Maladies infectieuses émergentes et biotechnologies

A. FlahaultEcole des Hautes Etudes en Santé Publique

24 avril 2007

La Réunion, 2006 (785 000 hab.) Chikungunya, bénin ou non ?

109876543210

Gravité de la maladie

300

250

200

150

100

50

0

Effe

ctif

Moyenne =7,7875Ecart type =2,03086N =1 021

Médiane = 8

• 266 000 cas• 255 certificats décès

avec "chikungunya"• 40 transmissions

néonatales• 2-4% de cas

hospitalisés– 247 cas en réanimation, – 63 décès

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

[0-5] [6-15] [16-30] [31-45] [46-60] [61-75] [76-90] > 90

Classes d'âge (en années)

Nombre de décès

Chikungunya vu comme modèle ?

• Une arbovirose méconnue• Une maladie - rarement sévère - et

touchant 40% d'une population• Dans une région très développée, tout

comme chez les pays voisins moins développés

=> un modèle intéressant pour l'étude et la réponse sur les maladies émergentes

Histoire naturelle et marqueurs biologiques

InoculationSignescliniques

En moyenne J-3 J0 J4-J7 J15

IgM

Début brutalArthralgies, fièvre, rash cutanéCéphalées, érosions bucales

IgG

Incubation(1 à 12 jours)

ARN viral jusqu'à J5 (RT-PCR)

Deux vagues épidemiques ?

0

5000

10000

15000

20000

25000

30000

35000

40000

45000

50000

S9 S11

S13

S15

S17

S19

S21

S23

S25

S27

S29

S31

S33

S35

S37

S39

S41

S43

S45

S47

S49

S51

S1 S3 S5 S7 S9 S11

S13

S15

S17

S19

S21

S23

S25

S27

2005 ? 2006

Séquençage du génome duvirus chikungunya

Océan indien : 92 séquences de 89 patientsDate Séquences A226 V226

Mars à Juin 2005 19 19 0

Septembre à Décembre 27 0 27

Janvier à Mars 2006 46 6 40

Mutation de A226 en V226 entre les 2 vagues épidemiques

De Schuffenecker I et coll., PLoS Medicine, 2006

Boelle and Flahault, Vect Born Zoon Dis, 2007

Deux vagues mais une seule

force épidémique

3 < R < 4

Week

Rep

rodu

ctio

n nu

mbe

r

02

46

810

2005

-13

2005

-17

2005

-21

2005

-25

2005

-29

2005

-33

2005

-37

2005

-41

2005

-45

2005

-49

2006

-120

06-5

2006

-920

06-1

3

Inci

denc

e

10

50100

5001000

500010000

50000

06/2004 : 75%

01/2005 : 63%

03/2005

01/2005 : 40%

04/2005 : 38%

12/2005 ?/2005

10/2005

La dissémination d'Aedesalbopictus entre 1980 et 2007

de Charrel R et coll. NEJM, 2007

Aedes albopictus progresse en Europe et des cas importés de chikungunya sont recensés

4

11

17116

12

1

1

807

source InVS

Stratégie de contrôle Séquençage complet, ORFéome, IntéractomeDiagnostics

– kits diagnostiques (sérologie, RT-PCR, ...)

Traitements– médicaments déjà sur le marché– recherche de nouveaux anti-viraux– traitements immunologiques

• sérums de convalescents• anticorps monoclonaux• vaccins classiques ou chimériques

Lutte anti-vectorielle– adulticides et larvicides– insectes génétiquement modifiés, mâles stériles (irradiés), mâles

stérilisant les femelles

Séroprévalence et émergence : le dilemne de l'urgence vs la qualité

1. Rapide mais approché :Serums déjà prélevés de 900 femmes enceintes

2. Rigoureux, mais long :Recueil prospectif de sérumsd'un échantillon représentatifde 2442 personnes

CIC-La RéunionCNR Arboviroses, Pasteur, Lyon

Figure 2: Seroprevalence survey in 900 pregnant women, La Réunion from 15 Jan.

to 15 Feb. 2006

0,00

5,00

10,00

15,00

20,00

25,00

3 4 5 6 7

Week No (2006)

% Ig

M+

Chi

kung

unya

La chloroquine est un inhibiteur de la réplication du CHIKV ex-vivo

X. de Lamballerie, Unité des Virus Emergents, Marseille, mars 2006

Essais cliniques

• CuraChik : essai randomisé chloroquine contre placebo, double insu ; 250 patients– analyse intérmédiaire (31 Août 2006) : 75 pts.

Le macaque : modèle animal

Le Grand, 2006100

1000

10000

100000

0 5 10 15 20

Temps post infection (jours)

Nom

bre

abso

lu d

e ce

llule

s ci

rcul

ante

s

lymphocytes

Granulocytes

Monocytes

Charge virale

Infection expérimentale

Charge virale plasm

atiqueLog(eqTC

ID50)

7

6

5

4

3

2

1100

1000

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0 5 10 15 20

Temps post infection (jours)

Nom

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Charge virale

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Granulocytes

Monocytes

Charge virale

Infection expérimentale

Charge virale plasm

atiqueLog(eqTC

ID50)

7

6

5

4

3

2

1

– J1-J5: virémie détectable par RT-PCR – J2: fièvre, arthralgies fugaces – J1-J3: éruption diffuse modérée – J3-J5: oedème du cou, angine

Le Grand, Sept. 2006

Expérimentation chez l'animal

• PrimaChik : essai préventif chez 18 macaques en animalerie sécurisée (A3)(CEA, Fontenay-aux-roses) Nov. 06 -

Mar. 07

De Lamballerie X, Lotteau V, Aumont G, Le Grand, 2006

Evolution des plaquettesEvolution des leucocytes

Anticorps monoclonaux

• 2002 : 30% des médicaments approuvésAc monoclonaux et protéines recombinantes

• 2010 : >90% des revenus des biotech.• 3 générations d'anticorps monoclonaux

– Ac chimériques– Ac humanisés– Ac humains clonés

• clonage-transformation-activation de Lymphocytes B circulant d'un convalescent

Vaccins chimériques

• Attacher une partie du virus qui déclenche l'immunité sans être pathogène à un vecteur viral non pathogène

identifiée à partir d'Ac monoclonaux

ORFéome - Intéractome

• ORFéome exhaustif du virus– clonage à partir de séquences codantes– dans des vecteurs produisant des protéines

recombinantes -> Ac monoclonaux• Intéractome

– cartographie des intéractions entre protéines• virus - hôte• virus - virus

– recherche fondamentale et identification de cibles thérapeutiques

• facteurs de susceptibilité ou de résistances de l'hôte aux formes graves

Fontenille Journeaux Paupy Boisson Aumont GaüzèreFlahault Hervé

Sanquer Lotteau Favier Setbon de Lamballerie

La cellule de coordination des recherches sur la dengue et le Chikungunya

La Réunion, Octobre 2006