. Surveillance de la rougeole

Apport de la biologie

INSERM Roxane Brachet

Le virus de la rougeole

• Famille des Paramixoviridae, Genre Morbillivirus.

• ARN mono-brin, polarité négative• Monotypique (un sérotype), bien que des

changements antigéniques dans l’hémagglutinine et la nucléoprotéine aient été décrits, mais sans conséquences épidémiologiques

• Réservoir humain

Structure du virus

HémagglutinineProtéine de Fusion

Protéine de Matrice

PolymérasePhosphoprotéine

Nucléoprotéine

Aspects cliniques

• Site primaire d ’infection dans l ’épithélium naso-pharyngé, après une seconde virémie (à J+6) mène à l’infection d’autres organes

• Incubation de 10 à 12 jours prodrome de 2 à 4 jours (fièvre, coryza, toux, conjonctivite, Köplik) Éruption généralisée de 5 jours ; secrétion du virus dans le naso-pharynx durant cette période

Épidémiologie actuelle• Couverture vaccinale -augmentation

de l’âge à l’infection, et atténuation du tableau clinique.– Diagnostic clinique difficile, confusion

avec d’autres maladies éruptives…– Nécessité d’une surveillance basée sur

des outils biologiques précis.

Méthodes de diagnostic biologique

• Technique indirectes : détection d’anticorps spécifiques (sérologie, test salivaire)

• Technique directes : mise en évidence du virus (isolement sur culture cellulaire, RT-PCR) à partir de sang, salive, prélèvement de gorge, aspiration NP, urine

Immunodétection d’Ig salivaires

Immuno-détection d’Ig salivaires

• Bonne spécificité et sensibilité (>90%)

• Test non invasif, rapide

• La détection d’IgM rend compte d’une infection récente, et est possible pendant les 5 semaines suivant le début de l’éruption

• Ne permet pas de distinguer les souches virales

Isolement viral / RT-PCR

Amplification génique (PCR)

• Extraction de l’ARN possible à partir du prélèvement clinique (sans isolement préalable) ---> transcription en ADNc ---> PCR

• Les gènes d ’hémagglutinine, nucléoprotéine, matrice sont les plus souvent étudiés en épidémiologie moléculaire

Isolement viral / RT-PCR: intérêt

• Constitution de virothèques

• Possibilité d ’analyse phyllogénétique : détermination des souches circulant en France, de leur évolution temporelle, et de leur origine géographique….

• Étude des protéines par clonage et expression des gènes amplifiés ---> étude des variations antigéniques ?

Quelques résultats publiés

Méthode Origine del échantillon

% de positifs Auteur

Isolement viral Gorge 9, Nez 2, PBL 2

100 Koburne et al. 1990

Isolement viral Gorge 43, Urine 45 78 Whistler et al. 1997

Detection d’IgM Salive 236 Se 84% ; Sp 98% Brown et al. 1992

Detection d’IgM Salive/ Sérum 269 Se 91% ; Sp 95% Helfand et al. 1996

RT-PCR (M, N)Sans isolement

Gorge 16, Urine 5,Sang 5, Salive 2,Nez 2

80 Jin et al. 1996

Conclusion

• Intérêt épidémiologique des méthodes décrites, nécessaires à une surveillance plus fine de la maladie– Confirmer les vrais cas de rougeole– Évaluer la circulation du virus en population

(vaccinée ou non)– Déterminer l’origine des souches virales

• Mieux cerner l’épidémiologie et adapter les programmes d’élimination