Limmunothérapie Camille Bellier Jonathan Chabout Yannick Elipot Céline Pellentz Marianne Simon 27...

L’immunothérapie

Camille BellierJonathan Chabout

Yannick Elipot Céline Pellentz

Marianne Simon

27 mars 2007 M1 UE Immunologie renforcée

http://www.ens-cachan.fr/

Introduction

Vaccination thérapeutique

Anticorps monoclonaux

Traitements immunosuppresseurs

Existe thérapies anti-cancéreuses par injection de DC activées.Les Dex pourraient ils avoir le même effet (1996)?

Conclusion

Définition

Cellules dendritiques

Exosomes

Exosomes et immunothérapie anti-cancéreuse

Qu’est ce qu’un exosome?

André et al, 2004

Exosome: petite vésicule (environ 90nm de diamètre) sécrété par différents types cellulaires, issu de la fusion des endosomes tardifs avec la membrane plasmique.

Composition:

Protéines liées au cytosquelette, impliquées dans la transduction du signal, enzymes, hsp…

+, dans les dexosomes:

- Enrichis en CMH I et II

-Molécules costimulatrices des T (CD86 = B7.2…)

-Tétraspanines

-…

Les dexosomes contiennent toutes les molécules nécessaires à la fonction des DC.

Introduction




Conclusion

Définition


Exosomes


Les différentes étapes de mise au points d’un médicament comme celui-ci

Étapes pré-cliniques

Tests d’activation de LT humains

Tests d’injection dans des Souris porteuses de tumeurs

Étapes cliniques

Phase I: faisabilité, effets secondaires

Phase II: effets,détermination dose optimale, posologie

Phase III: test efficacité, comparaison avec traitements existants et/ou placebo

Phase IV: suivi à long terme, état de tout traitement sur le marché

In vitro In vivo

Exosomes: HLA I / pept chargé

Bon CMH indisp sur exosomes

Peu importe le CMH de la cellule dend

Pas d’activation directe des LT par les exosomes

Pept essentiel

Les exosomes rendent les DC compétentes pour l’activation des LT8 en leur transférant les

protéines nécessaires


Introduction




Conclusion

Définition


Exosomes

Études précliniques: travail in vitro

+

LT8 Mart1-spé

Sécrétion d’interféron γ ?

CMH I A2+

CMH I A2-

Mart1 = peptide tumoral

André et al, 2004

Perspectives:Essais à poursuivre, résultats encourageants

Tenter d’augmenter l’activation des LT (adjuvants, déplétion des LT reg…)Mieux comprendre le mécanisme impliquant l’action des cellules NK


Introduction




Conclusion

Définition


Exosomes

Essai clinique: 2 phases 1 en 2005

Morse et al, USA

Escudier et al, IGR

Objectifs phase I:

Faisabilité: OK, exosomes peuvent être produits à partir de patients atteints de cancers avancés comme à partir de porteurs sains.

Tolérance: OK, peu d’effets secondaires, aucun grave (fièvre grade 1 chez quelques patients).

Effets du traitements constatés:

Régressions de la tumeur chez certains patients

Pourtant, activation des LT faible ou nulle (présence de LT régulateurs? Patients immunodéprimés?)

Observation d’une activation des NK (démontrée plus tard in vitro), infiltrent tumeur

Introduction




Problématique,conclusion,etc…

Conclusion

Polyclonaux

Définition

Mode d’action

Cytotoxique

Modulateur

Préciblage

Agoniste/ antagoniste

Présentation des anticorps monoclonaux

Structure, caractéristiques les distinguant des polyclonaux

Schéma Ac? Explication avantage clonalité, decouverte…

Introduction





Conclusion

Polyclonaux

Définition

Mode d’action

Cytotoxique

Modulateur

Préciblage


Présentation des anticorps monoclonaux

Les différents types d’anticorps monoclonaux utilisés en immunothérapie

Importance d’Ac humanisés, les différentes techniques pour y parvenir au cours du temps

Introduction





Conclusion

Polyclonaux

Définition

Mode d’action

Cytotoxique

Modulateur

Préciblage


Diversité des modes d’action

Cf. schéma M.A. Poulx

Introduction




Pb: immunosuppression => fragilité accrue face aux infections

Conclusion

But

Allergie

Greffe

Maladies autoimmunes

Immunosuppression anti rejet de greffe

Rejet de greffe et traitements pour l’éviter

Transplantation indiquée dans de + en + de cas (élargissement critères d’âge, diminution des contre-indications…)

MAIS

Rejet des allogreffons

3 types de réactions de rejet:

-Hyperaigue: très rapide, surtout humorale, rare mais très violente,

-Aigue: quelques jours après, surtout cellulaire, nombreuses cellules T infiltrées,

-Chronique: mois ou années plus tard, répond très mal aux immunosuppressions.

Thérapies utilisées

Thérapies immunosuppressives

Inhibition de l’expression de cytokines ex: corticoïdes, ciclosporine (anticalcineurine)

Inhibition de l’action des cytokines ex: Ac monoclonaux anti-IL2

Inhibition prolifération cellules activées ex: Cellcept (antimétabolite), rapamycine (--| mTor)

Introduction




Le protocole empêche le rejet de greffe de cœur chez la Souris

Conclusion

But

Allergie

Greffe



Un exemple de traitement en cours d’étude: activation des LT régulateurs

Buschell et al, 2005

Etat actuel: étude pré-clinique sur modèle souris

Thérapie: double injection d’anticorps anti-CD4 et d’antigènes du donneur

Observation: prolifération de LT régulateurs CD4+ CD25+

Ac + Ag

Ac seul

Ag seul

Introduction




Immunosuppression spécifique, n’affecte pas la réponse anti-virale.

Conclusion

But

Allergie

Greffe



Un exemple de traitement en cours d’étude: activation des LT régulateurs

Buschell et al, 2005

Les LT issus des animaux traités présentent le même % de lyse spécifique que ceux des rats naïfs.

« ELISA »: cellules MDCK incubées avec extraits de poumon, puis fixées, Ac

anti-HA, Ac II couplé HRP

Ne reste pas plus de particules virales chez les animaux traités que

chez les animaux naïfs.

Bonus présentation des anticorps monoclonaux

Immunisation d’un animal

Prélèvement d’un clone de lymphocyte B de la rate Cellule de myélome

fusion

Sélection des hybridomes

Production des Anticorps

Purification des anticorps

Utilisation des anticorps monoclonaux

Isolement des hybridomes spécifiques de l’Ag

Sélection des clones de meilleure affinité pour l’antigène

Production d’Ac monoclonaux par la technique des hybridomes

Bonus anticorps anti CD4 contre le rejet de

greffe

Les Ac anti-CD4 permettent la production de cellules T FoxP3+ régulatrices

Mécanisme d’action des LT régulateurs CD4+ CD25+

CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cells: from basic research to potential therapeutic use.

C. Mottet, D. Golshayan

Bonus exosomes et immunothérapies anti-

tumorales

Comparaison de la composition des dexosomes et des cellules dendritiques

CMH I

CMH II

Chaine invariante

Test Souris: effet anti- tumoral d’un traitement à base d’exosomes

1998

Test in vitro: induction de la lyse spécifique de cellules de mélanome (FON) exprimant Mart1, par des LT CD8+

Ac anti HLA A2

André et al, 2004

Ag de tumeur Dexosome de CMH I A2+

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