Analyses quantitatives et temporelles dde la nosémose chez les … · 2012-03-27 · sont moin Le...
Transcript of Analyses quantitatives et temporelles dde la nosémose chez les … · 2012-03-27 · sont moin Le...
– J
Analyla nos Tanya CoUniversitSainte-A CollaboratPierre GiochercheuSuha Jab
Ce
La nosémNosema cd’abeilles sont moin
Le but de trouver le2008 au Cedes décheanalyses réalisées chaque rumontrent q
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Journée cham
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ateurs : ovennazo, Mr en apicultur
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1
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1. CAPA
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2. Bailey43(3):3
3. Fries, 103:S7
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A Statement o/capabees.co
y, L. (1955). Th379-389.
I. (2010). N73-S79.
pêtre en apicu
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Nosema ceran
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pean honey
a Disease of
bees (Apis m
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2
ee. Ann. Appl
Invertebr. P
3
l. Biol.
Pathol.
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e, car les spu rucher doit ervées dans toire.
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1
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1
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problème
Nosema sporesPhoto taken by Dr Huilan ChenMagnification 600x
2
Glandes mandibulaires-GlandesUtilisées pour faire du « bee bread » et la cireReine- sécrète des pheromonesPas observé
Glandes salivaries
Glandes hypopharyngiennes-Utilisées pour faire du gelée royaleN. ceranae
Glandes de venin-thoraciques- Utiliséspour faire du mielN. ceranae
Utilisés pour la défensePas observé
TGI- emplacement principal
• Nourriture
Miel Pollen
– Pollen, miel, eau
• Matériaux de ruche– Cire, fèces
• Débris au fond de la ruche?
Fèces
3
• Méthode traditionnelle- comptage des spores
• Mulitplex quantitative PCR (qPCR)– Distingue les deux espèces
• Les deux méthodes tuent des abeilles
I. Il y a des changements saisonniers des tauxd’infection des deux espèces de Nosema
II. Les glandes contiennent des spores de Nosema
III L déb i f d d l h i dIII. Les débris au fond de la ruche contiennent des spores de Nosema
4
• Déterminer les tendances saisonnières des d è d Ndeux espèces de Nosema
• Échantillonnage au Centre de recherche en sciences animalesÉchantillonnage au Centre de recherche en sciences animalesde Deschambault (CRSAD)
– Abeilles adultes
– Débris au fond de la ruche
• Échantillonnage entre mai 2008 et juillet 2010– 6 ruches/mois
Deschambault, Qc
– Infections naturelles
Adultes Débris
5
Avec l’ADN et laAvec l ADN et la fluoresence on peutquantifier combien de spores sont présentsdans un échantillon
1,00E+06
1,00E+08
ency
Hemacytometer Spore Count vsqPCR Spore Equivalency
qPCR Spore Equivalency
Hemacytometer Spore Count
1,00E+02
1,00E+04
Spor
e Co
unt/
qPCR
Spo
re E
quiv
al
Hemacytometer threshold
N. ceranae duplex qPCR thresholdN. apis duplex qPCR threshold
1,00E+00
qPCR est une méthode plus sensible
6
Nosema ceranae est plus répandueLes tendances saisonnières des deux espèces sont différentes
• Déterminer si les glandes et les débris ti t d d Ncontiennent des spores de Nosema
Hypopharyngeal Glands Salivary Glands Bottom Board Debris
Mandibular Glands Venom Sac & Glands
7
Hypopharyngienne Mandibulaire Intestins Debris
100mg/rucheSalivaire Venin
4 ruches8 mois/ruche
15 abeilles/ruche
4 ruches8 mois/ruche=32 Collections=2,400 dissections
8 mois/ruche=32 collections
Multiplex qPCRAnalyse de corrélationAnalyses saisonnières
• N. ceranae et N. apis ont été détectés danst l ti t l déb itous les tissus et le débris
N. ceranae N. apis Co-infections Total Infecté
Glandeshypopharyngiennes
11 1 15 27
Glandes mandibulaires 6 1 17 23
Glandes salivaires 7 0 17 24
Glandes venin 12 1 16 29
Intestins 11 2 19 32
Débris 13 4 13 30
8
• Déterminer si les taux d’infections dans les glandes et le débris sont corrélés avec les t d’i f ti d htaux d’infections des ruches
Glandes hypopharyngiennes Glandes salivaires Débris
Glandes mandibulaires Glandes venin
9
N. ceranae
N. apis
Taux d’infection dans les intestins
Data Log(x+1)
Taux d’infection dans les intestins
N. ceranae
es)
N. apises (p
ar a
beill
esou
glan
de
Eté Printemps
p
Spor
e
Printemps/étéAutomne
10
• N. ceranae et N. apis ne sont pas spécifiquestiau tissus
• Sources de transmission: nourriture, cire, une abeille qui se nourrit une autre
11
r =0.3403, p=0.1037, n=28
N. ceranae
ebri
s (S
pore
s/10
0mg)
N apisr =0.86970, p<0.0001, n=29
D N. apis
Intestins (spores/abeille)
mg)
N. ceranae
alen
ts (p
er b
ee o
r 10
0m
N. apis
Eté Printemps
Spor
e Eq
uiva
Printemps/étéDébrisIntestins
Automne
12
• Les débris au fond de la ruche peuvent êtreb i di t d t d’i f ti d lun bon indicateur des taux d’infection de la
ruche ou la présence des espèces de Nosema
• L’échantillonnage d’abeilles n’est pas nécessaire pour détecter la présence de Nnécessaire pour détecter la présence de N. ceranae et N. apis
• Les ruches devraient être nettoyésliè t di i l t t dregulièrement pour diminuer le contact des
abeilles avec les débris
• Utilisez des “screened bottom boards”