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Pr.S.ABDENNOUR2021-2022
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ANALYSETOXICOLOGIQUEI.Objectifdelatoxicologieanalytique:Miseenœuvredemoyenstechniquespourisoler,identifieretdoserunxénobiotiqueàpartird’unematrice(leplussouventbiologique…)Cen’estpasuniquementlanatured’unproduitquidéterminesatoxicitémaisaussisaconcentration!II.Typesdeprélèvements:
• Biologiques:Sang,Urines,Bile,Cheveux,Salive,Sueur,Viscères…• Nonbiologiques:Eau,Air,Sol,Autres
III.Matriceseloncinétique:
• Sang:quelquesheures(24àmax.48)• Urines:quelquesjours(3àmax.6)• Cheveux:dessemaines,desmois
IV.Prélèvementsbiologiquesavantages/inconvénients:
V.Classificationdestoxiques:
• Toxiquesminéraux:Métalliques(Pb,Hg,Cd…)ouNon-métaux(As,Se,Sb…)Nécessitentuneminéralisation
• Toxiquesgazeux:Ex:CO,HCN,NO,HCl…• Volatilsouentrainables:Isoléspardistillation,parentrainementàlavapeur
d’eauouàl’airchaud.Ex:alcools,phénols,dérivésaminésaromatiques…• Extractiblesparsolvants:Toxiquesorganiques
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VI.Isolementdestoxiquesminéraux«minéralisation»:VI.1.Voiesèche:CALCINATION
- four(450°C)- fouràmicroondes(1000°C)Ø Avantage:analysedequantitésimportantesd’échantillonØ Inconvénient:pertesparvolatilisation
VI.2.Voiehumide:-parlesacides+++HNO3-chauffésdefaçonconventionnelleouaumoyendelatechniquemicro-ondes.
Ø Systèmefermé:souspressionØ Systèmeouvert:pressionatmosphérique
VII.Isolementdestoxiquesgazeux:VII.1.Atmosphère:VII.1.1.Analysessurleterrain:TubesindicateursDräger,ProcédésphysiquesinstrumentauxVII.1.2.Analysesenlaboratoire:Sacsourécipients,CollecteursactifsoupassifsVII.2.Sang:microdiffusion.Ex:COVIII.Isolementdestoxiquesvolatilsouentrainables:Distillation,Entrainementàlavapeurd’eau,autresIX.Isolementdestoxiquesextractiblesparsolvants:Extractionliquide-liquide,Extractionsolide-liquideIX.1.Extractionliquide-liquide
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IX.2.Extractionenphasesolide(SPE):
Techniquesanalytiques:qualitatives/quantitatives.avantages/inconvénients:rapidité,sensibilité,spécificité,coût,reproductibilité,précisionI.RéactionscoloréesII.Spectroscopievisibleetultraviolette:qualitative/quantitativeIII.Immunochimie:bonnesensibilite,automatisation,sansphasepreliminaired’extraction
• Deuxtechniquesdequantification:
• III.1.Enphasehétérogène:PasdedifférencesentrelessignauxproduitsparlesformeslibresouliéesdesanalytesdoncNECESSITEDESEPARERdesdeuxformesavanttoutemesure!(RADIO-IMMUNODOSAGE)
• III.2.Enphasehomogène:DifférencedecomportemententrelaformeliéeetlaformelibredoncPASNECESSAIREDESEPARERlesdeuxformes(IMMUNODOSAGESOPTIQUES)
• III.1.Radio-Immunodosage:Laséparationdesformeslibresetliéesestdélicate.Réservéauxlaboratoireshabilitésàdéteniretmanipulerdessourcesradioactives
• III.2.ImmunodosagesOptiques:EMIT(enzymemultipliedimmunoassaytechnique),FPIA(Immunopolarisationdefluorescence)
• III.2.1.EMIT(enzymemultipliedimmunoassaytechnique):
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III.2.2.FPIA(Immunopolarisationdefluorescence)
IV. MéthodesChromatographiques/TechniquesSéparatives:
IV.1.CCM(CHROMATOGRAPHIESURCOUCHEMINCE)Permetdesépareretdecaractériserungrandnombredecomposésorganiquesgrâceàladifférencedeleurvitessedemigrationsurunecouched’unproduitadsorbantsousl’actiond’unmélangedesolvant(éluant).Ø plaquerecouverted’unephasestationnaire(geldesilice)Ø l’extraitestdéposésurlaplaqueØ migrationparcapillaritéascendantedansunechambreàdéveloppementau
moyend’unmélangedesolvantsappropriésØ RévélationdesmoléculessouslaformedetachescoloréesØ RfIV.2.HPLC:Mode:gradient/isocratique
Phasestationnaire:normale/inverse
Immunopolarisa,ondefluorescence
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Détecteurs:UV/visible;Masse
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IV.3.CPG:
Ø Gazvecteur:hélium,hydrogène,azoteetargonØ Colonne:remplie(maximum2mètres)oucapillaire(de15à100mètres).Ø Détecteur:FID,ECD,MS…
V.MÉTHODESSPECTROMETRIQUESD’ABSORPTIONETD’EMISSIONATOMIQUEV.1.SAA:
Ø SAA:analysedesélémentsmétalliquesØ Source:lampeàcathodecreuse(élémentàdoser)Ø Atomiseur:produitdesatomesàl’étatfondamental
Flamme/Fourgraphite
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V.2.ICP-AES:
Ø analysesimultanée+++