Préparation de milieux gélosés

Boîte de pétriLa gélose tapisse le fond de la boîte sur une épaisseur d'environ 5 mm.

TubeLa gélose est refroidie en plaçant le tube en position inclinée pour développer une surface maximale.

3. Réalisation d’un antibiogramme

Réalisation d'un antibiogramme– Ensemencement de bactéries sur un boîte de Pétri– 2 souches bactériennes sont ensemencées :

Escherichia Coli et Bacillus megatherium

Pour l'ensemencement, on fabrique des râteaux en verre

Principe de l’antibiogramme

• Utilisation de disques de papier imprégnés d’antibiotiques

• L’antibiotique diffuse dans la gélose

Antibiogramme

• Les résultats sont lus après 16 à 18 heures d’incubation

• Le diamètre des zones d’inhibition révèle la sensibilité des micro-organismes

•http://perso.wanadoo.fr/sordalab/anticollege.htm

4. Diversité des métabolismes

Exemple de résultats

* A Colonies dans tout le tube : bactéries aéro-anaérobies

* B Colonies en haut du tube : bactéries aérobies strictes

* C Colonies en haut du tube, légèrement sous la surface : bactéries micro-aérophiles (supportent des pressions réduites en dioxygène.

* D Colonies en bas du tube : bactéries anaérobies strictes

a) Etude du développement des bactéries dans des milieux oxygénés ou non :

Film bactérien uniquement en surface du tube>bactérie aérobie stricte

Pseudomonas aeruginosa

Développement dans tout le tube>bactérie aérobie – anaérobie facultative

La bactérie libère du gaz qui repousse la gélose

Escherichia coli

Développement dans tout le tube sans faire de tapis en surface>bactérie anaérobie aérotolérante

Enterococcus faecium

Pas d’acidification dans tube fermé Acidification en surface dans tube ouvert>dégradation du glucose par voie oxydative

Acidification dans les deux tubes>dégradation du glucose par voie fermentative avec production de gaz CO2 et H2