Microbiologie médicale ECB du LCR

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I- Aspect microscopique :

L’examen du LCR est un examen d’urgence, le liquide céphalorachidien normal est normal est

clair, appelé classiquement « Eau de Roche » et les modifications peuvent donner :

� LCR hémorragique :

Ce qui témoigne d’une extravasation sanguine au niveau des méninges, ceci peut être

visible ou bien mis en évidence après centrifugation, dans ce cas on observe un culot

surmonté d’un surnageant clair, si ce dernier est jaunâtre --> l’hémorragie est ancienne

et il est appelé xanthochromique (Leptosperia).

L’hémorragie méningée est facilement différenciée d’une hémorragie par piqure en

réalisant le prélèvement sur trois tubes (seul le 1er

et parfois le 2ème

contiennent des

hématies dues à la piqure).

� Aspect trouble :

C’est une modification due à une hyperleucocytose ;

- Lymphocytaire : méningite virale ou tuberculeuse ;

- Polynucléaire : méningite bactérienne.

II- Cytologie quantitative :

C’est la numération cellulaire qui se fait soit sur cellule de Malassez ou sur cellule de

Nageotte. Apprécier les leucocytes, les hématies, la présence de bactéries et de certains

parasites et faire la numération (x40).

III- Cytologie qualitative :

Elle se fera après coloration au MGG sur le culot de centrifugation du LCR (détermination du

type de leucocytes).

- 5 mn de May-Grunwald ; rajouter la même quantité d’eau pendant 1 mn ;

- Rincer ; rajouter pendant 15 mn du Giemsa ;

- Rincer ; sécher.

Observer au grossissement (x100), le cytoplasme rose et noyau en bleu, le surnageant servira

à la recherche d’Ag solubles (agglutination de particules de Latex sensibilisées aux Ac

spécifiques aux Ag).

Lorsque le LCR est fortement hémorragique, on utilise la solution de LAZARUS qui :

- Elimine les hématies ;

- Colore les leucocytes.

IV- Culture : Elle se fait sur deux milieux de cultures (gélose à sang frais et une autre à sang

cuit) incubé sous CO2 pendant 24 à 48H à 37°C.

V- Chimie : Elle consiste à faire 3 déterminations :

- Glucorachie ;

- Protéinorachie ;

- Chlorurachie.

La confrontation des analyses cytologiques, bactériologiques et chimiques permettra dans

l’heur qui suit de déterminer le type de méningite.

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Toutefois, il n’est pas rare que pour diverses raisons :

- Mise en œuvre prématurée d’un TRT antibiotique ;

- Rareté des éléments microbiens ;

- Rareté des cellules à l’examen direct.

=>> Le diagnostique étiologique ne soit pas posé.

VI- Caractéristiques des différentes méningites :

LCR normal Méningite

purulente

Méningite

tuberculeuse

Méningite

virale

Aspect Eau de Roche Trouble Claire Claire

Protéïnorachie

(0,3 < N < 0,5 g/l) < 0,30 Jusqu’à 3 g/l Jusqu’à 1 g/l

Elevé mais <

1 g/l

Glucorachie

0,42 < N < 0,74 N Inférieure ou 0 Diminuée Normale

Chlorurachie

120 mEq/ml 120 m Eq/l Normale Normale ou basse Normale

Cellule/mm3 0 à 2 C/mm

3 > 10

3 C/mm

3 100 – 500 C/mm

3 ≈100 C/mm

3

Type cellulaire Mononuclée PN LYM LYM

Présence de

bactéries. Négative (+) (+) Négative

Présences de

bactéries après

culture.

Négative (+) (+) Négative

• Cas particuliers :

- Si le LCR est normal alors que la glucorachie est élevée (diabétique) ;

- LCR pauvre en éléments nucléés et riche en germes => Méningite débutante ;

- Méningite à Listeria => la formule est mixte (formule panachée PN + LYM).

VII- Identification des germes :

Elle est basée sur l’aspect macroscopique des colonies + Gram :

- C GN � Neisseria meningitidis (grain de café) ;

- C GP � Streptococcus pneumoniae (en flamme de bougie) ;

� Streptococcus β hémolytique grp B surtout chez le nouveau né (chaînette) ;

� Staphylococcus aureus (coagulase +)(grappe de raisin) ;

- BGN � E. Coli de sérotype K1 ;

� Pseudomonas aeruginosa ;

� Haemophilus influenzae ;

- BGP � Listeria monocytogenes ;

- Bactérie spiralée � Treponema pallidum ;

� Leptospira interrogans ;

- Agents mycosiques � Candida albicans ;

� Cryptococcus neoformans ;

- Ne pas oublier les amibes libres (Acanthamoeba & Neglerria).