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Service de Bio-pathologie médicale Clinique St-Pierre Ottignies MANUEL DE PRELEVEMENT PR-0135 Version : 7.4 Date d’application : 2015-10-26 Approbation : Roussel Gatien, Ph.biol. 1 / 39 Manuel de prélèvement Laboratoire de Bio-pathologie médicale Clinique Saint-Pierre Ottignies
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médicale
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Manuel de prélèvement
Laboratoire de Bio-pathologie médicale
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Objet
Ce document est destiné aux préleveurs internes et externes au laboratoire (médecin, infirmiers,
infirmières, technologues) afin de leur indiquer les recommandations pré-analytiques nécessaires à la
bonne réalisation des analyses : consignes, informations permettant une prise en charge efficace des
patients lors de l’acte de prélèvement.
Le respect de l’ensemble des recommandations pré-analytiques est primordial pour l’obtention de résultats
fiables d’analyses et pour une gestion des dossiers patients efficace (identification, remboursement, rendu
des résultats…).
Présentation des sites de prélèvement
Clinique Saint Pierre
Niveau 0, Aile 800
Avenue Reine Fabiola 9
1340 Ottignies
010.437259
Dr Andreatti 010.437777
Dr Selosse 010.437543
Horaires d’ouverture
Du lundi au vendredi de 7h30 à 17h00
Le samedi de 7h45 à 11h45
Accueil des petits enfants de préférence entre 8h et 12h, et entre 14h et 16h
Centre Médical de Jodoigne
Avenue F. Charlot 10
1370 Jodoigne
010.812193
010.813536
Horaires d’ouverture
Sur rendez-vous
Centre Médical de Wavre
Rue du pont-Saint-Jean 2
1300 Wavre
010.232929
010.232922
Horaires d’ouverture
Du lundi au vendredi de 7h30 à 11h30
Prise de sang chez les petits enfants : de 8h00 à 11h00
Maison Médicale du Biéreau
Voie du Roman Pays, 46
1348 Louvain-La-Neuve
010.450101
Horaires d’ouverture :
Du lundi au vendredi de 8h00 à 9h00
Polyclinique LLN
Rue du Traité de Rome, 5
1348 Louvain-La-Neuve
010.232570
Horaires d’ouverture :
Du lundi au vendredi de 8h00 à 12h00
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Le matériel de prélèvement à disposition
Vérifiez la date de péremption du matériel avant toute utilisation Les tubes munis d’une bague blanche présentent des volumes de remplissage réduits (= pédiatrique)
Exemple :
Tube sec avec gel – bouchon rouge – 3.5 ml / 8 ml
o Sérum
o Tube ref. « VACUETTE KG454225 / KG455071 »
o Biochimie – hormonologie – marqueurs cardiaques- sérologie
Tube citrate – bouchon bleu – 2 ml / 3.5 ml
o Sang total citrate / plasma citrate
o Tube ref. « VACUETTE KG454322 / KG454332 »
o Hémostase
Respect de la proportion sang/anticoagulant (bien remplir jusqu’au trait de jauge)
Acheminer le plus rapidement possible le prélèvement au laboratoire à température ambiante
(< 4h, dosage INR : < 12h)
Tube hépariné– bouchon vert – 2 ml / 4 ml / 9 ml
o Sang total hépariné / plasma hépariné
o Tube ref. « VACUETTE KG454237 / KG454029 / KG455084 »
o Biochimie urgente – marqueurs cardiaques
Tube EDTA– bouchon mauve – 2 ml / 4 ml / 6 ml
o Sang total EDTA / plasma EDTA
o Tube ref. « VACUETTE KG454047 / KG454209 / KG456043 »
o Hématologie, immuno-hématologie : Numération formule – groupe sanguins, RAI, HBA1C, BNP
Tube fluorure de sodium– bouchon gris – 2 ml / 4 ml
o Sang total fluoré / plasma fluoré
o Tube ref. « VACUETTE KG454238 / KG454297 »
o Glycémie, lactate
Tube citrate – bouchon noir – 1.28 ml
o Sang total citraté
o Tube ref. « KE10010 »
o Vitesse de sédimentation VS
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Tube en plastique– bouchon à visser – 13 ml
o Ponctions (Liquide-Céphalo-Rachidien)
o Tube ref. « 60.540.108 »
o Biochimie – microbiologie – numération formule LCR
Tube en verre– bouchon brun/noir – 10 ml
o Sang maternel pour test prénatal non invasif (coût 460 euros à charge de la patiente)
o Prélèvement réalisé dans nos centres de prélèvements uniquement du lundi au mercredi
o Obligation que la patiente soit munie du formulaire ad hoc complété
o Tube ref. « Streck – Celle-Free DNA BCT ® » - approvisionnement à l'IPG via les biologistes
o Génétique
Micro Tube sec– bouchon transparent – 1.3 ml
o Sérum
o Tube ref. « Microtube 1.3 ml Z 41.1501.005 Sarstedt»
o Biochimie pédiatrique
Micro Tube EDTA– bouchon rouge – 1.3 ml
o Sang total EDTA
o Tube ref. « Microtube 1.3 ml K3E 41.1504.005 Sarstedt»
o Numération formule pédiatrique
Seringue pour gazométrie – 3 ml
o Sang total hépariné
o Tube ref. « Smith Portex Line Draw 3ml L/S 4043 E »
o Gaz sanguin
Flacons pour hémocultures
- Aérobie – bouchon bleu
- Anaérobie – bouchon doré
- Pédiatrique – bouchon argenté
- Mycobactéries – bouchon rouge
Sang total
Ref. « BD Bactec plus aerobic/F culture vials 442023 » - plastique
Ref. « BD Bactec plus anaerobic/F culture vials 442022 » - plastique
Ref. « BD Bactec peds plus/F culture vials 442194 » - verre
Ref. « BD Bactec Myco/F Lytic culture vials 442288 » Après accord du
microbiologiste (7704/7646) !
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POUR TOUS LES FLACONS : Revisser soigneusement et fermement le bouchon afin d’éviter les
souillures et de disposer de l’intégralité de l’échantillon recueilli
Aiguilles pour prélèvement sanguin Quickfit
Ref. « Terumo venoject quick fit multi sample
o 0.9*40mm MN-2038Q (jaune)
o 0.8*40mm MN2138Q (vert)
o 0.7*40mm MN-2238Q (noir)
Holder
Ref. « Terumo Venosafe quick filt holders XX-VF10H65Q »
Unité de prélèvement à ailettes de sécurité « papillon »
o Ref. « Terumo surflo winged infusion set 0.8*19mmm SV-21BL »
o Ref. « Terumo venoject quickfit luer adapter XX-MN-2000Q »
Pot bactério - bouchon rouge – 60 ml
o Urine (examen cytologique)
o Ponctions
o Selles
o Ref. « TP35A-020 Gosselin »
o Cytologie urinaire, Culture bactériologie
Pot bactério - bouchon bleu – 40 ml
o Urine (examen cytologique)
o Ref. « TP30-009 Gosselin »
o Cytologie urinaire, Culture bactériologie pédiatrique
Pot bactério BORICON - bouchon rouge – 30 ml
o Urine
o Ref. « 8602086 IMP »
o Culture bactériologie urines
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Pot à urines avec canule de tranfert intégrée – bouchon bleu avec opercule – x ml
(dispositif vacutainer)
Compatible avec tube BD pour chimie urinaire, cytologie urinaire et bactériologie :
o Tube cytologie urinaire – bouchon beige (11ml)
o Tube bactériologie urinaire – bouchon vert olive (10ml)
o Ref. pot bleu « BD Vacutainer urine collection cups 364941 » (pour médecins généralistes)
o Ref. Tube vert « BD vacutainer plus CS boriq acid sodium borate formate 364958 »
o Ref. Tube beige « BD vacutainer z plus urine 364915»
o Ref. canule de transfert « BD vacutainer urine transfert straw 364940 »
Flacon pour urine de 24 heures – bouchon vert – 3000 ml
o Urine de 24h acidifiée
o Ref. « 77.578.252 Sarstedt»
o Cathécholamines, métanéphrines urinaires
Pot à selles - bouchon rouge – 60 ml
o Ref. « 409552 G MLS »
o Culture bactériologie, parasites, recherche antigénique (rotavirus,
adénovirus)
Pot à sperme - bouchon opaque – 100 ml
o Ref. « 75.562.005 Sarstedt »
o Spermogramme, capacitation
Flacon pour urine de 24 heures – bouchon jaune – 3000 ml
o Ref. « 77575 Sarstedt »
o Chimie urinaire
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Kit de prélèvement d’échantillons pour test direct Herpes simplex 1 et 2 :
Ecouvillon copan pour culture bactériologie avec milieu de transport amies– bouchon bleu
o Ref. « Copan sterile swab 425013 »
o Frottis pour culture aérobie/anaérobie
Ecouvillon copan pour culture bactériologie avec milieu de transport amies – bouchon orange
o Ref. « Copan sterile transport swab 425032 »
o Frottis d’œil – Frottis d’oreille
Kit de prélèvement pour dépistage MRSA
o Ref. « Copan TSBSaltBroth M10171 MLS »
o Frottis gorge, nez, périnée ou plis inguinaux
Kit de prélèvement pour PCR Chlamydia trachomatis et Neisseria gonorrhoeae « Abbott multi-collect collection
kit » :
o Tube avec milieu de transport – bouchon orange
Ecouvillon (pour frottis)
Pipette à usage unique (pour urine)
o Frottis uréthral, vaginal
Urine de premier jet
o Ref. « Abbott multi collect specimen kit 9K12-01 »
Ecouvillon fin Copan E-Swab avec milieu de transport amies – bouchon orange
o Frottis naso-pharyngé
o Ref. « Copan E Swab 483CE »
o PCR, détection antigénique, culture aérobie/anaérobie
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o 1 lame en verre
2 écouvillons en dacron
1 flacon de fixateur à l’acétone avec bague de pression
o Frottis de vésicules
o Ref. « Trinity Biotech Microtrak HSV1/2 direct specimen collection kit 8H329UL
Frottis de col endo-cervical – PCR HPV : prélèvement en phase liquide
o Ref. Pot « Hologic ThinPrep Pap Test Presercyt Solution 20ml 70097-003 »
o Ref. Ecouvillon « Rouers medical devices BV, Rouers cervex brush 70671-
001 »
Collecteur d’aiguilles 3 L
o Ref. « AP Medical BD 300429 »
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Recommandations pré-analytiques spécifiques
Facteurs ayant une incidence sur la qualité du prélèvement et/ou des résultats d’analyses :
Facteurs physiologiques
- Sexe
- Age
- Ménopause, grossesse
- Heure du prélèvement (cycle circadien : cortisol, ...)
Prise de médicaments
- date, heure de la dernière prise
- antibiothérapie (prélèvements de bactériologie)
Facteurs liés au prélèvement
- Excès de temps de pose du garrot
- Prélèvement collecté dans un récipient inadéquat (anticoagulant)
- Hémolyse (prélèvement difficile, agitation vigoureuse des tubes prohibée !)
- Ordre de prélèvement des tubes non respecté
- Tube pas assez rempli (hémostase) ou coagulé (hémostase, Complet Formule Sanguine)
Etat de jeûne
L’ensemble des analyses sanguines réalisées au laboratoire s’effectue de préférence le matin à jeûn
(interférence de la lipémie sur de nombreux dosages), cependant bien qu’il soit toujours conseillé, le jeûne
n’est pas obligatoire pour l’ensemble des prélèvements.
- Jeûne obligatoire de 12 heures (sauf avis médical) : dosage de la glycémie, cholestérol,
triglycérides,…
Il est possible de boire un verre d’eau et il est recommandé de prendre un repas léger la veille au
soir.
- Pour les autres dosages, il est préférable de respecter au minimum un délai de 2 heures après les
repas.
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Prescription médicale
Différents formulaires de demande d’analyses médicales sont disponibles sur demande au
laboratoire :
- Demande générale (hématologie – biochimie – hormonologie – sérologie)
- Demande d’évaluation du risque de trisomie 21 premier – second trimestre
- Demande de gaz sanguin
- Demande de bactériologie
- Demande de dépistage MRSA
- Frottis cervico-vaginal : demande d’analyse cytologique/PCR HPV
- Demande de sang et dérivés sanguins
D’autres formulaires spécifiques sont nécessaires pour la réalisation de certaines analyses comme :
analyses de biologie moléculaire (PCR et Génotypage Hépatite C, PCR Hépatite B …)
Une prescription informatisée est disponible dans les services hospitaliers de la clinique.
Les formulaires de demande d’analyses médicales dûment complétés accompagnent les
échantillons biologiques :
Identification univoque du patient (manuscrite, par vignette de mutuelle ou par étiquette de la clinique
imprimée via la carte d’identité ou la carte SIS) :
- nom, prénom
- sexe, date de naissance
- adresse, téléphone
- données mutuelle
- date et heure de prélèvement
- identification du préleveur
- indentification du médecin prescripteur :
o nom, prénom
o signature et cachet (N° INAMI, adresse, N° de téléphone/Fax)
- date de prescription
- le destinataire des copies du compte rendu :
o le médecin traitant ou autre
o le patient (avec accord du prescripteur)
- les renseignements cliniques nécessaires à la bonne exécution des analyses et à l’interprétation
des résultats
La préparation des prélèvements se fait en fonction de la demande complétée par le médecin prescripteur
(choix des contenants, vérification des conditions de conservation et de transport)
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Identification des prélèvements
L’absence ou la mauvaise identification des prélèvements peut mener à une inversion de tubes.
Les conséquences peuvent être dramatiques pour le patient.
Afin de garantir la sécurité du patient, la personne qui effectue le prélèvement doit :
- vérifier l’identité du patient : nom, prénom et date de naissance, …
- immédiatement identifier les tubes ou pots :
o idéalement à l’aide d’étiquettes pré-imprimées reprenant le nom, prénom et date de
naissance
OU
o en inscrivant manuellement nom et prénom au minimum.
L’absence ou l’erreur d’identification du prélèvement constitue un critère de non-conformité et peut
entraîner la non-exécution des actes.
Hygiène des mains
Désinfection hydro-alcoolique
Avant et après un prélèvement, se passer les mains à la solution hydro-alcoolique (3 ml = 2 pressions) :
En cas de mains souillées, procéder à un lavage des mains avant la désinfection hydro-alcoolique.
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Le prélèvement sanguin veineux
Ordre des tubes à respecter
Les flacons d’hémocultures sont toujours prélevés en premier lieu, suivi des prélèvements veineux :
Remplir complètement le tube Citraté (jusqu’au trait de jauge) !!
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Acte de prélèvement
Préalables
- Installer la personne confortablement (position assise ou couchée)
Aider le patient à se détendre, le rassurer s’il semble stressé.
- Vérifier son identité (demander Nom, Prénom, date de naissance…)
- Vérifier la validité de la prescription médicale et s’assurer de la concordance entre l’identité du
patient et celle figurant sur la prescription
- Choisir le matériel adapté au type de prélèvement et au malade (tubes, aiguilles, dispositif de
prélèvement)
- Désinfecter la zone de ponction par friction avec un produit hydro-alcoolique (sur mains propres)
Déroulement de l’acte
Etape 1
- poser le garrot au dessus du coude (à +/- 10 cm), le maintenir serré moins de 3 minutes
- repérer les veines du patient par palpation : choisir le meilleur point de ponction au pli du coude
(en cas d’impossibilité : avant bras, dos de la main)
- désinfecter le site de ponction (alcool à 70°, respecter un temps de contact de 30 secondes et ne
plus y toucher)
- placer le bras en position basse et faire serrer le poing
Etape 2
- enlever la protection de l’aiguille
- stabiliser le bras d’une main et tenir le holder de l’autre
- piquer dans le sens de la veine, ouverture de l’aiguille vers le haut. Le corps de prélèvement doit
former avec le bras un angle de 30° environ
- enfoncer le tube au fond du holder de façon à percer le bouchon
- faire desserrer le poing et desserrer le garrot
Etape 3
- attendre l’arrêt de l’écoulement de sang dans le tube pour changer de tube
- pendant que le tube suivant se remplit, homogénéiser les tubes par 8 à 10 retournements lents
- à la fin du prélèvement, une fois le tube retiré, enlever l’aiguille et l’élim iner dans un collecteur
d’aiguilles, appliquer un coton sec
- maintenir une pression ferme pendant au moins 1 minute
- NE JAMAIS RECAPUCHONNER L’AIGUILLE
- Enlever le garrot
Etape 5
- éliminer le matériel de ponction ainsi que le coton dans collecteur d’objets sou illés situé à proximité
- mettre un pansement
- IDENTIFIER LES TUBES DE PRELEVEMENTS
- transmettre les tubes et le bon de demande d’analyses au laboratoire le plus rapidement possible.
Incidents possibles
- Hématomes : causé par un garrot trop serré, des veines difficiles, un mauvais geste du patient.
Conduite à tenir : pansement + alcool, compresse à l’arnica, hirudoïd, compression
sur le point de ponction (coton et garrot serré sur le point de ponction pendant
quelques minutes)
- Malaise : causé par l’angoisse, le jeûne…
Conduite à tenir : allonger le patient, lui lever les jambes, le faire respirer à fond, lui
donner du sucre…
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Le micro-prélèvement : sang capillaire
A la pulpe du doigt
o Eviter les régions infectées, comportant des cicatrices ou un œdème
o Désinfecter (l’alcool à 70°)
o Laisser évaporer
o Piquer franchement le bout du doigt : légèrement sur le côté (idéalement à l’aide d’une lancette de
sécurité à usage unique)
o Le sang doit couler spontanément sans exercer de pression OU masser le doigt de la base vers
l’extrémité
o Essuyer la première goutte avec un coton sec
o Prélever les gouttes suivantes avec des micro-tubes (homogénéiser par retournements doux), sur
papier filtre destiné au test de Guthrie ou dans un capillaire hépariné (MultiCap ref 01198961
Siemens)
o Eviter tout début de coagulation
o Essuyer avec un tampon sec
Au talon (âge < 6 mois)
o Saisir fortement le talon du nouveau-né ou du nourrisson, réchauffer le pied, l’enserrer entre le
pouce et l’index, désinfecter, piquer sur la face interne ou externe du talon (afin de ne pas piquer le
calcanéum).
Le prélèvement de sang capillaire est déconseillé pour l’exploration de l’hémostase .
Dosage des gaz du sang
Le dosage des gaz du sang se fait par ponction artérielle en général (ou par micro prélèvement de sang
capillaire).
C’est un acte médical
Acte de prélèvement
- Asepsie rigoureuse du point de ponction
- Le prélèvement est effectué au niveau des artères radiale, humérale ou fémorale
- Dès le retrait de l’aiguille, faire un point de compression de plusieurs minutes
- Noter l’heure exacte du prélèvement
- Eviter toute contamination par des bulles d’air
- Obturer la seringue par un bouchon
- Mélanger le sang en roulant la seringue entre les mains
- Porter immédiatement au laboratoire : délai max 30 minutes
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Urines de 24 heures
Préconisations pour le prélèvement
La totalité des urines de 24 heures sont prélevées à l’aide de flacons spécifiques fournis par le laboratoire
(avec OU sans acide) (voir tableau page suivante)
Au lever
Vider totalement sa vessie dans les toilettes.
Noter sur le flacon fourni par le laboratoire son nom, la date et l’heure
Pendant les 24 heures
N’uriner que dans le flacon.
Ne pas perdre d’urines en allant à la selle
Garder le flacon de préférence au réfrigérateur pendant la collecte
Au bout de 24 heures
A l’heure notée, vider totalement sa vessie dans le flacon fourni par le laboratoire
Amener le flacon au laboratoire le plus rapidement possible
Urines de 24 heures avec acide SP-0089 Comment recueillir des urines de 24H
acidifiées
Le recueil d’urines de 24H acidifiées se fait à l’aide d’un récipient Uriset 24 avec Monovette® Urine de
Sarstedt.
A. Le matin, au réveil vider la vessie complètement sans conserver les urines et noter l’heure sur
l’étiquette.
B. Utiliser le pot de 500 ml pour chaque miction qui suit. Transvaser chaque miction dans le récipient
de 3 litres à bouchon vert.
C. Après avoir transvasé la 1ère miction, vider le pot d’acide (ATTENTION !) dans le récipient de 3
litres et mélanger doucement.
D. Jusqu’au lendemain, à la même heure, conserver toutes les urines émises dans ce récipient.
La récolte sera complète lors du dernier recueil d’urines dans le récipient de 3 litres, à la même
heure que celle notée la veille. Identifier la récolte en mentionnant ses nom, prénom et date de
naissance ou en collant une vignette de mutuelle.
E. Conserver la récolte dans un endroit frais.
F. Apporter la récolte de 24H complète à la consultation de prélèvements (aile 800 niveau 0) ou au
laboratoire (aile 800 niveau 2).
La demande d’analyse du laboratoire définit dans quel cas il faut utiliser des urines de 24h
acidifiées ou non.
Certaines analyses telles que la créatinine, le calcium, le phosphore et le magnésium peuvent être
réalisées sur des urines acidifiées ou non.
Pour des informations complémentaires, contacter le laboratoire (cfr. SP-0096-Dosages sur urines de 24H: avec ou sans acide)
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Modes opératoires pour les tests dynamiques
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Approbation : Roussel Gatien, Ph.biol. 18 / 39
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Approbation : Roussel Gatien, Ph.biol. 21 / 39
Modes opératoires pour les prélèvements pour recherches
microbiologiques
Les échantillons identifiés doivent être acheminés au laboratoire le plus rapidement possible.
Les renseignements cliniques sont indispensables pour permettre l’interprétation des cultures
bactériologiques.
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PR-0135 Version : 7.4 Date d’application : 2015-10-26
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PR-0135 Version : 7.4 Date d’application : 2015-10-26
Approbation : Roussel Gatien, Ph.biol. 25 / 39
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Bio-pathologie
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MANUEL DE PRELEVEMENT
PR-0135 Version : 7.4 Date d’application : 2015-10-26
Approbation : Roussel Gatien, Ph.biol. 28 / 39
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Bio-pathologie
médicale
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Approbation : Roussel Gatien, Ph.biol. 38 / 39
Elimination des déchets d’activités de soins
Les déchets d’activités de soins à risque infectieux doivent suivre une filière d’élimination
spécifique.
Ces déchets sont :
- Tout déchet biologique provenant de patients,
- Tout déchet présentant ou pouvant présenter une contamination microbienne, tout
matériel souillé par du matériel biologique (exemple : coton souillé de sang)
Des mini-collecteurs pour déchets biologiques sont disponibles au laboratoire sur
demande. Leur élimination peut être assurée par le laboratoire en cas de nécessité.
Ce pictogramme doit apparaitre sur la poubelle :
Transport
Le transport des échantillons, réalisé par les coursiers du laboratoire, est organisé et
effectué de manière à respecter les obligations légales et les exigences de délai et de
température nécessitées pour les analyses.
Références
- « Les bonnes pratiques du prélèvement sanguin », Bioformation
- « Les bonnes pratiques du prélèvement », Bioformation
- « Clinical Microbiology Procedures Handbook », Seconde édition 2004
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