencontré dans:

• Néoplasie urothéliale



5004 Bouge

Cellule épithéliale non squameuse



Amas de cellules épithéliales non

squameuses

NEC: atypies cellulaires !

5. Cylindres hyalins

• Constitués de la protéine de Tamm-Horsfall

• Rencontré chez:– Sujet normal– Exercice physique– Pyrexie– Déshydratation– Pathologies rénales



5004 Bouge

Cylindres hyalins

Cylindres hyalins

Cylindres hyalins

Cylindre hyalin tortueux

Cylindres hyalins

6. Cylindres pathologiques

• Cylindres:– Granuleux– Hyalino-granuleux– Leucocytaires– …

• Rencontré dans:– Nécrose tubulaire aigue– Glomérulonéphrite– Saignement glomérulaire– …



5004 Bouge

Cylindres hyalino-granuleux

Cylindres granuleux

Cylindre leucocytaire

Cylindre érythrocytaire

Cylindre érythrocytaireGRD

GRD

Cylindre cellulaire mixte

QUELQUES CRISTAUX


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7.a. Cristaux d’urate amorphe et de phosphate amorphe

• Distingués en fonction du pH

• Intérêt clinique pas net



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Echantillon 3920123:Urates amorphes

Echantillon 3920123:Après chauffage !

Oxalate dicalcique

Bactéries (coccobacilles)

7.b. Cristaux d’oxalate calcique

• Rencontré chez:– Patient normal (nutrition: chocolat, cacahuètes, épinards…)– Lithiases– Hyperoxalurie– …



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Oxalates dicalciques

Oxalates dicalciques

Oxalate monocalcique

Oxalate dicalcique

7.c. Phosphates triples

• Rencontré chez:– Infections urinaires avec proteus, ureaplasma urealyticum,…



5004 Bouge

Phosphates triples (ammoniaco-magnésiens)

Phosphates triples (ammoniaco-magnésiens)

7.d. Acides uriques

• Rencontré chez:– Patients normaux– Lithiases– Syndrome de lyse tumorale



5004 Bouge

Acides uriques

Acides uriques

8. Bactéries

• Rencontré dans:– Infections urinaires – Contaminations– …



5004 Bouge

Bactéries (bacilles)

9. Levures

• Rencontré chez:– Infections urinaires – Chez patients diabétiques ou immunodéprimés



5004 Bouge

Levures

PLAN

1. Contexte





6. Conclusions



5004 Bouge

Cas 1


5004 Bouge

Le sédiment en résumé:

• GB: 76 / Champ (++)

• GR: 19 / Champ (++)

• Bactéries: ++

Cas 1

GB

GB

GR

Cas 1


5004 Bouge

Enterobacter Aerogenes

Cas 2


• GB: 57 / Champ (++)

• GR: 3 / Champ (+)

• Bactéries: ++

Cas 2

GB

GB

Cas 2 Staphylocoque Saprophyticus

Cas 3


• GB: 438 / Champ (+++)

• GR: 19 / Champ (++)

• Bactéries: ++

Cas 3

GB

GB

Cas 3 Pseudomonas Aeruginosa

Cas 4 Avant dilution

Cas 4 Après dilution

Cas 4


• GB: 557 / Champ (+++)

• GR: 3,5 / Champ (+)

• Bactéries: +++

Cas 4 E. Coli

Cas 5


5004 Bouge


• GB: 3,6 / Champ (+)

• GR: 12,9 / Champ (++)

• Cylindres hyalins : ++++

Cas 5

Cylindres hyalins

GR

Cas 6


5004 Bouge


• GB: 2 / Champ (+)

• GR: 58 / Champ (++)

La tigette en résumé:

• Protéines: ++ (200 mg/dL)

• Blood: +++

Cas 6

GR

GR

GRD

GRD

GRD

GRD

Cas 7


5004 Bouge


• GB: 5 / Champ (+)

• GR: 123 / Champ (+++)


• Protéines: ++ (100 mg/dL)

• Blood: +++

Cas 7

GRD

GRD

Cylindre érythrocytaire

Cas 8


5004 Bouge


• GB: 14 / Champ (+)

• GR: 4061 / Champ (+++)


• Protéines: ++ ( 200 mg/dL)

• Blood: +++

Cas 8 Avant dilution

GR

Cas 8 Après dilution

GR

Cas 8

• Carcinomatosepéritonéale

• Envahissement urétéral

• Urétéro-hydronéphrose bilatérale

Cas 9


5004 Bouge

• Jeune patient (26 ans)

• Urgences

• AEG

• Insuffisance rénale

• Atteinte hépatique

Cas 9


5004 Bouge


• GB: 6 / Champ (+)

• GR: 0 / Champ (Nl)

• Cylindres granuleux ++


• Protéines: ++ ( 100 mg/dL)• Urobilinogène: ++• Bilirubine: +

Cas 9

Cylindres granuleux

GB

Cylindres granuleux

Cylindres granuleux

Cellules non identifiées(NEC ?)

• Même patient

• Contrôle après hospitalisation

• Sans traitement spécifique

• Résolution de la symptomatologie et des anomalies biologiques


5004 Bouge

Cas 9

PLAN

1. Contexte





6. Conclusions



5004 Bouge



5004 Bouge

Problèmes techniques rencontrés en 3 mois et demi:

1. Sur l’AutionMAX:

1. Erreurs sur la bande de transport des tigettes (2x)

2. Nécessité de recalibrer le blanc des tigettes

3. Mauvaise alimentation des tigettes dans le feeder (3x)



5004 Bouge

Problèmes techniques rencontrés en 3 mois et demi:

2. Sur le SediMAX:

1. Erreur de boussole du sampler (débris métallique) (1x)• Problème le plus sérieux à ce jour• Résolu sans intervention de Menarini

2. Erreur d’alimentation des cuvettes (1x)

3. Lenteur du programme en utilisation intensive• Edition des particules• Nécessité de terminer la tâche



5004 Bouge

Erreur de boussole du sampler (débris métallique) (1x)



5004 Bouge

Evaluation du soft:

• Bonne reconnaissance des particules suivantes:» GB» GR» Cylindres hyalins» Cellules épithéliales squameuses » Levures

• Reconnaissance plus difficile» Bactéries:

• attention aux échantillons « limite crowded »• quelques discordances

• Non reconnus, mais visualisés» Cylindres pathologiques» Précipités amorphes

PLAN

1. Contexte

2. Les composants du sédiment urinaire vus au Sedimax




6. Conclusions



5004 Bouge



5004 Bouge

Sysmex UF SediMAX IQ-200

Plate-Forme Cytométrie en flux Microscopie automatisée

Microscopie en flux

Volume minimal

0,8 mL 2 mL 3 mL

Avantages 1. Boîte noire2. Système expert

3. Système répandu

1. Coût2. Visualisation des

particules3. Automatisation

totale

1. Visualisation des particules

Inconvénients 1. Boîte noire2. Reviews microscopiques

3. Automatisation incomplète4. Coût

5. Carry-Over

1. Pas de système expert

2. Système nouveau

1. Images différentes

2. Reviewsmicroscopiques

3. Carry-over review

microscope6-35 % <1 % ?



5004 Bouge

Comparaisons:

• Sysmex UF-1000 i: • CVs de 6,5 % RBC (QC mat.) (Shavanfar et al CCLM 2007)• CVs < 20 % pour la majorité des paramètres

(Jiang T et al Scand J Clin lab invest 2011)

• Iris IQ 200: • CVs de 5,5 % RBC (QC mat.) (Shavanfar et al CCLM 2007)• CVs de 6,1 % à 32,4 % (QC mat) (Clin Chim Acta 2007)• Carry-over 0,21 % pour RBC et 1,92 % pour WBC (Park J et al

Korean J Lab Med 2008)

PLAN

1. Contexte

2. Les composants du sédiment urinaire vus au Sedimax




6. Conclusions



5004 Bouge

6. Conclusions


5004 Bouge

L’automatisation avec la chaîne Menarini a permis de:

1. Augmenter significativement le niveau de qualité du secteur

2. Réduire les besoins en personnel au poste

3. Faciliter la réalisation des sédiments lors des gardes

4. Réduire le temps de réponse

5. D’obtenir un taux de reviews microscopiques très bas

6. Conclusions


5004 Bouge

Nouveaux développements sur le Sedimax:

1. Possibilité de travailler avec différents tubes2. Nouvelles cartes hardware3. Seringue Hamilton4. Plus rapide (jusqu’à 100 échantillons/ heure)5. Software en 7 langues (dont français)6. Module d’évaluation M7: amélioration pour la

reconnaissance de:1. Cellules épithéliales2. NEC3. Cylindres pathologiques et hyalins


5004 Bouge

Secteur sédiments urinaires: L’équipe des biologistes:

Marjorie Jacques Philippe GillionAndrée Mathias Catherine RosseelsBetty Rousseau Kim Laffineur

Christine EucherEquipe IT: Jean-Marie Gilson

Diana de FabritiisLaurence Rozen

Service technique:Mr. LissoirMr. Alexandreet leurs collaborateurs

Tableaux croisés dynamiquesOlivier Collet

Menarini:

Claudine PichotEric Frere

Remerciements


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