CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE LIEGE · 2016-08-06 · CNR mycoses à la suite de l’audit...
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CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE LIEGE Service de Microbiologie Clinique-CNR mycoses
1
Centre de reacutefeacuterence mycoses
Centre hospitalier universitaire de Liegravege
Rapport drsquoactiviteacute 2014
Marie-Pierre Hayette
Rosalie Sacheli
Novembre 2015
CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE LIEGE Service de Microbiologie Clinique-CNR mycoses
2
Sommaire
1 Introduction
2 Missions speacutecifiques du CNR mycoses
3 Reacutesumeacute des activiteacutes de 2013
o Activiteacutes du CNRLiegravege
o Deacutemarche qualiteacute
Accreacuteditation Belac ISO15189
Controcircles de qualiteacute externe supranationaux
o Collection
4 Bilan de 2014 pour les champignons isoleacutes par le CNR
o Bilan Global
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement de phanegraveres
Cheveux
Peau
Ongles
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
7 Travaux de recherche et collaborations
8 Conclusions
9 Reacutefeacuterences
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1 Introduction
Le CNR mycoses a pour mission lrsquoexpertise et la surveillance eacutepideacutemiologique et
microbiologique des mycoses superficielles et profondes Lrsquoimportance
grandissante tenue par les mycoses au niveau meacutedical est sans nul doute lieacutee agrave
lrsquoincidence croissante des infections fatales causeacutees par celles-ci chez des patients
immunodeacuteprimeacutes durant les deux derniegraveres deacutecennies (1) Cette augmentation
est attribueacutee agrave un accroissement du nombre de patients soumis agrave un traitement
immunodeacutepresseur (patients canceacutereux greffeacutes de moelle ou drsquoorgane) agrave
lrsquointensification de ce type de traitement mais aussi agrave lrsquoaccroissement du nombre
de patients infecteacutes par le VIH
Un diagnostic rapide et preacutecis est neacutecessaire chez ces patients vulneacuterables Dans
ces cas il est important de connaitre les aspects culturaux macroscopiques et
microscopiques des agents fongiques de faccedilon agrave orienter rapidement le clinicien
vers une theacuterapeutique adapteacutee
A cocircteacute des mycoses invasives les mycoses superficielles et particuliegraverement les
onychomycoses ont une preacutevalence eacuteleveacutee dans la population geacuteneacuterale comme
lrsquoatteste une eacutetude portant sur 16 pays europeacuteens qui montre une preacutevalence de
38-41(2) De plus la preacutesence drsquoun nombre anormalement eacuteleveacute de teignes
dues agrave des dermatophytes anthropophiles se confirme en Belgique agrave lrsquoinstar de
ce qui se passe dans drsquoautres pays europeacuteens (3-5) De plus les agents
responsables de teignes microsporiques (touchant le cuir chevelu) peuvent se
reacuteveacuteler contagieux et neacutecessiter une eacuteviction scolaire drsquoougrave lrsquoimportance drsquoun
diagnostic rapide et preacutecis (6)
Le centre national de reacutefeacuterence (CNR) a pour mission principale lrsquoidentification
des champignons qui lui sont adresseacutes de faccedilon agrave confirmer un diagnostic
jusqursquoau niveau de lrsquoespegravece Une confirmation ou deacutetermination de la sensibiliteacute
in vitro des champignons vis-agrave-vis des antifongiques adapteacutes peut eacutegalement ecirctre
reacutealiseacutee si neacutecessaire Un appui agrave lrsquoaide de techniques moleacuteculaire est aussi offert
comme par exemple la deacutetection de Pneumocystis jirovecci ou drsquoAspergillus sp
Enfin dans le cadre drsquoeacutepideacutemies les laboratoires de reacutefeacuterence offrent une aide
dans la caracteacuterisation pheacutenotypique et geacutenotypique des souches impliqueacutees
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2 Missions speacutecifiques du CNR Mycoses
Les missions du CNR mycoses sont les suivantes
laquo Identification des champignons filamenteux et de levures adresseacutes par les
laboratoires belges Reacutealisation drsquoantifongigramme dans le cas drsquoinfection
profonde ou drsquoinfection reacutecidivante raquo
Constitution et entretien de la collection de souches de dermatophytes (CNR
Mycoses Liegravege)
Mise au point et deacuteveloppement de nouvelles meacutethodes de diagnostic
drsquoidentification et de typage moleacuteculaire des champignons telles que les
meacutethodes drsquoamplification geacutenique et de seacutequenccedilage moleacuteculaire
Alerte des autoriteacutes sanitaires agrave lrsquoexemple de lrsquoeacutemergence de nouvelles
reacutesistances aux antifongiques ou de lrsquoapparition drsquoune souche eacutepideacutemique
dans une population particuliegravere
Activiteacute de conseil aupregraves des autoriteacutes sanitaires des meacutedecins et des
biologistes
Participation agrave des groupes drsquoexperts agrave travers lrsquoEurope
Valorisation des travaux par des publications articles scientifiques guide de
prescription formation continue
Activiteacutes de recherches et drsquoeacutetudes en collaboration avec drsquoautres eacutequipes
scientifiques
Participation agrave des controcircles de qualiteacute externe
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3 Reacutesumeacute des activiteacutes de 2013
o Activiteacutes du CNRLiegravege
Au cours de lrsquoanneacutee 2014 tous les aspects des missions attribueacutees au CNR ont eacuteteacute
couverts comme lrsquoidentification drsquoisolats de levures et champignons filamenteux
lrsquoaide au diagnostic de mycoses rares la deacutetermination de la sensibiliteacute aux
antifongiques et lrsquoameacutelioration de techniques de typage et drsquoidentification
moleacuteculaire Le CNR de Liegravege se focalise principalement sur lrsquoidentification des
mycoses superficielles isoleacutees de phanegraveres
Parmi les techniques drsquoidentification des levures lrsquoidentification par spectromeacutetrie
de masse est lrsquooutil ndeg1 qui est utiliseacute Les reacutesultats sont confirmeacutes par seacutequenccedilage
moleacuteculaire si neacutecessaire
Parmi les outils moleacuteculaires une approche polyphasique est utiliseacutee La reacutegion
cibleacutee en premier lieu dans le cas de lrsquoidentification drsquoune espegravece est tout ou partie
de la reacutegion ITS1-58S-ITS2 de lrsquoARN ribosomique (ARNr) Deux cibles
compleacutementaires sont disponibles agrave savoir la reacutegion D1-D2 de la partie LSU (28S)
de lrsquoARNr et la becircta-tubuline Ces autres cibles sont utiliseacutees en cas de confirmation
de lrsquoidentification drsquoune espegravece rare ou en cas de reacuteponse non satisfaisante apregraves
une premiegravere amplification Drsquoautres cibles sont actuellement agrave lrsquoeacutetude
Le CNR Mycose a acquis en 2014 lrsquoappareil Diversilabreg (BioMeacuterieux) Cet appareil
permet une caracteacuterisation preacutecise du geacutenome des champignons filamenteux (y
compris les dermatophytes) et des levures Il a eacuteteacute deacutejagrave utiliseacute afin de caracteacuteriser
les souches de dermatophytes anthropophile circulant en Belgique en 2013 Il
pourrait ecirctre utiliseacute en cas drsquoeacutepideacutemie notamment afin de caracteacuteriser rapidement
le geacutenome de la souche circulante(5)
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o Deacutemarche de qualiteacute
Accreacuteditation Belac ISO 15189
Le laboratoire de Microbiologie clinique du CHU de Liegravege a mis en place une
deacutemarche drsquoaccreacuteditation du laboratoire depuis quelques anneacutees La mise en place
du systegraveme qualiteacute du CNR mycoses de Liegravege a eacuteteacute initieacutee en 2012 et lrsquoaudit
drsquoaccreacuteditation a eu lieu en mai 2013 La deacutemarche retenue pour mettre en
conformiteacute le CNR avec la norme ISO 15189 est fondeacutee sur la reacutedaction de
proceacutedures pour chaque analyse proposeacutee par le CNR la creacuteation drsquoun dossier de
validation complet pour chacune de ces techniques et un eacutetat des lieux des
proceacutedures et protocoles existants La deacutemarche consiste eacutegalement en la mise en
conformiteacute des locaux et appareillages deacutedieacutes aux activiteacutes du CNR La gestion du
mateacuteriel permet en outre de garantir lrsquoutilisation drsquoeacutequipements fiables
approprieacutes aux besoins et surveilleacutes en temps reacuteel La gestion des reacuteactifs et
consommables (seacutelection et eacutevaluation des fournisseurs distribution et eacutevaluation
des produits) est assureacutee eacutegalement Lrsquoaccreacuteditation ISO 15189 a eacuteteacute octroyeacutee au
CNR mycoses agrave la suite de lrsquoaudit BELAC de mai 2013 En 2014 toutes les
proceacutedures du CNR mycoses ont eacuteteacute reacuteviseacutees et reacuteactualiseacutees Un audit de
surveillance a eu lieu en janvier 2015 qui a confirmeacute le respect de la norme
ISO15189
Controcircles de qualiteacute externes supranationaux
Le CNR Mycoses participe agrave un controcircle de qualiteacute externe tri-annuel concernant
la deacutetermination de la sensibiliteacute de souches de levures agrave diffeacuterents antifongiques
et lrsquoidentification de cultures de levureschampignons filamenteux issus
drsquoeacutechantillons cliniques Ces controcircles sont organiseacutes par lrsquoUK NEQAS
Parallegravelement agrave cela le CNR mycose organise et ou participe annuellement agrave des
laquo ring-tests raquo inter-laboratoires afin de valider les analyses pour lesquelles il
nrsquoexiste pas de controcircle proposeacute par un organisme externe
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o Collection
Tous les isolats cliniques de levures et de dermatophytes adresseacutee au CNR sont
systeacutematiquement conserveacutes et congeleacutes agrave -80degC excepteacute les isolats de
champignons contaminants sauf inteacuterecirct particulier La pureteacute des souches est
preacutealablement veacuterifieacutee et des techniques drsquoidentification (y compris seacutequenccedilage
moleacuteculaire) et de deacutetermination de la sensibiliteacute aux antifongiques (selon la
demande) sont reacutealiseacutees preacutealablement agrave la congeacutelation Les souches sont
reacutefeacuterenceacutees eacutetiqueteacutees et stockeacutees au sein de la laquo champithegraveque raquo (souchothegraveque)
du CNR
4 Bilan de 2014 pour les champignons isoleacutes par le CNR
o Bilan global
En 2014 un total de 3264 isolats fongiques ont eacuteteacute envoyeacutes aux deux CNR
laquo Mycoses raquo (regroupement des cas isoleacutes de phanegraveres agrave la KULeuven et au CHU de
Liegravege) dont 3220 provenaient de phanegraveres et 44 drsquoautres sites (sang frottis
drsquooreille de plaie de vagin expectoration lavage broncho-alveacuteolaire œil) Parmi
les eacutechantillons 1283 (3937) ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes
dont 239 provenant de la KUL et 1044 provenant du CHU de Liegravege Parmi eux
1166 (909) isolats ont eacuteteacute identifieacutes comme faisant partie du genre
Trichophyton 116 comme faisant partie du genre Microsporum (904) et 1
(007) comme faisant partie du genre Epidermophyton Un total de 508 isolats de
levures ont eacutegalement eacuteteacute reacutepertorieacutes (tous preacutelegravevements confondus) soit 156
de tous les preacutelegravevements dont 314 Candida sp Le reste des isolats (1473 souches
4524 de tous les preacutelegravevements) correspond agrave drsquoautres types de champignons
filamenteux (Voir Figure 1)
Plus preacuteciseacutement parmi les dermatophytes lrsquoespegravece la plus freacutequemment isoleacutee
(tous types de preacutelegravevement confondus) est Trichophyton rubrum (843 isolats
6578 des dermatophytes) suivi du complexe T mentagrophytes (242 isolats
1886) M canis (64 isolats 49) M audouinii (43 isolats 335) T tonsurans
(38 isolats 296) T soudanense (20 isolats 155) T violaceum (19 isolats
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148) M persicolor (3 isolats 021) M gypseum (3 isolats 021) T
verrucosum (2 isolats 014) M ferrugineum (2 isolats 014) M praecox (1
isolat 007) E floccosum (1 isolat 007) et T phaseolioformis ( 1 isolat 007)
Un isolat a eacuteteacute identifieacute comme Trichophyton spp sans identification preacutecise de
lrsquoespegravece La figure 2 repreacutesente la reacutepartition des espegraveces de dermatophytes en
2014 tous preacutelegravevements confondus
Parmi les autres isolats envoyeacutes au CNR on retrouve des levures reacuteparties en 17
espegraveces de Candida sp (314 isolats 6172 des levures isoleacutees) Rhodotorula sp
(105 isolats 207 des levures isoleacutees) Trichosporon sp ( 77 isolats 1517)
Geotrichum sp (7 isolats 137 des levures isoleacutees) et Saccharomyces sp (5
isolats 098 des levures isoleacutees) La figure 3 deacutecrit en deacutetail la reacutepartition des
levures analyseacutees par le CNR mycoses
Parmi les autres preacutelegravevements reccedilus par le CNR on retrouve entre autres des
Penicillum sp (248 isolats 778 de tous les preacutelegravevements) Aspergillus sp(177
isolats 555) Fusarium sp (90 isolats 282) Scopulariopsis sp (84 isolats
263) Alternaria sp (78 isolats 244) Acremonium sp (39 isolats 122)
Cladosporium sp (31 isolats 099)
Figure 1 Reacutepartition des preacutelegravevements reccedilus en 2014 par le CNR mycoses
Dermatophytes 39
Levures 16
Autres filamenteux
45
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Figure 2 Reacutepartition des 1283 dermatophytes isoleacutes en 2014 par les 2 CNR
007
007
007
007
014
014
021
021
148
155
296
335
490
1886
6578
000 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000
Efloccosum
Trichophyton sp
M praecox
T phaseoliformis
M ferrugineum
T verrucosum
M gypseum
M persicolor
Tviolaceum
T soudanense
Ttonsurans
Maudouinii
M canis
T mentagrophytes complex
Trubrum
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Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
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4000
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Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
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50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
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0
10
20
30
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2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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23
ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Sommaire
1 Introduction
2 Missions speacutecifiques du CNR mycoses
3 Reacutesumeacute des activiteacutes de 2013
o Activiteacutes du CNRLiegravege
o Deacutemarche qualiteacute
Accreacuteditation Belac ISO15189
Controcircles de qualiteacute externe supranationaux
o Collection
4 Bilan de 2014 pour les champignons isoleacutes par le CNR
o Bilan Global
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement de phanegraveres
Cheveux
Peau
Ongles
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
7 Travaux de recherche et collaborations
8 Conclusions
9 Reacutefeacuterences
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3
1 Introduction
Le CNR mycoses a pour mission lrsquoexpertise et la surveillance eacutepideacutemiologique et
microbiologique des mycoses superficielles et profondes Lrsquoimportance
grandissante tenue par les mycoses au niveau meacutedical est sans nul doute lieacutee agrave
lrsquoincidence croissante des infections fatales causeacutees par celles-ci chez des patients
immunodeacuteprimeacutes durant les deux derniegraveres deacutecennies (1) Cette augmentation
est attribueacutee agrave un accroissement du nombre de patients soumis agrave un traitement
immunodeacutepresseur (patients canceacutereux greffeacutes de moelle ou drsquoorgane) agrave
lrsquointensification de ce type de traitement mais aussi agrave lrsquoaccroissement du nombre
de patients infecteacutes par le VIH
Un diagnostic rapide et preacutecis est neacutecessaire chez ces patients vulneacuterables Dans
ces cas il est important de connaitre les aspects culturaux macroscopiques et
microscopiques des agents fongiques de faccedilon agrave orienter rapidement le clinicien
vers une theacuterapeutique adapteacutee
A cocircteacute des mycoses invasives les mycoses superficielles et particuliegraverement les
onychomycoses ont une preacutevalence eacuteleveacutee dans la population geacuteneacuterale comme
lrsquoatteste une eacutetude portant sur 16 pays europeacuteens qui montre une preacutevalence de
38-41(2) De plus la preacutesence drsquoun nombre anormalement eacuteleveacute de teignes
dues agrave des dermatophytes anthropophiles se confirme en Belgique agrave lrsquoinstar de
ce qui se passe dans drsquoautres pays europeacuteens (3-5) De plus les agents
responsables de teignes microsporiques (touchant le cuir chevelu) peuvent se
reacuteveacuteler contagieux et neacutecessiter une eacuteviction scolaire drsquoougrave lrsquoimportance drsquoun
diagnostic rapide et preacutecis (6)
Le centre national de reacutefeacuterence (CNR) a pour mission principale lrsquoidentification
des champignons qui lui sont adresseacutes de faccedilon agrave confirmer un diagnostic
jusqursquoau niveau de lrsquoespegravece Une confirmation ou deacutetermination de la sensibiliteacute
in vitro des champignons vis-agrave-vis des antifongiques adapteacutes peut eacutegalement ecirctre
reacutealiseacutee si neacutecessaire Un appui agrave lrsquoaide de techniques moleacuteculaire est aussi offert
comme par exemple la deacutetection de Pneumocystis jirovecci ou drsquoAspergillus sp
Enfin dans le cadre drsquoeacutepideacutemies les laboratoires de reacutefeacuterence offrent une aide
dans la caracteacuterisation pheacutenotypique et geacutenotypique des souches impliqueacutees
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4
2 Missions speacutecifiques du CNR Mycoses
Les missions du CNR mycoses sont les suivantes
laquo Identification des champignons filamenteux et de levures adresseacutes par les
laboratoires belges Reacutealisation drsquoantifongigramme dans le cas drsquoinfection
profonde ou drsquoinfection reacutecidivante raquo
Constitution et entretien de la collection de souches de dermatophytes (CNR
Mycoses Liegravege)
Mise au point et deacuteveloppement de nouvelles meacutethodes de diagnostic
drsquoidentification et de typage moleacuteculaire des champignons telles que les
meacutethodes drsquoamplification geacutenique et de seacutequenccedilage moleacuteculaire
Alerte des autoriteacutes sanitaires agrave lrsquoexemple de lrsquoeacutemergence de nouvelles
reacutesistances aux antifongiques ou de lrsquoapparition drsquoune souche eacutepideacutemique
dans une population particuliegravere
Activiteacute de conseil aupregraves des autoriteacutes sanitaires des meacutedecins et des
biologistes
Participation agrave des groupes drsquoexperts agrave travers lrsquoEurope
Valorisation des travaux par des publications articles scientifiques guide de
prescription formation continue
Activiteacutes de recherches et drsquoeacutetudes en collaboration avec drsquoautres eacutequipes
scientifiques
Participation agrave des controcircles de qualiteacute externe
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5
3 Reacutesumeacute des activiteacutes de 2013
o Activiteacutes du CNRLiegravege
Au cours de lrsquoanneacutee 2014 tous les aspects des missions attribueacutees au CNR ont eacuteteacute
couverts comme lrsquoidentification drsquoisolats de levures et champignons filamenteux
lrsquoaide au diagnostic de mycoses rares la deacutetermination de la sensibiliteacute aux
antifongiques et lrsquoameacutelioration de techniques de typage et drsquoidentification
moleacuteculaire Le CNR de Liegravege se focalise principalement sur lrsquoidentification des
mycoses superficielles isoleacutees de phanegraveres
Parmi les techniques drsquoidentification des levures lrsquoidentification par spectromeacutetrie
de masse est lrsquooutil ndeg1 qui est utiliseacute Les reacutesultats sont confirmeacutes par seacutequenccedilage
moleacuteculaire si neacutecessaire
Parmi les outils moleacuteculaires une approche polyphasique est utiliseacutee La reacutegion
cibleacutee en premier lieu dans le cas de lrsquoidentification drsquoune espegravece est tout ou partie
de la reacutegion ITS1-58S-ITS2 de lrsquoARN ribosomique (ARNr) Deux cibles
compleacutementaires sont disponibles agrave savoir la reacutegion D1-D2 de la partie LSU (28S)
de lrsquoARNr et la becircta-tubuline Ces autres cibles sont utiliseacutees en cas de confirmation
de lrsquoidentification drsquoune espegravece rare ou en cas de reacuteponse non satisfaisante apregraves
une premiegravere amplification Drsquoautres cibles sont actuellement agrave lrsquoeacutetude
Le CNR Mycose a acquis en 2014 lrsquoappareil Diversilabreg (BioMeacuterieux) Cet appareil
permet une caracteacuterisation preacutecise du geacutenome des champignons filamenteux (y
compris les dermatophytes) et des levures Il a eacuteteacute deacutejagrave utiliseacute afin de caracteacuteriser
les souches de dermatophytes anthropophile circulant en Belgique en 2013 Il
pourrait ecirctre utiliseacute en cas drsquoeacutepideacutemie notamment afin de caracteacuteriser rapidement
le geacutenome de la souche circulante(5)
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o Deacutemarche de qualiteacute
Accreacuteditation Belac ISO 15189
Le laboratoire de Microbiologie clinique du CHU de Liegravege a mis en place une
deacutemarche drsquoaccreacuteditation du laboratoire depuis quelques anneacutees La mise en place
du systegraveme qualiteacute du CNR mycoses de Liegravege a eacuteteacute initieacutee en 2012 et lrsquoaudit
drsquoaccreacuteditation a eu lieu en mai 2013 La deacutemarche retenue pour mettre en
conformiteacute le CNR avec la norme ISO 15189 est fondeacutee sur la reacutedaction de
proceacutedures pour chaque analyse proposeacutee par le CNR la creacuteation drsquoun dossier de
validation complet pour chacune de ces techniques et un eacutetat des lieux des
proceacutedures et protocoles existants La deacutemarche consiste eacutegalement en la mise en
conformiteacute des locaux et appareillages deacutedieacutes aux activiteacutes du CNR La gestion du
mateacuteriel permet en outre de garantir lrsquoutilisation drsquoeacutequipements fiables
approprieacutes aux besoins et surveilleacutes en temps reacuteel La gestion des reacuteactifs et
consommables (seacutelection et eacutevaluation des fournisseurs distribution et eacutevaluation
des produits) est assureacutee eacutegalement Lrsquoaccreacuteditation ISO 15189 a eacuteteacute octroyeacutee au
CNR mycoses agrave la suite de lrsquoaudit BELAC de mai 2013 En 2014 toutes les
proceacutedures du CNR mycoses ont eacuteteacute reacuteviseacutees et reacuteactualiseacutees Un audit de
surveillance a eu lieu en janvier 2015 qui a confirmeacute le respect de la norme
ISO15189
Controcircles de qualiteacute externes supranationaux
Le CNR Mycoses participe agrave un controcircle de qualiteacute externe tri-annuel concernant
la deacutetermination de la sensibiliteacute de souches de levures agrave diffeacuterents antifongiques
et lrsquoidentification de cultures de levureschampignons filamenteux issus
drsquoeacutechantillons cliniques Ces controcircles sont organiseacutes par lrsquoUK NEQAS
Parallegravelement agrave cela le CNR mycose organise et ou participe annuellement agrave des
laquo ring-tests raquo inter-laboratoires afin de valider les analyses pour lesquelles il
nrsquoexiste pas de controcircle proposeacute par un organisme externe
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7
o Collection
Tous les isolats cliniques de levures et de dermatophytes adresseacutee au CNR sont
systeacutematiquement conserveacutes et congeleacutes agrave -80degC excepteacute les isolats de
champignons contaminants sauf inteacuterecirct particulier La pureteacute des souches est
preacutealablement veacuterifieacutee et des techniques drsquoidentification (y compris seacutequenccedilage
moleacuteculaire) et de deacutetermination de la sensibiliteacute aux antifongiques (selon la
demande) sont reacutealiseacutees preacutealablement agrave la congeacutelation Les souches sont
reacutefeacuterenceacutees eacutetiqueteacutees et stockeacutees au sein de la laquo champithegraveque raquo (souchothegraveque)
du CNR
4 Bilan de 2014 pour les champignons isoleacutes par le CNR
o Bilan global
En 2014 un total de 3264 isolats fongiques ont eacuteteacute envoyeacutes aux deux CNR
laquo Mycoses raquo (regroupement des cas isoleacutes de phanegraveres agrave la KULeuven et au CHU de
Liegravege) dont 3220 provenaient de phanegraveres et 44 drsquoautres sites (sang frottis
drsquooreille de plaie de vagin expectoration lavage broncho-alveacuteolaire œil) Parmi
les eacutechantillons 1283 (3937) ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes
dont 239 provenant de la KUL et 1044 provenant du CHU de Liegravege Parmi eux
1166 (909) isolats ont eacuteteacute identifieacutes comme faisant partie du genre
Trichophyton 116 comme faisant partie du genre Microsporum (904) et 1
(007) comme faisant partie du genre Epidermophyton Un total de 508 isolats de
levures ont eacutegalement eacuteteacute reacutepertorieacutes (tous preacutelegravevements confondus) soit 156
de tous les preacutelegravevements dont 314 Candida sp Le reste des isolats (1473 souches
4524 de tous les preacutelegravevements) correspond agrave drsquoautres types de champignons
filamenteux (Voir Figure 1)
Plus preacuteciseacutement parmi les dermatophytes lrsquoespegravece la plus freacutequemment isoleacutee
(tous types de preacutelegravevement confondus) est Trichophyton rubrum (843 isolats
6578 des dermatophytes) suivi du complexe T mentagrophytes (242 isolats
1886) M canis (64 isolats 49) M audouinii (43 isolats 335) T tonsurans
(38 isolats 296) T soudanense (20 isolats 155) T violaceum (19 isolats
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148) M persicolor (3 isolats 021) M gypseum (3 isolats 021) T
verrucosum (2 isolats 014) M ferrugineum (2 isolats 014) M praecox (1
isolat 007) E floccosum (1 isolat 007) et T phaseolioformis ( 1 isolat 007)
Un isolat a eacuteteacute identifieacute comme Trichophyton spp sans identification preacutecise de
lrsquoespegravece La figure 2 repreacutesente la reacutepartition des espegraveces de dermatophytes en
2014 tous preacutelegravevements confondus
Parmi les autres isolats envoyeacutes au CNR on retrouve des levures reacuteparties en 17
espegraveces de Candida sp (314 isolats 6172 des levures isoleacutees) Rhodotorula sp
(105 isolats 207 des levures isoleacutees) Trichosporon sp ( 77 isolats 1517)
Geotrichum sp (7 isolats 137 des levures isoleacutees) et Saccharomyces sp (5
isolats 098 des levures isoleacutees) La figure 3 deacutecrit en deacutetail la reacutepartition des
levures analyseacutees par le CNR mycoses
Parmi les autres preacutelegravevements reccedilus par le CNR on retrouve entre autres des
Penicillum sp (248 isolats 778 de tous les preacutelegravevements) Aspergillus sp(177
isolats 555) Fusarium sp (90 isolats 282) Scopulariopsis sp (84 isolats
263) Alternaria sp (78 isolats 244) Acremonium sp (39 isolats 122)
Cladosporium sp (31 isolats 099)
Figure 1 Reacutepartition des preacutelegravevements reccedilus en 2014 par le CNR mycoses
Dermatophytes 39
Levures 16
Autres filamenteux
45
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9
Figure 2 Reacutepartition des 1283 dermatophytes isoleacutes en 2014 par les 2 CNR
007
007
007
007
014
014
021
021
148
155
296
335
490
1886
6578
000 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000
Efloccosum
Trichophyton sp
M praecox
T phaseoliformis
M ferrugineum
T verrucosum
M gypseum
M persicolor
Tviolaceum
T soudanense
Ttonsurans
Maudouinii
M canis
T mentagrophytes complex
Trubrum
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Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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23
ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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24
3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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3
1 Introduction
Le CNR mycoses a pour mission lrsquoexpertise et la surveillance eacutepideacutemiologique et
microbiologique des mycoses superficielles et profondes Lrsquoimportance
grandissante tenue par les mycoses au niveau meacutedical est sans nul doute lieacutee agrave
lrsquoincidence croissante des infections fatales causeacutees par celles-ci chez des patients
immunodeacuteprimeacutes durant les deux derniegraveres deacutecennies (1) Cette augmentation
est attribueacutee agrave un accroissement du nombre de patients soumis agrave un traitement
immunodeacutepresseur (patients canceacutereux greffeacutes de moelle ou drsquoorgane) agrave
lrsquointensification de ce type de traitement mais aussi agrave lrsquoaccroissement du nombre
de patients infecteacutes par le VIH
Un diagnostic rapide et preacutecis est neacutecessaire chez ces patients vulneacuterables Dans
ces cas il est important de connaitre les aspects culturaux macroscopiques et
microscopiques des agents fongiques de faccedilon agrave orienter rapidement le clinicien
vers une theacuterapeutique adapteacutee
A cocircteacute des mycoses invasives les mycoses superficielles et particuliegraverement les
onychomycoses ont une preacutevalence eacuteleveacutee dans la population geacuteneacuterale comme
lrsquoatteste une eacutetude portant sur 16 pays europeacuteens qui montre une preacutevalence de
38-41(2) De plus la preacutesence drsquoun nombre anormalement eacuteleveacute de teignes
dues agrave des dermatophytes anthropophiles se confirme en Belgique agrave lrsquoinstar de
ce qui se passe dans drsquoautres pays europeacuteens (3-5) De plus les agents
responsables de teignes microsporiques (touchant le cuir chevelu) peuvent se
reacuteveacuteler contagieux et neacutecessiter une eacuteviction scolaire drsquoougrave lrsquoimportance drsquoun
diagnostic rapide et preacutecis (6)
Le centre national de reacutefeacuterence (CNR) a pour mission principale lrsquoidentification
des champignons qui lui sont adresseacutes de faccedilon agrave confirmer un diagnostic
jusqursquoau niveau de lrsquoespegravece Une confirmation ou deacutetermination de la sensibiliteacute
in vitro des champignons vis-agrave-vis des antifongiques adapteacutes peut eacutegalement ecirctre
reacutealiseacutee si neacutecessaire Un appui agrave lrsquoaide de techniques moleacuteculaire est aussi offert
comme par exemple la deacutetection de Pneumocystis jirovecci ou drsquoAspergillus sp
Enfin dans le cadre drsquoeacutepideacutemies les laboratoires de reacutefeacuterence offrent une aide
dans la caracteacuterisation pheacutenotypique et geacutenotypique des souches impliqueacutees
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4
2 Missions speacutecifiques du CNR Mycoses
Les missions du CNR mycoses sont les suivantes
laquo Identification des champignons filamenteux et de levures adresseacutes par les
laboratoires belges Reacutealisation drsquoantifongigramme dans le cas drsquoinfection
profonde ou drsquoinfection reacutecidivante raquo
Constitution et entretien de la collection de souches de dermatophytes (CNR
Mycoses Liegravege)
Mise au point et deacuteveloppement de nouvelles meacutethodes de diagnostic
drsquoidentification et de typage moleacuteculaire des champignons telles que les
meacutethodes drsquoamplification geacutenique et de seacutequenccedilage moleacuteculaire
Alerte des autoriteacutes sanitaires agrave lrsquoexemple de lrsquoeacutemergence de nouvelles
reacutesistances aux antifongiques ou de lrsquoapparition drsquoune souche eacutepideacutemique
dans une population particuliegravere
Activiteacute de conseil aupregraves des autoriteacutes sanitaires des meacutedecins et des
biologistes
Participation agrave des groupes drsquoexperts agrave travers lrsquoEurope
Valorisation des travaux par des publications articles scientifiques guide de
prescription formation continue
Activiteacutes de recherches et drsquoeacutetudes en collaboration avec drsquoautres eacutequipes
scientifiques
Participation agrave des controcircles de qualiteacute externe
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5
3 Reacutesumeacute des activiteacutes de 2013
o Activiteacutes du CNRLiegravege
Au cours de lrsquoanneacutee 2014 tous les aspects des missions attribueacutees au CNR ont eacuteteacute
couverts comme lrsquoidentification drsquoisolats de levures et champignons filamenteux
lrsquoaide au diagnostic de mycoses rares la deacutetermination de la sensibiliteacute aux
antifongiques et lrsquoameacutelioration de techniques de typage et drsquoidentification
moleacuteculaire Le CNR de Liegravege se focalise principalement sur lrsquoidentification des
mycoses superficielles isoleacutees de phanegraveres
Parmi les techniques drsquoidentification des levures lrsquoidentification par spectromeacutetrie
de masse est lrsquooutil ndeg1 qui est utiliseacute Les reacutesultats sont confirmeacutes par seacutequenccedilage
moleacuteculaire si neacutecessaire
Parmi les outils moleacuteculaires une approche polyphasique est utiliseacutee La reacutegion
cibleacutee en premier lieu dans le cas de lrsquoidentification drsquoune espegravece est tout ou partie
de la reacutegion ITS1-58S-ITS2 de lrsquoARN ribosomique (ARNr) Deux cibles
compleacutementaires sont disponibles agrave savoir la reacutegion D1-D2 de la partie LSU (28S)
de lrsquoARNr et la becircta-tubuline Ces autres cibles sont utiliseacutees en cas de confirmation
de lrsquoidentification drsquoune espegravece rare ou en cas de reacuteponse non satisfaisante apregraves
une premiegravere amplification Drsquoautres cibles sont actuellement agrave lrsquoeacutetude
Le CNR Mycose a acquis en 2014 lrsquoappareil Diversilabreg (BioMeacuterieux) Cet appareil
permet une caracteacuterisation preacutecise du geacutenome des champignons filamenteux (y
compris les dermatophytes) et des levures Il a eacuteteacute deacutejagrave utiliseacute afin de caracteacuteriser
les souches de dermatophytes anthropophile circulant en Belgique en 2013 Il
pourrait ecirctre utiliseacute en cas drsquoeacutepideacutemie notamment afin de caracteacuteriser rapidement
le geacutenome de la souche circulante(5)
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6
o Deacutemarche de qualiteacute
Accreacuteditation Belac ISO 15189
Le laboratoire de Microbiologie clinique du CHU de Liegravege a mis en place une
deacutemarche drsquoaccreacuteditation du laboratoire depuis quelques anneacutees La mise en place
du systegraveme qualiteacute du CNR mycoses de Liegravege a eacuteteacute initieacutee en 2012 et lrsquoaudit
drsquoaccreacuteditation a eu lieu en mai 2013 La deacutemarche retenue pour mettre en
conformiteacute le CNR avec la norme ISO 15189 est fondeacutee sur la reacutedaction de
proceacutedures pour chaque analyse proposeacutee par le CNR la creacuteation drsquoun dossier de
validation complet pour chacune de ces techniques et un eacutetat des lieux des
proceacutedures et protocoles existants La deacutemarche consiste eacutegalement en la mise en
conformiteacute des locaux et appareillages deacutedieacutes aux activiteacutes du CNR La gestion du
mateacuteriel permet en outre de garantir lrsquoutilisation drsquoeacutequipements fiables
approprieacutes aux besoins et surveilleacutes en temps reacuteel La gestion des reacuteactifs et
consommables (seacutelection et eacutevaluation des fournisseurs distribution et eacutevaluation
des produits) est assureacutee eacutegalement Lrsquoaccreacuteditation ISO 15189 a eacuteteacute octroyeacutee au
CNR mycoses agrave la suite de lrsquoaudit BELAC de mai 2013 En 2014 toutes les
proceacutedures du CNR mycoses ont eacuteteacute reacuteviseacutees et reacuteactualiseacutees Un audit de
surveillance a eu lieu en janvier 2015 qui a confirmeacute le respect de la norme
ISO15189
Controcircles de qualiteacute externes supranationaux
Le CNR Mycoses participe agrave un controcircle de qualiteacute externe tri-annuel concernant
la deacutetermination de la sensibiliteacute de souches de levures agrave diffeacuterents antifongiques
et lrsquoidentification de cultures de levureschampignons filamenteux issus
drsquoeacutechantillons cliniques Ces controcircles sont organiseacutes par lrsquoUK NEQAS
Parallegravelement agrave cela le CNR mycose organise et ou participe annuellement agrave des
laquo ring-tests raquo inter-laboratoires afin de valider les analyses pour lesquelles il
nrsquoexiste pas de controcircle proposeacute par un organisme externe
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7
o Collection
Tous les isolats cliniques de levures et de dermatophytes adresseacutee au CNR sont
systeacutematiquement conserveacutes et congeleacutes agrave -80degC excepteacute les isolats de
champignons contaminants sauf inteacuterecirct particulier La pureteacute des souches est
preacutealablement veacuterifieacutee et des techniques drsquoidentification (y compris seacutequenccedilage
moleacuteculaire) et de deacutetermination de la sensibiliteacute aux antifongiques (selon la
demande) sont reacutealiseacutees preacutealablement agrave la congeacutelation Les souches sont
reacutefeacuterenceacutees eacutetiqueteacutees et stockeacutees au sein de la laquo champithegraveque raquo (souchothegraveque)
du CNR
4 Bilan de 2014 pour les champignons isoleacutes par le CNR
o Bilan global
En 2014 un total de 3264 isolats fongiques ont eacuteteacute envoyeacutes aux deux CNR
laquo Mycoses raquo (regroupement des cas isoleacutes de phanegraveres agrave la KULeuven et au CHU de
Liegravege) dont 3220 provenaient de phanegraveres et 44 drsquoautres sites (sang frottis
drsquooreille de plaie de vagin expectoration lavage broncho-alveacuteolaire œil) Parmi
les eacutechantillons 1283 (3937) ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes
dont 239 provenant de la KUL et 1044 provenant du CHU de Liegravege Parmi eux
1166 (909) isolats ont eacuteteacute identifieacutes comme faisant partie du genre
Trichophyton 116 comme faisant partie du genre Microsporum (904) et 1
(007) comme faisant partie du genre Epidermophyton Un total de 508 isolats de
levures ont eacutegalement eacuteteacute reacutepertorieacutes (tous preacutelegravevements confondus) soit 156
de tous les preacutelegravevements dont 314 Candida sp Le reste des isolats (1473 souches
4524 de tous les preacutelegravevements) correspond agrave drsquoautres types de champignons
filamenteux (Voir Figure 1)
Plus preacuteciseacutement parmi les dermatophytes lrsquoespegravece la plus freacutequemment isoleacutee
(tous types de preacutelegravevement confondus) est Trichophyton rubrum (843 isolats
6578 des dermatophytes) suivi du complexe T mentagrophytes (242 isolats
1886) M canis (64 isolats 49) M audouinii (43 isolats 335) T tonsurans
(38 isolats 296) T soudanense (20 isolats 155) T violaceum (19 isolats
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8
148) M persicolor (3 isolats 021) M gypseum (3 isolats 021) T
verrucosum (2 isolats 014) M ferrugineum (2 isolats 014) M praecox (1
isolat 007) E floccosum (1 isolat 007) et T phaseolioformis ( 1 isolat 007)
Un isolat a eacuteteacute identifieacute comme Trichophyton spp sans identification preacutecise de
lrsquoespegravece La figure 2 repreacutesente la reacutepartition des espegraveces de dermatophytes en
2014 tous preacutelegravevements confondus
Parmi les autres isolats envoyeacutes au CNR on retrouve des levures reacuteparties en 17
espegraveces de Candida sp (314 isolats 6172 des levures isoleacutees) Rhodotorula sp
(105 isolats 207 des levures isoleacutees) Trichosporon sp ( 77 isolats 1517)
Geotrichum sp (7 isolats 137 des levures isoleacutees) et Saccharomyces sp (5
isolats 098 des levures isoleacutees) La figure 3 deacutecrit en deacutetail la reacutepartition des
levures analyseacutees par le CNR mycoses
Parmi les autres preacutelegravevements reccedilus par le CNR on retrouve entre autres des
Penicillum sp (248 isolats 778 de tous les preacutelegravevements) Aspergillus sp(177
isolats 555) Fusarium sp (90 isolats 282) Scopulariopsis sp (84 isolats
263) Alternaria sp (78 isolats 244) Acremonium sp (39 isolats 122)
Cladosporium sp (31 isolats 099)
Figure 1 Reacutepartition des preacutelegravevements reccedilus en 2014 par le CNR mycoses
Dermatophytes 39
Levures 16
Autres filamenteux
45
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9
Figure 2 Reacutepartition des 1283 dermatophytes isoleacutes en 2014 par les 2 CNR
007
007
007
007
014
014
021
021
148
155
296
335
490
1886
6578
000 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000
Efloccosum
Trichophyton sp
M praecox
T phaseoliformis
M ferrugineum
T verrucosum
M gypseum
M persicolor
Tviolaceum
T soudanense
Ttonsurans
Maudouinii
M canis
T mentagrophytes complex
Trubrum
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10
Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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11
Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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14
Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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15
Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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16
Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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17
Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
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2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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4
2 Missions speacutecifiques du CNR Mycoses
Les missions du CNR mycoses sont les suivantes
laquo Identification des champignons filamenteux et de levures adresseacutes par les
laboratoires belges Reacutealisation drsquoantifongigramme dans le cas drsquoinfection
profonde ou drsquoinfection reacutecidivante raquo
Constitution et entretien de la collection de souches de dermatophytes (CNR
Mycoses Liegravege)
Mise au point et deacuteveloppement de nouvelles meacutethodes de diagnostic
drsquoidentification et de typage moleacuteculaire des champignons telles que les
meacutethodes drsquoamplification geacutenique et de seacutequenccedilage moleacuteculaire
Alerte des autoriteacutes sanitaires agrave lrsquoexemple de lrsquoeacutemergence de nouvelles
reacutesistances aux antifongiques ou de lrsquoapparition drsquoune souche eacutepideacutemique
dans une population particuliegravere
Activiteacute de conseil aupregraves des autoriteacutes sanitaires des meacutedecins et des
biologistes
Participation agrave des groupes drsquoexperts agrave travers lrsquoEurope
Valorisation des travaux par des publications articles scientifiques guide de
prescription formation continue
Activiteacutes de recherches et drsquoeacutetudes en collaboration avec drsquoautres eacutequipes
scientifiques
Participation agrave des controcircles de qualiteacute externe
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5
3 Reacutesumeacute des activiteacutes de 2013
o Activiteacutes du CNRLiegravege
Au cours de lrsquoanneacutee 2014 tous les aspects des missions attribueacutees au CNR ont eacuteteacute
couverts comme lrsquoidentification drsquoisolats de levures et champignons filamenteux
lrsquoaide au diagnostic de mycoses rares la deacutetermination de la sensibiliteacute aux
antifongiques et lrsquoameacutelioration de techniques de typage et drsquoidentification
moleacuteculaire Le CNR de Liegravege se focalise principalement sur lrsquoidentification des
mycoses superficielles isoleacutees de phanegraveres
Parmi les techniques drsquoidentification des levures lrsquoidentification par spectromeacutetrie
de masse est lrsquooutil ndeg1 qui est utiliseacute Les reacutesultats sont confirmeacutes par seacutequenccedilage
moleacuteculaire si neacutecessaire
Parmi les outils moleacuteculaires une approche polyphasique est utiliseacutee La reacutegion
cibleacutee en premier lieu dans le cas de lrsquoidentification drsquoune espegravece est tout ou partie
de la reacutegion ITS1-58S-ITS2 de lrsquoARN ribosomique (ARNr) Deux cibles
compleacutementaires sont disponibles agrave savoir la reacutegion D1-D2 de la partie LSU (28S)
de lrsquoARNr et la becircta-tubuline Ces autres cibles sont utiliseacutees en cas de confirmation
de lrsquoidentification drsquoune espegravece rare ou en cas de reacuteponse non satisfaisante apregraves
une premiegravere amplification Drsquoautres cibles sont actuellement agrave lrsquoeacutetude
Le CNR Mycose a acquis en 2014 lrsquoappareil Diversilabreg (BioMeacuterieux) Cet appareil
permet une caracteacuterisation preacutecise du geacutenome des champignons filamenteux (y
compris les dermatophytes) et des levures Il a eacuteteacute deacutejagrave utiliseacute afin de caracteacuteriser
les souches de dermatophytes anthropophile circulant en Belgique en 2013 Il
pourrait ecirctre utiliseacute en cas drsquoeacutepideacutemie notamment afin de caracteacuteriser rapidement
le geacutenome de la souche circulante(5)
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6
o Deacutemarche de qualiteacute
Accreacuteditation Belac ISO 15189
Le laboratoire de Microbiologie clinique du CHU de Liegravege a mis en place une
deacutemarche drsquoaccreacuteditation du laboratoire depuis quelques anneacutees La mise en place
du systegraveme qualiteacute du CNR mycoses de Liegravege a eacuteteacute initieacutee en 2012 et lrsquoaudit
drsquoaccreacuteditation a eu lieu en mai 2013 La deacutemarche retenue pour mettre en
conformiteacute le CNR avec la norme ISO 15189 est fondeacutee sur la reacutedaction de
proceacutedures pour chaque analyse proposeacutee par le CNR la creacuteation drsquoun dossier de
validation complet pour chacune de ces techniques et un eacutetat des lieux des
proceacutedures et protocoles existants La deacutemarche consiste eacutegalement en la mise en
conformiteacute des locaux et appareillages deacutedieacutes aux activiteacutes du CNR La gestion du
mateacuteriel permet en outre de garantir lrsquoutilisation drsquoeacutequipements fiables
approprieacutes aux besoins et surveilleacutes en temps reacuteel La gestion des reacuteactifs et
consommables (seacutelection et eacutevaluation des fournisseurs distribution et eacutevaluation
des produits) est assureacutee eacutegalement Lrsquoaccreacuteditation ISO 15189 a eacuteteacute octroyeacutee au
CNR mycoses agrave la suite de lrsquoaudit BELAC de mai 2013 En 2014 toutes les
proceacutedures du CNR mycoses ont eacuteteacute reacuteviseacutees et reacuteactualiseacutees Un audit de
surveillance a eu lieu en janvier 2015 qui a confirmeacute le respect de la norme
ISO15189
Controcircles de qualiteacute externes supranationaux
Le CNR Mycoses participe agrave un controcircle de qualiteacute externe tri-annuel concernant
la deacutetermination de la sensibiliteacute de souches de levures agrave diffeacuterents antifongiques
et lrsquoidentification de cultures de levureschampignons filamenteux issus
drsquoeacutechantillons cliniques Ces controcircles sont organiseacutes par lrsquoUK NEQAS
Parallegravelement agrave cela le CNR mycose organise et ou participe annuellement agrave des
laquo ring-tests raquo inter-laboratoires afin de valider les analyses pour lesquelles il
nrsquoexiste pas de controcircle proposeacute par un organisme externe
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7
o Collection
Tous les isolats cliniques de levures et de dermatophytes adresseacutee au CNR sont
systeacutematiquement conserveacutes et congeleacutes agrave -80degC excepteacute les isolats de
champignons contaminants sauf inteacuterecirct particulier La pureteacute des souches est
preacutealablement veacuterifieacutee et des techniques drsquoidentification (y compris seacutequenccedilage
moleacuteculaire) et de deacutetermination de la sensibiliteacute aux antifongiques (selon la
demande) sont reacutealiseacutees preacutealablement agrave la congeacutelation Les souches sont
reacutefeacuterenceacutees eacutetiqueteacutees et stockeacutees au sein de la laquo champithegraveque raquo (souchothegraveque)
du CNR
4 Bilan de 2014 pour les champignons isoleacutes par le CNR
o Bilan global
En 2014 un total de 3264 isolats fongiques ont eacuteteacute envoyeacutes aux deux CNR
laquo Mycoses raquo (regroupement des cas isoleacutes de phanegraveres agrave la KULeuven et au CHU de
Liegravege) dont 3220 provenaient de phanegraveres et 44 drsquoautres sites (sang frottis
drsquooreille de plaie de vagin expectoration lavage broncho-alveacuteolaire œil) Parmi
les eacutechantillons 1283 (3937) ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes
dont 239 provenant de la KUL et 1044 provenant du CHU de Liegravege Parmi eux
1166 (909) isolats ont eacuteteacute identifieacutes comme faisant partie du genre
Trichophyton 116 comme faisant partie du genre Microsporum (904) et 1
(007) comme faisant partie du genre Epidermophyton Un total de 508 isolats de
levures ont eacutegalement eacuteteacute reacutepertorieacutes (tous preacutelegravevements confondus) soit 156
de tous les preacutelegravevements dont 314 Candida sp Le reste des isolats (1473 souches
4524 de tous les preacutelegravevements) correspond agrave drsquoautres types de champignons
filamenteux (Voir Figure 1)
Plus preacuteciseacutement parmi les dermatophytes lrsquoespegravece la plus freacutequemment isoleacutee
(tous types de preacutelegravevement confondus) est Trichophyton rubrum (843 isolats
6578 des dermatophytes) suivi du complexe T mentagrophytes (242 isolats
1886) M canis (64 isolats 49) M audouinii (43 isolats 335) T tonsurans
(38 isolats 296) T soudanense (20 isolats 155) T violaceum (19 isolats
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8
148) M persicolor (3 isolats 021) M gypseum (3 isolats 021) T
verrucosum (2 isolats 014) M ferrugineum (2 isolats 014) M praecox (1
isolat 007) E floccosum (1 isolat 007) et T phaseolioformis ( 1 isolat 007)
Un isolat a eacuteteacute identifieacute comme Trichophyton spp sans identification preacutecise de
lrsquoespegravece La figure 2 repreacutesente la reacutepartition des espegraveces de dermatophytes en
2014 tous preacutelegravevements confondus
Parmi les autres isolats envoyeacutes au CNR on retrouve des levures reacuteparties en 17
espegraveces de Candida sp (314 isolats 6172 des levures isoleacutees) Rhodotorula sp
(105 isolats 207 des levures isoleacutees) Trichosporon sp ( 77 isolats 1517)
Geotrichum sp (7 isolats 137 des levures isoleacutees) et Saccharomyces sp (5
isolats 098 des levures isoleacutees) La figure 3 deacutecrit en deacutetail la reacutepartition des
levures analyseacutees par le CNR mycoses
Parmi les autres preacutelegravevements reccedilus par le CNR on retrouve entre autres des
Penicillum sp (248 isolats 778 de tous les preacutelegravevements) Aspergillus sp(177
isolats 555) Fusarium sp (90 isolats 282) Scopulariopsis sp (84 isolats
263) Alternaria sp (78 isolats 244) Acremonium sp (39 isolats 122)
Cladosporium sp (31 isolats 099)
Figure 1 Reacutepartition des preacutelegravevements reccedilus en 2014 par le CNR mycoses
Dermatophytes 39
Levures 16
Autres filamenteux
45
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9
Figure 2 Reacutepartition des 1283 dermatophytes isoleacutes en 2014 par les 2 CNR
007
007
007
007
014
014
021
021
148
155
296
335
490
1886
6578
000 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000
Efloccosum
Trichophyton sp
M praecox
T phaseoliformis
M ferrugineum
T verrucosum
M gypseum
M persicolor
Tviolaceum
T soudanense
Ttonsurans
Maudouinii
M canis
T mentagrophytes complex
Trubrum
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10
Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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23
ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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24
3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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5
3 Reacutesumeacute des activiteacutes de 2013
o Activiteacutes du CNRLiegravege
Au cours de lrsquoanneacutee 2014 tous les aspects des missions attribueacutees au CNR ont eacuteteacute
couverts comme lrsquoidentification drsquoisolats de levures et champignons filamenteux
lrsquoaide au diagnostic de mycoses rares la deacutetermination de la sensibiliteacute aux
antifongiques et lrsquoameacutelioration de techniques de typage et drsquoidentification
moleacuteculaire Le CNR de Liegravege se focalise principalement sur lrsquoidentification des
mycoses superficielles isoleacutees de phanegraveres
Parmi les techniques drsquoidentification des levures lrsquoidentification par spectromeacutetrie
de masse est lrsquooutil ndeg1 qui est utiliseacute Les reacutesultats sont confirmeacutes par seacutequenccedilage
moleacuteculaire si neacutecessaire
Parmi les outils moleacuteculaires une approche polyphasique est utiliseacutee La reacutegion
cibleacutee en premier lieu dans le cas de lrsquoidentification drsquoune espegravece est tout ou partie
de la reacutegion ITS1-58S-ITS2 de lrsquoARN ribosomique (ARNr) Deux cibles
compleacutementaires sont disponibles agrave savoir la reacutegion D1-D2 de la partie LSU (28S)
de lrsquoARNr et la becircta-tubuline Ces autres cibles sont utiliseacutees en cas de confirmation
de lrsquoidentification drsquoune espegravece rare ou en cas de reacuteponse non satisfaisante apregraves
une premiegravere amplification Drsquoautres cibles sont actuellement agrave lrsquoeacutetude
Le CNR Mycose a acquis en 2014 lrsquoappareil Diversilabreg (BioMeacuterieux) Cet appareil
permet une caracteacuterisation preacutecise du geacutenome des champignons filamenteux (y
compris les dermatophytes) et des levures Il a eacuteteacute deacutejagrave utiliseacute afin de caracteacuteriser
les souches de dermatophytes anthropophile circulant en Belgique en 2013 Il
pourrait ecirctre utiliseacute en cas drsquoeacutepideacutemie notamment afin de caracteacuteriser rapidement
le geacutenome de la souche circulante(5)
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6
o Deacutemarche de qualiteacute
Accreacuteditation Belac ISO 15189
Le laboratoire de Microbiologie clinique du CHU de Liegravege a mis en place une
deacutemarche drsquoaccreacuteditation du laboratoire depuis quelques anneacutees La mise en place
du systegraveme qualiteacute du CNR mycoses de Liegravege a eacuteteacute initieacutee en 2012 et lrsquoaudit
drsquoaccreacuteditation a eu lieu en mai 2013 La deacutemarche retenue pour mettre en
conformiteacute le CNR avec la norme ISO 15189 est fondeacutee sur la reacutedaction de
proceacutedures pour chaque analyse proposeacutee par le CNR la creacuteation drsquoun dossier de
validation complet pour chacune de ces techniques et un eacutetat des lieux des
proceacutedures et protocoles existants La deacutemarche consiste eacutegalement en la mise en
conformiteacute des locaux et appareillages deacutedieacutes aux activiteacutes du CNR La gestion du
mateacuteriel permet en outre de garantir lrsquoutilisation drsquoeacutequipements fiables
approprieacutes aux besoins et surveilleacutes en temps reacuteel La gestion des reacuteactifs et
consommables (seacutelection et eacutevaluation des fournisseurs distribution et eacutevaluation
des produits) est assureacutee eacutegalement Lrsquoaccreacuteditation ISO 15189 a eacuteteacute octroyeacutee au
CNR mycoses agrave la suite de lrsquoaudit BELAC de mai 2013 En 2014 toutes les
proceacutedures du CNR mycoses ont eacuteteacute reacuteviseacutees et reacuteactualiseacutees Un audit de
surveillance a eu lieu en janvier 2015 qui a confirmeacute le respect de la norme
ISO15189
Controcircles de qualiteacute externes supranationaux
Le CNR Mycoses participe agrave un controcircle de qualiteacute externe tri-annuel concernant
la deacutetermination de la sensibiliteacute de souches de levures agrave diffeacuterents antifongiques
et lrsquoidentification de cultures de levureschampignons filamenteux issus
drsquoeacutechantillons cliniques Ces controcircles sont organiseacutes par lrsquoUK NEQAS
Parallegravelement agrave cela le CNR mycose organise et ou participe annuellement agrave des
laquo ring-tests raquo inter-laboratoires afin de valider les analyses pour lesquelles il
nrsquoexiste pas de controcircle proposeacute par un organisme externe
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7
o Collection
Tous les isolats cliniques de levures et de dermatophytes adresseacutee au CNR sont
systeacutematiquement conserveacutes et congeleacutes agrave -80degC excepteacute les isolats de
champignons contaminants sauf inteacuterecirct particulier La pureteacute des souches est
preacutealablement veacuterifieacutee et des techniques drsquoidentification (y compris seacutequenccedilage
moleacuteculaire) et de deacutetermination de la sensibiliteacute aux antifongiques (selon la
demande) sont reacutealiseacutees preacutealablement agrave la congeacutelation Les souches sont
reacutefeacuterenceacutees eacutetiqueteacutees et stockeacutees au sein de la laquo champithegraveque raquo (souchothegraveque)
du CNR
4 Bilan de 2014 pour les champignons isoleacutes par le CNR
o Bilan global
En 2014 un total de 3264 isolats fongiques ont eacuteteacute envoyeacutes aux deux CNR
laquo Mycoses raquo (regroupement des cas isoleacutes de phanegraveres agrave la KULeuven et au CHU de
Liegravege) dont 3220 provenaient de phanegraveres et 44 drsquoautres sites (sang frottis
drsquooreille de plaie de vagin expectoration lavage broncho-alveacuteolaire œil) Parmi
les eacutechantillons 1283 (3937) ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes
dont 239 provenant de la KUL et 1044 provenant du CHU de Liegravege Parmi eux
1166 (909) isolats ont eacuteteacute identifieacutes comme faisant partie du genre
Trichophyton 116 comme faisant partie du genre Microsporum (904) et 1
(007) comme faisant partie du genre Epidermophyton Un total de 508 isolats de
levures ont eacutegalement eacuteteacute reacutepertorieacutes (tous preacutelegravevements confondus) soit 156
de tous les preacutelegravevements dont 314 Candida sp Le reste des isolats (1473 souches
4524 de tous les preacutelegravevements) correspond agrave drsquoautres types de champignons
filamenteux (Voir Figure 1)
Plus preacuteciseacutement parmi les dermatophytes lrsquoespegravece la plus freacutequemment isoleacutee
(tous types de preacutelegravevement confondus) est Trichophyton rubrum (843 isolats
6578 des dermatophytes) suivi du complexe T mentagrophytes (242 isolats
1886) M canis (64 isolats 49) M audouinii (43 isolats 335) T tonsurans
(38 isolats 296) T soudanense (20 isolats 155) T violaceum (19 isolats
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8
148) M persicolor (3 isolats 021) M gypseum (3 isolats 021) T
verrucosum (2 isolats 014) M ferrugineum (2 isolats 014) M praecox (1
isolat 007) E floccosum (1 isolat 007) et T phaseolioformis ( 1 isolat 007)
Un isolat a eacuteteacute identifieacute comme Trichophyton spp sans identification preacutecise de
lrsquoespegravece La figure 2 repreacutesente la reacutepartition des espegraveces de dermatophytes en
2014 tous preacutelegravevements confondus
Parmi les autres isolats envoyeacutes au CNR on retrouve des levures reacuteparties en 17
espegraveces de Candida sp (314 isolats 6172 des levures isoleacutees) Rhodotorula sp
(105 isolats 207 des levures isoleacutees) Trichosporon sp ( 77 isolats 1517)
Geotrichum sp (7 isolats 137 des levures isoleacutees) et Saccharomyces sp (5
isolats 098 des levures isoleacutees) La figure 3 deacutecrit en deacutetail la reacutepartition des
levures analyseacutees par le CNR mycoses
Parmi les autres preacutelegravevements reccedilus par le CNR on retrouve entre autres des
Penicillum sp (248 isolats 778 de tous les preacutelegravevements) Aspergillus sp(177
isolats 555) Fusarium sp (90 isolats 282) Scopulariopsis sp (84 isolats
263) Alternaria sp (78 isolats 244) Acremonium sp (39 isolats 122)
Cladosporium sp (31 isolats 099)
Figure 1 Reacutepartition des preacutelegravevements reccedilus en 2014 par le CNR mycoses
Dermatophytes 39
Levures 16
Autres filamenteux
45
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Figure 2 Reacutepartition des 1283 dermatophytes isoleacutes en 2014 par les 2 CNR
007
007
007
007
014
014
021
021
148
155
296
335
490
1886
6578
000 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000
Efloccosum
Trichophyton sp
M praecox
T phaseoliformis
M ferrugineum
T verrucosum
M gypseum
M persicolor
Tviolaceum
T soudanense
Ttonsurans
Maudouinii
M canis
T mentagrophytes complex
Trubrum
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Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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21
Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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24
3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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6
o Deacutemarche de qualiteacute
Accreacuteditation Belac ISO 15189
Le laboratoire de Microbiologie clinique du CHU de Liegravege a mis en place une
deacutemarche drsquoaccreacuteditation du laboratoire depuis quelques anneacutees La mise en place
du systegraveme qualiteacute du CNR mycoses de Liegravege a eacuteteacute initieacutee en 2012 et lrsquoaudit
drsquoaccreacuteditation a eu lieu en mai 2013 La deacutemarche retenue pour mettre en
conformiteacute le CNR avec la norme ISO 15189 est fondeacutee sur la reacutedaction de
proceacutedures pour chaque analyse proposeacutee par le CNR la creacuteation drsquoun dossier de
validation complet pour chacune de ces techniques et un eacutetat des lieux des
proceacutedures et protocoles existants La deacutemarche consiste eacutegalement en la mise en
conformiteacute des locaux et appareillages deacutedieacutes aux activiteacutes du CNR La gestion du
mateacuteriel permet en outre de garantir lrsquoutilisation drsquoeacutequipements fiables
approprieacutes aux besoins et surveilleacutes en temps reacuteel La gestion des reacuteactifs et
consommables (seacutelection et eacutevaluation des fournisseurs distribution et eacutevaluation
des produits) est assureacutee eacutegalement Lrsquoaccreacuteditation ISO 15189 a eacuteteacute octroyeacutee au
CNR mycoses agrave la suite de lrsquoaudit BELAC de mai 2013 En 2014 toutes les
proceacutedures du CNR mycoses ont eacuteteacute reacuteviseacutees et reacuteactualiseacutees Un audit de
surveillance a eu lieu en janvier 2015 qui a confirmeacute le respect de la norme
ISO15189
Controcircles de qualiteacute externes supranationaux
Le CNR Mycoses participe agrave un controcircle de qualiteacute externe tri-annuel concernant
la deacutetermination de la sensibiliteacute de souches de levures agrave diffeacuterents antifongiques
et lrsquoidentification de cultures de levureschampignons filamenteux issus
drsquoeacutechantillons cliniques Ces controcircles sont organiseacutes par lrsquoUK NEQAS
Parallegravelement agrave cela le CNR mycose organise et ou participe annuellement agrave des
laquo ring-tests raquo inter-laboratoires afin de valider les analyses pour lesquelles il
nrsquoexiste pas de controcircle proposeacute par un organisme externe
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o Collection
Tous les isolats cliniques de levures et de dermatophytes adresseacutee au CNR sont
systeacutematiquement conserveacutes et congeleacutes agrave -80degC excepteacute les isolats de
champignons contaminants sauf inteacuterecirct particulier La pureteacute des souches est
preacutealablement veacuterifieacutee et des techniques drsquoidentification (y compris seacutequenccedilage
moleacuteculaire) et de deacutetermination de la sensibiliteacute aux antifongiques (selon la
demande) sont reacutealiseacutees preacutealablement agrave la congeacutelation Les souches sont
reacutefeacuterenceacutees eacutetiqueteacutees et stockeacutees au sein de la laquo champithegraveque raquo (souchothegraveque)
du CNR
4 Bilan de 2014 pour les champignons isoleacutes par le CNR
o Bilan global
En 2014 un total de 3264 isolats fongiques ont eacuteteacute envoyeacutes aux deux CNR
laquo Mycoses raquo (regroupement des cas isoleacutes de phanegraveres agrave la KULeuven et au CHU de
Liegravege) dont 3220 provenaient de phanegraveres et 44 drsquoautres sites (sang frottis
drsquooreille de plaie de vagin expectoration lavage broncho-alveacuteolaire œil) Parmi
les eacutechantillons 1283 (3937) ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes
dont 239 provenant de la KUL et 1044 provenant du CHU de Liegravege Parmi eux
1166 (909) isolats ont eacuteteacute identifieacutes comme faisant partie du genre
Trichophyton 116 comme faisant partie du genre Microsporum (904) et 1
(007) comme faisant partie du genre Epidermophyton Un total de 508 isolats de
levures ont eacutegalement eacuteteacute reacutepertorieacutes (tous preacutelegravevements confondus) soit 156
de tous les preacutelegravevements dont 314 Candida sp Le reste des isolats (1473 souches
4524 de tous les preacutelegravevements) correspond agrave drsquoautres types de champignons
filamenteux (Voir Figure 1)
Plus preacuteciseacutement parmi les dermatophytes lrsquoespegravece la plus freacutequemment isoleacutee
(tous types de preacutelegravevement confondus) est Trichophyton rubrum (843 isolats
6578 des dermatophytes) suivi du complexe T mentagrophytes (242 isolats
1886) M canis (64 isolats 49) M audouinii (43 isolats 335) T tonsurans
(38 isolats 296) T soudanense (20 isolats 155) T violaceum (19 isolats
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8
148) M persicolor (3 isolats 021) M gypseum (3 isolats 021) T
verrucosum (2 isolats 014) M ferrugineum (2 isolats 014) M praecox (1
isolat 007) E floccosum (1 isolat 007) et T phaseolioformis ( 1 isolat 007)
Un isolat a eacuteteacute identifieacute comme Trichophyton spp sans identification preacutecise de
lrsquoespegravece La figure 2 repreacutesente la reacutepartition des espegraveces de dermatophytes en
2014 tous preacutelegravevements confondus
Parmi les autres isolats envoyeacutes au CNR on retrouve des levures reacuteparties en 17
espegraveces de Candida sp (314 isolats 6172 des levures isoleacutees) Rhodotorula sp
(105 isolats 207 des levures isoleacutees) Trichosporon sp ( 77 isolats 1517)
Geotrichum sp (7 isolats 137 des levures isoleacutees) et Saccharomyces sp (5
isolats 098 des levures isoleacutees) La figure 3 deacutecrit en deacutetail la reacutepartition des
levures analyseacutees par le CNR mycoses
Parmi les autres preacutelegravevements reccedilus par le CNR on retrouve entre autres des
Penicillum sp (248 isolats 778 de tous les preacutelegravevements) Aspergillus sp(177
isolats 555) Fusarium sp (90 isolats 282) Scopulariopsis sp (84 isolats
263) Alternaria sp (78 isolats 244) Acremonium sp (39 isolats 122)
Cladosporium sp (31 isolats 099)
Figure 1 Reacutepartition des preacutelegravevements reccedilus en 2014 par le CNR mycoses
Dermatophytes 39
Levures 16
Autres filamenteux
45
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9
Figure 2 Reacutepartition des 1283 dermatophytes isoleacutes en 2014 par les 2 CNR
007
007
007
007
014
014
021
021
148
155
296
335
490
1886
6578
000 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000
Efloccosum
Trichophyton sp
M praecox
T phaseoliformis
M ferrugineum
T verrucosum
M gypseum
M persicolor
Tviolaceum
T soudanense
Ttonsurans
Maudouinii
M canis
T mentagrophytes complex
Trubrum
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Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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7
o Collection
Tous les isolats cliniques de levures et de dermatophytes adresseacutee au CNR sont
systeacutematiquement conserveacutes et congeleacutes agrave -80degC excepteacute les isolats de
champignons contaminants sauf inteacuterecirct particulier La pureteacute des souches est
preacutealablement veacuterifieacutee et des techniques drsquoidentification (y compris seacutequenccedilage
moleacuteculaire) et de deacutetermination de la sensibiliteacute aux antifongiques (selon la
demande) sont reacutealiseacutees preacutealablement agrave la congeacutelation Les souches sont
reacutefeacuterenceacutees eacutetiqueteacutees et stockeacutees au sein de la laquo champithegraveque raquo (souchothegraveque)
du CNR
4 Bilan de 2014 pour les champignons isoleacutes par le CNR
o Bilan global
En 2014 un total de 3264 isolats fongiques ont eacuteteacute envoyeacutes aux deux CNR
laquo Mycoses raquo (regroupement des cas isoleacutes de phanegraveres agrave la KULeuven et au CHU de
Liegravege) dont 3220 provenaient de phanegraveres et 44 drsquoautres sites (sang frottis
drsquooreille de plaie de vagin expectoration lavage broncho-alveacuteolaire œil) Parmi
les eacutechantillons 1283 (3937) ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes
dont 239 provenant de la KUL et 1044 provenant du CHU de Liegravege Parmi eux
1166 (909) isolats ont eacuteteacute identifieacutes comme faisant partie du genre
Trichophyton 116 comme faisant partie du genre Microsporum (904) et 1
(007) comme faisant partie du genre Epidermophyton Un total de 508 isolats de
levures ont eacutegalement eacuteteacute reacutepertorieacutes (tous preacutelegravevements confondus) soit 156
de tous les preacutelegravevements dont 314 Candida sp Le reste des isolats (1473 souches
4524 de tous les preacutelegravevements) correspond agrave drsquoautres types de champignons
filamenteux (Voir Figure 1)
Plus preacuteciseacutement parmi les dermatophytes lrsquoespegravece la plus freacutequemment isoleacutee
(tous types de preacutelegravevement confondus) est Trichophyton rubrum (843 isolats
6578 des dermatophytes) suivi du complexe T mentagrophytes (242 isolats
1886) M canis (64 isolats 49) M audouinii (43 isolats 335) T tonsurans
(38 isolats 296) T soudanense (20 isolats 155) T violaceum (19 isolats
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8
148) M persicolor (3 isolats 021) M gypseum (3 isolats 021) T
verrucosum (2 isolats 014) M ferrugineum (2 isolats 014) M praecox (1
isolat 007) E floccosum (1 isolat 007) et T phaseolioformis ( 1 isolat 007)
Un isolat a eacuteteacute identifieacute comme Trichophyton spp sans identification preacutecise de
lrsquoespegravece La figure 2 repreacutesente la reacutepartition des espegraveces de dermatophytes en
2014 tous preacutelegravevements confondus
Parmi les autres isolats envoyeacutes au CNR on retrouve des levures reacuteparties en 17
espegraveces de Candida sp (314 isolats 6172 des levures isoleacutees) Rhodotorula sp
(105 isolats 207 des levures isoleacutees) Trichosporon sp ( 77 isolats 1517)
Geotrichum sp (7 isolats 137 des levures isoleacutees) et Saccharomyces sp (5
isolats 098 des levures isoleacutees) La figure 3 deacutecrit en deacutetail la reacutepartition des
levures analyseacutees par le CNR mycoses
Parmi les autres preacutelegravevements reccedilus par le CNR on retrouve entre autres des
Penicillum sp (248 isolats 778 de tous les preacutelegravevements) Aspergillus sp(177
isolats 555) Fusarium sp (90 isolats 282) Scopulariopsis sp (84 isolats
263) Alternaria sp (78 isolats 244) Acremonium sp (39 isolats 122)
Cladosporium sp (31 isolats 099)
Figure 1 Reacutepartition des preacutelegravevements reccedilus en 2014 par le CNR mycoses
Dermatophytes 39
Levures 16
Autres filamenteux
45
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9
Figure 2 Reacutepartition des 1283 dermatophytes isoleacutes en 2014 par les 2 CNR
007
007
007
007
014
014
021
021
148
155
296
335
490
1886
6578
000 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000
Efloccosum
Trichophyton sp
M praecox
T phaseoliformis
M ferrugineum
T verrucosum
M gypseum
M persicolor
Tviolaceum
T soudanense
Ttonsurans
Maudouinii
M canis
T mentagrophytes complex
Trubrum
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10
Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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14
Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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15
Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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23
ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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148) M persicolor (3 isolats 021) M gypseum (3 isolats 021) T
verrucosum (2 isolats 014) M ferrugineum (2 isolats 014) M praecox (1
isolat 007) E floccosum (1 isolat 007) et T phaseolioformis ( 1 isolat 007)
Un isolat a eacuteteacute identifieacute comme Trichophyton spp sans identification preacutecise de
lrsquoespegravece La figure 2 repreacutesente la reacutepartition des espegraveces de dermatophytes en
2014 tous preacutelegravevements confondus
Parmi les autres isolats envoyeacutes au CNR on retrouve des levures reacuteparties en 17
espegraveces de Candida sp (314 isolats 6172 des levures isoleacutees) Rhodotorula sp
(105 isolats 207 des levures isoleacutees) Trichosporon sp ( 77 isolats 1517)
Geotrichum sp (7 isolats 137 des levures isoleacutees) et Saccharomyces sp (5
isolats 098 des levures isoleacutees) La figure 3 deacutecrit en deacutetail la reacutepartition des
levures analyseacutees par le CNR mycoses
Parmi les autres preacutelegravevements reccedilus par le CNR on retrouve entre autres des
Penicillum sp (248 isolats 778 de tous les preacutelegravevements) Aspergillus sp(177
isolats 555) Fusarium sp (90 isolats 282) Scopulariopsis sp (84 isolats
263) Alternaria sp (78 isolats 244) Acremonium sp (39 isolats 122)
Cladosporium sp (31 isolats 099)
Figure 1 Reacutepartition des preacutelegravevements reccedilus en 2014 par le CNR mycoses
Dermatophytes 39
Levures 16
Autres filamenteux
45
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9
Figure 2 Reacutepartition des 1283 dermatophytes isoleacutes en 2014 par les 2 CNR
007
007
007
007
014
014
021
021
148
155
296
335
490
1886
6578
000 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000
Efloccosum
Trichophyton sp
M praecox
T phaseoliformis
M ferrugineum
T verrucosum
M gypseum
M persicolor
Tviolaceum
T soudanense
Ttonsurans
Maudouinii
M canis
T mentagrophytes complex
Trubrum
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Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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12
Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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13
et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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9
Figure 2 Reacutepartition des 1283 dermatophytes isoleacutes en 2014 par les 2 CNR
007
007
007
007
014
014
021
021
148
155
296
335
490
1886
6578
000 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000
Efloccosum
Trichophyton sp
M praecox
T phaseoliformis
M ferrugineum
T verrucosum
M gypseum
M persicolor
Tviolaceum
T soudanense
Ttonsurans
Maudouinii
M canis
T mentagrophytes complex
Trubrum
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10
Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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11
Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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12
Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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13
et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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14
Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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24
3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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10
Figure 3 Repreacutesentation graphique de la reacutepartition des espegraveces de levures
analyseacutees par le CNR en 2014 (en )
o Bilan selon lrsquoorigine du preacutelegravevement
Parmi les isolats envoyeacutes au CNR de Liegravege (et avec en sus les preacutelegravevements de
phanegraveres du CNR de la KUL) 2266 (694) provenaient drsquoongles 829 (254)
provenaient de squames ou biopsies de peau 119 (364) provenaient de cheveux
(ou de cuir chevelu) et 44 (134) provenaient drsquoautres sources (Voir figure 4)
019
019
019
019
019
039
059
059
098
098
118
137
137
157
157
1064
1517
1811
207
2386
Candida haemulonii
Candida zeylanoides
Candida utiliis
Candida lypolitica
Candida metapsilosis
Candida orthopsilosis
Candida kefyr
Candida intermedia
Candida tropicalis
Saccharomyces sp
Candida species
Candida famata
Geotrichum sp
Candida glabrata
Candida lusitaniae
Candida guilliermondii
Trichosporon sp
Candida albicans
Rhodotorula sp
Candida parapsilosis
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Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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12
Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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13
et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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22
comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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23
ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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24
3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Figure 4 Reacutepartition de lrsquoorigine des preacutelegravevements envoyeacutes au CNR Mycoses en
2014
Cheveux
Au total 119 isolats reccedilus par le CNR provenaient de cheveux parmi lesquels 80
ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des dermatophytes se reacutepartissant en 12 espegraveces
M audouinii est le pathogegravene fongique le plus freacutequent pour ce type de
preacutelegravevement et repreacutesente 30 des infections par les dermatophytes (n=24) Les
autres dermatophytes identifieacutes sont Trichophyton tonsurans (n=14 175)
Microsporum canis (n=13 162) Trichophyton violaceum (n=9 1126)
Trichophyton soudanense (n=8 10) M persicolor (n=3 37) Trichophyton
mentagrophytes complex (n=2 246) Microsporum gypseum(n=2 246) M
ferrugineum (n=2 246) M pracecox (n=1 123) T verrucosum (n=1 123)
(Voir figure 5) Les autres espegraveces cultiveacutees eacutetaient des champignons filamenteux
non-dermatophytes preacutesents dans les eacutechantillons comme contaminants ou
pathogegravenes potentiels Notre analyse reacutevegravele la preacutedominance de lrsquoespegravece M
audouinii comme agent causal de la teigne
Cheveux 4
Peau 25
Ongles 70
Autres 1
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Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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13
et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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14
Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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18
Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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20
Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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21
Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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22
comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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23
ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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24
3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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12
Figure 5 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
du cuir chevelu en 2014
Peau
Au total 829 isolats cultiveacutes agrave partir de squames ont eacuteteacute reccedilus Les isolats sont
reacutepartis comme suit dermatophytes (387 isolats 4672 de tous les isolats)
levures (108 isolats 1303 de tous les isolats) Le reste des souches est reacuteparti en
diffeacuterentes espegraveces de champignons filamenteux non-dermatophytiques
Parmi les dermatophytes 179 isolats de T rubrum ont eacuteteacute identifieacutes soit 476 des
dermatophytes Crsquoest lrsquoagent le plus freacutequemment isoleacute dans ce type de
preacutelegravevements Au total 84 isolats du complexe T mentagrophytes ont eacuteteacute isoleacutes de
preacutelegravevements de peau (2232) A noter que les espegraveces T interdigitale et T
mentagrophytes ont eacuteteacute rassembleacutees par faciliteacute dans le complexe T
mentagrophytes Microsporum canis a eacuteteacute retrouveacute agrave raison de 59 souches durant
lrsquoanneacutee 2014 (1526) Les autres dermatophytes isoleacutes moins freacutequemment sont
les suivants 20 T tonsurans (53) 19 M audouinii (505) 14 T violaceum
(371 ) 10 T soudanense (265) 1 M gypseum (026) 1 E floccosum (026)
(voir figure 6 pour la distribution)
Le groupe des champignons non-dermatophytes contient les genres suivants
Cladosporium Rhizopus Alternaria Aspergillus Fusarium Scopulariopsis
Penicillium Parmi ceux-ci certains peuvent ecirctre agrave lrsquoorigine drsquoinfection superficielle
303
173 1605
1111 987
37 246 246 246 123 123
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et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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14
Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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18
Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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22
comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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23
ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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et drsquoautres agrave lrsquoorigine drsquoinfection invasive chez les patients dont lrsquoimmuniteacute est
diminueacutee ou en cas de blessure non correctement prise en charge Il est important
de consideacuterer chaque agent fongique en fonction du patient (patient agrave risque de
deacutevelopper une infection superficielle ou invasive en fonction de son degreacute
drsquoimmunodeacutepression ou de facteurs locaux) et aussi en fonction de lrsquoexamen
microscopique pour deacuteterminer la preacutesence drsquoun contaminant ou drsquoun pathogegravene
Crsquoest pour cela que le remplissage du formulaire mis agrave disposition par le CNR est
essentiel dans la prise en charge de lrsquoeacutechantillon La preacutesence de contaminants de
lrsquoenvironnement au moment du preacutelegravevement ou de lrsquoensemencement conduit agrave la
culture de champignons non significatifs pouvant empecirccher la culture du veacuteritable
pathogegravene Il est important de rappeler que le preacutelegravevement des phanegraveres doit ecirctre
preacuteceacutedeacutee par la deacutesinfection du site avec de lrsquoalcool agrave 70 (particuliegraverement
drsquoapplication pour les ongles souvent contamineacutes) de faccedilon reacuteduire au maximum le
risque de contamination
Figure 6 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes (en ) causant des infections
de la peau en 2014
476
2232
1422
53 505 371 265 0265 026
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Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Ongles
La majoriteacute des souches reccedilues par le CNR provenaient drsquoongles (2266 isolats)
Ceci a conduit agrave lrsquoidentification de 828 dermatophytes (3663) 267 levures (dont
188 Candida sp reacutepartis en 12 espegraveces 79 appartenant agrave drsquoautres genres) et des
champignons non-dermatophytes consideacutereacutes souvent comme contaminants ou
pathogegravenes ougrave lrsquoon retrouve des genres tels que les Alternaria Scopulariopsis
Acremonium Penicillium Aspergillus Fusarium Il est important de mettre lrsquoaccent
sur le fait que la preacutesence de champignons non dermatophytes qui sont
potentiellement pathogegravenes tels que Fusarium sp ou Scopulariopsis sp doit ecirctre
confirmeacutee sur base de la positiviteacute de lrsquoexamen direct et eacutegalement drsquoun second
eacutechantillon positif pour le mecircme agent avant de le juger responsable de la
symptomatologie En effet la preacutesence drsquoun dermatophyte peut ecirctre gecircneacutee par la
croissance de tels contaminants Dans ce cas la PCR pourrait ecirctre une alternative
utile pour compleacuteter le diagnostic
Le groupe des dermatophytes comprend 663 T rubrum et 84 T mentagrophytes
complex (8064 et 102 respectivement) Drsquoautres espegraveces de dermatophytes
ont eacuteteacute identifieacutees minoritairement agrave partir de preacutelegravevements drsquoongles agrave savoir 45
M canis (543) 6 T tonsurans (072) 4 T soudanense (048) 4 T violaceum
(048) 3 M persicolor (036) 2 M praecox (024) 1 M gypseum (012) 1 T
phaseoliformis (012) (Voir figure 7)
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
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2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Figure 7 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes responsables
drsquoonychomycoses en 2014
o Bilan selon lrsquoacircge des patients
Le groupe drsquoacircge le plus affecteacute par les infections agrave dermatophytes est le groupe des
51-70 ans et 31-50 ans (Voir figure 8) Dans la tranche drsquoacircge lt de 10 ans M
audouinii est lrsquoagent responsable de 37 des infections qui sont principalement
des teignes du cuir chevelu (Voir reacutepartition des espegraveces de dermatophytes
touchant les lt de 10 ans figure 9)
8065
1015 543
072 048 048 036 024 012 012
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
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60
70
80
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Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
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2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE LIEGE Service de Microbiologie Clinique-CNR mycoses
24
3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Figure 8 Repreacutesentation graphique des groupes drsquoacircges de patients concerneacutes par
les dermatophytoses en 2014
Figure 9 Distribution des infections agrave dermatophytes (nombre de cas recenseacutes)
dans la cateacutegorie drsquoacircge des lt de 10 ans en 2014 (tous preacutelegravevements confondus)
Pour lrsquoespegravece M audouinii crsquoest la tranche drsquoacircge des 4-7 ans qui est la plus toucheacutee
chez les enfants de moins de 10ans Cette tranche drsquoacircge repreacutesente 52 des
preacutelegravevements chez les moins de 10 ans (Voir figure 10)
172
240
365 369
123
0
50
100
150
200
250
300
350
400
lt10 ans 11 -30 ans 31-50 ans 51-70 ans gt70 ans
0 5 10 15 20 25 30 35 40
M audouinii
M canis
T tonsurans
T violaceum
T rubrum
T mentagrophytes complex
T soudanense
T verrucosum
M ferrugineum
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
2013
2014
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Figure 10 Repreacutesentation des tranches drsquoacircges concerneacutees par les infections agrave M
audouinii chez les ndash de 10 ans (preacutelegravevements de peau et cuir chevelu)
5 Comparaison anneacutees 2012-2014
En 2012 un total de 2733 preacutelegravevements ont eacuteteacute traiteacutes par les CNR En 2013 ce
nombre eacutetait de 3185 (+165) il est de 3264 en 2014 (+24 par rapport agrave
2013) Le nombre drsquoeacutechantillons traiteacutes par le CNR est donc en augmentation
constante Parmi ces eacutechantillons 775 ont eacuteteacute identifieacutes comme eacutetant des
dermatophytes en 2012 1529 en 2013 et 1283 en 2014 Comme le montre la
figure 11 lrsquoanneacutee 2013 a vu une recrudescence des dermatophytes isoleacutes
puisqursquoils repreacutesentent 48 des preacutelegravevements en 2013 versus 284 en 2012 et
3937 en 2014 Ceci est en partie ducirc aux souches envoyeacutees par les diffeacuterents
laboratoires peacuteripheacuteriques pour lrsquoeacutetude nationale sur les dermatophytes
anthropophiles Le taux de levures isoleacutees est resteacute stable en 2014 puisque 156
des preacutelegravevements eacutetaient des levures Ce nombre eacutetait de 1506 en 2013 et 10
6 en 2012
30
52
18
0-3 ans
4-7 ans
8-10 ans
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
2012
2013
2014
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
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5000
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7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
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T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
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Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE LIEGE Service de Microbiologie Clinique-CNR mycoses
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Figure 11 Reacutepartition des espegraveces identifieacutees reccedilus en 2012 2013 et 2014 aux
CNR
En ce qui concerne les dermatophytes T rubrum reste le pathogegravene preacutedominant
tous preacutelegravevements confondus On observe une augmentation du nombre de T
rubrum isoleacutes en 2014 puisque cet isolat repreacutesente 6572 des dermatophytes
isoleacutes (532 en 2013 456 en 2012) Par contre une diminution progressive du
complexe T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee En 2014 ils repreacutesentent 1886 des
preacutelegravevements (196 en 2013 311 en 2012) Le nombre de M audouinii isoleacutes
en 2013 avait augmenteacute agrave la suite de lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee deacutebut 2013
concernant les teignes anthropophiles agrave M audouinii et T violaceum ils
repreacutesentaient en 2013 119 des preacutelegravevements Ce nombre est revu agrave la baisse en
2014 puisqursquoils repreacutesentent seulement 335 des preacutelegravevements Par contre les
infections agrave M canis suivent un accroissement lent mais constant (116 en
2012 307 en 2013 et 496 en 2014) Lrsquoanneacutee 2013 a vu lrsquoeacutemergence de
nouvelles espegraveces isoleacutees telles que T verrucosum T terreste complex T
schoenleinii et M gypseum En 2014 ces espegraveces sont toujours preacutesentes agrave
lrsquoexception de T schoenlenii et T terrestre complex On observe par contre
lrsquoapparation de M ferrugineum rarement rapporteacute sur le territoire belge ces
derniegraveres anneacutees (Voir figure 12 et Tableau 1 pour les deacutetails)
000
1000
2000
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Levures (Candida + autres )
Dermatophytes Autres filamenteux
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
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T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
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Trubrum
T mentagrophytes complex
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21
Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
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35
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2012
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE LIEGE Service de Microbiologie Clinique-CNR mycoses
23
ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Figure 12 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes isoleacutees en 2012 2013 et
2014 par les CNR
Espegravece 2012 () 2013() 2014()
Trubrum 351(4560) 812(5320) 843(6578)
T mentagrophytes complex 241(3115) 300(1964) 242(1886)
Maudouinii 77(994) 183(1197) 43(335)
Tviolaceum 27(356) 66(432) 19(148)
M canis 9(116) 47(307) 64(49)
T soudanense 5(064) 41(268) 20(155)
Ttonsurans 17(220) 40(261) 38(296)
M praecox 38(490) 20(131) 1(007)
Efloccosum 7(090) 6(039) 1(007)
T schoenleinii 0 5(033) 0
Trichophyton sp 2(025) 4(026) 1(007)
M gypseum 0 2(013) 3(021)
M persicolor 1(007) 1(006) 3(021)
T terrestre complex 0 1(006) 0
T verrucosum 0 1(006) 2(014)
M ferrugineum 0 0 2(014)
TOTAL 775 1529 1283
Tableau 1 Comparaison des pourcentages des diffeacuterentes espegraveces de
dermatophytes observeacutees en 2012 2013 et 2014 par les CNR
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
2012
2013
2014
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
0
10
20
30
40
50
60
T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
2012
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0
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20
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2012 2013 2014
Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
0
5
10
15
20
25
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35
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2012
2013
2014
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Pour les isolats issus de cheveux on peut observer que les espegraveces M canis et T
tonsurans semblent augmenter leacutegegraverement alors que la tendance est agrave la baisse
pour M audouinii qui reste tout de mecircme lrsquoagent eacutetiologique preacutedominant pour
ce type drsquoinfections (voir figure 13)
Figure 13 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de cheveux pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
En ce qui concerne les preacutelegravevements drsquoongles on observe au cours des anneacutees une
augmentation constante de T rubrum alors que les infections agrave T mentagrophytes sont
en baisse depuis 2012 (Voir figure 14)
Figure 14 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements drsquoongles pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
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T soudanense Tviolaceum M canis Ttonsurans Maudouinii
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Trubrum
T mentagrophytes complex
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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Pour les preacutelegravevements de peau on observe eacutegalement une augmentation de T rubrum et
une diminution de T mentagrophytes complex M canis et T tonsurans sont en hausse
alors que M audouinii est en baisse (Voir Figure 15)
La baisse de M audouinii tant dans les preacutelegravevements de cheveux que dans les
preacutelegravevements de peau srsquoexplique en partie par lrsquoeacutetude eacutepideacutemiologique lanceacutee en
20122013 qui a geacuteneacutereacute lrsquoenvoi massif par les laboratoires exteacuterieurs de souches de M
audouinii et T violaceum
Figure 15 Reacutepartition des espegraveces de dermatophytes les plus freacutequemment isoleacutees
dans les preacutelegravevements de peau pour les anneacutees 2012 2013 et 2014
6 Enquecirctes eacutepideacutemiologiques
Durant lrsquoanneacutee 2012 le CNR Mycoses ayant noteacute un nombre particuliegraverement eacuteleveacute
drsquoinfections agrave M audouinii une eacutetude nationale avait eacuteteacute lanceacutee en 2013 pour le recueil
des souches de M audouinii et T violaceum et leur analyse geacutenotypique de faccedilon agrave
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE LIEGE Service de Microbiologie Clinique-CNR mycoses
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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24
3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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comprendre lrsquoorigine de cette croissance en Belgique Cette eacutetude avait pour finaliteacute de
deacuteterminer srsquoil existait des diffeacuterences geacutenotypiques entre des souches drsquoune mecircme
espegravece et si un lien pouvait ecirctre eacutetabli avec une eacuteventuelle localisation geacuteographique ou
une origine ethnique particuliegravere Toutes les souches de M audouinii et T violaceum
(n=139) reccedilues par le CNR dans le cadre de lrsquoeacutetude ont eacuteteacute analyseacutees geacutenotypiquement
gracircce au Diversilabreg (bioMeacuterieux) Les donneacutees eacutepideacutemiologiques neacutecessaires agrave
lrsquointerpreacutetation des reacutesultats ont eacutegalement recueillies au cours de cette eacutetude
Cependant il nous a eacuteteacute tregraves difficile drsquoobtenir ces donneacutees eacutepideacutemiologiques et de
nombreuses informations sont manquantes Cette eacutetude a fait lrsquoobjet drsquoun meacutemoire de
Master 2 en Santeacute publique soutenu en juin 2014 par le Dr Audace NKESHIMANA (7)
Sur le plan de lrsquoanalyse geacutenotypique une eacutetude pilote a eacuteteacute effectueacutee sur une partie des
souches de M audouinii et T violaceum 2012 et 2013 et les reacutesultats ont eacuteteacute preacutesenteacutes au
laquo 6th Trend in Medical Mycology raquo (TIMM) en octobre 2013 (8) Les reacutesultats finaux de
cette eacutetude seront preacutesenteacutes au 7th trend in Medical Mycology en octobre 2015 (9) et
sont en cours de publication
Le CNR Mycoses de Liegravege a eacutegalement collaboreacute agrave lrsquoeacutetude nationale TANSIR concernant
les candideacutemies Les reacutesultats de cette eacutetude ont eacuteteacute preacutesenteacutes agrave Copenhagen agrave lrsquoECCMID
2015 et seront publieacutes dans les mois prochains (10)
7 Travaux de recherche et collaborations
Le CNR a participeacute agrave une eacutetude visant le deacuteveloppement et la validation clinique drsquoun
test PCR en temps reacuteel pour la deacutetection de plusieurs espegraveces de dermatophytes
directement agrave partir drsquoeacutechantillons drsquoongles de peau et de cheveux Une eacutetude
preacuteliminaire de ce travail a eacuteteacute preacutesenteacutee agrave lrsquoECCMID 2014 (11) Une validation clinique
de ce test sur les ongles sera preacutesenteacutee au TIMM agrave Lisbonne en octobre 2015(12)
Un PhD est en cours et porte sur la caracteacuterisation biochimique et geacutenomique des
proteacuteases de M audouinii en co-tutelle avec lrsquoUniversiteacute de Tunis (Professeur Raies)
En 2014 des souchesatypique de T mentagrophytes a eacuteteacute isoleacutee agrave plusieurs reprises (8
souches) essentiellement chez les jeunes adultes (tranche drsquoacircge 20-40 ans la +
concerneacutee) Ces souches preacutesentent geacuteneacuteralement un aspect macroscopique
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
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ressemblant agrave M canis avec un pigment jaune marqueacute et des caracteacuteristiques
microscopiques variables rendant leur identification difficile Ces souches atypiques
proviendraient de cobayes infecteacutes La recrudescence de cette espegravece pouvant mecircme
ecirctre responsable de tinea capitis a eacutegalement eacuteteacute mis en eacutevidence en Allemagne(13) Le
seacutequenccedilage ITS de ces souches les identifie en tant que A benhamiae Une eacutetude
preacuteliminaire sur le Diversilab permet de mettre en eacutevidence que ces souches atypiques
forment un groupe distinct correspondant agrave la souche A benhamiae qui se distingue par
son empreinte geacuteneacutetique de T mentagrophytes var interdigitale
8 Conclusions
Les activiteacutes du CNR Mycoses ont permis de mettre en eacutevidence que le T rubrum reste
dans nos reacutegions le premier agent responsable de mycoses superficielles tous
preacutelegravevements confondus cet agent eacutetant le plus souvent associeacute aux onychomycoses Le
complexe T mentagrophytes est quant agrave lui freacutequemment responsable de mycoses
superficielles de la peau et de lrsquoongle mais sa preacutevalence diminue depuis 2012
Concernant les infections du cuir chevelu M audouinii apparait comme eacutetant le premier
responsable de ce type drsquoinfection ce qui eacutetait eacutegalement le cas en 2012 et 2013 Du fait
de lrsquoeacutetude nationale nous avons enregistreacute davantage de cas drsquoinfection en 2013 (183 M
audouinii en 2013 contre 77 en 2012 et 43 en 2014) Lrsquoapparition de souches atypique
de T mentagrophytes a eacuteteacute observeacutee en 2014 et une observation plus deacutetailleacutee de ces
souches sera reacutealiseacutee agrave lrsquoavenir notamment une caracteacuterisation geacutenotypique par le
Diversilab
Durant lrsquoanneacutee 2015 de nouvelles techniques de biologie moleacuteculaire seront
deacuteveloppeacutees afin de pouvoir identifier plus efficacement certaines espegraveces de
dermatophytes
9 Reacutefeacuterences
1_Pagano L Lumb J Future microbial 20116(9) 985-989 Update on fungal infections 2_Burzykowski T Molenberghs G Abeck D Haneke E Hay R Katsambas A Roseeuw D van de Kerkhof P van Aelst R Marynissen G High prevalence of foot diseases in Europe results of the Achilles Project- Mycoses 2003 46(11-12)496-505
CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE LIEGE Service de Microbiologie Clinique-CNR mycoses
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3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581
CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE LIEGE Service de Microbiologie Clinique-CNR mycoses
24
3 Gray RM Champagne C Waghorn D Ong E Grabczynska SA Morris J Management of a Trichophyton tonsurans outbreak in a day-care center Pediatr Dermatol 2015 32(1)91-96
4 Zink A Papanagiotou V Todorova A Seidl HP Niedermeier A Ring J Traidl-Hoffmann C Outbreak of Microsporum audouinii in Munich--the return of infectious fungi in Germany Mycoses 2014 57(12)765-770 5 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Arrese Estrada J Hayette M-P DNA fingerprinting using Diversilab system for genotyping characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum In Edited by National Center for M vol 56 2013 6 Kelly BP Superficial fungal infections Pediatr Rev 2012 Apr 33(4)e22-37 7 Nkeshimana A Epideacutemiologie des teignes anthropophiles Agents fongiques incrimineacutes facteurs de transmission gestion en milieu scolaire Meacutemoire de Master 2 en Santeacute publique (option eacutepideacutemiologie et eacuteconomie de la santeacute) Ulg 2014 8 Sacheli R Dimo L Graide H Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2013 ldquoDNA fingerprinting using DiversiLab system for genotypic characterization of Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum isolates in the Belgian population preliminary studyrdquo
9 Sacheli RDekkers CGeacuteron B Graide H Darfouf R Adjetey C Meex C Descy J Huynen P Melin P Andreacute J Arrese J Hayette MP Poster communication TIMM 2015 ldquo ldquoEpidemiological aspects and genotypic characterization of Tviolaceum strains collected during a Belgian National survey on anthropophilic tineardquo
10Trouveacute C Blot S Hayette M-P Patteet S Rodriguez-Villalobos H Symoens F Van Wijngaerten E Lagrou K Epidemiology and clinical reporting of candidaemia in Belgium a national prospective study (TANSIR trial) In Epideacutemiologie et aspects cliniques des candideacutemies en Belgique eacutetude prospective nationale (Etude TANSIR) Edited by Msd 2015 11 Dingemans G van den Bosch M Hayette MP Goethel S Rusu V Sacheli R Meis J Gajetaan G Simons G Development of a new commercial qPCR assay to detect and differentiate dermatophyte infections of the skin nails and hair ECCMID Barcelone Mai 2014
12 Hayette MP Graide H Adjetey C Arrese J Gaajetaan G Van tegelen D Kampermann T Simons G Dingemans G Validation of the Dermagenius nail plus multiplex assay a new commercial PCR assay developed for the detection and identification of dermatophyte and Candida in nails Poster communication TIMM 2015 Lisbon Portugal
13 Nenoff P Uhrlass S Kruger C Erhard M Hipler UC Seyfarth F Herrmann J Wetzig T Schroedl W Graser Y Trichophyton species of Arthroderma benhamiae - a new infectious agent in dermatology Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft = Journal of the German Society of Dermatology JDDG 2014 12(7)571-581