MATRICEEXTRA-CELLULAIRE

MEMBRANECELLULAIRE

CYTOPLASMEAU NIVEAU D’UNEPLAQUED’ADHESION

LA PLAQUE D’ADHESION

Paxilline

D’après Alan Horwitz, « L’adhérence des cellules » Dossier Hors série Pour la Science, 1998

Le cycle des plaques adhésion

dans la cellule en migration

D’après D.A. Lauffenberger and Alan Horwitz, Cell, 1996.

51 v3

D’aprés Eli Zamir and coll., Nature and Cell Biology, Vol 2, 2000: 191-197

Dynamique et ségrégation des adhésions cellule–matrice

chez des fibroblastes en culture

La mobilité des cellules dépend des interactions cellules/matrice

D’après Elisabeth A. Cox, David Bennin, Ashley T. Doan, Timothy O’Toole and Anna Huttenlocher, Molecular Biology of

the Cell, Vol. 14, 658–669, February 2003.

DYNAMIQUE DE L’ACTINE

D’après D.A. Lauffenberger and Alan Horwitz, Cell, 1996.

D’après Thomas D. Pollard1, and Gary G. Borisy, Cell, Vol. 112, 453–465, February 21, 2003.

La polymerisation de l’actine fait naitre la lamellipode

DYNAMIQUE DES PLAQUES D’ADHESION

Keratocyte sur silicone

Visualiser les forces

Les forces dépendent de protéines kinases

Staurosporine inhibe les kinases

Le LPA active les kinases

Y27632 inhibe la ROCK1Qui phosphoryle la Myosin II

Les differents complexes Integrine/substrat repondent a la contractilite du systeme

ACTO-MYOSINE

Segregation des integrines Consolidation des plaques d’adhesion

D’après Eli Zamir and coll., Nature and Cell Biology, Vol 2, 2000: 191-197

D’après Kevin Burton et al., Molecular Biology of the Cell, Vol. 10, 3745–3769,

November 1999.

Alpha 5 GFP

Protéine de fusion alpha5-GFP

N-term C-term

Visualiser les plaques d’Adhesion

UV

Fluorescence verte

Les plaques d’adhésion sont sensibles à la tension:

Y27632(=Inhibiteur de la RhoKinase, kinase qui active la myosine II)

détruit transitoirement les plaques d’adhésion

D’après Christoph Ballestrem, et al., The Journal of Cell Biology, Volume 155, Number 7, December 24, 2001 1319–

1332

Localisation de la Paxilline chez

Dictyostelium discoideum

D’après Tanya Bukahrova, et al., Journal of Cell Science 118, 4295-4310.

« Paxillin is required for cell-substrate adhesion, cell sorting and slug migration during Dictyostelium Development »

RELATION ENTRE PLAQUES D’ADHESION ET MICROTUBULES

D’après Irina Kaverina, Olga Krylyshkina, and J. Victor Small,

J. Cell Biol. 1999 Vol. 146 No. 5 p.1033.

« Microtubule Targeting of Substrate Contacts Promotes Their Relaxation

and Dissociation »

LES MICROTUBULES ET LES PLAQUES D’ADHESION

D’après Irina Kaverina et al.

J. Cell Biol. 1999 Vol. 146 No. 5 p.1033.

D’après Snezhana Oliferenko, Irina Kaverina, J. Victor Small, and Lukas A. Huber,

J. Cell Biol. 2000 Vol. 148 No. 6 p.1159. “Hyaluronic Acid (HA) Binding to CD44 Activates Rac1 and Induces

Lamellipodia Outgrowth”.

L’ Acide Hyaluronique (HA) induit la formation de lamellipodesVia la petite proteine G Rac

Migration des cônes de croissances:Images en lumière polarisée (Pol-scope)

D’après Kaoru Katoh, Katherine Hammar, Peter J. S. Smith, and Rudolf Oldenbourg,

Molecular Biology of the Cell, Vol. 10, 197–210, January 1999.

« Birefringence Imaging Directly Reveals Architectural Dynamics of Filamentous Actin in Living Growth Cones»

Migration des cellules in vivo

1) Explants de tissu embryonnaire, lampe tres puissante pour echantillon epais.2) Cellules sensees migrer microinjectees avec GFP (DiI.mov) ou Rac N17-GFP (Ginsberg)

Cellules Rac sauvages: Tres longues lamellipodes, cellules sautent:

vitesse de migration non lineaire, contraintes d’adhesion differentes.

Cellules Rac N17 cellules font toujours des lamellipodes mais bougent moins vite.

Migration cellulaire lors de la formation du pseudo-

champignon chez D. discoideum

Souche exprimant 2% de cellules PaxB-null (KO pour PaxB marquées à la GFP= vertes) et 2% de cellules PaxB wt exprimant la RFP= rouges

(filmdictyo_movie6)

D’après Tanya Bukahrova, et al., Journal of Cell Science 118, 4295-4310.

« Paxillin is required for cell-substrate adhesion, cell sorting and slug migration during Dictyostelium Development »