53 AL AWAMIA - N'82 - Septembre 1993

DEVELOPPEMENT SAPROPHYTIQUE DUFusarium oxysporun f.sp. albedinis

DANS DIFFERENTS SOLS DE PALMERAIESET ACTIVITE ANTAGONISTE DE QUELQUES

MICROORGANISMESSUR SON COMPORTEMENT

. SEDRA My H., et BAH N.,*

tr -r, Lrl J-\_rJ\ o**ô: *

-t'll :I.,-*

Érf.JI cÈ_," .rL* ,.11."+"_?.-J\jF\ iS\-t\ cÈ\-r"$ \Jil\ iij\.i.ô{ r:\-?\\

o5\,r^ +-" ôl +!-Jl L1:bJS-J i1J:Jl çp F+l;*Jl ËE ,-r!F dB ùJ:L ': rr ii ,l-L" i .' . . o l+5i19 L-J.jiJ\9 ir-,L.Àjl Ê$lr+l ù- Jé\ lc.rc 6e-:! J

.Èr-1]"ùi-ui - .îl'uÀæYl, iri3lg ôJéli islg

6721 6tr- I>\, i-;,r-à i=-"yr-lrqijl F+tlJ+il i-!|l-:J J.r -.,_!-ir-g

/,t-ër-? 26941 rr35t3 +y .* .r-3s a.rJl ù+ dly" 4 (rt* JS çt' Le._,+

.lâ*g o3 gJJl {JÊ cÈ9+tJl gèJ .#-l\ x'l'JÀ;ll ôJ.r--g ijJu-. 'r'. /(rlJj

,â.ijl ôJ.I3 J.tr-. .rl .j-i .\-.hjj\ i.*r:*lj d\S " s i-t,;:lJ r+> û+ .é-,-

e. i i fu.Léyl, i - . t l l çÀ/.68,73.6rél j . .J çr3I 100 ètià JdJt "J-,\FÀt\.ulSi-" ^.rr q's r

-:i 110

,{ j À+;J\ , j (rs+-s.r+o)' l5Jls 1,,S959éUl) rÀi l \ d6-s+ 661 i , . . , : gl?' / .241 .Lnr,t ^vl, LFIJ (t.gLZ J\ /. 40) 6ré\_., +j , '-s ,é\ 8JIFL L,:-\ l

ei:ô? é t,..,: l l 5.16 eë.rs.cr5\J," -*,l os

t{âL Jêll r,..: l l ôi^ (/.48 J\.X+!l Ê.i-: Lu:- cYull

!F\ Jl _-.l"jûj iot 'tl i1;iSJl Ê$lJ+ll ét .'r Lôr':^ o;Î i.-'-U 6-.'t. 1,2 6 J.cl Jl dtÀ-9+Jl ;!t,:l r...,: oà.ijilJ ,i-.i,ll

çI{llâJI --hjjl }ô !# --ls Y.Êsly +-,. O\ qil-b>yll ôÀÀ ôû+J liÀ.o-,Loo3l J-l-* JS ç+

.i-i-""à'JI o\3JI9 "!-rJ\ "- t$ .istiLaYlr qll *

Qv /l v) (SableÆourbe)** Fusariwn orysporum f.sp. albedinis

,rét"3 ,c-ràl:.)I) i.jjl L"Jli^.Fl J#.1 ,c'àJ*rjl cpJj' x.-rlra- ctJ<.qJ:5t1.çJYr-l e1s.s

* Laboratoire de Pathologie Végétrl€ - Mycologie. Centre Régional du Haouz-Pré-Sahara .INRA . 8.P. 533. Marrakech. MAROC.

ALAWAMIA - N'82 - Septembre 1993

RESUME

- L]apsençe du Bayoud dans la palmeraie de Marrakech peut être expliquée parles phénomènes de résistance des sols aux fusarioses vasculaires. t'esûimàtion Aeladensité-et la composition de la microflore des sols étudiés montrent que lessols de Marrakech sont plus riches en flore fongique, bactérienïe etactinomycétale qu-e le sol le Tagom et le substrat reCeptifs au Bayoud. L-adensité_ moyenne de la population du Fuscn'urn est4 fois moins importânte dansle sol de Manakech (672 propagules par g du sol sec) qu'en sol deZagora (2694?gPagules par g du sol sec). Dans le mélange: sol à tester et lè milieu àcoloniser (4y!v),l'indicg moyen de colonisatiôn saprophytique du Fusuiumorysporutn f.sp, albedinis atteint 100 7o dans le sol de Zagora,6,7 Vo dans lesubsFat et seulement 10 7o dans le sol de Marrakech. læs pourcentaees degermination des macroconidies et chlamydospores du parasite piacées au ôntactdes sols non traités à la chaleur sont plus importants dans lés sols de Zagora(9,2,2 V9 et 4O Vo) et le substat E (48 7o et 24Vo) que dans le sol de Manaliech(21,4 Vo etIVo). Ces pourcentages de germination âugmentent considérablementet deviennent non différentiels lorsque les sols sont traités à la chaleur.L'infestation des sols préalablement autoclavés avec les bactéries antagonistesfait diminuer nettemeni le pourcentage de germination des spores Ou pàrasite amoins de 12 Vo. Ces observations laissent à penser que les sols de la palmeraie deMarrakech sont moins favorables au développement du F.o. Îsp. abeAinis .

MOTS CLÉS : Fusarium oxysporarn f.sp. albedinis, Phoenix dactylifera L.,résistance des sols aux maladies, Antagonisme, Pseudotnorras fluorescents,colonisation saprophytique.

55 AL AWAMIA - No 82 - Septembre 1993

ABSTRACT

The Bayoud absence in Marrakech palm grove may be explained by thephenomenon of the soils resistance to Fusafium wilt. The estimation of thedensity and the composition of the soil microflora shows that Manakech palmgrove soils are richer in fungal, bacterial and actinomycetal flora than Zagorasoils and the Bayoud conductive substratum. The average density of theFusartum population is 4 times less important in Marrakech soil (672propagules per g of dry soil) than Zagora soil (2694 propagules per g of drysoil). In the mixture : soil to be tested and the medium to be colonized (4v!v),the average index of saprophytic colonization of Fusarium oxysporum Î.sp.albedinis reaches IA0 Va inZ,agora soil, 68.7 Vo in the substratum and only 10 %in Manalçech soil. The germination percentage of the parasite macroconidia andchlamydospores put into contact with soils that are not feated with heat aremore importantinZ,agora soils (91.2 Vo and40 Vo) and the substratum (48 7o and24 7o) than in Manakech soil (21.4 7o andO 7o). These germination percentagesincrease considerably and become non differential whén the soils-are treaiedwith heat. However, the infestation of the soils that are previously autoclavedwith antagonistc bacteria decreases clearly the germinatiôn perceritages of theparasite spores to less than 12 7o. T\ese observations suggést that Marrakeshpalm grove soil are less favourable to F.o. f sp. albedinis development.

KEY WORDS : Fusarturn oxysporum f.sp. albedinis, phoenix dactyliftra L.,suppressive soils, antagonism, Pseudomonas fluorescent, sàpiophyticcolonization.

56 AL AWAMIA - N' 82 - Septembre 1993

INTRODUCTION

Le paknier dattier (Phoenix dactylfera L.) constitue l'élément fondamentalde.l'écosystèmg oagiel_. Il._est exposé à I'afiaque d'une grave maladie "Bayoud"qui a détruit.plus.de l0 millions de palr,nigrs âu Maroclpereau-Leroy, tq3g) etplus dg Fois millions d'arbres en Algérie (Djerbi, tggZ) . Cetié mal:âdrevasculaire causée par Fusarium oxysporun f.sp. albedinis constitue uner:nenace pour les palmeraies de la Tunisie et les aubes pays producteurs dedattes.

Les sratégies de lutte poursuivies consistent en I'utilisation des cultivars etclones résistants au Bayoud . (Louvet et Toutain, 1973 ; Saaidi et al., I9gI,Sedra, 1990a).

--LapréTnce decertaines palmeraies encore indemnes au Bayoud, notammentcelle de Manakech a permis I'ouverture d'une voie de recheiche sur les solsnaturellement résistrnts à la maladie (Sedra et Rouxel, 1989 ; Sedra, 1990b) .Cette résistance peut être due à la texture argileuse du sol etlou à la présence âemicroorganismes antagonistes au parasite (Sedra et Maslouhy, l992ab) . Cesderniers auteurs ont isolé à partir des sols de la palmeraie de vtarrakéch desbactéries antagonistes appartenant au groupe de Pieudomonas fluorescents quiexercent in vitro une action inhibifice sur F.o.fsp. albedinis Dendant lesdifférenæs phases de sgn développement . Plusieurs auteurs ont mohné que lesbactéries jouent un rôle primordial dans la résistance des sols aux fusâriosesvasculaires (Arjunario, l97l ; Tu et al., 1975 ; Scher et Baker, l9B2;Iæmanceau et al,1988 ;Park et al.,1988) .

D'autres chercheurs ont démontré que la population de Fusarium saprophytesont des responsables majeurs de cette résistance des sols (Rouxel et aI., lgTg ;Alabouvette et al.,1983; Tramier et al., 1983; Schneider, 1984 : Amir et Amir.1988).

Dans cet article , notre étude consistait dans un premier temps à estimer ladensité des populations de ces différents groupes de microorganismes dans le solde Marrakech et de Za;gora ainsi que dans un substrat préparé au laboratoire et àévaluer la colonisation saprophytique du F.o. f..sp. albedinis dans ces sols . Dansun deuxième temps, nous avons évalué I'action de certains microorganismesantagonistes isolés des sols de Manakech sur le comporlement des spores duparasite placées au contact des sols étudiés .

MATERIEL ET METHODES

Estimation de la densité de la microflore des sols

læ dénombrement microbiologique est effecûré sur le sol de Marrakech(M2-A), un sol de Z,agon (D19-E) et un substrat E pépaé au laboratoire(tableau I) . Iæ substrat et le sol & Zagora sont réceptfs aux fusariosesvasculirires tandis que le sol de Marrakech est peu réceptif à résistant (Sedra etRouxel" 1989).

51 AL AWAMIA - No 82 - Septembre 1993

Tableau I : Quelques caractéristiques des sols étudiés .

texturel c /NS o I

a r rakech Mz -A

ago ra D19 -E

ubstrat El suBs

p récéden to r éôep t i v i t tcul tural - ' aux

fusa r i osesvascu la i r s

a rg i l ense 8 t 3

equ i l i b rée 8 . r 6

- 7 r l

9 r 2

7 r l

o rge

o rSe

rés i s tant

récep t i f

t r èsrécep t i f

I : texture détérminée selon le diagramme textural établi par U.S.D.A( Anonyme, (1951) ) .2: prc*éÀentculturar de ra culture associée au palmier dattier.3 : substrat préparé au raboratoire = mélange de sable et de toube (rvr2v) .

D'auFes caractéristiques de ces sols sont présentées dans le tableau I . Troiséchantillons de 2 Kg par sol (6 kg de terre) ont été prélevés à une profondeursituée entre 2O et û cm et distants de 2 m du pied d'un palmier . Un kg de terremélangée de chaque sol a été pris au hasard et subit une série d'opérationssuccessives de conditionnement selon la technique proposée par Rouxel etBouhot (1971) . Les particules de tene ont finalement un diamèFe inférieur ouégal à 100 pm . Un gramme de terre conditionnee et homogénéisée est mis ensuspension dans 100 ml d'eau distllée stérile . Iæs dilutions l0-2, 10-4 et 10-6sont utilisees pour dénombrer respectivement les populations du Fusarium, deschampignons et des bactéries-actinomycétes . Iæs milieux respectifs utilisés pourisoler ces microorganismes sont le milieu de Komada (1975),le PDAI actidifié àbase d'extrait de pomme de terre et de glucose et le PYA2 à base d'extrait delevure et de peptone . Neuf boites par diluton et par milieu ont été utilisées .Chaque boite est ensemencée par 0,5 ml de la suspension de terre et 14 ml dumilieu sélectif . Le dénombrement des colonies est réalisé après sept joursd'incubation pour les Fusarium spp., quaFe jours pour les champignons diverset deux à tois jours pour les bactéries-actinomycétes .

Evaluation de I'indice de colonisation saprophytique de Fusartumo xys po rum I sp. albedinis

L'isolat Foa 133 du parasite utilisé a été choisi pour son grand niveaud'agressivité sur les plantules du palmier dattier (Sedra, 1992) . L'étude de

1 : PDA : milieu de culture préparé au laboraûoire à base d'extait de pomme de terre(250 ell) et d'agar (2O cll) (pH = 4)2 : PYA : milieu de culture préparé au laboratoire à base de pepûone (6 g/l), d'extait delevure 3 gû et d agar (20 eA) .

AL AWAMIA - No 82 - Septembre 1993

I'aptitude du parasite à la colonisation saprophytique est réalisée dans les sols depalmeraie et le susbstrat précités . La méthode d'étude est inspirée de celle deRao (1959) et appliquee par Rouxel (1978) pour érudier la colonisationsaprophytique du F.o. f.sp. melonis . Le principe de la méthode consiste àévaluer I'aptitude du parasite parmi d'autres microorganismes du sol à coloniserun milieu donné. Ce milieu composé du sable et la farine du maïs renfermant leschlamydospores du F.o. f.sp. albedinis est mélangé au sol à tester dans lesproportions 0,U4, 12, 3/4 ou 1, puis incorporé dans une eau gélosée . Despastilles de 6 mm de diamètre prélevees de cette eau gélosée sont placées dansdes boites de Petri contenant chacune 14 à 15 ml du milieu Czapeck stérile . Lesboites sont incubées à 25' C, d'abord U h à I'obscurité puis exposées à lalumière fluorescente artificielle continue pendant six à sept jours . La surface dela culture colonisée par F.o. T.sp. albedinis ou autre champignon est évaluée etexprimée en pourcentage correspondant à I'indice de colonisation saprophytque(rcs).

Etude de la germination de différentes spores du F.o. Î.sp. albedinisplacées au contact des sols infestés ou non avec les antagonistes .

[æs sols M2-A de Marrakech, D19-E deZagora et le substrat E (subs), ontfait I'objet de cette étude . [æs microorganismes antagonistes utilisés ont étéisolés des sols de Marrakech et étudiés par Sedra et Maslouhy (1992a) . Ils'agissait des bactéries M-Bl, M-B2 et M-83 apparænant au Pseudomonasfluorescents et un actionomucéte M-Al . L'inoculum de ces microorganismes estproduit sur milieu gélosé PYA Iæs cultures développees de chaquemicroorganisme sont recupérées et mises en suspension séparément dans un litred'eau distillée stérile . Environ 3 kg de chaque sol préparé et conditionné sontautoclavés deux fois à llO"C à intervalle de 2 heures . Chaque lot de sol estréparti en petits échantillons de 500 g puis infestés séparément avec différentsantagonistes (3 x 106 progaules par g du sol), le témoin est traité avec I'eaudistillée stérile .

Sur le milieu PDA, le F.o. lsp. albedims produit essentiellement desmicroconidies . Afin d'obtenir des macroconidies suffisantes, nous avons essayéde récupérer les macroconidies au premier isolement du parasite à partir despalmes atteintes de Bayoud . læs jeunes cultures développées à la surface desfragments du rachis sont exposées à la lumière fluorescente une semaine pourfavoriser la production des macroconides . Celles-ci sont récupérées puis misesen suspension dans I'eau distillée stérile . Cette suspension est conservée auréfrégirateur (4"C). Une partie de la suspension est utilisée pour produire deschlamydospores selon la æchnique préconisée par Messiaen et Cassini (1968).

L'étude de la germination des macroconidies et des chlamydospores du F.o.f.sp. albenidis placées au contact des sols est réalisée selon la technique décritepar Adams (1967) et appliquée par Rouxel (1978) pour étudier la germination duF.o. f.sp. melonis. Le principe de la méthode consiste à étaler une suspensionde spores sur une membrane millipore (O = 0,4um) sous vide . Chaquemembrane est entenée dans des flacons contenant le sol normal ou infesté avecchaque antagoniste læ sol est humidifié à la satuxation . Après 24 h

AL AWAMIA - N" 82 - Septembre 1993

d'incubation des flacons (25' C), des membranes sont retirées, rincées etcolorées . Les préparations sont éclaircies puis montées enhe lame et lamellesous microscope . Læ taux germination exprimé en pourcentâge moyen estestimé par rapport au nombre total de propagules observées (400 à 500propagules) . La longueur des tubes germinatifs des spones a été aussi mesuÉe .Dans un essai préliminaire, l'étude de la cinétique de la germination desmacroconidies du parasite a étÉ, réùisen seulement dans les sols de Manakech etdeZagora (24h,48h et 72h dincubation) .

RESULTATSComposition et importance des microorganismes présents dans les solsdes palmeraies étudiées.

Le tableau II montre que la densité des populations du Fusarium dans le solde Z,agora (2694 propagules par g du sol (ppgs) est nettement plus élevee quecelles du sol de Marrakech (674 ppgs) et du subsûat (846 ppgs) . En effet, ladensité moyenne de la flore fusarienne est 4 fois moins importante dans le sol deMarrakech que dans le sol de Zagora. L'espèce Fusariam solani est la plusreprésentée dans tous les sols . Le sol de Marrakech résistant aux fusariosesvasculaires est plus riche en flores totales fongiques, bactérienne etactionmycétale que le sol de Zagora et le subsffat réceptifs à ces maladies .

Colonisation saprophytique du parasite et d'autres espères fongiques

læs résultats présentés dans le tableau III montrent que I'indice decolonisation saprophytique (ICS) du F.o. Î.sp. albedinis défini précédemmentaugmente généralement quand la proportion de I'inoculum dans le mélange (sol+ inoculum) augmente . Il demeure cependant très faible dans le cas du sol deMarakech même si cette proportion atteignait 3/4 .En effet, dans ce cas,I'ICSdu parasite atteint l00%o dans le sol de Zagora,68,7 7o dans le substrat E etseulement l0 7o dans le sol de Marrakech . Quant aux autres espèces fongiquescolonisatrices, il paraît que I'espèce Aspergillus niger présente I'ICS le plusélevé dans tous les sols étudiés . Trichoderma spp. ne montre son pouvoircolonisateur que dans le sol de Manakech avec un ICS variant de I&,lVo à20Voquelle que soit la proportion de I'incolum dans le mélange .

Effet du sol et des antagonistes sur la germination des macroconidieset des chlamydospores du Fusarium oxysporurn f .sp. albeilinis

I.a figure 1 montre que les pourcentages moyens de spores (macroconidies etchlamydospores) germées dans le sol de Zagora (91,2 4o et40 Vo) et le subsEat E(48 7o et24 Vo) sont plus importants que dans le sol de Marrakech (2I,4 Vo et07o). Lorsque ces sols sont traités à la chaleur, aucune différence nette nh étéobservée enFe les pourcgnt4geji de ge-rmination des spores . Ces pourcentagesvarient en fonction iles sols &16 Eoâ9s Eo pour les màcroconidies et de 70 qo à857o pour les chlamydospores . Les tubes germinatifs des macroconidies sontgénéralement plus longs dans le sol de Zagora que dans le sol de Marrakech .

60 AL AVYAMIA - No 82 - Septembre 1993

t

f E rl o \

8 X* ?f 8!| l,fË sI

'l

C)èoC)

oèo

()s)

I

X g'H,E râ H 1€ 1 F

EE:. r Ê ràr's <

q ' 2 ^

d € Ë .

i :: âË 9..î s. = O F É

l'i iit!Ë { H; tE,ËËËc.$: k " çû : ê t

EE:T5.aiËE€ëËË i Ë Ë8 9 ? É' | ' 6 = c t

F E.E.EË Ë i EEËâArHÉS! ! ô î '

ËË1ËËE3s

À ! t - c g

.;èô&

t-

f pT F

Ë ûl F <

!l 'q,

- F q< F r

i ( n

EI

t

q)èooc)èo

oO

É

61 AL AWAMIA - No 82 - Sepûembre 1993

aô|

g

I

o\

N

3

&Fr(h

aâ

(9oo6)

(9eo

o

8 8 8 8 3 3 8 9 9 0

62 AL AWAMIA - N" 82 - Septembre 1993

En effet, ils atteignent 90 pm, soit 4,5 fois la longueur moyenne d'unemacroconidie dans 40Vo des spores germées dans le sol de Zagora, tandis quedans le sol de Marrakech, ces tubes germinatifs ne dépassent pas 30 pm pour 907o des spores germées (Tableau IV) . La figure 2 montre que le poucentage degermination des spores du parasite diminue en fonction du temps aussi bien dansle sol de Zagora(37,4 Vo en24hà 15,6 Vo en72h) que dans le sol de Manakech(6 Vo en 71 h à 3,1 Vo en 72 h) .

Tableau II : Densité et composition de la microflore des sols étudiés despalnerai€s.

i c r oo rgan i smes MarrakechM 2 - A

Zago raD 1 9 - E

SubstratSUBS.

2 2 b

442 b

8 c

1 6 0 b

6 7 2 b

2 1 6 a

1 5 3 0 a

5 1 6 a

432 a

2694 a

1 6 0 a

3 5 6 b

1 8 9 b

1 4 1 . b

8 4 6 b

F. oxysporum

F. so l " an i

F . non i f i f o rne

F' , roseum

To ta I Fusa r i u tn sPP .

F l - o re f ong iquet o t a f ( e n m i l l i e r s )

1 7 0 0 bt é r i e s e t

t i no rnycè tes( en rn i I I e r s )

3 0 2 1 a r 7 0 1 bm i c r o f l o r et o t a l e ( e n m i J - l e r s )

I : hincipales espèces dominantes du Fusarium. La densité moyenne despopulation-s microbiennes est exprimée en nombre de propagules par g de solsec.Les chiffres suivis de la même lettre sur la même ligne ne sont passignificativement différents pour p = 0,05 ( test de Newman et Keuls ) '

63 AL AWAMIA - N" 82 - Septembre 1993

c i EÂ , =

ËgË: p Ë +ç F.E- l ô ÈË'g e

J L O> ' t r Éc r x !'19 ( )^q o> .2

ç Ë.8a . = e )q2 vê

= i j 6

n 3*':= q

. g > :b 0 o [ rÊ 9 . . r- 'É àI Ë. ;,v,,8 6B-x€a c q ' É

3 É *o x ( !

È.8 +i à k @

5 a 'H* ô t râ = =N - V

o FL r 'Ë

Ë E €Ë E e; a Ë9 C ) ( )

È 6 =6 6 €ào. cÈ = . 9- l J Fc ) v F ô

. 9 ç ! É ô

E E F E' . N . . , €

3eOE

(t)c)g)

\c)

v)(D

-(u.3ÈÈq)aci

q

d

ËÈaÈ>

q3

E

q)

>.

G t Oo u )

. ë Ed Lo :q,

O u 19 te ) c !

3 8. - =E .gË à o

O

L.

o0)

. t4

a

q0)

,Y .

oq)

\q)

(.)aq)

. F

F

a.)X a9 F

T t a' F

F

o

t a a

é ô

o o .

ô @

a

= t à

( ) ç q

û -< Ëa

èoH

â ' ;o< ' Ë

aa ' . ! lâ.=d _ 8

1 r ' -

R o o o o o

rn C{ F- Ct lnÉo 5 -iolc.i \d ôir n r ô * c ô \ O . f , l r ) Q - O O O

t ô r n r ô ^ F -e lo r - c - r - c5o< j è5è55Ê r ô ( ) d O O C ô Ê * \ O È È d

\æO Q Ê

a\co

r-co

ô.1Ê̂

r - ^

c-ca

ôt ôl t--'rl -î -iô{odt ' - O O c . . l O O Ê \ O Ê

Ô T A A N O O

tôô1 ^ôi\i5f \ r n i

(t):8H :38 T iE :ËE i8E> à 6 > à - , n > â - o > À / A > À A

ôtE V

. 9 8

d Pt É

-

{.eô

el{.

AL AWAMIA - No 82 - Septembre 1993

Tableau IV : Développement des tubes germinatifs des macroconidies duFusartum oxysporumf. sp. albedinis palcées au contact des solsétudiés .

Longueu r ( pm)des t ubes ge rn i -na t i f s dgs mac ro -c o n i d i e s '

pou rcen tage moyen des "spo res ge rmées dansl - es so l sÉ

Za€,ora Substrat E MarrakechD19-E SUBS l t l2-A

1 0 - 1 5 ,( 0 , 5 - 0 , 7 5 ) ' �

5 0 - 6 0( 2 , 5 - 3 )

8 0 - 9 0( 4 - 4 , 5 )

0

6 0

4 0

0

7 3

2 7

6 0

1 0

0

I : l"ongueur (pm) des tubes germinatifs des macroconidies mesurée âprès 24 hd'incubation à 25 'C .2 : Pourcentage moyen calculé à partir de 4 répetitions de 100 à 150 sporesgermées, placées au contact des sols de Marrakech M2 A, Zagon D19-E et dusubsfat E .3 : Rapports de la longueur des tubes germinatifs des macroconidies sur lalongueur de celles-ci présentés entre parenthèses .

Dans les sols autoclavés puis infestés avec les microorganismes antagonistesat F.o, f,sp. albedinds, le pourcentrage moyen de germination des spores duparasite diminue par rapport au témoin (Figure lA,B,C) . La plus forte actioninhibitrice de la germination des spores du parasite est exercée par la bactérieM-Bl dans le sol de T,agora et le substrat .

Le pourcentage moyen de germination des spores est inférieur à l2Vo enprésence individuelle des microorganismes exceptée la bactérie M-B2 quimontre une action relativement faible dans le substrat . La présence de tous lesantagonistes ensemble dans les sols diminue nettement le pourcentage degerminaton des spores du parasite .

DISCUSSION

I-es résultats exposés dans cet article ont permis de comparer les aptitudes dedifférents sols à favoriser ou inhiber la germination et le déveloprpementsaprophytique du F.o. Î.sp, albeilims La densité et la composition desmicroorganismes présents dans ces sols ont été aussi comparées . Il paraît que lesol de Marrakech est le moins favorable à la germination des macroconidies etles chlamydospores du parasite et le plus riche en bactéries et actinomycètes .

AL AWAMIA - No 82 - Septembre 1993

Fig 2 : Effet du temps d'incubation sur la germinatipon des macroconidiesde F usarium oxysporum f. sp. albedinis placées au contact des sols deZagora (D19-E) et de Marrakech (M2-A) .Chaque point correspond à la moyenne (et écart-type) despourcentâges de conidies germées calculés sur 500 à 600 conidiesobservées soit 4 répétitions de f00 à 150 conidies chacune.

5 : o' I

' =rC,,

ë 2 0(,à0

A1L

o l n

1t48heures

ffiMarakech (M2-A) %zaaop,A (D19-E)

Sedra et Besri (1990) ont monhé que les sols de Manakech sont défavorablesà la^germination d'autres formes spéciales de F. oxysporum . ces observationsconfirment encore les résultats que nous avons obtehus (Sedra et Rouxel, l9g9)et laissent à penser qu'il existe dans ce sol des phénomènes intenses défongistase ou d'antibiose qui agissent sur les activités du parasite . plusieurs3u!gur.s 9nt rqppo_ rté que ces phénomènes en plus de la compétition peuvent êtreà I'origine de la résistance- des sols aux-maladies (Li^n et Coot. tgZg :,fla@qygtte et al., 1983.; Sabou et al., 1983; Elad et Baker, l9g5) . Rouxel eial.. (1979) ont montÉ que la flore fusarienne saprophyte j<iue un rôlepr,épondérant dans la résistance des sols de châteaurenâr0, te rôle des bactériesthermo-Ésistants n'étânt pas négligeable . l.emanceau et al. (1988) ont élucidé lavéritable synérgie entre ces bactéries etles Fusafium oryiporum et F. solanisaprophytes qui exercent un antagonisme puissant c-onne les Fusariumoxysporum pathogènes . Pour Rosenwig et Stotzky (1979),1'antagonisme exercé

66 AL AWAMIA - N' 82 - Septembre 1993

par quelque.s bactéries du sol sur des champignons semble dû principalement àune co,m$tition pour la source de carbone .Park et al. (1988) ont monhé que lacompétition enfre les bactéries (groupe Pseudomonas et les f'. orysparumpathogènes s'exerce pour le fer disponible . Dans le cas des sols de Màrrakech,I'abondance exceptionnelle des bactéries nous a conduit à leur attribuer un rôlep_répondérant dans feq phénomènes d'antagonisme . En 1989, Sedra et Maslouhy(1992a) ont détecté dans ces sols des bactéries (M-Bl, M-B2, M-B3, M-B4 étM-85) antagonistes au F.o.f.sp. albedinis . Ces bactéries appaftenant auxgroupes des Pseudomonas fluorescents exercent in vi.to une action inhibiFiceremarquable . L'infestation artificielle avec les bactéries M-Bl, lN'f.-82, M-83 etI'actinomycète M-Al des sols de Tagora et du subsfrat préalablement stérilisésp_ar la chaleur, fait diminuer fortement le pourcentage de germination des sporesdu F.o. tsp. albedims et surtout avec la bactérie M-Bl . Certaines aCtionsinhibiftices des bactéries exercées sur les chlamydospres du F.o. fsp.cucumerium ont été élucidées par Sneh et aL (1984) . L'inhibition de lagermination des chlamydospores du F. oxysprum a été aussi observée dans lessols résistants de Salinas (Smith, L977) et de châteaurenard (Alabouvelte et aL,1980).

L'évaluation de I'indice de colonisation saprophytique (ICS) du F.o. fsp.albedkis montre que I'ICS du parasite est plus iaiuie-caris led soÉ de Marrakerihrésistants que dans les sols de zagora et le subsEat réceptifs aux fusariosesvasculaires . En France, Rouxel (1978) a constaté que le développement du F.o.Îsp. melonis se ralentit en sol résistant qu'en sol sehsible . Ces iésultats laissentà_penser qqe_dans leq so$ de Manakech, il existe des microorganismes beaucoupplqs aptes à la colonisation saprophytique qqe ceux qui habitent le sol de T-agoraet le substat . Ce substat s'est avéié lè meilleur sur-13 subshats comparés fourleur aptitude à maintenir la densité du F.o. Î.sp. albedinis (Sedra, 1993; . Nousavons constaté.qry Trlch_derrna spp, parmi les autres espèces fongiques,présenæ un indice de colonisation saprophytique assez important dans ltsol deMarrakæh seulement . Læ rôle de certaines espèces ût Trichodenna dans lecontrôle des maladies Al*ig^t!ç tellurique est tès connu depuis longtemps (Chetet al.,1979; Hadar et al., L984)

[æs résultats présentés dans ce ftavail à savoir I'abondance exceptionnelle desbactéries dans le sol de Marrakech, la forte fongishse ou antibiose qui sbxercentdans ce sol et probablement la puissante compétition observée entre lesmicroorganismes en dépit du parasiæ, permetraienf de contribuer à l'élucidationde certains aspects de mécanismes de résistance de ce sol aux fusariosesv.asculaires y compls le Bayoud . II est par uil!"*r nécessaire de se_pencher surlétude des interactons microorganismes parasite et plante-hôtes afin déluciderles causes physico-chimiques ou microbiologiçes qui conditionnent le maintiende léquilibre microbien responsable des mécanismes de résistance auxfusarioses vasculirires des sols de la palmenaie de Marrakech .

REMERCIEMENTS

Nous remercions le professeur M. Besri (IAV-Hassan II Rabat-Maroc) et Dr.F. Rouxel (INRA-Le Rheu - France) pour leurs remarques précieuses etsuggestions emichissantes.

ALAWAMIA - N" 82 - Septembre 1993

REFERENCES BIBLIOGIPHIQUES

ADAMS, P. B. 1967 . A buried membrane filter method for studying Behavior ofsoil fungi. Phytopathology,57 : û2-û3.

ALABOIJVETTE, C., COUTEAIJDIER Y. et J. LOtryET. 1983. Importancedes phénomènes de compétition nutritive dans I'antagonisme entremicroorganismes, p. 7-16. In Les antagonismes microbiens, Modes d'action etapplicatons à la lutte biologique contre les maladies des plantes, hoceeding24ème Coll.Soc. fr. phytopathol., Bordeaux, France 26-28Mu 1983. Bordeaux,France.

ALABOUVETTE, C., ROU)GL F. et J. LOWET. 1980. Recherche sur larésistance des sols aux maladies. VIL Etude comparative de la germination deschlamydospores de Fusarium oxlsporum et Fusarium solani au contact desols résistants et sensibles aux fusarioses vasculaires. Ann. Phytopafhol, 12 :2r-30.

ANOI{YME, 1951. Soil Survey Manual, U.S. Department of Agriculturc HandBook, n" 18, Washington.

AMIR, H. et A. AMIR. 1988 . Le palmier dattier et la fusariose XIV .Antagonisme dans le sol de souches de Fusari.um solani vis-à-vis de Fusariamorysporumfsp. olbedims. Rev. Ecol. Biol. sol.,25 : 16I-174.

ARIUNARAO, V. 1971. Biological contol of cotton s,ilt m. In vivo effect ofantagoniste of the pathogen Fusariam vasinfectum. hoc. Indian. Acad Sci.Sect. B..74: 53-62.

CI{ET, I- HADAR T., ELAD Y., KATAN J. et Y. IIENIS. 1979. BiotogicalgoJrhol of soil-borne plant pathogensby Triclwderm ,unzianana p.585-59-1. In_S_chippers B. and Gams. (ed). Soil-Bome plant Pathogens, Academic Press. NewYork

DJERBI, M. 1982.Iæ Bayoud en Algérie, problèmes et solutons. FAO Regionalprojet for palm and dates research cenûe in the Near East

ELAD, Y. ET R. BAKER. 1985. The role of competition for iron and carbon insuppression of chlamydospore germinafion of Fui,arfum spp. DJ pseadomonasspp. Phytopathology, 75: 1053- 1059.

HADAR, Y., HARMAN G. E. et A.G. TAYLOR. 1984. Evaluarion ofTrichoderma koningii and, Trbhoderma hanianam from New yuk soils forll^o-togçrt control of seed rot caused by Pythium qpp. phytopathology, T4 :106-1 10.

KOMADA, H. 1975. Development of a selective Medium for quantitativeIsolation for Fuso.riam oxysporum from Natural soil. Rev. of plant prôrccl Res.,8: ll4-125.

68 AL AWAMTA - No 82 - Sepæmbre 1993

LEMANCEAU, P., ALABOUVETTE C. et Y. COUTEAUDIER. 1988.Recherche sur la résistance des sols aux maladies. XIV. Modification du niveaude éceptivité d'un sol résistant et d'un sol sensible aux fusarioses vasculaires enréponse à des apports de fer ou de glucose. Agronomie, 8 : 155-162.

LIN, Y.S. et R. J. COOK. 1979, Suppression of Fusarium îoseum"Avenaceum" by soil microoorganisms. Phytopathology,69 : 384-388.

LOWET, J. et G. TOL/TAIN. Ln3. Recherches sur les fusariosesvasculaircs.Vll. Nouvelles observations sur la fusariose du Palmier dattier etprécisions concernant la lutte. Ann. Phytopathol. 5 :35-52.

MESSIAEN. G.M. ET R. CASSINI. 1968. Recherches sur les fusarioses IV. Lasystématique des Fusarium. Ann. Epiphyties 18 : 241-247.

PARK, C., PAULITZ J. et R. BAKER. 1988. Biocontrol fo Fusartum wilt ofcucumber resulting from intetactons between Pseudomonas putida et notpathogenic isolates of F usariu m o xy sporum. Phytopatholo gy, 7 I : I 90- I 94.

PEREAU-LEROY, P. 1958. Le palmier dattier. Inst. Francais de recherchesfruitières. Outre-mer [.F.A.C), 142 pp.

RAO, A.S., 1959. A comparative study of competirve saprophytic ability intwelve root-infecting fungi by an agar plate method. Trans. Brit. Mycol. Soc.,42:97 -111.ROSENWEIG, W.D. et G. STOPTZKY. 1979. Influence of environmentalfactors on antagonism of fungi by bacteria in soil : clay minerals and pH. Appl.environm. Microbiol., 38 : ll20-L126.

ROUXEL, F. 1978. Etude de la résistance microbiologique des sols auxfusarioses vasculaires. Application aux sols de la basse vallée de la Durance.Thèse dEtat. Université Dijon. France.

ROUXEL, F. et D. BOUHOT. 1971. Recherche sur l'écologie des champignonsparasites dans le sol.IV. Nouvelles mises au point concernant I'analyse sélectiveet quantitâtive des Fusarium oxysporum et Fusarium solani dans le sol. iômn.Phytopathol., 3 : 17 l-188.

ROUXEL, F. ALABOUVETTE C.et J. LOWET. 1979. Recherches sur l-arésistance des sols aux maladies.IV : Mise en évidence du rôle des Fusariumautochtones dans la résistance d'un sol à la fusariose vasculaire du melon. Ann.Phytopathol., 7 0 : 412-417 .

SAAIDI, M., TOUTAIN G., BANNEROT H. etJ. LOUVET. 1981. La sélectiondu palmier dattier (Phoenix daetylifera L.) pour la résistance au Bayoud. fruits.V o l . 3 6 : 2 4 1 - ? A 9 .

SABAOU, N., BOUNAGA N. et D. BOUNAGUA. 1983. Actions antibiotiquesmycolytique et pamsitaires de deux actinomycètes envers Fusartum oxlsporun

AL AWAMIA - No 82 - Septembre 1993

f .sp. albedinis et auhes formes speciales' Can.J. Microbiol., 29 : 194-199.

SCHER, M. F. et R. BAKER. 1982. Effects of Pseudomonas putida andsynthetic iron chelator on induction of soil suppressiveness to Fusarium wiltpâthogens. Phytopatholo gy,T2 : 1567 - 1573.

SCHNEIDER, R. V/. 1984. Effects of nonpathogenic strains of Fusariumoxysporum on celery foot infection by F. o.rysporum l.sp._apii and a.novel useof-the linweaver-burk double reciprocal plot æchnique. Phytopathology, T4 :&5-653.

SEDRA, MY.H. 1990a. Preliminary results on the evaluation of the resistance tothe Bayoud on the clone (khalts);-cultivars an{ s_oqre lvbltds of.the date pa1m.rees sélecæd on the fruit quality criterium. p 525. In the Proceeding of the 8thCongress of Mediten. Phytôpath'ol. Union, Agadir. Morocco 27lloi3lll- 1990-

SEDRA, MY H. 1990b. Study of some moroccan plam grove soils receptivity toFusarium wilts : interest of sôme study factors. p 527.In the Proceeding oÏ the 8th Congress of Mediterr. PhytopathôI. Union, Agadir. Morocco 271I0-3/ll'1990.

SEDRA, MY. H. 193. Preliminary results on the evaluation of the viffoplants toBayoud disease of some morrocan clones and cultivars of $9 date palm. In thethiid Symposium on date Palm. Saoudi Arabia .l7-201UL993.

SEDRA, MY.H. 1992. Remarques sur la variabilité dans le pouvoir pathogènedu Fusarium orysporum Î.sp. albedinis, agent du Bayoud du palmier dattier(sous presse à Al Awamia no 84).

SEDRA, MY.H. et M. BESRI. 1989. Possibilités de lutte biologique contre lafusariose vasculaire (Bayoud) du palmier. In Revue Mediter., Séminaire surI'agriculture oasienne. TouzeurÂ'{efta, Tunisie. 19-21 Novembre 1988, Tunisie.

SEDRA, MY.H. et M. BESRI. 1990. Behaviour,of some pathogen Fusariumorysporum fsp. albedinr's and stydy of the dynamic a4 _!!9 saprophyticcoioirization on- the Fusarium oxyiporum Îsp. albedinis in different soils ofmoroccan palm grave.p. 528. In the Proceeding of thq 8th Congress of Mediterr.Phytopathol. Union, Agadir. Morocco 27110-3lll- 1990.

SEDRA, MY.H.et MASLOUHY MY.A.palmier dattier. Activité antagoniste influorescents et d'autres microorganismesalbedinsis. (soumis à Al Awamia).

1992a. La fusariose vasculaire duvito des bactéries Pseudomonas

envers Fusariwn orysporum Îsp.

SEDRA, MY.H. et MASLOUHY MY.A. 1992b. La fusariose vasculiaire dupalmier dattier. Action inhibitrice des filFarts de culture de quelquesmicroorganismes antagonisæs isolés des sols de la palmeraie de Marrakech surle deveËppement iz iitro du Fusarium oxysporum l.sp. atbedinsis. (soumis àAl Awamia).

AL AWAMIA - No 82 - Sepæmbre 1993

SEDRA, MY.H. et F. ROU)GL. 1989. Résistance des sols aux maladies. Miseen évidence de la résistance d'un sol de la palmoaie de Marrakech auxfusanioses vasculaires. Al Awamia, 66:35-54.

SNEH, B., DUPLER M., ELAD Y. et R. BAKER. 1984. Chlamydospore ofFusariun oxysp_orum isp. cucumcrtnum as affected by fluorescent and lyticbacæria from a F usadan suppressive soil. Phyûopatholo$y,7 4: Ills-n%.

SMITH, SN. 1977. Comparaison of germination of nathocenrc Fuwriamoxyspol,r,in chlamydosporei in host rhizosphere soils condirctvàand supressiveto wiltslhytqa6ology, 67 : 5U2-510.

TRAMIER, R. MIONNAT J. C. et N. TEBIBEL. 1983. Role of the fungi in theinduction of suppressiveness into subsEates of Fusarûum wilt of carnation. AcfaHortic, 141 :55-59.

TU, C.C., CHEN Y.H.et M. CHEN. 1975. Flax Fusartum wilt- suDDressive soilin Taiwan. PlantProtection Bull. Taiwan. 17 :39O-399