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FGSM2 - Formation Générale aux Soins Médicaux de niveau 2 MED0304 – Tissu Sanguin Pr NGUYEN S3 – 22/09/2020

BENMIMOUN Firas & EPOMA Justine Correcteur : ?

E-learning 1: Les Leucocytes Les Leucocytes

INTRODUCTION

§ Globules blancs § Cellules nucléées avec un rôle essentiel dans la défense de l’organisme contre les

agressions infectieuses (le plus souvent).

Observation Microscope

Optique Coloration au

MGG (May Grunewald

Giemsa).

LEUCOCYTES

Séquence 1 Le polynucléaire neutrophile (PNN)

Microscope Optique (MO) après coloration

MGG

Description

§ § §

12 à 15 𝜇m de diamètre. Noyau multilobé : 2 à 5 lobes. Chromatine dense PAS de nucléole => témoigne de la maturité du noyau.

Polynucléaires = Granulocytes (UN Seul noyau polybé !) (

Mononuclées (un noyau)

Neutrophile

Eosinophile

Basophile

Monocyte

Lymphocyte

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§ Cytoplasme abondant avec de nombreuses granulations.

Granulations Azurophiles Rouges

§

Granulations primaires = lysosomes riche en : o Myéloperoxydase o Phosphatase acide o Hydrolase o Collagénase o Lysozyme

Granulations Neutrophiles Beiges

§ Granulations secondaires riche en :

o Phosphatase alcaline o Lactoférine o Collagénase o Lysozyme

Caractéristiques : Microscope électronique à

balayage (MEB) : Roulement des

leucocytes à la surface endothéliale

§ Durée de vie courte 24h § Fonction essentielle : défense antibactérienne § Pool circulant à 50% des PNN § Pool marginé = PNN adhérant à l’endothélium ð Donc numération des PNN reflète partiellement le nombre réel des

PNN circulants.

Fonctions

Combattre les bactéries (= bactéricidie) :

Microscope Electronique 1ère étape de migration

transendothéliale.

§ Nécessite une migration vers les tissus § Plusieurs étapes : 1) Adhérence à la cellule endothéliale via sélectines et intégrines

(= molécules d’adhésion exprimées par la membrane du PNN). 2) Attraction vers les tissus = chimiotactisme grâce à des facteurs

chimiotactiques (toxines bactériennes ; fragments bactériens ; protéines de l’immunologie (= du complément) ; médiateurs(appelés chémokines)).

3) Migration trans-endothéliale (tissulaire) vers la bactérie. 4) Phagocytose de la bactérie.

à Phagocytose :

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§ Étape essentielle à la bactéricidie. - Le PNN englobe la bactérie et déverse le contenu des

granulations dans le phagosome. - Parallèlement, il produit des dérivés actifs oxygénés (H2O2)

hautement toxiques pour les bactéries, des enzymes comme la Myéloperoxydase et des molécules : l’iode, le bromure et le chlore participant à la destruction de la bactérie.

- Digestion de la bactérie par les hydrolases. -

à L’altération des PNN activés engendre la formation de « pus ».

Cellules altérées : formation du « pus »

Séquence 2 Le Polynucléaire Éosinophile (PNE)

Observations

MO après coloration au MGG : Microscopie Electronique (ME)

Description

§ 9 à 12 𝜇m de diamètre. § Un noyau multilobé : 2 ou 3 lobes. § Chromatine dense sans nucléole. § Cytoplasme abondant avec de nombreuses granulations : ð Grains éosinophiles oranges (visibles en MO, coloration MGG) avec une structure

cristalline interne (visible en ME).

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Fonctions

§ Phagocyte les œufs de parasites (helminthes). § Neutralise les réactions d’hypersensibilité immédiate (allergies). § Rôle délétère dans de nombreux états pathologiques. § Attraction du PNE vers les tissus par :

- Facteurs chimiotactiques spécifiques : éotoxines. - Facteurs non-spécifiques : leucotriènes, fragments C5a et C3a, cytokines.

§ Libération d’histaminase. § Libération de médiateurs inflammatoires :

o Protéines cationiques. o Cytokines. o Peroxydases. o Radicaux oxygénés.

Éosinophilopoïèse

§ Différenciation de la cellule souche hématopoïétique en PNE. § Éosinophilopoïèse : voie de différenciation spécifique impliquant 3 cytokines

essentielles : o L’interleukine 5 (IL-5) : très spécifique de

l’Éosinophilopoïèse, avec une capacité chimiotactique pour l’éosinophile lui-même.

o L’interleukine 3 (IL-3). o GM-CSF : facteur de croissance.

§ En pratique médicale : inhibition pharmacologique de l’Éosinopoïèse par les corticoïdes et les immunosuppresseurs très utilisés dans les allergies.

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Séquence 3 Le Polynucléaire Basophile (PNB)

Observation au MO après coloration

MGG

Description

§ §

§ §

8 à 10 𝜇m de diamètre. Noyau massif irrégulier : rarement visible (car recouvert de nombreuses granulations). Chromatine dense. Cytoplasme abondant avec nombreuses granulations :

o Grains basophiles violets (sombres) contenant : § Médiateurs de l’inflammation. § L’histamine. § 5-hydroxytryptophane (précurseur de la 5HT).

§ Leucocyte circulant le plus rare.

Différenciation

§ Voie spécifique de différenciation impliquant des facteurs de croissance : o Stem Cell Factor (SCF). o IL-3. o GM-CSF.

§ Passage rapide vers les tissus : surtout les muqueuses. § Le PNB ne reste pas longtemps dans le sang :

=> se différencie en mastocyte dans l’espace tissulaire.

Fonctions du PNB et du mastocyte

§ Rôle important dans l’hypersensibilité immédiate. § Capacité de stockage de nombreux médiateurs impliqués dans cette

hypersensibilité immédiate. § Expression de récepteurs aux fragments constants (Fc) des IgE et IgG.

1) Fixation d’un Ag (= allergène) sur les IgE fixées sur récepteur => active le basophile.

2) Dégranulation des basophiles/mastocytes.

3) Libération péricellulaire des médiateurs (histamine, 5-hydroxytriptanine, IL-5).

4) IL-5 attire les éosinophiles. à Hypersensibilité immédiate

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Séquence 4 Le monocyte

Monocyte : Morphologie et

Fonctions

Microscopie optique en coloration MGG

ü Grosse cellule : 15 à 20 µm ü Forme du noyau caractéristique : encoché ü Cytoplasme abondant : « gris ciel d’orage » avec de fines granulations

Azurophiles (apparaissent en rouges en coloration MGG). ü Circulation très brève dans le sang ü Fonctions : Phagocytose et Bactéricidie ü Migre facilement au niveau des tissus et prend le nom de Macrophage ü Peut se différencier en Cellule dendritique

ü Possibilité d’étudier l’activité enzymatique par cytochimie, elle révèle : - Une Faible activité phosphatase alcaline. - Une Forte activité peroxydasique et estérasique.

Cette activité est très caractéristique du Monocyte

ü Différents aspects selon le tissu :

A : au niveau hépatique B : au niveau de l’épithélium respiratoire : Ingestion de particules noirâtres par le macrophage : probablement des particules inorganiques de charbon C : Observation au MEB d’une émission de longs pseudopodes pour englober les plaquettes altérées ou les Hématies

A B C

Macrophage

ü Fonctions :

- Phagocytose : Survie après la phagocytose à l’inverse du PNN. Il peut résider

de nombreuses années dans les tissus - Bactéricidie grâce aux granulations lysosomales

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Cellule dendritique

ü Fonctions :

- Présentation des antigènes aux lymphocytes T - Synthèse de cytokines - Intervention à la phase initiale de la réponse immune et de l’inflammation

Séquence 5 : Le lymphocyte

Généralités Observation au MO après coloration MGG

ü Cellule essentielle de l’immunité. ü Morphologie dans le sang périphérique variable. ü Taille : 7 à 9 µm pour un petit lymphocyte. ü Noyau arrondi. ü Cytoplasme extrêmement réduit avec quelques granulations Azurophiles. ü Hétérogénéité morphologique en fonction de la taille, de l’aspect du

noyau (signes d’activation), du cytoplasme (plus ou moins important) et de la présence parfois de granulations ( chez les LT et les cellules NK)

ü Multiplicité de sous-populations lymphocytaires, distinguées et quantifiées par l’immunophénotypage réalisée par cytométrie en flux :

- Lymphocyte B (LB). - Lymphocyte T (LT). - Cellule Natural Killer (NK).

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Lymphocyte B : 10% des lymphocytes circulants.

Lymphopoïèse B

ü Voie de différenciation des lymphocytes B en plasmocytes. ü A lieu au niveau de la moelle osseuse (= médullaire). ü Possibilité d’étudier les différentes étapes de différenciation des LB par

cytométrie en flux. ü Au cours de la différenciation, chaque cellule acquiert un phénotype particulier :

- Cellule Pro-B : CD34+ (typique des cellules souches hématopoïétiques),

CD19+, CD10+. - Cellule Pré-B : CD19+, CD20+, chaîne μ intracytoplasmique (1ère trace de

sécrétion d’Ig). - Cellule B immature : CD19+, CD20+, IgM de surface. - Cellule B mature : CD19+, CD20+, IgM et IgD de surface

Lymphocyte B « naïf » : pas de contact préalable avec un Antigène (Ag) Lymphocyte B « mémoire » : après contact avec un Antigène (Ag).

Plasmocyte

ü Activation du LB après contact avec un Ag et migration vers la moelle osseuse :

pré-plasmocyte → plasmocyte (médullaire). ü Grande taille : 12 à 18 µm ü Forme ovalaire. ü Cytoplasme très basophile. ü Noyau excentré. ü Chromatine dense : aspect « écaille de tortue » ou

« rayon de roue ». ü Archoplasme : abrite un appareil de Golgi

extrêmement développé. → Caractéristiques d’une synthèse protéique intense : les immunoglobulines.

Lymphocyte T : 70 à 80% des lymphocytes circulants

Lymphopoïèse T

ü Voie de différenciation des lymphocytes T en thymocytes. ü A lieu au niveau du thymus. ü Possibilité d’étudier les différentes étapes de différenciation des LT par

cytométrie en flux.

ü Au cours de la différenciation, chaque cellule acquiert un phénotype particulier : - Pro-thymocyte : CD2+, CD7+. - Thymocytes corticaux : CD4+ et CD8+. - Thymocytes médullaires : CD3+ (très caractéristique de la cellule) / CD4+ ou

CD8+ (de façon exclusive). ü Expression du récepteur T (TCR) quelle que soit l’étape de différenciation :

- Tαβ majoritaire. - Tγ minoritaire.

ü LTCD4 et LTCD8 : impliqués dans la reconnaissance des Ag associés aux

molécules HLA de classes I et II.

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Lymphocyte Natural Killer (NK) : 10% des lymphocytes circulants.

ü Granulations Azurophiles en coloration MGG.

ü Cytométrie en flux permettant de distinguer un phénotype particulier

(caractéristique de la cellule NK) qui n’exprime pas le marqueur CD3 mais qui exprime les marqueurs CD16 et CD56.

ü Rôle : Élimination des cellules étrangères, indépendamment de l’Ag et

de toute activation préalable.

ANNALES 2020 :

7. Quelle(s) est (sont) la (les) proposition(s) exacte(s) concernant les polynucléaires ? A - les polynucléaires éosinophiles représentent la majorité des polynucléaires circulants B - les polynucléaires basophiles sont très rares dans le sang circulant C - les polynucléaires éosinophiles et les polynucléaires neutrophiles présentent des propriétés communes D - les polynucléaires éosinophiles ont la capacité de se différencier en plasmocytes E - les polynucléaires basophiles expriment le récepteur FC des IgE

8. Quelle(s) est (sont) la (les) proposition(s) exacte(s) concernant les lymphocytes ? A - les lymphocytes ont une morphologie hétérogène au microscope optique B - les lymphocytes ont une morphologie nettement différente de celle des polynucléaires en microscopie optique C -les lymphocytes B expriment les récepteurs TCR D - certains lymphocytes B ont la capacité de se différencier en plasmocytes E - les lymphocytes T représentent 70 à 80 % des lymphocytes circulants REPONSES : 7. BCE 8. ADE