Université Mohamed khider Biskrafaculté des science exactes et snv

département de science de la nature de la vie1ére année master BBM

2011/2012

Les moyens d’étude de la croissance microbienne

PLANT DE TRAVAILINTRODUCTION

I-LA CROISSANCE MICROBIENNE

II- LES MOYENS D’ETUDE DE LA CROISSANCEII-1 LES METHODES DIRECTES

II-1 MESURE DE NOMBRE DE CELLULES

  1-Comptage total 

  2-Comptage des cellules viables cultivables

 II-2/LES METHODES INDIRECTS

a-Mesure de la biomasse

1/ mesure de poids sec

2/ mesure de trouble

b-Mesure de l’activité cellulaire

III/ LA CINITIQUE DE LA CROISSANCE MICROBIENNE 1/Expression graphique

2/Expression mathématique

3/Rendement  

INTRODUCTION

La croissance est un phénomène de grande intérêt

biologique , dont l’importance écologique et pratique

est considérable .

  C'est Jacques MONOD, lauréat en 1965 du Prix Nobel de

médecine (avec André LWOFF et François JACOB) qui le

premier a étudié la croissance .

Dont notre exposé, on propose un problématique ; est

ce que les techniques d’étude de la croissance sont

nombreuses et montre qu'aucune n'est parfaite ?

 

 

I- LA CROISSANCE MICROBIENNE

DEFINITION :Accroissement ordonné de tous les composants d’un organismeAu niveau cellulaire, la conséquence est la division de la celluleOn observe donc chez les organismes Pluricellulaires : une augmentation de la taille de l’individu Unicellulaire : une augmentation de la populationChez les micro-organismes, croissance est synonyme de multiplication

FACTEURS ESSENTIELS À LA CROISSANCE

Se divisent en deux catégories:Physiques - eau - température - pH - pression osmotique -lumière Chimiques: - carbone, azote, soufre et phosphore - oligo-éléments - oxygène

FACTEURS ORGANIQUES DE CROISSANCE

Composés organiques dont un microorganisme a besoin mais qu’il ne peut synthétiser lui-même. Ex : vitamines (coenzymes) acides aminésLes purines et les pyrimidines à cèle des acides nucléique

II- LES MOYENS D’ETUDE DE LA CROISSANCE MICROBIENNE

II-1 Les méthodes directes II-1-1Mesure de nombre des cellules

1-Comptage total  A- Lecture au microscope Cellule de numération hématimétrie (Cellule de Thoma, Cellule de Malassez Cellule de Pétroff- Hauser)

B-Compteur de particules

*Fluidique

- Cellules en suspension

-Flux sur une file à travers

*Optique

- Un volume illuminé où elles

- Diffusent la lumière et fluorescent

*Electronique

-Signaux collectés, filtrés et Convertis en valeurs numériques

-Stockées dans un ordinateur

COULTER

C- EPIFLUORESSENCE

Les cellules microbiennes sont

colorées par un fluorochrome de type

Acridine orangé.

-Cellules vivantes qui sont

fluorescentes dans le vert(ADN

double brin).

-Cellules mortes dont la fluorescence rouge résulte de la combinaison du fluorochrome avec l'ADN dénaturé.

2-COMPTAGE DES CELLULES VIABLES CULTIVABLES

Dénombrement après culture

II-2/LES METHODES INDIRECTS A-MESURE DE LA BIOMASSE 1/ MESURE DE POIDS SEC

Microorganisme récolté par centrifugation ou par filtration sur membrane

Lavage soigneux à l’aide d’un tampon approprié

Culot desséché à 10°C-110°C

Poids sec (gr de matière sèche par litre )

2/ MESURE DE TROUBLE

l’absorption de la lumière traversant une suspension microbienne obéit à la loi de Beer Lambert :

A= log (I°) I

B-MESURE DE L’ACTIVITÉ CELLULAIRE

On peut mesure soit :

1- La consommation de substrat

2- Mesure des produits d’excrétion 

3-Mesure des variations physico-

chimiques du milieu

III/ LA CINITIQUE DE LA CROISSANCE MICROBIENNE

III-1 Expression mathématique

peut être définie par deux constantes :

Temps de génération :

C’est l’intervalle de temps entre deux

divisions successives ou celui nécessaire au et

doublement de la population.: 1---2 ---- 4----8,

etc G = t/n

Taux de croissance : le nombre de divisions par unité de temps:

µ = 1/G = n/t.

.

Une population avec la formule

suivante :

N = N0 x 2 t /G

N nombre de bactéries

N0 nombre de bactéries au départ

t temps de culture

G temps de génération

2/Expression graphique :

Courbe de croissance

Différentes phases

1-Latence µ = 0

2-Accélération µ augmente, N augmente, et G

diminue

3-Phase exponentielle µ = µmax = cste ,G constant et

minimal, N augmente

4-Ralentissement µ diminue ,N augmente, et G

augmente.

5-Stationnement µ = 0, N est constante et maximale

6-Déclin mortalité μ est négatif , N diminue,.

Figure : Courbe de croissance .

3/RENDEMENT

R= la masse cellulaire formée

la masse d’aliments

consommés

CONCLUSION

On fin de notre petite recherche , on concluent qu’il existe

différentes méthodes de mesure de la croissance microbienne.

On utilise des méthodes directes et indirectes de

quantification des bactéries ou des levures : en fonction du

temps, on suit l’évolution du nombre de micro-organisme par

unité de volume du milieu.

Les conditions expérimentales de mesure de la croissance

nécessitent:

Une population homogène.

Des paramètres physico-chimiques optimum..

Une certaines quantité de nutriments.

MERCI POUR VOTRE

ATTENTION