Le point sur les Lymphomes de la Zone Marginale (LZM)

E. Callet-Bauchu

GFCH 04/02/2015

GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique

DONNEES CYTOGENETIQUES ET MOLECULAIRES Résultats des techniques conventionnelles Résultats des techniques de profiling Résultats des techniques de NGS CONCLUSION

GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique

DONNEES CYTOGENETIQUES ET MOLECULAIRES Résultats des techniques conventionnelles Résultats des techniques de profiling Résultats des techniques de NGS CONCLUSION

Les Lymphomes B de la zone marginale

LZMS

MALT

LZMN

Les Lymphomes B de la zone marginale

~10% des LNH B

LZM

70% = MALT

20% = LZMS

10% = LZMN

Maladies rares

Physiopathologie: association à une stimulation Ag chronique

A G E N T S M I C R O B I E N S

Helicobacter Pilori Helicobacter Heilmannii Borrelia Burgdorferi Chlamydia Psittaci Campilobacter Jejuni HCV

MALT gastrique MALT cutané MALT conjonctival IPSID / MALT du grêle LZMS

A U T O A N T I G E N E S

Syndrome de Gougerot Söjgren Thyroïdite d’Hashimoto Pneunopathie intersticielle lymphoïde

MALT glandes salivaires MALT thyroïde MALT poumon

Hétérogène: Estomac (50%), poumon, peau, œil, conjonctives, glandes salivaires, I. grêle, etc… Splénomégalie isolée +/- hypersplénisme, atteinte médullo-sanguine: LZMS

Syndrome tumoral avec atteintes GG sus et sous diaphragmatiques: LZMN LZMS + atteintes GG (hors hile) = LZMS disséminé

Malt de plusieurs organes = MALT disséminé (1/4 des cas)

Atteintes multi-sites (rate, MO, GG, Malt): LZM disséminé

En commun: Absence de symptômes B Absence de facteurs de mauvais pronostic au diagnostic Evolution clinique indolente

Présentation clinique

MORPHOLOGIE: • Histologie : MALT, LZMN, LZMS • Cytologie seule: LZMS (envahissement médullo sanguin)

DIAGNOSTIC POSITIF BIOLOGIQUE

Caractéristiques communes (≠ des autres LNH B) Cellules de taille petite à moyenne Aspect centrocyte-like et/ou monocytoïde, villosités mb Colonisation des follicules Différenciation plasmocytaire

DIAGNOSTIC POSITIF BIOLOGIQUE

IMMUNOPHENOTYPAGE CELLULAIRE • Sur pièce d’exérèse, sur suspension cellulaire, sur SP, MO, etc • Par CMF, par HIC, etc

Caractéristiques communes (≠ des autres LNH B) CD19+, CD20+, CD27+, Igs M (pfs D) CD5-, CD10-, CD23-, CD43-, CD103-, FMC7 +/-, Cyclin D1- Score RMH/Matutès < 3

MORPHOLOGIE IMMUNOPHENOTYPAGE CELLULAIRE

DIAGNOSTIC POSITIF BIOLOGIQUE

CYTOGENETIQUE, BIOLOGIE MOLECULAIRE

Cytogénétique /FISH optionnelle - formes atypiques: . CD5+ . RMH/Matutès >3 - dg ≠ des LNH Spléniques: HCL, HCLv, LPL/WM, SDRPL - formes cliniques disséminées (MALT vs LZM S/N)

DIAGNOSTIC POSITIF BIOLOGIQUE

Statut mutationnel optionnel utilisation préférentielle des segments VH et VL lors du réarrangement VDJ des Ig

Absence de mutations somatiques Présence de mutations somatiques

Pré-CG

Centre Germinatif

Post-CG

Malt (gastrique, gl. Salivaires) VH1-69 LZMN VH4-34 LZMS VH3-23 VH1-2 VH4-34

GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique

DONNEES CYTOGENETIQUES ET MOLECULAIRES Résultats des techniques conventionnelles: Caryotype +/- FISH Résultats des techniques de profiling: a-CGH/a-SNP Résultats des techniques de séquençage (NGS):

• Etudes génomiques: WGS, WES • Etudes transcriptomiques, fonctionnelles: RNA-Seq

CONCLUSION

GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique

DONNEES CYTOGENETIQUES Résultats des techniques conventionnelles: caryotype +/- FISH Résultats des techniques de profiling Résultats des techniques de NGS

CONCLUSION

LNH Malt

LZMS

LZMN

Anomalies de structure de type translocations réciproques

Anomalies de nombre de type gains/délétions

Profils cytogénétiques

différents

1 2

MALT

MALT: distribution des anomalies selon les sites anatomiques

t(3;14)(p14;q32) [2005]

FOXP1-IgH

orbite: 20%

thyroïde: 50%

peau: 10%

+3 (11-75%) +18 (4-25%)

t(11;18)(q21;q21) [1989]

API2-Malt1 [1999]

poumon: 40%

estomac: 25%

orbite: 10%

t(1;14)(p22;q32) [1999]

BCL10-IgH

poumon: 9% intestin: 4%

t(14;18)(q32;q21) [2003]

IgH-Malt1

gl. salivaires 16% poumon: 9%

orbite: 7%

1

Dierlamm 1996

Ott, 2000

Solé 2000

Cunéo 2001

Lyon 2005

31 25 33 14 103

+3/+3q 78,3% 20% 30% 21% 37%

del7q 9% 8% 36% 21% 31%

+18/+18q 39% 8% 0% 0% 28%

del6q 26% 8% 6% 14% 19%

+12/+12q 21% 66% 6% 28% 15%

2 LZM non MALT

Incidence d’associations

Type d’associations

+3/+18

+3/7q

+3/+12

7q/+12

7q /+18

+12/+18

Non-MALT (103)

32 (31%)

19 (18%)

10 (10%)

6 (6%)

4 (4%)

4 (4%)

4 (4%)

LLC/LL (462)

8 (2%) 1 (<1%) 0 4 (1%) 0 0 5 (1%)

LCM (94)

1 (1%) 0 0 0 0 0 1 (1%)

LF (166)

12 (7%) 3 (2%) 0 1 (1%) 1 (1%) 1 (1%) 6 (4%)

Profil cytogénétique des LZM non MALT

Conclusions des données cytogénétiques

ANOMALIES CHROMOSOMIQUES DES LZM ≠ des autres LNH B ≠ entre eux: MALT, LZMS, LZMN similarités: +3, +18

GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique

DONNEES CYTOGENETIQUES Résultats des techniques conventionnelles: Caryotype +/- FISH Résultats des techniques de profiling: a-CGH/a-SNP Résultats des techniques de séquençage (NGS):

• Etudes génomiques: WGS, WES • Etudes transcriptomiques, fonctionnelles: RNA-Seq

CONCLUSION

BLOOD,2011, 117,5, 1595

MALT 57 LZMS 134 LZMN 25 NS 2 ______ _________ MZL 218

Gene Chip Human Mapping 250 K

24% 18% 17% 16%

LZM = entité distincte au sein des LNH B

Genome-wide DNA profiling of MZL identifies subtype-specific lesions with an impact on the clinical outcome. A. Rinaldi & Col. BLOOD,2011, 117,5,

1595

LZM = 3 entités distinctes Fréquence des anomalies communes Présentation des anomalies communes

30%

20%

21%

15%

24%

Genome-wide DNA profiling of MZL identifies subtype-specific lesions with an impact on the clinical outcome. A. Rinaldi & Col. BLOOD,2011, 117,5,

1595

LZM = 3 entités distinctes Présence d’anomalies « spécifiques »

30%

26%

gènes impliqués

FOXP1 NFKBIZ

BCL6 TNFAIP3*

BCL2 MALT1 NFATC1

POT1 MIR29A MIR29B

IRF5

LF BCL2

LDGC BCL6

LCM CCND1

LZM ???????

Conclusions des données de profiling par a-CGH/a-SNP

ANOMALIES CHROMOSOMIQUES DES LZM ≠ des autres LNH B ≠ entre eux: MALT, LZMS, LZMN similarités: +3, +18 gènes impliqués?

GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique

DONNEES CYTOGENETIQUES Résultats des techniques conventionnelles: Caryotype +/- FISH Résultats des techniques de profiling: a-CGH/a-SNP Résultats des techniques de séquençage (NGS):

• Etudes génomiques: WGS, WES • Etudes transcriptomiques, fonctionnelles: RNA-Seq

CONCLUSION

JEM,2012, 209,9, 1537

PLOS ONE,2013, 8,12,1

Leukemia, 2014, 28,1334

NGS (WES) gènes mutés dans LZMS?

Gènes mutés dans LZM et surtout des LZMS :

Gènes impliqués dans développement normal de la ZM - NOTCH (NOTCH1, NOTCH2, SPEN, DTX1) - NF-KB (IKBKB, TNFAIP3,MYD88, BIRC3,TRAF3,MAP3K14) - BCR - TLR

Gènes impliqués dans le remodelage de la chromatine Gènes impliqués dans la régulation transcriptionnelle

« spécifiques » des LZM

« spécifiques » des LZMS

45,8% del7q

30%

34,1%

Gènes impliqués dans développement normal de la ZM

Patients avec mutations de NOTCH2: meilleur pronostic

NF-KB Inactive NF-KB active

KLF2

- mutation

Accumulation de cel B ds ZM

KLF2g: mutations MYD88 mutation TP53

Trois groupes de LZMS selon statut mutationnel de KFL2

KLF2 m: IgVH1-2 del7q NOTCH2m NF-KB

KLF2 +/-: NOTCH2 +/-m NF-KB +/- BCR +/-

Conclusions des données de NGS (1)

LZM ≠ des autres LNH : mutations de NOTCH2

LZM ≠ entre eux : NOTCH2 et LMZS ++

Blood,2013, 122,24, 3899

Apports des données chromosomiques et génomiques

dans le démembrement des lymphomes spléniques

D’après NG. Bailey, Arch Pathol Lab Med 2012, 139, 1295

Conclusions des données de NGS (2)

GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique

DONNEES CYTOGENETIQUES Résultats des analyses conventionnelles Résultats des analyses de a-CGH/a-SNP Résultats des analyses en NGS

CONCLUSION

MALT + LZMS + LZMN = même entité = LZM - pour: AC communes, AC ≠ des autres LNH B - contre: profils CG ≠, statut mut ≠

?voie de signalisation commune

LLC del13q +12 del11q de17p

LF t(14;18) del6q +7 +18 del17p

LCM t(11;14) +3 del13q del1p del17p

MW +4 del6q del13q +18

+3 +18

MZLN

MALT

MZLS

NOTCH2

MYD88

CONCLUSION

t(11;18) t(14;18) t(3;14) t(1;14)

del7q del6q

VH4-34

VH1-2 VH3-23 VH4-34

VH1-69