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67 Bull. Soc. Pharm. Bordeaux, 2012, 151(1-4), 67-84 COMPORTEMENT IN VITRO ET POUVOIR PATHOGÈNE DE TROIS ESPÈCES FONGIQUES RESPONSABLES DE LA POURRITURE DU MELON EN POST-RÉCOLTE (*) Fakhreddine ZEMMOURI (1) , Karima SELMAOUI (1) , Mohamed EL MAHDRI (1) , Rachid BENKIRANE (1) , Amina OUAZZANI TOUHAMI (1) , Alain BADOC (2) , Allal DOUIRA (1) Le comportement de quatre isolats d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum isolés de melons pourris en post-récolte a été étudié sur différents milieux de culture. La croissance diamétrale et la production de conidies sont importantes sur le milieu PDA, les milieux à base de chair et d’épicarpe de Melons Galia et Cantaloup et le milieu synthétique Czapeck. Les pH allant de 4 à 8 et les températures de 22, 25 et 30°C sont favorables à la croissance mycélienne et la production de conidies. L’optimum de germination des conidies est obtenu à 25°C. La pathogénicité des isolats a été étudiée sur les fruits et les pédoncules des Melons Galia et Cantaloup. L’isolat Aa4 d’Alternaria alternata donne des pourritures de 25 mm de profondeur sur Cantaloup. Les pourritures provoquées par les isolats Fo2 et Fo1 de F. oxysporum sur les zones équatoriales du (*) Manuscrit reçu le 18 juillet 2012. (1) Laboratoire de Botanique et de Protection des Plantes, UFR de Mycologie, Faculté des Sciences, BP 133, Université Ibn Tofaïl, 14000 Kénitra, Maroc. [email protected], [email protected], [email protected], [email protected], [email protected], [email protected] (2) GESVAB – EA 3675, UFR des Sciences pharmaceutiques, Université de Bordeaux, ISVV, 210, Chemin de Leysotte, CS 50008, 33882 Villenave-d’Ornon. [email protected]

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Bull. Soc. Pharm. Bordeaux, 2012, 151(1-4), 67-84

COMPORTEMENT IN VITRO ET POUVOIR PATHOGÈNE DE TROIS ESPÈCES FONGIQUES

RESPONSABLES DE LA POURRITURE DU MELON EN POST-RÉCOLTE (*)

Fakhreddine ZEMMOURI ( 1 ) , Karima SELMAOUI ( 1 ) , Mohamed EL MAHDRI ( 1 ) , Rachid BENKIRANE ( 1 ) ,

Amina OUAZZANI TOUHAMI ( 1 ) , Alain BADOC ( 2 ) , Allal DOUIRA ( 1 )

Le comportement de quatre isolats d’Alternaria alternata,

deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum isolés de melons pourris en post-récolte a été étudié sur différents milieux de culture. La croissance diamétrale et la production de conidies sont importantes sur le milieu PDA, les milieux à base de chair et d’épicarpe de Melons Galia et Cantaloup et le milieu synthétique Czapeck. Les pH allant de 4 à 8 et les températures de 22, 25 et 30°C sont favorables à la croissance mycélienne et la production de conidies. L’optimum de germination des conidies est obtenu à 25°C.

La pathogénicité des isolats a été étudiée sur les fruits et les pédoncules des Melons Galia et Cantaloup. L’isolat Aa4 d’Alternaria alternata donne des pourritures de 25 mm de profondeur sur Cantaloup. Les pourritures provoquées par les isolats Fo2 et Fo1 de F. oxysporum sur les zones équatoriales du

(*) Manuscrit reçu le 18 juillet 2012. (1) Laboratoire de Botanique et de Protection des Plantes, UFR de Mycologie,

Faculté des Sciences, BP 133, Université Ibn Tofaïl, 14000 Kénitra, Maroc. [email protected], [email protected], [email protected], [email protected], [email protected], [email protected]

(2) GESVAB – EA 3675, UFR des Sciences pharmaceutiques, Université de Bordeaux, ISVV, 210, Chemin de Leysotte, CS 50008, 33882 Villenave-d’Ornon. [email protected]

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Cantaloup atteignent 23 et 22 mm. Trichothecium roseum provoque des pourritures superficielles importantes sur Cantaloup avec des diamètres moyens de 40 mm sur la zone équatoriale du fruit et 32 mm sur le pédoncule.

INTRODUCTION

Le Melon est une culture importante de plein champ ou de serre. Il en existe un grand nombre de cultivars et la Chine est le principal producteur. En Europe, la France arrive en troisième position après l'Espagne et l'Italie, mais n’est pas autosuffisante. Elle importe des melons d’Espagne, du Maroc, d’Israël. De plus en plus de melons proviennent du Maroc, douzième exportateur mondial [4]. Les principaux pathogènes sont des espèces fongiques qui détériorent les fruits pendant le stockage [12], entrainant une perte de productivité [19].

Plusieurs champignons sont impliqués dans la pourriture des melons [1,17]. Les plus répandus au cours de l’entreposage sont Alternaria alternata, divers Fusarium et Trichothecium roseum responsables d’une alternariose, d’une fusariose et de la pourriture rose [2].

La mise en place de stratégies de lutte contre ces maladies implique une bonne connaissance de leurs besoins nutritionnels et de leur comportement in vitro et in vivo.

Dans ce travail, sept isolats correspondant à trois espèces fongiques ont été étudiés in vitro et leur pathogénicité a été testée sur deux variétés de Melon en post-récolte.

MATÉRIEL ET MÉTHODES

Espèces fongiques

Les isolats ont été isolés de melons cultivés sous serre dans la région d’Agadir, au Maroc : A1, A2, A3 et A4 d’Alternaria alternata de melons Cantaloup et F1 et F2 de Fusarium oxysporum et Tr de Trichothecium roseum de melons Galia.

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Le milieu PSA [Potato Sucrose Agar] (200 g pomme de terre, 15 g d’agar, 20 g saccharose et 1000 ml d’eau distillée) additionné de 0,5 g/l de chloramphénicol pour éliminer les bactéries a été utilisé pour l’isolement des champignons responsables des pourritures. Après stérilisation par autoclavage 30 min à 120°C, le milieu a été refroidi jusqu’à 45°C et coulé en boites de Petri à raison de 20 ml par boite.

Les melons pourris ont été désinfectées par l’hypochlorite de sodium à 5 % pour éliminer les saprophytes entourant les pourritures et les fragments présentant de la pourriture ont été ensuite découpés avec un scalpel stérile et déposés sous hotte à flux stérile sur le milieu de culture PSA solidifié. Les boites ont été incubées à 25°C à l’obscurité Les champignons développés ont été réensemencés dans des nouvelles boites de PSA jusqu’à obtenir des cultures pures.

Croissance mycélienne Des disques mycéliens de 5 mm de diamètre ont été prélevés à la

marge de cultures jeunes âgées de sept jours à l’aide d’un emporte-pièce et placés au centre de boites de Petri de 90 mm de diamètre contenant 15 ml de milieu de culture.

Pour chaque isolat et chaque condition testée, trois boites de Petri ont été utilisées.

La croissance mycélienne a été estimée en mesurant le diamètre perpendiculaire moyen des colonies de chaque culture ((diamètre maximal + diamètre minimal) / 2, les colonies étant de forme ellipsoïdale) après incubation à l’obscurité douze jours pour Alternaria alternata, dix pour Trichothecium roseum et sept pour Fusarium oxysporum.

Effet du milieu de culture Deux types de milieux de culture ont été testés à 25°C sur la

croissance mycélienne et la production des spores des champignons : Milieux organiques : PDA (40 g Potato Dextrose Agar, 5 g agar,

1000 ml eau distillée), Extrait de Malt (20 g extrait de malt, 15 g agar, 1000 ml eau distillée). Différents milieux de culture ont été préparés à base de chair et de croute (épicarpe) de melons Galia ou Cantaloup : GC (200 g chair Galia, 15 g saccharose, 15 g agar, 1000 ml eau distillée), GCr (200 g croute Galia, 20 g saccharose, 15 g agar, 1000 ml eau distillée), CC (200 g chair Cantaloup, 15 g saccharose, 15 g agar, 1000 ml eau distillée) et CCr (200 g croute Cantaloup, 20 g saccharose, 15 g agar, 1000 ml eau distillée).

Milieux synthétiques : Czapeck (2 g NaNO3, 1 g K2HPO4, 0,5 g MgSO4, 7 H2O, 0,05 g KCl, 0,01 g FeSO4, 7 H2O, 30 g saccharose, 15 g

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agar, 1000 ml eau distillée) et Richard (10 g KNO3, 0,5 g K2HPO4, 2,5 g MgSO4, 7 H2O, 15 g saccharose, 20 g agar, 1000 ml eau distillée). Effet de la température

La température a été testée sur le milieu PDA à 5, 15, 22, 25, 30 et 35°C. Effet du pH

Le milieu PDA a été retenu pour déterminer l’effet du pH sur la croissance mycélienne. Il a été ajusté avec NaOH 1 N et HCl 12 N à pH 4, 6, 7, 8 et 10 avant autoclavage.

Production de conidies Les boites de Petri ayant servi à l’étude de l’effet du milieu de

culture, de la température et du pH sur la croissance mycélienne ont été utilisées pour évaluer la production de conidies. Trois prélèvements par boite de quatre rondelles de 5 mm de diamètre ont été réalisés à la zone marginale des cultures âgées de 12 jours. Les rondelles ont été placées par quatre dans un tube à essai contenant 1 ml d’eau distillée stérile et agitées au vortex quelques secondes pour libérer les conidies des conidiophores. Trois comptages ont été effectués à l’aide d’une cellule de Malassez. Comme on a 3 boites de Petri pour chaque isolat et chaque condition, le nombre moyen de conidies par unité de surface (105 conidies/mm2) est établi à partir de 9 mesures.

Germination des conidies L’effet de la température sur la germination des conidies a été étudié

en remplissant des boites de Petri stériles avec de l’eau distillée stérile et en plaçant, au milieu des boites, des verres de montre contenant 0,2 ml d’une suspension conidiale de 103 conidies/ml provenant des cultures jeunes des champignons étudiés. Les boites de Petri ont été ensuite placées à 5, 15, 22, 25, 30 et 35°C à l’obscurité. Le comptage a été réalisé sur les 0,2 ml soit approximativement 200 conidies. L’essai a été répété trois fois en partant de la même suspension conidiale. Le taux de germination correspond au pourcentage de conidies germées après 24 heures.

Étude du pouvoir pathogène

Matériel végétal Des fruits des variétés de Melon Galia (variété LAVI (X-GAL-52))

et Cantaloup (variété Cléo) de même calibre et d’apparence saine ont été désinfectés superficiellement par trempage pendant 1 min dans une solution d’hypochlorite de sodium à 5 % et rincés à l’eau distillée stérile puis séchés avec du papier filtre stérile.

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Inoculation Les fruits ont été blessés artificiellement à l’aide d’une aiguille

stérile de 3 mm de diamètre et 2 mm de profondeur à quatre points équatoriaux équidistants et à l’emplacement du pédoncule détaché. Chaque blessure a reçu un disque mycélien de 5 mm de diamètre qui s’y attache provenant de nouvelles cultures jeunes de sept jours sur PDA des sept champignons testés. Des témoins ont été inoculés par des disques de 5 mm du milieu de culture PDA seul. Les fruits ont été répartis individuellement dans des sachets en plastique blanc et déposés sur la paillasse dans les conditions ambiantes du laboratoire. Les sachets ont été humidifiés au départ intérieurement avec de l’eau distillée stérile.

Pour chaque variété et chaque isolat, trois fruits ont été utilisés. La mesure du diamètre moyen et de la profondeur moyenne dans le

fruit des pourritures (emplacement du pédoncule et 4 points équatoriaux) a été effectuée après neuf jours pour Alternaria alternata et sept jours pour Fusarium oxysporum et Trichothecium roseum à l’aide d’un double-décimètre en effectuant des coupes horizontales et verticales.

Analyse statistique L’analyse statistique des résultats des facteurs étudiés a été effectuée

par le test ppds (plus petite différence significative) au seuil de 5 %.

RÉSULTATS

Effet des milieux de culture Tous les milieux de culture ont permis la croissance et la production

de conidies des champignons testés à des degrés divers. Milieux organiques

Le milieu PDA et les milieux à base d’extrait de chair des deux variétés de Melon ont présenté une croissance diamétrale de 77 et 91 mm significativement supérieure à celle des autres milieux étudiés (Figure 1). La croissance est moyenne pour le milieu additionné de croute de Cantaloup. L’extrait de malt donne une moins bonne croissance pour Aa1, Aa3, Fo1 et Fo2 alors que c’est le milieu additionné de croute de Galia pour les isolats Aa2, Aa4 et Tr.

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croissance (mm) Aa1 Aa2

Aa3 Aa4

Fo1 Fo2

Tr

PDA : Potato Dextrose Agar EM : Extrait de Malt GC : Galia-Chair GCr : Galia-Croute CC : Cantaloup-Chair CCr : Cantaloup-Croute

Deux résultats sont significativement différents au seuil de 5 % s’ils ne sont affectés d’aucune lettre en commun.

Fig. 1 : Croissance diamétrale (mm) de quatre isolats d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum en fonction de

six milieux de cultures organiques.

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Les milieux à base de chair et de croute des deux variétés de Melon s’avèrent globalement plus propices à la sporulation des isolats testés (2,37.104 à 12,78.104 conidies / mm2) que les milieux PDA et EM (1,86.104 à 9,21.104) (Tableau I). L’intensité de production de conidies de l’isolat Aa1 est importante par rapport aux trois autres isolats. La production de conidies de l’isolat Fo2 est plus importante que celle de Fo1 pour tous les milieux testés. Trichothecium roseum présente la quantité la plus élevée de conidies.

Tableau I : Nombre moyen de spores (104 conidies / mm2) de quatre isolats

fongiques d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum en fonction de six milieux de culture organiques.

Milieux Isolats fongiques

Aa1 Aa2 Aa3 Aa4 Fo1 Fo2 Tr

PDA 4,58b 2,33c 2,12d 2,92bc 2,42c 4,58d 9,21cd

EM 3,22c 2,03d 1,86d 2,54c 2,33c 3,56e 10,82b

GC 5,34b 3,14b 3,31b 4,11a 3,77ab 6,15c 11,63ab

GCr 5,17b 4,07a 3,99a 3,90a 3,05bc 6,62b 9,42c

CC 6,62a 2,37c 3,22bc 3,05b 3,65b 7,93a 12,78a

CCr 5,22b 3,90a 2,88c 2,71bc 4,92a 5,85c 8,23d

Sur une même colonne, deux résultats suivis par la même lettre ne diffèrent pas significativement au seuil de 5 %.

PDA : Potato Dextrose Agar EM : Extrait de Malt GC : Galia-Chair

GCr : Galia-Croute CC : Cantaloup-Chair CCr : Cantaloup-Croute

Milieux synthétiques

Le milieu Czapeck permet un bon développement mycélien de tous les isolats avec une croissance diamétrale de 76,66 à 82,33 mm (Figure 2). Le milieu Richard donne une croissance significativement plus faible de 60 à 70,33 mm.

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Croissance diamétrale (mm) Czapeck

Richard

Deux résultats sont significativement différents au seuil de 5 % s’ils ne sont affectés d’aucune lettre en commun. Fig. 2: Croissance diamétrale (mm) de quatre isolats d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum en fonction de

deux milieux de culture synthétiques.

Le milieu Czapeck s’avère significativement plus performant pour la production de conidies que le milieu Richard chez tous les isolats étudiés.

Tableau II : Nombre moyen de spores (104 conidies / mm2) de quatre isolats d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de

Trichothecium roseum en fonction des milieux de culture synthétiques. Milieux Isolats fongiques

Aa1 Aa2 Aa3 Aa4 Fo1 Fo2 Tr Czapeck 5,05a 3,86a 4,84a 3,65a 4,24a 6,62a 11,71a Richard 2,88b 3,22b 3,60b 2,12b 3,01b 5,77b 10,95b

Sur une même colonne, deux résultats suivis par la même lettre ne diffèrent pas significativement au seuil de 5 %

Effet de la température La croissance radiale et la production de conidies de tous les isolats

testés varient considérablement en fonction des températures testées (Figure 3, Tableau III).

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croissance (mm) Aa1 Aa2

Aa3 Aa4

Fo1 Fo2

Tr

Deux résultats sont significativement différents au seuil de 5 % s’ils ne sont affectés d’aucune lettre en commun.

Fig. 3 : Croissance diamétrale (mm) de quatre isolats d’Alternatia alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum en fonction de

la température.

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La température optimale de croissance mycélienne et de production des conidies est de l’ordre de 25°C. Au fur et à mesure que cette température augmente ou diminue, le développement mycélien et la production de conidies diminuent également pour s’annuler à 35°C. À 5°C, la croissance radiale et la production de conidies sont faibles pour l’ensemble des champignons testés.

Tableau III : Nombre moyen de spores (conidies /mm2) de quatre isolats d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum

en fonction de la température.

T (°C)

Isolats fongiques

Aa1 Aa2 Aa3 Aa4 Fo1 Fo2 Tr

5 0,13d 0,25e 0,08d 0,16d 0,21e 0,16d 1,35e

15 1,61c 1,10d 0,76c 1,18c 1,35d 1,65c 4,92d

22 4,96b 3,77c 4,24b 3,94b 2,37c 3,22b 7,60c

25 6,92a 5,68a 5,34a 5,09a 3,69a 5,34a 12,01a

30 6,70a 6,15b 5,17a 3,82b 3,31b 5,60a 11,25b

35 0,00e 0,00f 0,00e 0,00e 0,00f 0,00e 0,00f

Sur une même colonne, deux résultats suivis par la même lettre ne diffèrent pas significativement au seuil de 5 %.

La germination moyenne de chaque isolat varie considérablement en fonction des températures testées (Tableau IV). La température favorable à la germination de tous les isolats est de 25°C suivie par 30°C. Une température de 35°C inhibe totalement la germination des spores et la germination est très faible à 5 et 15°C.

À 15°C, l’isolat de Trichothecium roseum donne le pourcentage de germination le plus élevé et ceux d’Alternaria alternata sont les plus faibles.

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Tableau IV : Pourcentages moyens de germination des conidies de quatre isolats

d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum en fonction de la température.

T (°C)

Isolats fongiques Aa1 Aa2 Aa3 Aa4 Fo1 Fo2 Tr

5 5,19d 2,86e 3,20e 3,64e 5,88e 8,17e 2,63e 15 25,55c 22,98d 19,70d 18,14d 26,43d 29,12d 36,91d 22 76,10b 72,60c 73,49c 70,80c 69,89c 72,24c 71,62c 25 98,29a 98,17a 99,17a 100,00a 100,00a 100,00a 100,00a 30 97,74a 94,76b 94,31b 93,35b 91,77b 93,35b 89,32b 35 0,00e 0,00f 0,00f 0,00f 0,00f 0,00f 0,00f

Sur une même colonne, deux résultats suivis par la même lettre ne diffèrent pas significativement au seuil de 5 %.

Effet du pH

Le pH 6 est significativement le plus favorable à la croissance de tous les isolats testés (Figure 4). À pH 10, la croissance mycélienne diminue nettement.

Le maximum de conidies produites est obtenu à pH 6 pour tous les isolats (Tableau V). Pour des pH inférieurs ou supérieurs à cette valeur, le taux de production diminue.

Tableau V : Nombre moyen de spores (104 conidies / mm2) de quatre isolats d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de

Trichothecium roseum en fonction du pH.

pH Isolats fongiques

Aa1 Aa2 Aa3 Aa4 Fo1 Fo2 Tr 4 2,80bc 2,16b 2,50bc 1,40c 2,03ab 3,56bc 10,52c 6 5,34a 4,33a 5,09a 4,92a 2,37a 4,84a 14,77a 7 4,24ab 3,56ab 4,03ab 3,48ab 2,20a 3,86b 12,78b 8 3,48b 2,33b 3,22b 2,67bc 1,61b 3,05c 9,00c

10 1,40c 0,63c 1,52c 1,14c 0,76c 1,27d 4,84d

Sur une même colonne, deux résultats suivis par la même lettre ne diffèrent pas significativement au seuil de 5 %.

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croissance (mm) Aa1 Aa2

Aa3 Aa4

Fo1 Fo2

Tr

Deux résultats sont significativement différents au seuil de 5 % s’ils ne sont affectés d’aucune lettre en commun.

Fig. 4 : Croissance diamétrale (mm) de 4 isolats d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum en fonction du pH.

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Étude du pouvoir pathogène

Pouvoir pathogène sur Cantaloup

La pathogénicité est similaire pour les isolats d’Alternaria alternata avec un diamètre moyen des pourritures de 7 à 10 mm en zone équatoriale et de 5 et 10 mm à l’emplacement des pédoncules (Figure 5). La profondeur des pourritures est peu importante sauf pour Aa4 où elle atteint 24 mm.

Le pouvoir pathogène de Fo1 n’est significativement supérieur à celui de Fo2 qu’à l’emplacement des pédoncules. Les deux isolats ont pu pénétrer à l’intérieur du fruit de 21 et 22 mm aux zones équatoriales et de 17 et 16 mm à l’emplacement du pédoncule.

La pourriture superficielle provoquée par Trichothecium roseum sur les zones équatoriales et à l’emplacement du pédoncule est la plus importante avec des diamètres moyens respectifs de 38 et 30 mm.

zone équatoriale superficiellement emplacement du pédoncule superficiellement

zone équatoriale en profondeur emplacement du pédoncule en profondeur

Deux résultats sont significativement différents au seuil de 5 % s’ils ne sont affectés d’aucune lettre en commun.

Fig. 5 : Diamètres (mm) des pourritures superficielles et en profondeur provoquées par quatre isolats d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum au niveau équatorial et à

l’emplacement du pédoncule de melons Cantaloup.

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Pouvoir pathogène sur Galia Aa2 provoque des pourritures superficielles importantes suivi par

Aa3, Aa4 et Aa1 (Figure 6). La profondeur des pourritures est significativement plus importante pour Aa1 au niveau du pédoncule.

Fo2 donne une pourriture superficielle plus importante que celle de Fo1 pour la zone équatoriale (17 contre 9 mm). La profondeur des pourritures causées par les deux isolats est modérée avec des diamètres compris entre 10 et 12 mm.

La pourriture superficielle provoquée par Trichothecium roseum sur Galia est importante à l’emplacement du pédoncule.

zone équatoriale superficiellement emplacement du pédoncule superficiellement

zone équatoriale en profondeur emplacement du pédoncule en profondeur

Fig. 6 : Diamètres (mm) des pourritures superficielles et en profondeur provoquées par quatre isolats d’Alternaria alternata, deux de Fusarium oxysporum et un de Trichothecium roseum au niveau équatorial et à

l’emplacement du pédoncule de melons Galia.

DISCUSSION ET CONCLUSION

Les sept isolats testés sont capables de se développer in vitro aussi bien sur les milieux de culture organiques que synthétiques.

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Cependant, les milieux organiques sont beaucoup plus performants pour tous les champignons testés. Le milieu PDA a été utilisé par plusieurs chercheurs comme milieu de base nutritif favorable à la croissance d’Alternaria alternata [11], de Fusarium spp. [20] et de Trichothecium roseum [8]. Il permet une bonne croissance et sporulation d’Alternaria alternata, Penicillium spp., Trichoderma spp., Trichothecium roseum et Fusarium avenaceum [15].

Pour les milieux synthétiques, le milieu Czapeck s’avère le plus propice à la croissance mycélienne et la sporulation des champignons testés. Des résultats identiques ont été signalés par Selmaoui [15] pour Alternaria alternata et Trichothecium roseum.

Le comportement de la croissance mycélienne et de la production de conidies vis-à-vis de la température et du pH sont identiques.

La température optimale de la croissance radiale et de la production de conidies de tous les champignons testés est de l’ordre de 25°C, en accord avec les résultats de Selmaoui [15]. Cet auteur a rapporté que la température favorable à la croissance et la sporulation d’Alternaria alternata, Penicillium spp., Trichoderma spp., Trichothecium roseum et Fusarium avenaceum est de 25°C. Hasija [7] a observé qu’A. alternata croît entre 15 et 35°C avec un optimum à 25°C.

Pour le pH, la croissance et la sporulation maximale de tous les champignons se situent aux environs de 6. De même, Selmaoui [15] a rapporté qu’un pH de 6 est très favorable à la croissance et la sporulation d’Alternaria alternata, Penicillium spp., Trichoderma spp., Fusarium avenaceum et Trichothecium roseum. Des résultats identiques ont été signalés par Vanbruggen et al. [21] pour Alternaria alternata, par Schuerger et Mitchell [14] pour Fusarium spp. et par Goetsch et al. [6] pour Trichothecium roseum.

Le pouvoir germinatif des conidies des champignons testés est maximal entre 25 et 30°C. Lamarque [9] a observé un optimum de germination autour de 28°C pour les Alternaria. Stevenson et Pennypacker [18] ont rapporté que la germination des spores d’Alternaria spp. commence à partir de 4°C, atteint un optimum entre 22 et 28°C et est fortement inhibée à 35°C, ce qui rejoint nos résultats.

La croissance mycélienne et la sporulation de tous les champignons sont très faibles aux températures et pH extrêmes. Ces pH peuvent modifier la stéréochimie des protéines, altérer de charge la surface des macromolécules ou induire une dénaturation des composés protéiques [14]. Une concentration élevée en ion H+ diminue la sévérité de la maladie

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racinaire provoquée par Fusarium solani [14]. Le pH affecte directement le métabolisme des champignons [10].

Les isolats d’Alternaria alternata, Fusarium oxysporum et Trichothecium roseum provoquent des pourritures sur les deux variétés de Melon à des degrés divers. Ces champignons sont responsables des pourritures de plusieurs cultures dont le Melon [5,22]. Bi et Wang [3] ont rapporté que les melons après la récolte sont sensibles aux pourritures causées par Alternaria alternata, Fusarium spp. et Trichothecium roseum. En Chine, Alternaria alternata, Penicillium spp., Fusarium spp., Cladosporium sp., Mucor mucedo, Trichothecium roseum, Rhizopus spp. et Geotrichum candidum sont responsables des pourritures des melons en conservation [2]. La pourriture rose causée par Trichothecium roseum a été signalée sur des melons en conservation en Inde [13,16], aux États-Unis [23].

RÉFÉRENCES

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ABSTRACT

In vitro behaviour and pathogenicity of three fungal pathogens associated with post-harvest melon rot

The behavior of Alternaria alternata, Fusarium oxysporum and

Trichothecium roseum isolates from post-harvest melons with fruit decay was studied on several culture media. Mycelial growth and conidial production were extensive on PDA medium, on culture media containing the flesh and rind of two varieties of melon Cantaloupe and Galia and on the synthetic medium Czapeck. The optimal pH and temperature values for mycelial growth and conidia production ranged respectively between 4 and 8, 22 and 30°C. The greatest conidial germination in all tested isolates was obtained at 25°C.

The pathogenicity of the Aa4 isolate of Alternaria alternata was considerable with a mean depth of decay of 25 mm in Cantaloupe melons. Depth of decay caused by Fusarium oxysporum on the equatorial points was great with 23 mm for Fo2 and 22 mm for Fo1. Superficial rot on Cantaloupe due to Trichothecium roseum was remarkable with 40 mm on the equatorial points and 32 mm on the peduncle. Key-words: Cucumis melo, fungal activity, melon rot, pathogenicity, post-

harvest pathogens.

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