Modèles Animaux En Pathologie Cardiaque
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Modèles AnimauxEn Pathologie Cardiaque
Dr Alain BelHEGP, Paris
Lyon, le 25 Novembre 2010
Contrôle du débit ou de la pression de perfusion
Cœur soumis à une postcharge (working heart)
Cœur ischémique ou hypoxique (altération de l’oxygénation du perfusat et/ou du débit de perfusion)
Etude de la fonction VG (systolique et diastolique)
Cœur Isolé PerfuséLangendorff
Nouveaux Modèles Animaux
Pour quoi faire?
Recherche fondamentale? vs échantillons humains
Quelle pathologie étudier? Contrôle de l’environnement
PertinenceSimilitude/humainReproductibilitéFacilité d’étude clinique et para-clinique
Pas de limite à l’imagination humaine! / comités d’éthique
• Recherche fondamentale, physiologie
•Ischémie
• Cardiopathie dilatée
• Valves
• Pathologie congénitale (shunts, HTAP…)
• Athérosclérose, Troubles du rythme, Tx…
Domaines
Nouveaux Modèles
Se poser toutes sortes de questions +++!!!
Recherche fondamentale ou appliquéeMécanisme, facteursCœur sain: isolé (Langendorff) ou corps entier (contrôle autres variables) Hémodynamique, marqueurs, traceurs, imagerie (écho, IRM, PetScan, microscopie, biologie fondamentale)Cœur pathologique: pertinence du modèle pathologique créé, reproductibilité, tester des mécanismes ou des drogues, moyens d’appréciation
Limites +++ (anatomique, physiologique, immunologique…)
Choix de l’AnimalPathologie existe (état naturel, génétique) ex: lapin Watanabe et athérome, chien et dystrophie musculaire, souris transgénique et cardiomyopathieImportance ou non de l’anatomie proche ou validation d’un conceptCréer la pathologie
Taille: adaptée à l’étude (ex: cellules ou valve)ou aux outils (chirurgicaux, techniques, biologiques…)
Age: période de croissance de l’animal intéressante ou non
Outils d’appréciation: biologie (marquage monoclonal pour l’espèce)imagerie (échographie, IRM, angiographie…)immunologie (primates)
Durée du suivi: jours, mois, années
Possibilités de l’animalerie: coût, personnel, compétences, autorisations…
Choix « éthique » ex: chien en France (dystrophies musculaires….)
Cardiopathie IschémiqueIschémie temporaire ou création d’un IDM localiséDéfinitif (+ répétitions si besoin)
aigu: ligature, embolisation (coils), toxique (alcoolisation, venin..)progressif: améroïdes
Temporaire (+/- fermeture pariétale)tirettenœud coulant
Petit animal:• Thoracotomie gauche: ligature prox CG, mortalité >1/3• Sternotomie: choix du lieu de ligature coronaire
Gros animal:• Sternotomie, thoracotomie ou percutané• Choix de l’artère coronaire à occlure
Ischemie 1 heure, reperfusion
IDM
Anapath de lAnapath de l ’’ IDMIDM
IDM par ligature coronaire
IDM temporaire
Cardiopathie Ischémique Toxique
Anapath après injection de venin
Améroïde
Thérapie cellulaire: voies de délivrance
Intraveineux Intracoronaire Endocardique Epicardique
Sinus Coronaire
Thérapie Cellulaire Epicardique
Thérapie Cellulaire Endocardique
Thérapie Cellulaire Endocoronaire
Patch Cellularisé
Shimizu et al. Biomaterials 2003;24:2309-16.
Memon et al. J Thorac Cardiovasc Surg2005;130:1333-41.
Thérapie CellulairePatch Cellularisé
Cardiopathie Dilatée, Hypertrophique ou Restrictive
• Ischémique à répétition + temps• Médicamenteuse (adriamycine), radique• Par électro-stimulation rapide• Surcharge volumique chronique• Surcharge de pression (post-charge) chirurgicale(sténose Ao abdominale, cerclage de l’AP)• A(dys)kinésie chirurgicale (patch ventriculaire)
Animaux transgéniques: surexpression de mutationsSouris MyBPc (cardiopathie hypertrophique)Souris cardiomyopathie desmine-dépendante,cardiopathie dilatée, surexpression myotrophine
Electro Stimulation Rapide
Cardiopathie Restrictive
Valves
Création de la pathologie valvulaire: difficilechirurgie en 2 temps, valvules (ballonisation, perforation)percutané: section de cordages
ischémie de pilierperforation par emporte pièce
Chirurgie directe (mouton, chèvre, porc) sous CEC
Chirurgie percutanée: endoprothèse valvulaire, clips mitraux…
Procédures Endo-ventriculaires
Plastie Mitrale
Bioprothèse Péricardique
Carmat
Des valves cardiaques au cœur artificiel
Pathologie Congénitale
HTAP cerclage de l’AP ajustable (technologie chambres implantables)Améroïdeanastomose systémico-pulmonaireExposition chronique en caisson hypobare
HTAcoarctation de l’aorte par cerclage ajustable
Shunts CIA par dilatation au ballonnet, CIV par alcoolisation, FAV…
Shunts: création de CIA
Rythmologie
Electro-physiologie in vivo
AC/FAStimulation rapide prolongée de l’oreilletteApplication topique d’acétylcholineArythmies post-ischémiques
Création de BAV par radiofréquence
Athérosclérose Coronaire
Plaque d’athérome vulnérable +++
Modèles porcins d’athérosclérose avancéePorcs transgéniques
Lapin Watanabe
Divers:Membranes anti-adhérences
Cova™ vs Seprafilm ®
Animaux transgéniques
Micro-chirurgie
Transplantation hétérotopique rat / souris
Circulation extra-corporelle chez le rat
Avancées
Surexpriment des gènes ciblés(fabriquent davantage de molécules intéressantes qu’un animal normal)
Animaux knock-out (KO) : un gène d’intérêt a été inactivé afin de mieux connaître son rôle en observant l’impact de l’absence de la ou des protéines qu’il code
La production de ces animaux est difficilesoit technique de micro-injection d’ADN utilisée pour la transgenèse n’est pas assez efficace (vecteurs viraux)soit il est délicat d’obtenir des rats KO via la manipulation de cellules embryonnairesTechnique nommée genome walking permet de localiser les transgènes intégrés dans les cellules
Animaux Transgéniques
Canule artérielle
Canule veineuse
Tête de pression
Abord carotidien
Trachéotomie
Ventilation mécanique
V. Le GuillouCHU Rouen
Pompe àgalet
Oxygénateur
Ligne veineuse
Ligne artérielle
Réservoir de cardiotomie
Oxygène
V. Le GuillouCHU Rouen
Rien n’est impossible!
Beaucoup d’obstination, de patience !Multi-disciplinarité !Discuter, écouter les conseils!
Hôpital Européen Georges Pompidou
Cell Therapy of Cardiac Diseases
Pôle Cardio-vasculaire