COMMUNICATIONS ORALES JOURNEE DE LA RECHERCHE CLINIQUE ET FONDAMENTALE

sur le même œil traité. Ces altérations de la fonction visuelle sont corrélées à une baisse significative du taux de DHA (- 16 % après 14 jours de reperfusion). Parmi les éther-lipides, des espèces liées à l'acide oléique étaient diminuées de manière signi- ficative après 14 jours de reperfusion. Discussion : Cette étude suggère l'existence d'un rapport entre les taux de lipides intrarétiniens et la fonction visuelle ainsi que leur rôle antioxydatif. Conclusion : Ces résultats préliminaires montrent qu'un stress oxydatif modifie Ii composition des lipides intrarétiniens, en particulier le DHA, principal acide gra poly-insaturé des segments externes des photorécepteurs.

Tempbraiure oculaire dans les occlusions veineuses rétiniennes. SurtaCe eye tempaïu~~ In reOnaI Wn occlwion. SODl A', GLOTER L, INNOCEMI B, MENCHINI U, CORVl A (Florence, Italie)

Introduction: The temperature of the anterior ocular surface might depend upon some extraocular factors, like the body core ternperature and the extemal envimn- mental temperature. On the other side, it is clearly related to some intraocular para- meters, like ocular blood flow and ocular tear layer. Then, in patients without significant tear film abnormaliies, its evaluation might provide useful informations about ocular hemodvnamics with an easilv ~erformed and low invasive technoloav. Aim of the work wasihe study the surfaceéye temperature in patients suffering from central retinal vein occlusion (CRVO). The thermographic profile might represent ocu- lar hemodynamics in the affected eyes, with clinical and prognostic implications. Material and Methods: Forty patients (20 men and 20 women), affected by CRVO were included in the study. The control group consisted of sixty healthy volunteers (30 men and 30 women). All the considered subjects were older than 50 ys and were free of ocular and systemic vascular diseases, tear film abnormalities and refractive errors higher than 3 sph diopters and 1.5 cyl diopters. The ocular surface tempera- ture values were evaluated by an infrared detector AGEMA 880 LWB and processed by a specific software. The temperatures of 7 locations (five on an horizontal line and two on a vettical line, both passing through the center of the comea) were specifically measured. For the analysis of the data, the ternperature values of normal eyes were compared with those ones of the eyes with central retinal vein occlusion using the Student's t-test. By means of the same test, the control eyes were also compara with the controlateral non affected eyes of patients with unilateral CRVO. The results were considered statistically significant if p was lower or equal to 0.05. Results: On average in eyes with centrai retinal vein occlusion the surface tempera- ture was lower than in normal eyes. In comparison with the control group, the surface temperature was also lower in the normal fdlow eye of patients with unilaterai CRVO. Discussion: The obtained data confirm the possibiliies of the utiliiation of thermo- graphie technology in assessing ocular blood flow impairment in vascular diseases of the eye. Besides that, the report of some blood flow abnormalities in the normal fellow eye of patients with CRVO suggests the presence of underlying systemic vas- cular risk factm significantly contributing to the pathogenesis of retinal vein occlu- sion. Conclusion: Thermography might represent an useful tool in providing physiopatho- logical informations about ocular hemodynamics in retinal vein occlusion.

RBgulation de l'expression d'un bianqéne dans la rétine de primates. Transgm reguaiion in non human primatns Mina. MABON O', LE MEUR G, ROLLING F, MOULLIER P, WEBER M (Nantes)

Introduction : La thérapie génique, qu'elle soit corrective (apport d'un gène théra- peutique afin de suppléer le gène déficient) ou de complémentation (apport d'ur gène codant pour des facteurs de survie), représente une thérapeutique prometteuse des dégénérescences rétiniennes congénitales ou acquises. Le but de notre étude a été de construire un vecteur comprenant un système de régulation TetON permet- tant la régulation d'un transgène. Ce vecteur a ensuite été injecté en sous-rétinien chez le rat et le primate. MatMels et Méthodes : Le système TetOn est un système de régulation sensible à la doxycycline, qui joue le rôle d'inducteur. Un vecteur AAV214 a été construit, contenant le gène de l'éryihropoïétine sous le contrôle du système TetOn, placé en aval du promoteur RPE65 spécifique de l'épithélium pigmentaire. Ce vecteur a ensuite été injecté en sous-rétinien chez 2 séries de 10 rats et 2 primates. Le dosage de I'EPO a été effectué dans l'humeur aqueuse suite à des ponctions de chambre antérieure itératives.

1 Rbsultats : La transduction de l'épithélium pigmentaire a permis la synthèse et la sécrétion d'EPO dans l'humeur aqueuse de rats et de primates. Chez le rat, un pic d'expression d'EPO a été obtenu à 2-3 semaines post-injection, suivi d'une décroissance progressive et d'une stabilisation de I'expression. Chez les primates, un 1" pic d'expression d'EPO a également été obtenu en présence de doxycycline avec retour à une expression basale à l'arrêt de l'inducteur. Chez un premier pri- mate, injecté avec un AAV215 contenant le gène EPO sous le contrble du système TetOn placé en aval d'un promoteur ubiquitaire, 3 pics d'expression d'EPO ont étb obtenus. Discussion : Chez le rat, la régulation n'a pu être réalisée compte tenu des faibles doses de vecteurs injectés et des faibles volumes d'humeur aqueuse prélevés. En revanche, chez le primate, la régulation d'expression d'EPO dans la rétine est pos- sible au moyen d'un système de régulation TetOn et de son inducteur, la doxycy- cline.

I Conclusion : II s'agit de résultats préliminaires et il conviendra de réaliser plusieurs cycles d'inductions afin de d'évaluer l'efficacité de ce système de régulation à plus long terme.

MO SA-1 3.30 h d e de I'expression de Rud-deriwd Cone YialiI* Faclbrdans un modYe de rétinopathie pigmentaire autosomique dominante : le rat P23H. Rod-dwfW Cone viabiIi& Facaw expmsion in üm hnsgenb tV3H rat, an autosoma1 dominant mode1 of reb'niüs pigigmendosa. DANAN A', LEVEILLARD T, MOHAND-SAID S (Paris), CHALMEL F, POCH O (Illkirch), SAHEL JA (Paris)

Introduction : Une voie de recherche, récemment développée dans le domaine des rétinopathies pigmentaires, axée sur les interactions cellulaires entre les photorécep- teurs et sur le principe fondamental de préservation des cônes, a permis l'isolation d'un facteur de viabilité des cônes : RdCVF (Rd-derived Cone viabiiii Factor) [Il. 1 Ce facteur a une expression diminuée chez la souris rd,, modèle de rétinopathie pig- mentaire autosomiaue récessive. et est caoable de limiter la déaénérescence des

( cônes en culture ei in vivo. Le but de ce iravail était d'étudier rexpression de ce facteur chez le rat P23H, modèle animal porteur d'une mutation responsable d'une

, rétinopathie pigmentaire autosomique dominante fréquente chez l'homme. Matériels et Méthodes : Après détermination de la séquence de RdCVF du rat par analyse bio-informatique, RdCVF a pu être isolé par rd-time UT-PCR (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction) et séquend à partir d'ARN de rétines de rat. L'expression du messager de RdCVF a été analysée de manière comparative chez le rat mutant et le rat témoin à différents âges, par rd-time RT-PCR et celle du peptide, par western blot. La protéine a été localisée par immuno-histochimie sur coupes de rétine cryo-préservées à différents stades de dégénérescence rétinienne. Résultats : RdCVF a été identifié dans la séquence du génome du rat. Deux isofor- mes de son messager ont été caractérisés et quantifiés par real-time UT-PCR. L'ana- lyse comparative en UT-PCR de la quantité du messager de RdCVF chez le rat P23H par rapport au témoin met en évidence une diminution de celle-ci à partir de 30 jours de vie, parallèlement à la diminution de I'arrestine, marqueur spécifique des bâton- nets et donc de la dégénérescence de ceux-ci. L'expression est très fortement dimi- nuée à un stade avancé de la dégénérescence (43 semaines de vie). Ce résultat est confirmé au niveau protéique, en western blot : I'expression de la protéine chez le rat P23H est inférieure à celle du témoin et diminue de manière progressive entre 10 jours et 18 semaines de vie. Par immuno-histochimie, RdCVF co-localise avec la ho- dopsine au niveau des segments externes des bâtonnets, le marquage étant corrélé au raccourcissement des segments extemes des bâtonnets et donc au stade de la dégénérescence rétinienne. Discussion : L'expression de RdCVF est diminuée chez le rat P23H tant au niveau transcriptionnel que protéique, cette diminution étant corrélée au stade de dégéné- rescence rétinienne et plus précisément à l'importance de la perte du segment exteme des bâtonnets où la protéine se localise. Conclusion : La perte d'expression de WCVF, un facteur de viabili des cônes sécrété par les bâtonnets, chez le rat P23H confirme et étend les résuitats obtenus dans un modèle récessif de dystrophie rétinienne hérédiiire, la souris rd,. Si l'effet trophique de RdCVF sur les cônes, observé chez la souris était confirmé chez le rat, i'administration de RdCVF recombinant après la dégénérescence des bâtonnets constituerait une voie thérapeutique des dystrophies rétiniennes dominantes, élar- gissant ainsi l'approche à un nombre plus important de patients. RBWrence : Leveillard T et ai. Nat Genet 2004 ; 36 : 755.

Vol. 28, Hors Série 1,2005 11 1 Vongrès de la Société Française d'OphtalmoIog~e