TRANSFUSION

Groupes sanguins érythrocytaires(système ABO, système RH et système KELLLes examens en immuno-hématologie

1900 Landsteiner découvre le 1er système des groupes sanguins : le système ABO

1940 valide le système Rhésus 1952 Dausset met en évidence le

système HLA des GB

Les groupes sanguins érythrocytaires

Les groupes sanguins érythrocytaires sont déterminés pas des antigènes présents (ou non) à la surface des globules rouges

Certains antigènes sont situés dans la Mb lipidique (Rhésus), d’autres dans les glycolipides sur la face externe de la Mb du GR (ABO)

Les groupes sanguins érythrocytaires

Génétiquement induits et déterminés indépendants les uns des autres Antigènes allotypiques cad caractères propres à un

groupe d’individus dans une espèce donnée 29 systèmes de groupes sanguins liés au globule

rouge Le plus connu et le plus ancien : le système ABO, le plus important du fait de son implication en

transfusion sanguine et pour la transplantation d’organe

Système Numéro Symbole Gène(s) Localisation du gène

ABO 001 ABO ABO 9q34.2

MNS 002 MNS GYPA, GYPB, GYPE 4q28.2-q31.1

P 003 P P1 22q11.2-qter

Rh 004 RH RHD, RHCE 1q36.13-q34.3

Lutheran 005 LU LU 19q13.2

Kell 006 KEL KEL 7q33

Lewis 007 LE FUT3 19q13.3

Duffy 008 FY DARC 1q22-q23

Kidd 009 JK SLC14A1 18q11-q12

Diego 010 DI SLC4A1 17q21-q22

Yt 011 YT ACHE 7q22.1

Xg 012 XG XG Xp22.32

Scianna 013 SC SC 1p34

Dombrock 014 DO DO 12p12.3

Colton 015 CO AQP1 7p14

Landsteiner Wiener 016 LW LW 19p13.3

Chido Rodger 017 CH/RG C4A, C4B 6p21.3

H 018 H FUT1 19q13.3

Kx 019 XK XK Xp21.1

Gerbich 020 GE GYPC 2q14-q21

Cromer 021 CROM DAF 1q32

Knops 022 KN CR1 1q32

Indian 023 IN CD44 11p13

OK 024 OK CD147 19p13.3

RAPH 025 MER2 MER2 11p15.5

JMH 026 JMH - -

I 027 I - -

GLOB 028 P - -

GIL 029 GIL - -

RHAG 030 RHAG - -

Antigènes

N° 1 2 3 4 5 6 7 8

01 ABO A B A,B A1

02 MNS M N S s U

03 P1 P1

04 RH D C E c e ce Ce Cw

05 LU Lua Lub

06 KEL K k Kpa Kpb

07 LE Lea Leb

08 FY Fya Fyb Fy3

09 JK Jka Jkb Jk3

Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) et Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) et nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)

Le système ABO

Le système ABO présente deux caractéristiques qui sont à l’origine des méthodes de groupage et expliquent son rôle important en transfusion et lors des transplantations :

La présence ou l’absence des antigènes A et/ou B à la surface des GR

La présence ou l’absence des anticorps naturels anti-A et/ou anti-B dans le plasma correspondants aux antigènes absents sur les GR

Les antigènes du système ABO

Les antigènes du système ABO

Groupe sanguin

Antigènes membranair

es

Anticorps sériques

Fréquence en

FranceA A anti-B 45%

B B anti-A 9%

O H anti-A et anti-B

43%

AB A et B aucun 3%

Répartition des Ag ABH dans l’organisme

à la surface des GR, PN, lymphocytes, monocytes et des plaquettes

présents sur de nombreuses cellules de l’organisme (cellules épithéliales, endothélium vasculaire, secrétions salivaires, cellules rénales) à l’exception de l’os, des neurones et de la cornée

Les anticorps naturels,réguliers

Naturels : Présents dans le plasma d’un sujet en dehors de toute stimulation antigénique reconnue (transfusion ou grossesse)

Sont dirigés contre les antigènes que le sujet ne possèdent pas sur leur GR

Réguliers : existent constamment chez les individus ne possédant pas l’antigène correspondant

Apparaissent chez l’enfant entre 0 et 6 mois (suite à l’hétéro immunisation par les bactéries de la flore intestinale)

Intérêt primordial en transfusion sanguine en raison du risque d’incident dès la 1ère transfusion incompatible

Les anticorps immuns, irréguliers

N’existent pas à l’état naturel Apparaissent à la suite d’une

immunisation préalable : grossesse ABO incompatible

Détermination du groupe ABO

Le groupage ABO repose sur deux épreuves qui doivent être concordantes :

Epreuve globulaire dite de Beth-Vincent

consiste à rechercher par une technique d’agglutination les antigènes présents sur les hématies

GR à tester (antigènes à déterminer) + sérums tests connus (anticorps monoclonaux anti-A et anti-B)

Réaction d’agglutination

Formation d’un réseau

Agglutination

Absence d’agglutination

Agglutination

Interprétation difficile :

Double population avec le sérum test anti-A

- Patient A transfusé en O

- Patient ayant subi une allogreffe de moelle (A/O ou O/A)

Détermination du groupe ABO

Epreuve sérique dite de SimoninConsiste à identifier les anticorps naturels réguliers dirigés contre les antigènes absentsPlasma à tester (anticorps naturels) + GR tests connus

Le groupe ne sera définitif qu’à la suite de 2 déterminations réalisées à partir de 2 prélèvements sanguins différents

Groupage ABO

O _ _ +++ +++

A +++ _ _ +++

B _ +++ +++ _

AB +++ +++ _ _

BETH VINCENT

anti-A anti-B

SIMONIN

GR A GR B

Règles de compatibilité ABOPOUR LES GLOBULES ROUGES

SYSTEME ABO

Ac anti-AAc anti-B

Ac anti-B

Ac anti-A pas d'Ac

A

A

B

B

OO AB

AB donneuruniversel

receveuruniversel

compatibilité

compatibilité

identité

identité

Règles de compatibilité ABO

POUR LE PLASMA

A

B

OAB

Le système RH (Rhésus)

Système complexe de groupe sanguin On compte 52 antigènes appartenant à ce système En pratique courante seuls 5 sont à connaître :

D, C, c, E, e La présence de l’antigène D défini le groupe

Rhésus positif (85%) son absence le groupe Rhésus négatif Le phénotype Rhésus est déterminé par la

présence ou l’absence des 5 antigènes : D, C/c, E/e

Le système Rhésus comprend 52 antigènes situés sur la membrane du GR

Les antigènes

ANTIGENES Fréquence en France

D (RH1) 85%

C (RH2) 70%

E (RH3) 30%

c (RH4) 80%

e (RH5) 98%

Phénotype Rhésus (RH) du receveur (fréquence en France)

Phénotype Rhésus (RH) du CGR à transfuser par ordre prioritaire

D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)(0,34)

D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)(0,20)

D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)

D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)(0,12)

D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)(0,12)

D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)(0,04)

D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)

D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)(0,02)

D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)(0,01)

D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)

D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)(0,15)

D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

Les Anticorps du système Rhésus Toujours acquis, secondaires à une allo-

immunisation, lors d’une transfusion ou d’une grossesse

Probabilité d’apparition fonction de l’immunogénicité

L’antigène Rh standard (D) est le plus immunogène puis dans l’ordre E, c et e

de classe IgG, hémolysants, capables de traverser le placenta, responsables de la symptomatologie présentée par un nouveau-né Rhésus + né de mère Rhésus - : maladie hémolytique du nouveau-né

Règles de compatibilité Rhésus

POUR LES GLOBULES ROUGES

Rh + = Ag D+

Rh -

Les autres systèmes érythrocytaires

Importance transfusionnelle car certains de leurs antigènes sont fortement immunisants

Système KELL: l’Antigène K est un puissant immunogène pour les sujets K- (91% de la population K-)

Système Duffy : antigène Fya et Fyb Système MNS : antigène S et s Système Kidd : antigène Jka et JKb

Les autres systèmes érythrocytaires

L’absence d’un Antigène dans l ’un de ces systèmes ne s’accompagne pas d’anticorps naturels, comme dans le système ABO, mais une transfusion ou une grossesse peuvent provoquer la formation d’anticorps immuns (allo-immunisation) responsables ultérieurement d’accidents transfusionnels ou de MHNN

Les examens immunohématologiques

Groupage ABO RH1 (RhD) Phénotypage RH et Kell Phénotypage étendu Recherche d’anticorps irréguliers (RAI) Epreuve de compatibilité au

laboratoire Tests de Coombs

 Exigences relatives aux échantillons : Qualité et quantité :

Type d’analyse Nombre de ml sur anticoagulant Nombre de ml sur tube sec ou anticoagulant

Groupe ABO.RH1 et phénotype RH.KEL1 5

RAI chez l’adulte 5

ABO.RH1 et RH.K et RAI chez l’adulte 5

RAI chez le nouveau-né 5

ABO.RH1 et RH.K et RAI chez le nouveau-né 5

Titrage et dosage pondéral anti-RH1 15

Test de Kleihauer 5

Bilan de réaction transfusionnelle 5 5

Bilan de maladie hémolytique du nouveau-né 5

AHAI : TCD–Elution–Hémolysine–AF-RAI 10 10

Test de Coombs Direct (TCD) 5

-Identification du patient : Nom patronymique / Nom marital / Prénom(s) / Date de naissance / Sexe. Exigences relatives aux documents accompagnateurs :-Etablissement de soins : service demandeur / ligne téléphonique directe-Prescripteur : nom, signature du médecin prescripteur, date de prescription-Préleveur : nom et qualité du préleveur, signature, date et heure du prélèvement-Identification du patient : nom patronymique, nom marital, sexe et date de naissance-Nature des analyses demandées-Renseignements cliniques éventuels-Si une transfusion est envisagée, date et heure prévues, niveau d’urgence.

Les examens immunohématologiques

Groupage ABO RH1

correspond à la détermination du groupe ABO indissociable de la recherche du Rhésus standard D

le groupage est considéré comme définitif si les résultats sont concordants sur deux déterminations sur 2 prélèvements différents

Contexte pré-transfusionnel avéré ou potentiel et contexte périnatal

La transmission électronique des résultats est la règle pour la délivrance des PSL

Phénotype Rhésus Kell

Recherche grâce à l’utilisation de sérums tests anti-C, anti-E, anti-c, anti-e et anti-K la présence ou l’absence à la surface des hématies des 5 antigènes suivants : C (RH2), E (RH3), c (RH4), e (RH5) et K (KEL1)

Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel Contexte pré et périnatal Validation de l’identification d’anticorps anti-

érythrocytaires

Phénotype étendu

Recherche de la présence ou l’absence des antigènes : Jka, Jkb (système Kidd), Fya, Fyb (système Duffy), S, s (système MNS)

Champ d’application : - patient présentant un anticorps irrégulier

dans l’un des systèmes concernés - à titre préventif chez patients devant

recevoir des transfusions itératives - patients en instance de greffe

Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)

NB : Les anticorps immuns sont décelables avec un maximum de probabilité du 7ème au 15ème jour après la transfusion

Examen consistant à dépister et identifier les anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autres que A et B dans le sérum à étudier grâce à une gamme d’hématies tests

Délai de réalisation de 45 mn à plusieurs heures

Validité 72H

Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)

Champ d’application : Obligatoire chez tout patient susceptible

d’être transfusé Contexte de greffe ou de transplantation Contexte pré ou périnatal Chez le patient transfusé itératif en bonne

place au cours des séries de transfusion Chez le patient transfusé dans le cadre du

suivi post-transfusionnel (dans un délai de 1 mois après le dernier épisode transfusionnel)

CAT en cas d’urgence hémorragique

Urgence vitale immédiate : distribution sans délaiPrélèvement 2 déterminations groupe + RAIpas de groupe ni de RAI si non disponiblesCGR O sans hémolysinesUrgence vitale : délai de distribution inférieur à 30 minutesPrélèvement 2 déterminations groupe + RAIpas de RAI si non disponiblenécessité de groupe ABO conformeUrgence « relative » : délai de distribution de 2 - 3 heuresPrélèvement 2 déterminations groupe + RAI nécessité de groupe et RAI conformes

CHOIX DES CGR EN URGENCE VITALE

Dans le cadre d’un dépôt d’urgence ayant en stock des CGR :O- (D-C-E-c+e+K-) non réservé à la transfusion isogroupeO+ (D+C+E-c-e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe

En fonction de D et Rhésus-Kell

Patient CGR à transfuser

D Rhésus Kell

D non connu non connu O-D-C-E-c+e+K-

D négatif connu ou non O-D-C-E-c+e+K-

D positif non connu O+D+C+E-c-e+K-

D positif connu : C+ O+D+C+E-c-e+K-

D positif connu : C- O-D-C-E-c+e+K-

Epreuve directe de compatibilité au laboratoire EDCL

Qualification biologique du don Consiste à tester le sérum du receveur vis-à-

vis du CGR à transfuser (l’objectif étant de détecter certains Ac masqués par la présence d’autres Ac, ou des Ac rares)

Validité 72H Champ d’application :

Receveur présentant ou ayant présenté un ou plusieurs allo-anticorps anti-érythrocytairesNouveau-né présentant un test de Coombs positif ou né de mère allo-immunisée

Test de Coombs

Permet la mise en évidence de la sensibilisation in vivo des hématies humaines par des anticorps grâce à l’utilisation d’un réactif appelé antiglobuline humaine

Champ d’application :Maladie hémolytique du nouveau-néIncident transfusionnelAnémie hémolytique autoimmune

Recherche d'anticorps fixés sur les hématiesRecherche d'anticorps fixés sur les hématies

Ac non spontanémentagglutinables

Hématies fœtalesayant fixé l'Ac

complexe agglutinant

+ anti-gammaglobulines humaines