Marc VasseFaculté mixte de Médecine & Pharmacie
de RouenLaboratoire MERCI
(MicroEnvironnement et Renouvellement Cellulaire Intégré)EA 3829
(Pr JP VANNIER)
Rôle du récepteur de l'urokinase sur Rôle du récepteur de l'urokinase sur
la migration cellulaire et ses applicationsla migration cellulaire et ses applications
dans l'angiogénèse et l'athérome. dans l'angiogénèse et l'athérome.
LES MECANISMES NECESSAIRESLES MECANISMES NECESSAIRES
A LA MIGRATION CELLULAIRE A LA MIGRATION CELLULAIRE
Les phases d’initiation de l’angiogénèse:
1- Augmentation de la perméabilité vasculaire
et dépôt extravasculaire de fibrine
2- Dissociation de la structure du vaisseau
3- Dégradation de la membrane basale
4- Migration des cellules endothéliales
et invasion de la MEC
5- Prolifération des cellules endothéliales
6- Formation de la lumière capillaire
MIGRATION CELLULAIRE ET ANGIOGÉNÈSEMIGRATION CELLULAIRE ET ANGIOGÉNÈSE
LES SYSTEMES ENZYMATIQUEES RESPONSABLESLES SYSTEMES ENZYMATIQUEES RESPONSABLESDE LA DEGRADATION DE LA MECDE LA DEGRADATION DE LA MEC
• CLIVAGE DE PROTEINES DE LA MEC:
- FIBRONECTINE
- LAMININE
- THROMBOSPONDINE
- FACTEUR WILLEBRAND
• LIBERATION DE FACTEURS ANGIOGENIQUES
- VEGF
- bFGF (FGF-2)
- TGF- • ACTIVATION DES MMP
ROLES DE LA PLASMINE DANS LADEGRADATION DE LA MEC:
LA PLASMINELA PLASMINE
ENZYME CLE DU SYSTEME FIBRINOLYTIQUEENZYME CLE DU SYSTEME FIBRINOLYTIQUE
1939: description d’une activité fibrinolytique au niveau des vaisseaux en croissance,
par Clark et Clark
• L’inhibition de la plasmine par l’acide tranexamique ou l’acide -amino caproïque inhibe
l’angiogénèse • Les souris Plg -/- ont une angiogénèse réduite
(Cesarman-Maus et. Hajjar, BJH 2005; 129: 307)
LE RECEPTEUR DE L’UROKINASE (CD 87)LE RECEPTEUR DE L’UROKINASE (CD 87)
LOCALISATION DE L’u-PA SUR UN POLE DE LA CELLULELOCALISATION DE L’u-PA SUR UN POLE DE LA CELLULE
Glycoprotéine de 55 kDa, fortement glycosylée,
ancrée dans la membrane par un glycophosphatidyl inositol3 fonctions: - localisation de l’uPA sur la membrane cellulaire (AA 1-48; AA 136-143)
- fixation de la vitronectine
- clairance de l’uPA
STRUCTURE DU RECEPTEUR DE L’UROKINASESTRUCTURE DU RECEPTEUR DE L’UROKINASE
(Blasi & Carmeliet, 2002; 3: 932)
Activité
chimiotactique
Mobilité
L’EXPRESSION d’u-PAR et d’u-PA EST AUGMENTEE L’EXPRESSION d’u-PAR et d’u-PA EST AUGMENTEE
PAR PAR
LES FACTEURS ANGIOGENIQUESLES FACTEURS ANGIOGENIQUES
(Mandriota et coll. J Biol Chem, 1995; 270:9709)Tem IL-4 IL-10 OSM
u-PA
u-PAR
Actine
(Pepper et coll. J Cell Biol, 1993; 122:673)
LE BLOCAGE DE L’u-PAR PAR DES ANTICORPSLE BLOCAGE DE L’u-PAR PAR DES ANTICORPS
INHIBE LA FORMATION DE CAPILLAIRES INHIBE LA FORMATION DE CAPILLAIRES IN VITROIN VITRO
A B C
bFGF +MAb H-2
bFGFContrôle
(Kroon et coll., ATVB, 1999; 154: 1731)
u-PAR ET ADHESION CELLULAIREu-PAR ET ADHESION CELLULAIREEFFET DIRECTEFFET DIRECT
MULTIMERIQUE
u-PAR ET ADHESION CELLULAIREu-PAR ET ADHESION CELLULAIREEFFET INDIRECTEFFET INDIRECT
INTERACTIONS DU RECEPTEUR DE L’UROKINASEINTERACTIONS DU RECEPTEUR DE L’UROKINASEAVEC LE PAI: CLAIRANCE DE L’u-PA ET MIGRATIONAVEC LE PAI: CLAIRANCE DE L’u-PA ET MIGRATION
L’u-PAR EST REEXTERNALISE APRES DEGRADATIONL’u-PAR EST REEXTERNALISE APRES DEGRADATION
DU COMPLEXE u-PA/PAI-1 DU COMPLEXE u-PA/PAI-1
T = 0
T = 30’
T = 120’
T = 60’
T = 30’+ RAP
T = 120’
T = 0
(Incubation avec cycloheximide)
Rôle dans le détachement de la cellule
Les souris PAI-1 -/- ont une angiogénèse réduite en raison
d’une migration défectueuse des cellules endothéliales
(Bajou et coll, 1998; 4: 923)
u-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNAL u-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNAL (1)(1)
• L’u-PA OU SON EXTREMITE AMINO TERMINALE (ATF) INDUIT LA MIGRATION
CELLULAIRE ET LA PROLIFERATION DES CELLULES ENDOTHELIALES(Stahl et coll., Cancer Res, 1994; 54: 3066)
NECESSITE D’ADAPTATEURSNECESSITE D’ADAPTATEURS
u-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNALu-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNAL
ROLE DES INTEGRINESROLE DES INTEGRINES
u-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNALu-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNAL
AUTRES ADAPTATEURSAUTRES ADAPTATEURS
ACTIVATION LA VOIE DES JAK/STAT ACTIVATION LA VOIE DES JAK/STAT
DANS LES CELLULES ENDOTHELIALESDANS LES CELLULES ENDOTHELIALES
(Dumler et coll., ATVB, 1999; 19: 290)
• STAT-1: impliquée dans la prolifération
des cellules endothéliales
• L’activation est inhibée si les cellules sont traitées par PI-PLC rôle de l’u-PAR
• Co-précipitation de l’u-PAR avec Jak-1 et
Tyk2
• La liaison d’uPA ou d’ATF induit la
translocation de STAT-1 dans le noyau
u-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNALu-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNAL
ROLE DE LA CAVEOLINEROLE DE LA CAVEOLINE
LE BLOCAGE DE L’INTERACTION u-PA/u-PAR LE BLOCAGE DE L’INTERACTION u-PA/u-PAR
BLOQUE L’ANGIOGENESE BLOQUE L’ANGIOGENESE
• AA 136-143 de l’u-PA INTERAGISSENT AVEC L’ u-PAR
• L’OCTAPEPTIDE A6 (KPSSPPEE) INHIBE l’ANGIOGENESE TUMORALE
(Guo et coll, FASEB J, 2000; 14: 1400)
L’ATF COUPLE A L’ALBUMINE L’ATF COUPLE A L’ALBUMINE
BLOQUE L’ANGIOGENESE BLOQUE L’ANGIOGENESE
Une chimère ATF-Albumine
bloque la déformabilité des
cellules endothéliales
(Li et coll., FEBS Lett. 1996; 12;380)
UN ADENOVIRUS PRODUISANT DE UN ADENOVIRUS PRODUISANT DE
L’ATF BLOQUE L’ANGIOGENESE L’ATF BLOQUE L’ANGIOGENESE
(Li et coll., Gene Ther. 1998 ; 5: 1105-)
Control + AdmATF (J20)
Xénogreffe de MDA-MB-231 chez la souris Nude
AUGMENTATION D’EXPRESSION DU CD 87 EN FONCTION AUGMENTATION D’EXPRESSION DU CD 87 EN FONCTION
DU STADE DES LESIONS ATHEROMATEUSES DU STADE DES LESIONS ATHEROMATEUSES
MNA: artères normales
EL: lésions précoces
FP: Plaques fibreuses
CP: Plaques calcifiées
(Steins et coll, Blood Coag Fibrin., 2004)
(Besta et coll., Thromb Res., 2004; 114: 283)
LE RECEPTEUR DE L’UROKINASE LE RECEPTEUR DE L’UROKINASE
(CD87)(CD87)
ET L’ADHESION LEUCOCYTAIREET L’ADHESION LEUCOCYTAIRE
(Chavakis et coll., Bioch Soc Trans 1999)
• Les monocytes des souris uPAR -/- présentent un défaut de migration
Thoracic aorta 5 0.364 ± 0.071
0.254 ± 0.052*
0.317 ± 0.102**
n uPAR anti-MAC-1 Ig G2 non rel.
L’uPAR EST IMPLIQUE DANS L’INFILTRATION DE L’uPAR EST IMPLIQUE DANS L’INFILTRATION DE
LA PAROI VASCULAIRE CHEZ LES SOURIS APO E -/-LA PAROI VASCULAIRE CHEZ LES SOURIS APO E -/-
Le CD11b est impliqué dans l’infiltration des monocytes
(Gu et coll., J Cell Physiol, 2005; 204: 73)
L’u-PAR DES MONOCYTES EST AUGMENTE A LA L’u-PAR DES MONOCYTES EST AUGMENTE A LA
PHASE AIGUË DE L’INFARCTUS DU MYOCARDEPHASE AIGUË DE L’INFARCTUS DU MYOCARDE
(CSA : angor stable)
ADHESION SUR LES CELLULES ENDOTHELIALES(May et coll, Blood. 2002; 100: 3611)
0 10 50 100 200 10 50 100 200 µg/ml0 10 50 100 200 10 50 100 200 µg/ml
LES LIPOROTEINES ET LEURS FORMES OXYDEES LES LIPOROTEINES ET LEURS FORMES OXYDEES
AUGMENTENTAUGMENTENT
L’EXPRESSION D’u-PAR A LA SURFACE DES MONOCYTES L’EXPRESSION D’u-PAR A LA SURFACE DES MONOCYTES
** *
0 10 50 100 200 10 50 100 200 µg/ml
1,2
1,0
0,8
0,6
0
u-P
A (
IMF
)
LDL LDL ox
0 10 50 100 200 10 50 100 200 µg/ml
Lp(a) Lp(a) ox
1,2
1,0
0,8
0,6
0
****
*
**
2
1,8
1,6
1,4
1,2
1
0,8
0
u-P
AR
(IM
F)
LDL LDL ox Lp(a) Lp(a) ox
*
***
2
1,8
1,6
1,4
1,2
1
0,8
0
(Ganne et coll, Thromb Haemos, 1999)
0
50
100
150
200
CVS (50 nM)0
50
100
150
200
CVS (50 nM)
• Diminution d’u-PA et d’u-PAR induite par les lipoprotéines in vitro
Témoin
LDL
LDL ox
u-PA u-PAR(Ganne et coll, Thromb Haemos, 1999)
LES STATINES DIMINUENT L’EXPRESSION D’u-PAR, DE SON LES STATINES DIMINUENT L’EXPRESSION D’u-PAR, DE SON
PAR LES MONOCYTES PAR LES MONOCYTES IN VITRO IN VITRO ET ET IN VIVOIN VIVO
Tem AVK AVK
AIA TVP
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
% C
D 8
7
0 1 2 3 4
Graphe en boîtesVariable(s) groupe : 0TVP/1Temp = 0,003
p = 0,001
• Diminution d’u-PAR
à la surface des monocytes
de patients traités par
des statines
L’IL-10 DIMINUE L’EXPRESSION D’u-PAR PAR LES L’IL-10 DIMINUE L’EXPRESSION D’u-PAR PAR LES
MONOCYTES MONOCYTES
ET LEUR ADHESION SUR LE FBG OU LA VN ET LEUR ADHESION SUR LE FBG OU LA VN
(Paysant et coll., Br J Heamatol 1998; 100:45)
CONCLUSIONCONCLUSION
• LE RECEPTEUR DE L’UROKINASE JOUE UN ROLE DYNAMIQUE
IMPORTANT DANS LES PHENOMENES D’ADHESION ET DE
MIGRATION CELLULAIRE
• IL CONSTITUE UN DES ELEMENTS PERMETTANT LA DEGRADATION
DES PROTEINES DE LA MATRICE EXTRACELLULAIRE, MAIS VOIT SON
ACTIVITE MODULEE PAR LES COMPOSANTS DE LA MATRICE
• LES MECANISMES DE TRANSDUCTION DU SIGNAL RESTENT A
ELUCIDER
• LA MODULATION PHARMACOLOGIQUE DE L’u-PAR PEUT CONSTITUER
DE NOUVELLES CIBLES PHARMACOLOGIQUES
REMERCIEMENTSREMERCIEMENTS
• Pr JP VANNIERPr JP VANNIER
• Pr C. SORIAPr C. SORIA
• C. CORBIERE, MCUC. CORBIERE, MCU
• B. LENORMANDB. LENORMAND
• E. LEGRANDE. LEGRAND
• D. BIGOTD. BIGOT
• S. LECLEIRES. LECLEIRE
• J. PAYSANTJ. PAYSANT
• F. GANNEF. GANNE
Bienvenue à I. DUBUSBienvenue à I. DUBUS
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