MycoplasmeMycoplasme

Civel / Joffin / Karczinski - Microbiologie / ABM2

1. Définition

- Incapable de produire les précurseurs de peptidoglycanes- Résistant aux bétalactamines (pas de PLP)

- Plus petites formes de vie autonome connue : 0,3 µm de long - Plus petit génome - Culture difficile

- Polymorphes (rondes, ovoïdes, filamentuses)

Le génome de Mycoplasma genitalium serait l'un des plus petits au monde (hors-virus), après la bactérie endosymbiote Carsonella ruddii récemment découvertee

2. Classification

2. Classification

Règne : Bacteria (procaryote)

Classe : Mollicutes (peau molle)

Ordre : MycoplasmatalesFamille : Mycoplasmataceae

Genre : Mycoplasma, Ureaplasma

2. Habitat

Parasites (commensales ou pathogènes) des animaux (muqueuses urogénitales et respiratoires) et des plantes (spiroplasmes des agrumes), ou saprophytes

Surtout des parasites des muqueuses, se collant aux cellules (car recherche du cholestérol).

3. Pouvoir pathogène

Beaucoup sont commensauxBPO

Mycoplasmes respiratoires : Mycoplasma pneumoniae → Responsable d’infections pulmonaires souvent bénignes / Mais pouvant provoquer des pneumonie graves

Mycoplasmes génitaux ou uro-génitaux : → Ureaplasma urealyticum : urétrites chez l’homme / infections génitales chez la femme → Mycoplasma hominis : salpingites (cause de stérilité)

Forte transmission sexuelle !Pour pouvoir conclure à une infection à Mycoplasme il faut en trouver une quantité importante (et éliminer les autres possibilités)

4. Isolement et identification

Diagnostic difficile : - La culture est difficile - Les Mycoplasmes sont de fréquent commensaux

Il faut prélever par grattage (les bactéries adhèrent aux cellules)Il faut trouver beaucoup de Mycoplasmes (>104/mL)

4. Isolement et identification

Milieux de culture : - La culture est difficile - Il faut des milieux riches :

extrait de levuresérum (apporte le cholestérol et autres)ADN (apporte les bases azotés)ProtéinesNaCl (isotonique)source d’énergie : glucose pour M. pneumoniae

arginine pour M. hominis urée pour U. urealyticum

pH adapté à chaque espèce, microaérophilie, atmosphère enrichie en CO2

Exemples de milieux :Gélose A7, bouillon urée-arginine

4. Isolement et identification

Identification : - Mise en évidence de l’ADH, de l’uréase, de la fermentation du glucose… - Examen macroscopique des colonies :

œuf sur le plat (M. hominis)oursin (Ureaplasma)mûriforme (M. pneumoniae)

4. Isolement et identification

Identification :

4. Isolement et identification

Identification :

Mycoplasma pneumoniae

Mycoplasma fermentans

Mycoplasma hominis

Ureaplasma urealyticum

Fermentation du glucose

Uréase

ADH

pH optimum

Taille des colonies (µm), en 24h

forme

4. Isolement et identification

Identification :

Mycoplasma pneumoniae

Mycoplasma fermentans

Mycoplasma hominis

Ureaplasma urealyticum

Fermentation du glucose + + - -

Uréase

ADH

pH optimum

Taille des colonies (µm), en 24h

forme

4. Isolement et identification

Identification :

Mycoplasma pneumoniae

Mycoplasma fermentans

Mycoplasma hominis

Ureaplasma urealyticum

Fermentation du glucose + + - -

Uréase - - - +

ADH

pH optimum

Taille des colonies (µm), en 24h

forme

4. Isolement et identification

Identification :

Mycoplasma pneumoniae

Mycoplasma fermentans

Mycoplasma hominis

Ureaplasma urealyticum

Fermentation du glucose + + - -

Uréase - - - +

ADH - + + -

pH optimum

Taille des colonies (µm), en 24h

forme

4. Isolement et identification

Identification :

Mycoplasma pneumoniae

Mycoplasma fermentans

Mycoplasma hominis

Ureaplasma urealyticum

Fermentation du glucose + + - -

Uréase - - - +

ADH - + + -

pH optimum 6,5 – 7,5 7,3 - 8 5,5 - 8 5,5 – 6,5Taille des colonies (µm), en 24h

forme

4. Isolement et identification

Identification :

Mycoplasma pneumoniae

Mycoplasma fermentans

Mycoplasma hominis

Ureaplasma urealyticum

Fermentation du glucose + + - -

Uréase - - - +

ADH - + + -

pH optimum 6,5 – 7,5 7,3 - 8 5,5 - 8 5,5 – 6,5Taille des colonies (µm), en 24h

100-400 100-300 100-300 10-50

forme

4. Isolement et identification

Identification :

Mycoplasma pneumoniae

Mycoplasma fermentans

Mycoplasma hominis

Ureaplasma urealyticum

Fermentation du glucose + + - -

Uréase - - - +

ADH - + + -

pH optimum 6,5 – 7,5 7,3 - 8 5,5 - 8 5,5 – 6,5Taille des colonies (µm), en 24h

100-400 100-300 100-300 10-50

forme mûriforme Œuf sur le plat

Œuf sur le plat oursin

4. Isolement et identification

Numération : Nombreuses techniques possibles.

Dénombrement sur gélose A7, comparaison via des abaques

4. Isolement et identification

Numération : Technique Biomérieux :- Ensemencement d’un bouillon Urée Arginine, immédiatement après le prélèvement- Prélèvement à la pipette / dépôt de 3 gouttes sur une gélose (37°C, anaérobie ou microaérophilie, 24-48h)

4. Isolement et identification

Numération :

Technique Biomérieux :- Ensemencement d’un bouillon Urée Arginine, immédiatement après le prélèvement- Prélèvement à la pipette / dépôt de 3 gouttes sur une gélose (37°C, anaérobie ou microaérophilie, 24-48h)- Après incubation du bouillon : lecture ADH, uréase

Mycoplasma hominis

Ureaplasma urealyticum

Mycoplasma fermentans négatif

ADH + Uré +

4. Isolement et identification

Numération :

Technique Biomérieux :- Ensemencement d’un bouillon Urée Arginine, immédiatement après le prélèvement- Prélèvement à la pipette / dépôt de 3 gouttes sur une gélose (37°C, anaérobie ou microaérophilie, 24-48h)- Après incubation du bouillon : observation du bouillon (lecture ADH)- Après incubation sur boite : observation de la macroscopie + Numération (abaque)

4. Isolement et identification

Numération : Nombreuses techniques possibles.

Méthodes actuelles incluant une microgalerie : bouillons Urée, bouillon arginine, bouillon glucose + numération + antibiogramme…

4. Isolement et identification

Numération : Nombreuses techniques possibles.

Méthodes actuelles incluant une microgalerie : bouillons Urée, bouillon arginine, bouillon glucose + numération + antibiogramme…

4. Isolement et identification

Numération : Nombreuses techniques possibles.

Méthodes actuelles incluant une microgalerie : bouillons Urée, bouillon arginine, bouillon glucose + numération + antibiogramme…

4. Isolement et identification

Numération : Nombreuses techniques possibles.

Méthodes actuelles incluant une microgalerie : bouillons Urée, bouillon arginine, bouillon glucose + numération + antibiogramme…

4. Isolement et identification

Numération : Nombreuses techniques possibles.

Méthodes actuelles incluant une microgalerie : bouillons Urée, bouillon arginine, bouillon glucose + numération + antibiogramme…

4. Isolement et identification

Numération : Nombreuses techniques possibles.

Méthodes actuelles incluant une microgalerie : bouillons Urée, bouillon arginine, bouillon glucose + numération + antibiogramme…

4. Isolement et identification

Numération : Nombreuses techniques possibles.

Méthodes actuelles incluant une microgalerie : bouillons Urée, bouillon arginine, bouillon glucose + numération + antibiogramme…

4. Isolement et identification

Numération : Nombreuses techniques possibles.

Méthodes actuelles incluant une microgalerie : bouillons Urée, bouillon arginine, bouillon glucose + numération + antibiogramme…

5. Traitement et prophylaxie

Vaccins à l’étudeAntibiotiques utilisés : tétracyclinesAntibiogramme en milieu spécial (galerie)

5. Traitement et prophylaxie

Vaccins à l’étudeAntibiotiques utilisés : tétracyclinesAntibiogramme en milieu spécial (galerie)

Mesure de protection contre les IST