Diagnostic immunologique deshépatites auto-immunes.

11stst AlgerianAlgerian LiverLiver Day de la SAHGEEDDay de la SAHGEED09 Mai 201509 Mai 2015

Pr SALAH S.S.Pr SALAH S.S.,, HAMDI A., ADMAN S, ATTAL N.MCAMCA -- Chef deChef de LaboratoireLaboratoire d’Autod’Auto--ImmunitéImmunité

DépartementDépartement d’Immunologied’Immunologie -- InstitutInstitut PasteurPasteur d’Algéried’AlgérieFaculté de Médecine d’AlgerFaculté de Médecine d’Alger -- Université d’Alger 1Université d’Alger 1

MAI du foie : affections où les lésions des organes cibles résultent dudéclenchement d’une RI dirigée contre des auto-antigènes :

- hepatocytes (HAI 1 et 2)- et les voies biliaires intra et extra hépatique (CBP et CSP).

La mise en évidence d’Auto-anticorps spécifiques peut aider au DIAGNOSTIC. Les AAc peuvent également s'observer :

aAc associés

Prédominance féminine.

HAI -1 (tout âge), HAI-2 ( enfant, adulte jeune).

Hépatopathies auto-immunes types I et II

Critères de diagnostique des HAI

Aspect histologique

Aspect biologique

Score ≥ 6:probableAIH; ≥7:definite

AIH.

AAN LKM-1

IFI sur coupes RFE de rat : Technique indispensable de 1ère INTENTION.Fluorescenceintense destubulesproximaux

Techniques de détection (sceening)MF*MF*

Titres varientavec stades de

la maladie

Sen 70%

Peu Spé

ML(Actine)

LC-1

HAI-1 HAI-2Fluorescence H.Hépatocytes autour desveines centro-lobulaires (-)

Fluorescencedes muscleslisses (F-Actine)

Sen 85%

Spé 80%

Titres varientavec stades de

la maladieSen 85%

Spé 100%

POSITIF> 1/80

MF*MF*Aspects d’IFI sur HEp-2 des auto-anticorps retrouvés lors des HAI.

Techniques de détection (sceening)

HomogèneHomogène MouchetéMoucheté MLML

Sen 35% Sen 35%

Auto-anticorps Cible antigénique Tech. dépistage Tech.d’identification

Sensibilité et affectionsassociées

Anti- ML(ASMA)

F-actine IFIdiluer a 1/40

IMMUNODOTELISA

IFI VSM 47

85% HAI-115% HAI-CBP

Anti-SLA/LP t-RNP(ser)sec. Non détectableen IFI

ELISAIMMUNODOT

15%-30% HAI-1HAI-CBP

AANNEGATIVESPOSITIVES :

(si MAI associées)

IFIDiluer 1/80

ELISAIFF

IMMUNODOT

70%HAI-1

Auto-anticorps et HAI

AANNEGATIVESPOSITIVES :

(si MAI associées)

IFIDiluer 1/80

ELISAIFF

IMMUNODOT

70%HAI-1

Anti-LKM1P4502D6/CYP2D6 enzyme

de détoxificationIFI

diluer a 1/40IMMUNODOT

ELISAIFF

85 %HAI-2

Anti-LC1(Associé LKM1)

L’enzyme du métabolismede l’histidine la (FTDC)

IFIDiluer 1/40

IMMUNODOTELISA

30-40%HAI-2

Anti-ASGP-R

Glucides au sein d’épitopesconformationnels sur la

structure hétéro-oligomérique du R.

IFISouvent associés

aux autresauto-anticorps

ELISA 50-90%HAI-1 ou HAI-2

ou CSP, …

≥ 1/40

Ac anti-mitochondries (AMA) de type M2(95% des cas)

Cirrhose Biliaire Primitive (CBP)

FOIEREIN

Fluorescenceintense destubulesdistaux

IFIIFI sursur coupes RFE de rat :coupes RFE de rat : Technique indispensable de 1Technique indispensable de 1èreère INTENTIONINTENTION..

Techniques de détection (sceening)MF*MF*

Sen 80-95%

Spé > 95%

Pas de valeurPc

ESTOMAC

Fluorescenceintense destubulesdistaux

Fluorescenceintense descellulespariétales

Fluorescenceintense destubulesdistaux

Pas de valeurPc

Techniques de détection (sceening)MF*MF*

Aspects d’IFI sur HEp-2 des anti-Mitochondries.

Aspect cytoplasmique de type GRANULAIRE

Anticorps anti-gp210Anticorps anti-gp210

Glycoprotéine des pores nucléaires

Sen 10-25%

Spé > 99%

Marqueur demauvais Pc

Aspect cerclés des noyaux x 400Aspect cerclés des noyaux x 400 Aspect type pores nucléairesAspect type pores nucléaires

Aspect de fluorescence du noyau de type MEMBRANAIRE

Marqueur demauvais Pc

Ac anti-Sp100Ac anti-Sp100

Structure : protéinesoluble acide de 53 kDa

Sen 10-30%

Spé > 99%Marqueur demauvais Pc

Sen 10-30%

Spé > 99%

Ac anti-PMLAc anti-PML

Speckeled protein (100KDa)

Single nuclear dots (2-5)Single nuclear dots (2-5) Multiple nuclear dots (6-12)Multiple nuclear dots (6-12)

Aspect de fluorescence du noyau de type GRANULAIRE

4% HAI, 1%HCV4% HAI, 1%HCV

Détection des auto-anticorps(Techniques d’IDENTIFICATION-CONFIRMATION)

Spé > 95% Spé 98-100%

Marqueurmauvais Pc

Spé > 99%

Détection des auto-anticorps(Techniques d’IDENTIFICATION-CONFIRMATION)

Sous unités E2 du : -complexe Pyruvate déshydrogénase (PDC-E2)-complexe à chaine ramifiée 2-oxo déshydrogénase acide (BCOADC-E2)-complexe 2-oxo glutarate déshydrogénase (OGDC-E2)

Sen +++

Bassendine et al, Sem Liv Dis, 1997

Il s’agit d’une technique en test unitaire.

La durée du test est rapide (1H30).

Elle permet d’identifier la cible antigénique de l’auto-Ac (IFI + ou IFI -).

C’est une technique complémentaire a l’IFI.

Identification des auto-anticorps (Immuno-DOT)

HAI-2 CBPHAI-1

Techniques de détection (sceening)

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