Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme...

43
Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine femme enceinte Dr Agnès Mailloux UF de biologie du CNRHP Centre National de Référence en Hémobiologie Périnatale Pôle de Biologie médicale et Pathologie HUEP – AP-HP

Transcript of Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme...

Page 1: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Suivi Immuno-Hématologique de la

femme enceinte

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

femme enceinte

Dr Agnès Mailloux

UF de biologie du CNRHP Centre National de Référence en Hémobiologie Périna tale

Pôle de Biologie médicale et Pathologie

HUEP – AP-HP

Page 2: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

But du suivi Immuno-hématolique :

Intérêt Fœtal – diagnostic des IFM érythrocytaire

IFM érythrocytaire : situation obstétricale rare

= fixation Ac maternels circulants sur les Ag fœtaux

érythrocytaires correspondants

INTRODUCTION

érythrocytaires correspondants

Gravité : Immuno-hémolyse fœtale et néonatale

Survenue d’une anémie

Hyper-production de bilirubine avec accumulation

post-natale et risque d’ictère nucléaire dès la première

semaine de vie

Incidence clinique 4/1000 naissancesA Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 3: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

PHYSIOPATHOLOGIE

1- Traversée trans-placentaire des anticorps maternels IgG via les récepteurs

FcgRn dès le premier trimestre de la grossesse.

Taux fœtal IgG à 20 SA : 10 % du taux maternel

2- Formation des immun-complexes Antigène-Anticorps sur le globule

rouge foetal

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

3- Immuno-adhérence et érythrophagocytose par les macrophages

spléniques

4- Survenue d’une anémie

5- Hyper-production de bilirubine avec accumulation post-natale et risque

d’ictère nucléaire dès la première semaine de vie

Page 4: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

OUTILS BIOLOGIQUES

POUR LE DIAGNOSTIC ET LE SUIVI DES

INCOMPATIBILTES INCOMPATIBILTES

FOETO-MATERNELLES

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 5: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

SUIVI DE GROSSESSE : Les RAI

• RAI D’INTERET FŒTAL :

Femme RH:1 : au 1er trimestre

Femme RH:-1 ou RH:1 avec ATCD transfusionnels :

au 1er, 2ème et 3ème trimestre (sauf si injt° d’IgRH)

• RAI D’INTERET MATERNEL (transfusionnel) :

en fin de grossesse

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 6: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

ALLO-ANTICORPS COURANTS ET RISQUE DE MALADIE HEMOLYTIQUE

Spécificité(nomenclature traditionnelle)

Spécificité(nomenclature

numérique)

Risque d’anémie fœtale Maladie hémolytique néonatale

Anti-D Anti-RH1 OUI après 15 SA OUI

Anti-Kell Anti-KEL1 OUI après 15SA OUI

DIAGNOSTIC-SUIVI BIOLOGIQUE

Anti-Kell Anti-KEL1 OUI après 15SA OUI

Anti-c Anti-RH4 OUI après 20 SA OUI

Anti-E Anti-RH3 RARE (3ème trimestre) OUI

Anti-e Anti-RH5 Exceptionnel OUI

Anti-Fya Anti-FY1 Exceptionnel OUI

Anti-Jka Anti-JK1 Exceptionnel OUI

Anti-Kpa Anti-KEL3 Exceptionnel OUI

Anti-M Anti-MNS1 Exceptionnel OUI

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 7: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Spécificité(nomenclature traditionnelle)

Spécificité(nomenclature

numérique)

Risque d’anémie fœtale Maladie hémolytique néonatale

Anti-A Anti-ABO1 NON OUI

Anti-B Anti-ABO2 NON OUI

ALLO-ANTICORPS COURANTS ET RISQUE DE MALADIE HEMOLYTIQUE

DIAGNOSTIC-SUIVI BIOLOGIQUE

Anti-B Anti-ABO2 NON OUI

Anti-C Anti-RH2 NON OUI

Anti-Fyb Anti-FY2 NON OUI

Anti-Jkb Anti-JK2 NON OUI

Anti-S Anti-MNS3 NON OUI

Anti-G Anti-RH12 NON OUI

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 8: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

���� Sa spécificité : déterminée par la RAI + IAI

���� Affinité : différente selon la spécificité

donnée par le titrage en Coombs indirect sur

hématies tests natives

DIAGNOSTIC-SUIVI BIOLOGIQUE

Paramètres de l’Ac influençant le risque hémolytique

hématies tests natives

���� Pouvoir d’activation des récepteurs Fc :

fonction de la sous-classe IgG1 ou IgG3 et de la glycosylation Fcg

déterminée par des tests fonctionnels (type ADCC)

���� Concentration : très grande variation (de 1 ng à 100 µg/ml)

déterminée / dosage pondéral ou approchée / titrage

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 9: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

I- LA TECHNIQUE DE DOSAGE

PONDERAL

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 10: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

anti-RH1, anti-RH4, Anti-RH5, anti-RH3, Anti-RH2

Dosage précis de la concentration en anticorps

DIAGNOSTIC-SUIVI BIOLOGIQUE

Dosage pondéral des anticorps

Technique lourde

CV de la technique : 5 % à 20 %CV de la technique : 5 % à 20 %

Variante 2 temps : hématies tests traitées au préalable par broméline :

haut rendement de fixation (résultat proche de la concentration réelle)

Variante 1 temps : broméline introduite directement dans le circuit,

destruction des IgG3 (dosage des IgG1 de haute affinité)

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 11: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

II- LA TECHNIQUE DE TITRAGE

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 12: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

• Pour les autres anticorps : Titrage en technique de Coombs indirect

en tube (test indirect à l’antiglobuline-hématies tests normales-

lecture macroscopique des agglutinats)

• Lecture directe : IgM

DIAGNOSTIC-SUIVI BIOLOGIQUE

Titrage des anticorps

• Lecture directe : IgM

• Addition de l’anti-IgG : lecture en test indirect à l’antiglobuline

• Réalisation en parallèle d’un témoin titrage

• Titrage comparatif / sérum précédent

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 13: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Spécificité des anticorps

Nombre de spécimens

Nombre de dilution d’écart pour la technique gel par rapport à la technique tube

Minimum Maximum Moyenne Anti-RH1 65 0 + 6 +3 Anti-RH1+RH2 31 0 + 4 +3 Anti-RH1+RH2+RH3 3 0 + 4 Anti-RH3 22 0 + 5 + 2 Anti-RH4 10 0 + 6 + 2 Anti-RH5 2 0 + 4 Anti -RH8 2 0 + 1

Titrage tube et titrage en support solide :

Difficultés de corrélation

Anti -RH8 2 0 + 1 Anti-KEL1 7 (titre < 1/64)

3 (titre > 1/64) 0 - 3 - 2 0 + 3

Anti-FY1 1 0 + 1 Anti-JK1 4 0 - 4 - 2 Anti-MNS1 8 0 - 3 - 2 Anti-MNS3 1 + 1 + 2 Anti-MNS5 2 + 3 + 4

Grande dispersion des résultats quelque soit le titre.

Utilisation du support gel augmente de façon peu reproductible le titre des Ac.

SAUF Anti-KEL1, anti-MNS1, anti-JK1 : titres en support gel < titrage tube.

Etude CNRHP, SFTS 2011A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 14: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

III- LA TECHNIQUE DE MICROTITRAGE DES ANTI-RH1MICROTITRAGE DES ANTI-RH1

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 15: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

3 QUESTIONS

1- ANTICORPS TROUVE DANS

LE SERUM UNIQUEMENT

EXPLICABLE PAR ANTI-RH1

PASSIF (±±±± ANTI-RH1 immun?)

INTERET DU MICROTITRAGE

2- EST-CE QUE LA QUANTITE D’ANTICORPS EST SUFFISANTE

POUR PROTEGER ?

Apport IgG anti-D ≥ à 20 µg/ml GR RH:1 ���� efficacité 100%

3- EST-CE QU’UN DOSAGE PONDERAL EST NECESSAIRE ?

µT ≥ 24ng/ml

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 16: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

TECHNIQUE DE MICROTITRAGE

Technique simple d’hémagglutination en support gel

6 ng/ml 3 1.5 0.75

STANDARD PATIENT

Pur 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32

Concentration approchée = 8 x 1.5= 12 ng/ml

Inverse de la dernière

dilution réactive de

l’échantillon

Concentration de la

dilution du standard

avec la même

intensité de réaction

XConcentration en anti-D =

Page 17: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

300

350

45 ng/ml

INTERPRETATION DU MICROTITRAGE

½ VIE 3 SEMAINES DIMINUTION DE MOITIE TOUTES LES 3 SEMAINES

Concentration en anti-D comparée à la concentration théorique

Terme SA

0

50

100

150

200

250

28 30 32 34 36 38 40 42

22 ng/ml

11 ng/ml

6 ng/ml

3 ng/ml

ANTICORPS TROUVE DANS LE SERUM

UNIQUEMENT EXPLICABLE PAR ANTI-D PASSIF

(ALLO-IMMUNISATION EN PLUS) ?

Page 18: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

IV- LES TECHNIQUES DE GENOTYPAGE FOETALGENOTYPAGE FOETAL

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 19: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

le génotypage fœtal par PCR

INVASIF

Liquide amniotique ou villosités choriales :

RHD, RHc, RHE, KEL1…

Méthodes validées

Indications : immunisations sévères anti-KEL1 ou anti-RHc avec

DIAGNOSTIC-SUIVI BIOLOGIQUES

Indications : immunisations sévères anti-KEL1 ou anti-RHc avec

géniteur hétérozygote

NON INVASIF

Sang maternel (ADN plasmatique) : RHD (2004), KEL1(2010), RH4

(2015)

Méthode validée, accréditée pour le RHD et le KEL1

Indications : toutes immunisations anti- D ou anti-Kell avec géniteur RHD ou KEL1 positif

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 20: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

LE GENOTYPAGE RHD FŒTAL NON INVASIF

Amplification par PCR des séquences spécifiques du gène RHD et ADN Maïs :

- EXON 10 (plus sensible mais moins spécifique)

- EXON 7 (plus spécifique mais moins sensible)

- EXON 5 (permet de génotyper le fœtus chez une mère possédant

Free DNA Fetal Kit® RhD

Kit de génotypage foetal RHD à partir d’ADN fœtal libre du sang

maternel (Technique PCR Temps réel)

- EXON 5 (permet de génotyper le fœtus chez une mère possédant

un variant silencieux Dpsi)

Amplification positive

FŒTUS RHESUS D POSITIF

Car : Absence de séquence du gène RHD

chez la mère RH1 négatif

PERMET DE LEGITIMER UNE

SURVEILLANCE ANTENATALE

Amplification négative

FŒTUS RHESUS D NEGATIF

(diagnostic par défaut)

Ou amplification défectueuse

Ou concent° très faible d’ADN fœtal

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 21: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

GENOTYPAGE RHD FOETALINDICATIONS

Femme immunisée anti-RH1

Réalisation à partir de 12 SA

Prophylaxie systématique de la 28ème semaine

Réalisation avant 26 SA

Avant amniocentèse

Réalisation 8-15 jours avant le geste

Femme RH1 négatif non-immunisée

Foetus RHD+ Fœtus RHD-

exemption de

surveillance

Incompatibilité fœto-maternelle

légitime

surveillance lourde

Besoins:

- certitude des négatifs

- diagnostic avant 26SA

Besoins:

- certitude des positifs

- certitude des négatifs

- diagnostic précoce

Fœtus RHD-

injection IgRH à 28 SA

Fœtus RHD+exemption de

prévention et

surveillance

(40%)

le geste

Fœtus RHD-

injection IgRH aussitôt après amniocentèse

Fœtus RHD+

évite injection

d’IgRH

Page 22: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

GENOTYPAGE KEL1 FŒTAL NON INVASIF

Examen basé sur

1- PCR allèle KEL1 spécifique en temps réel (SyberGreen)

réalisé en triplicate (91 pb)

…AAC CGA ACG CTG AGA…

…TTG GCT TGC GAC TCT…

…AAC CGA ATG CTG AGA…

…TTG GCT TAC GAC TCT…

KEL2 (Thr) KEL1 (Met)Mutation de substitution

(transversion)

réalisé en triplicate (91 pb)

⇒⇒⇒⇒ mise en évidence d’ADN foetal KEL1

2- PCR de l’exon 7 du gène ABO en temps réel (SyberGreen)

réalisé en simplicate (128 pb)

⇒⇒⇒⇒ représentation de la quantité d’ADN maternelle

3- PCR d’un ADN traceur (Maïs) en temps réel (TaqMan)

⇒⇒⇒⇒ Validation de l’étape d’extraction

Tous les résultats doivent être confirmés sur un 2ème prélèvement réalisé plus

tard au cours de la grossesse.

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 23: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

GENOTYPAGE KEL1 FOETALINDICATION

Femme immunisée anti-KEL1

-Risque d’anémie fœtale sévère fonction du

titre de l’anticorps anti-KEL1 maternel et l’âge

gestationnel : risque d’anémie fœtale sévère

dès 16 SA

-Surveillance clinique spécifique démarrée à

partir d’un titre supérieur au 1/32 (50 % des

patientes)patientes)

Besoins:

- certitude des positifs

- certitude des négatifs

- diagnostic précoce

Fœtus KEL1 + Fœtus KEL1 -

exemption de

surveillance

Incompatibilité fœto-maternelle

légitime surveillance

lourde

- Réalisation à partir de 13 SA

- Proposé lorsque titre en anti-KEL1 > au 1/32

- Conjoint hétérozygote KEL1/KEL2

Page 24: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

DIAGNOSTIC ET SUIVI BIOLOGIQUE

EN PRATIQUEEN PRATIQUE

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 25: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

ANTICORPS

DANS LES CAS D’ANEMIE FŒTALE SEVERE

Anti-D (RH1) Anti-c (RH4) Anti-Kell (KEL1)

Détection 1er trimestre. parfois limite de détection

Tjs au 1er

trimestreTjs au 1er

trimestre Titre en TIA d’emblée très élevéélevé

GR test enzymatique

Détection facilité

Détection très facilité

Aucun intérêt

Pièges Confusion anti-D passifRéactivation fréquente

Titre en TIA souvent faible non prédictif d’une atteinte sévère

Agglutination parfois faibleGrande variabilité du titrage inter-laboratoire

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 26: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Schéma de Titrage- Dosage

DIAGNOSTIC-SUIVI BIOLOGIQUE

Anti-RH1 Anti-RH4 Anti-Kell Anti-RH3 Autres

Dosage / Titrage de référence

+ sur GR natifs

+ sur GR natifs

+ sur GR natifs

NON

Dosage pondéral

≥1/8 ≥1/4 NON ≥1/8 NON sauf public pondéral sauf public RH2 RH5

Réactivat° Fréquente ts trim

Fréquente ts trim

Rare3ème trim

Rare3ème trim

Rare3ème trim

Fréquence dosages

2 sem 2 à 4 sem Tous les mois

6è, 7è et 8è

mois3è et 8è

mois

Taux critiques

250 UCHP 500 UCHP titre≥1/4

1/32 700 UCHP titre≥1/8

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 27: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Dépistage et surveillance des incompatibilités foetomaternelles

au cours de la grossesse

Anti-RH1, anti-RH4, anti-RH3,

Anti-KEL1

Anti-FY1, FY2, Anti-JK1,

Anti-JK2, Anti-MNS3, Anti-

MNS4, Anti-MNS1, Anti-RH2

Anti-LE1, LE2, Anti-P1,

Anti-H, Anti-HI, auto-

anticorps froid, auto-

papaïne

RAI positive

Identification

Risque d’anémie fœtale sévère in

utéro

1- Phénotyper procréateur

Si phéno-incompatible :

2- Génotypage fœtal

3- Titrage et dosage pondéral

toutes les 2 à 3 semaines

Risque de maladie

hémolytique postnatale

1- Phénotyper procréateur

Si phéno-incompatible :

2- Titrage et dosage pondéral

à 3 et 8 mois

papaïne

Pas de risque de

maladie hémolytique

Pas d’examen

complémentaire

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 28: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Grossesse avec allo-immunisation anti-RH1

Schéma de prise en charge

Génotypage RHD fœtal sur sang maternel

à partir de 12 SA

Titrage ET Dosage

Si fœtus RHD positif

RAI positive au premier trimestre

Identification = Anti-RH1

Si fœtus RHD négatif

Anti-RH1 < 1 µg/ml(250 UCHP/ml)

- Surveillance échographique standard

- Dosage + titrage anti-RH1 tous les 15

jours à partir de 18 SA

Anti-RH1 > 1 µg/ml

- Surveillance hebdomadaire dès 18 SA

écho + vélocimétrie doppler

- Dosage + titrage anti-RH1 tous les 15 jours à

partir de 18 SA

Si fœtus RHD positifSi fœtus RHD négatif

sur 2 prélèvements

Surveillance levée

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 29: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Génotypage KEL fœtal sur sang maternel

à partir de 13 SA

Titrage

Si fœtus KEL1 positif

RAI positive au premier trimestre

Identification = Anti-KEL1

Si fœtus KEL1 négatif sur

Grossesse avec allo-immunisation anti-KEL1

Schéma de prise en charge

Anti-KEL1<1/32

- Surveillance échographique standard

- Titrage anti-KEL1 tous les mois à partir de

18 SA

Anti-KEL≥1/32

- Surveillance hebdomadaire dès 18 SA

écho + vélocimétrie doppler

- Titrage anti-KEL1 tous les mois à partir de 18

SA

Si fœtus KEL1 positif

sur 2 prélèvements

Si fœtus KEL1 négatif sur

2 prélèvements

Surveillance levée

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 30: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

CAS CLINIQUES

PROBLEME DE SUIVI DESPROBLEME DE SUIVI DES

PATIENTES RH:-1

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 31: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Mme L. RH1 négatif, 2ème gesteUn accouchement à terme 8 ans auparavant. A reçu sa prophylaxie rhésus du post-partum

• 8 SA : Première RAI dans un laboratoire privé ⇒⇒⇒⇒ RAI positive ⇒⇒⇒⇒ laboratoire centralisateur:

identification anti-RH1 et titrage au ⇒⇒⇒⇒ CNRHP biologique: titrage <1/2; microtitrage: 6 ng/ml

⇒ « femme faiblement immunisée en début de grossesse; prévoir un génotypage RHD du fœtus non

invasif pour confirmer incompatibilité; titrage et dosage pondéral tous les 3 semaines au CNRHP»

• 15 SA: génotypage RHD fœtal sur plasma maternel

⇒ « fœtus RHD positif; Grossesse en situation incompatible ; titrage et dosage /15 jours »⇒ « fœtus RHD positif; Grossesse en situation incompatible ; titrage et dosage /15 jours »

• 27 SA: anti-RH1 titrant au 1/16 et dosé à 0,4µg/ml

⇒ « activation de l’immunisation sans risque actuel d’anémie fœtale; titrage et dosage/15j »

• 29 SA: anti-RH1 titrant à 1/32 et dosé à 1µg/ml

⇒ « Immunisation anti-RH1 s’aggravant à risque d’anémie fœtale: suivi obstétrical spécialisé

hebdomadaire et biologique spécialisée tous les 15 jours »

⇒⇒⇒⇒ Contact direct avec l’obstétricien et orientation vers un centre de compétence

(vélocimétrie doppler et transfusion fœtale)

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 32: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Mme L. RH1 négatif, 2ème geste

• 37 SA: consultation hebdomadaire systématique

– anomalies du RCF

– accélération de la vitesse cérébrale ⇓⇓⇓⇓

• Extraction par césarienne en urgence d’un petit garçon

– Bonne adaptation mais pâle et jaune 20

30

40

50

60

70

80

90

100

110

PS

C (

cm/s

)

– Bonne adaptation mais pâle et jauneavec hépatosplénomégalie;

– Au cordon: • Bili: 84 µmoles/l ;

• Hb: 9 g/dl avec 350 000 réticulocytes/mm3

⇒⇒⇒⇒ Transfusion CGR à J0 et photothérapieintensive

0

10

20

16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40

âge gestationnel (SA)

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Page 33: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Mme M. RH1 négatif, 3ème gesteUne grossesse 14 ans auparavant, et une fausse couche

• 7 SA: RAI négatives mais métrorragies ⇒⇒⇒⇒ injection Rhophylac® 200

• 11 SA: métrorragies

– ⇒⇒⇒⇒ RAI + injection N°2 de Rhophylac® 200

– ⇒⇒⇒⇒ RAI positives ⇒⇒⇒⇒ CNRHP: identification anti-RH1 et microtitrage :6-

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

– ⇒⇒⇒⇒ RAI positives ⇒⇒⇒⇒ CNRHP: identification anti-RH1 et microtitrage :6-

12ng/ml; µtitrage compatible avec l’injection à 7 SA

• 13 SA et 18 SA: RAI positives ⇒⇒⇒⇒ EFS X: anti-RH1 « résiduel »

• 25 SA: RAI positives ⇒⇒⇒⇒ Laboratoire centralisateur: anti-RH1 identifié de

titre <1 : « anti-RH1 passif résiduel »

Page 34: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Mme M. RH1 négatif, 3ème geste

• 32 SA: Consultation à la maternité pour

« Cholestase gravidique »

– Anomalies du RCF sur J1

– Anasarque sur J1 avec accélération

des vitesses cérébrales

⇒Extraction en urgence

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

⇒Extraction en urgence

• Deux jumelles anémiques et ictèriques

avec mauvaise adaptation et détresse

respiratoire

– J1→ Hb:2,9g/dl et bili:100µmoles/l ⇒

TNN+EST

– J2 → Hb:7,9g/dl et bili:120 µmoles/l

⇒ EST

Page 35: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

• Obstétricien n’avait aucun moyen de mettre en doute le résultat

donné par le laboratoire, pas de connaissance sur :

techniques à réaliser

sensibilité des techniques

transmission des examens à laboratoire de référence

ECHEC DE LA PRISE EN CHARGE D’UNE FEMME

ENCEINTE IMMUNISEE

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

• RAI positive dans un contexte d’injection d’IgRHD

Erreur d’interprétation : anti-D faussement étiqueté comme

passif résiduel

Seul le dosage des anti-RH1 permet de se prononcer

INTERET DU MICROTITRAGE

ROLE DU BIOLOGISTE EST ESSENTIEL

Page 36: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

CAS CLINIQUES

PROBLEME DE SUIVI DES

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

PROBLEME DE SUIVI DES

PATIENTES RH:1

Page 37: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Mme A. RH1 positif

• DDG : fin juin 2013

• Pas de RAI au 1er trimestre

• 37 SA ½ : 12/03/14

RAI positive, identification d’un Anti-RH4 (Labo CH)

1er titrage/dosage envoyé au CNRHP

A Mailloux,, CNRHP, Hôpital St Antoine

1 titrage/dosage envoyé au CNRHP

Titrage : saline 1/16 TCI 1/32

Dosage pondéral : 2 temps : 8360 UCHP/ml

1 temps : 2680 UCHP/ml

• Alerte le 18/03/14 par le CNRHP biologique 17H00

• Césarienne en urgence le 18/03/14

Région Ile de France

Page 38: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

⇒⇒⇒⇒ Naissance en urgence sans information pédiatrique ni anticipation

transfusionnelle d’un enfant avec une anémie hémolytique sévère

3100g

Groupe : O DCcee Kell neg

TCD 4+ (QI pour l’élution avant la transfusion)

Au cordon: bilirubine totale 69 µmol/L, Hb 5,5g/dL

- J0 ⇒⇒⇒⇒ Transfusion (⇒⇒⇒⇒ 14,5 g/dL)

- J0 ⇒⇒⇒⇒ Photothérapie intensive dès H6

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

-- J0 ⇒⇒⇒⇒ Photothérapie intensive dès H6

- J1 ⇒⇒⇒⇒ Perfusion d’albumine

- J2 ⇒⇒⇒⇒ IgIV pour éviter EST

- J 3 ⇒⇒⇒⇒ Photothérapie en discontinu

Immunisation connue en 2007 anti-RH4

Dosage pondéral : 2 temps : 60

1 temps : <40

Page 39: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Mme G. RH1 positif

• DDG : en août 2013

• Pas de RAI pendant la grossesse

• 35 SA fin mars 2014 : MFIU

RAI positive : identification d’un anti-RH4 + anti-RH3 (EFS X)

31/03/14 : prélèvement envoyé au CNRHP :

Titrages : Anti-RH4: saline <1/2 TCI 1/128

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

Titrages : Anti-RH4: saline <1/2 TCI 1/128

Anti-RH3 : saline <1/2 TCI <1/2

Dosage pondéral : 2 temps : 8720 UCHP/ml

1 temps : 5175 UCHP/ml

• MAIS anti-RH4 connu en 2010

• 11/07/14 Foetopathologie : anémie profonde + erythroblastose très

importante. Anti-RH4 à l’origine de la MFIU

Région Limousin

Page 40: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

• Réception des sérothèques de Toxoplasmose pour dosages pondéraux

rétrospectifs :

• 7 prélèvements

Date Titre saline

Titre TCI 2 temps 1 temps

21/08/13 <1/2 <1/2 40 <40 24/09/13 <1/2 <1/2 40 <40 22/10/13 <1/2 <1/2 <40 <40

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

22/10/13 <1/2 <1/2 <40 <40 21/11/13 <1/2 <1/2 40 <40 27/12/13 <1/2 <1/2 85 <40 30/01/14 <1/2 <1/2 280 55 04/03/14 <1/2 1/16 1360 520

Début de

réactivation

non vue avec

le titrage

22 SA

Page 41: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

Mme M. RH1 positif

•DDG : mi-octobre 2012

•28 SA : RAI positives 24/04/13

laboratoire privé Laboratoire centralisateur

Identification : anti- RH4, Titrage <1/1

Pas de dosage pondéral : « Quantité insuffisante pour transmettre le

prélèvement au CHP pour dosage pondéral. Prévoir 10mL de sang total et 5mL

de sérum lors du prochain prélèvement. » paragraphe sur la dangerosité de

l’anti-RH4 dans un contexte de grossesse et les recommandations de suivi.

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

l’anti-RH4 dans un contexte de grossesse et les recommandations de suivi.

•AUCUN AUTRE PRELEVEMENT

•37 SA : 09/07/13 (Clinique) extraction en urgence pour souffrance fœtale d’un

garçon

• Groupe : A DCcee Kell neg

• TCD 4+ élution positive anti-RH4

Page 42: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

• Mauvaise adaptation initiale ���� transfert Hôpital X

Anémie à 5g/dL et détresse respiratoire sévère ���� transfert en

réanimation dans nouvel Hôpital Y

J0 : Transfusion en urgence vitale immédiate en O RhD neg car la

mère n’a pas le même nom que l’enfant et absence de notion de RAI chez

la mère.

• RAI de l’accouchement du 09/07/13: anti-RH4 identifié à l’EFS X prévient

l’Hôpital Y mais la 1ère transfusion a déjà eu lieu.

11/07/13 : 1er prélèvement CNRHP : anti-c (RH4)

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine

• 11/07/13 : 1er prélèvement CNRHP : anti-c (RH4)

Anti-RH4 : Titrage 1/16

Dosage pondéral : 2 temps : 1650 UCHP/ml

1 temps : 1000 UCHP/ml

• Absence de surveillance adaptée d’une immunisation anti-RH4.

• Retard à la prise en charge adaptée à la maladie hémolytique.

• Absence de connaissance de cette femme au niveau des EFS régionaux

délivrant les produits : conséquences transfusionnelles pour l’enfant.

Page 43: Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte€¦ · Suivi Immuno-Hématologique de la femme enceinte A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine Dr Agnès Mailloux UF de biologie

SUVI IMMUNO-HEMATOLOGIQUE

DE LA FEMME ENCEINTE

• Diagnostic des IFM : purement biologique

• Pathologie rare dépistable si respect du calendrier des RAI

• Diagnostic biologique spécialisée : Existence d’un Centre de • Diagnostic biologique spécialisée : Existence d’un Centre de

Référence avec une biologie et une clinique périnatale de

référence

- Biologie donne l’alerte pour le déclenchement d’un

suivi spécifique

- Interactions étroites entre

biologiste / biologiste de référence / clinicien

A Mailloux, CNRHP, Hôpital St Antoine