Le Mylogramme permet d'effectuer l'valuation de l'hmatopose.

Ralisation

Le myelogramme se fait par aspiration du suc mdullaire aprs avoir ralis une ponction l'aide d'un trocart. Cette ponction est ralise sur le manubrium sternal ou bien en crte iliaque supro-postrieure (notamment chez les enfants). L'aspiration doit tre minimale pour ne pas provoquer de dilution. Le suc mdullaire aspir est ensuite tal pour raliser des frottis. Il est possible au pralable de raspirer le sang du prlvement pour ne raliser les frottis quavec les grumeaux. Cette technique, bien que trs prcieuse, est hlas peu utilise car elle peut conduire une coagulation trs rapide du prlvement. Les frottis sont ensuite schs puis colors par la technique de May-Grunwald Giemsa en utilisant un tampon pH 6.9

Dfinition :

C'est un examen qui consiste prlever de la moelle osseuse par ponction et aspiration, pour pouvoir ensuite faire un frottis qui sera color pour tre examin au microscope.

Le prlvement est effectu dans le but de faire :

Une Analyse morphologique au microscope photonique mais aussi pour effectuer d'autres examens complmentaires :

Immunophnotypage des populations cellulaires mdullaires

Caryotype

Biologie molculaire: recherche de rarrangements de gnes

Cultures cellulaires (Progniteurs)

Examens bactriologiques (recherche de BK par exemple)

Matriel de prlvement :

Trocarts usage unique : diffrents modles sont proposs sur le march.

Seringues de 20ml

Lames de verre pour effectuer les talements

Tubes avec anticoagulants (EDTA /Hparine) pour les prlvements complmentaires (cytogntique ; biologie molculaire ; cultures)

Lieux de prlvement :

-Os plats (Sternum ; Os iliaque antrieur ou postrieur) -Epiphyse des os longs (bosse tibiale, chez le petit enfant)

Mthode :

Reprage du lieu de ponction :

Le sternum, est le lieu de ponction le plus frquemment utilis: au niveau du manubrium sternal, juste au-dessus de l'angle de Louis, au centre. Sur un patient en dcubitus dorsal. La ponction peut aussi tre effectue en crte iliaque postrieure, en particulier chez les enfants. Dsinfection cutane en utilisant par exemple de l'alcool iod. Attention on est souvent en situation de risque infectieux majeur.

L'anesthsie locale :

Elle est indispensable et peut utiliser :

Xylocaine 1%. Son injection permet une anesthsie des plans cutans et de la table externe du sternum.

Pommade Emla. Elle doit tre pose entre une demi-heure et une heure avant la ponction. La ponction

Elle se fait en 4 temps :

Le trocart traverse la peau, prend appui perpendiculairement sur le sternum puis traverse la table externe.

Le mandrin est retir de l'aiguille creuse

Une seringue de 20ml est solidement adapte l'embout du trocart.

L'aspiration de la moelle osseuse doit tre brve car elle est douloureuse. Le prlvement :

1 goutte de moelle, pour examen cytologique, doit tre prleve en premire intention, avec une premire seringue, pour viter une hmodilution.

L'talement

C'est une tape importante pour une bonne analyse morphologique.

La meilleure technique d'talement est celle des frottis : La goutte de moelle osseuse est rejete sur la lame de verre, et les grumeaux de moelle rcuprs avec une autre lame de verre et tals selon la technique des frottis. Une autre technique consiste craser les grumeaux de moelle, pour tenter d'obtenir une meilleure concentration cellulaire; mais cette technique risque d'engendrer des artefacts gnants pour l'interprtation cytologique.

Plusieurs frottis doivent tre effectus pour un mme patient : -3 lames pour les colorations standard avec la technique de May-Grunwald-Giemsa, pH6.9 -4 ou 5 autres lames pour des ventuelles ractions cytochimiques.

Les prlvements complmentaires

Ils seront effectus avec une autre seringue qui permettra de prlever plusieurs millilitres de moelle qui seront rpartis dans des tubes contenant l'anticoagulant ncessaire chacune de ces techniques.

Agrandir cette image

Observation

L'observation du mylogramme (aprs coloration de MGG) commence toujours par l'examen des frottis au grossissement X10 afin d'en dterminer la richesse globale, et la richesse en mgacaryocytes.

Richesse

Elle se cte de 0 5 selon l'chelle suivante

0 = Dsert (lorsque trs peu d'lments sont observables et que leur dcompte reste infrieur 100)

1 = Pauvre (lorsque le dcompte dpassera peine 100)

2 = Mdiocre (intermdiaire entre moyen et pauvre)

3 = Moyenne (intermdiaire entre pauvre et riche)

4 = Riche (persistance d'espaces libres entre les cellules)

5 = Trs Riche (lorsque les cellules granuleuses se touchent)

Les Mgacaryocytes

A = Absent (ncessaire d'avoir observ le frottis en totalit)

R = Rares (2 3 mgas sur un frottis observ en totalit)

P = Prsents

N = Nombreux (plusieurs mgas par champs en fins de frottis)

Rsultats normaux du Mylogramme

Richesse : = ou >3

Mgacaryocytes : Prsents

Ligne Erythroblastiques

Prorythroblaste : 0 2% Erythroblaste Basophile : 2-5% Erythroblaste Polychromatophile : 8 15% Erythroblaste Acidophile : 10 25%

Ligne Mylode

Hmoblaste : 1 3%Myloblaste : 1 3% Promylocyte : 1 5%

Mylocyte Neutrophile : 12 18% Mylocyte Eosinophile : 0 3% Mylocyte Basophile : 0 1%

Mtamylocyte Neutrophile : 12 18% Mtamylocyte Eosinophile : 0 3% Mtamylocyte Basophile : 0 1%

Polynuclaire Neutrophile : 25 40% Polynuclaire Eosinophile : 0 5% Polynuclaire Basophile : 0 3%

Ligne Lymphode

Lymphoblaste : 0 1% Prolymphocyte : 0 1% Lymphocyte : 10 15%

Ligne Monocytaire

Monoblaste : 0 1% Promonocyte : 0 1% Monocyte : 2 8%

Autres

Plasmocyte : 1 5%