ANRS-EP38-IMMIP
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F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
ANRS-EP38-IMMIP
AG 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Florence Buseyne
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
ANRS-EP38-IMMIPInclusions et caractéristiques des sujets
93 patients inclus Février 2007-Février 200993 patients inclus Février 2007-Février 2009
Infection périnatale par le VIH-1>15 ansStatut thérapeutique inchangé depuis au moins 6 mois
Age médian : 17 ans (15-24)57% Filles
85% HAART, dont 75% ARN VIH <80 copies/ml 66% CD4 > 500 cellules/µl
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Naissance --------- >15 ans
CliniqueTraitement
CD4Virus Le statut
immunitaire et
virologique actuel
ANRS-EP38-IMMIP : Objectifs
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Différentiation des lymphocytes T
Naive
Naive
Naive
Naive
Antigène
Mémoire
MémoireMémoire
MémoireMémoire
VIHDestruction
La taille du compartiment CD4 naif est liée à la diversité du répertoire et la capacité des lymphocytes T à contrôler de nouvelles infections
Périphérie
Moelle osseuse
Thymus
Naive
Tissus lymphatiques
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Méthode : analyse des cellules du sang périphérique par cytométrie en flux
Adapté de Maecker, NRI, 2012
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% N
aive
CD
8
Non infectés IMMIP0
20
40
60
80
100
% N
aive
CD
4
Non infectés IMMIP0
20
40
60
80
100
CD4
Médiane
(10-90th)
CD8
Médiane (10-90th)
IMMIP
15-24 ans
56 (37-70) 31 (15-56)
Non infectés
(US 12-18 ans)
51 (31-65) 56 (42-73)
Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs sont préservées chez les sujets de l’étude
Shearer, JACI, 2003
CD4
Médiane
(25-75th)
CD8
Médiane
(25-75th)
IMMIP
15-24 ans
56 (44-64) 31 (22-45)
Non infectés
(US Adultes)
50 (41-58) 52 (41-59)
Roederer, JCI, 1995
«Témoin » : intra-laboratoire, adultes non infectés VIH et non infectés VHC
«Témoin » : Littérature
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Les proportions de lymphocytes T naifs sont corrélés au nombre de lymphocytes T CD4
CD4N (%)
CD
8 N (
%)
0 20 40 60 80 1000
20
40
60
80
100 =0.330 p=0.004
CD4/µl
CD
4 N (
%)
0 500 1000 15000
20
40
60
80
100 =0.387 p=0.04
CD4/µl
CD
8 N (
%)
0 500 1000 15000
20
40
60
80
100 =0. 656 p<0.0001
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Les proportions de lymphocytes T naifs ne sont pas liées à l’âge/durée d’infection par le VIH
Age (yrs)
CD
4 N (
%)
15 20 250
20
40
60
80
100 =-0.261 p=0.17H
Age (yrs)
CD
8 N (
%)
15 20 250
20
40
60
80
100 =0.030 p=0.79J
Pas d’association avec l’âge au nadir de CD4, ni avec l’âge à l’initiation des HAART
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Différentiation des lymphocytes T et infections virales
Naive
Naive
Naive
Naive
Antigène
Mémoire
MémoireMémoire
MémoireMémoire
VIH
VIH
Destruction
Les infections par le VIH et le CMV induisent une diminution des % de lymphocytes T naifs chez l’adulte
CMV
VIH
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Les proportions de lymphocytes T CD8 naifs sont diminués chez les sujets ayant une réplication
active du VIH et chez les sujets infectés par le CMV
plasma HIV RNA
CD
8 N (
%)
< 80 copies/ml >= 80 copies/ml0
20
40
60
80
100 p<0.0001F
CMV serologyC
D8 N
(%
)Negative Positive
0
20
40
60
80
100 p<0.0001G
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs ne sont pas diminués chez les sujets ayant une réplication active du VIH et chez les sujets
infectés par le CMV
plasma HIV RNA
CD
4 N (
%)
< 80 copies/ml >= 80 copies/ml0
20
40
60
80
100 p=0.10
CMV serologyC
D4 N
(%
)Negative Positive
0
20
40
60
80
100 p=0.46
Résultat paradoxallien CD4 chez les sujets de l’étudeLittérature adultes
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Histoire de la maladie et lymphocytes naifs
→ Analyses stratifiées selon ARN VIH plasmatique (interactions)
Focus sur → les sujets dont l’ARN VIH est < 80 copies/ml → les lymphocytes T CD4
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Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs sont positivement corrélés avec la virémie cumulée au cours des 10 ans précédant le prélèvement
Durée cumulée sur 10 ansARN VIH < 500 copies (mois)
CD
4 N (
%)
0 50 100 1500
20
40
60
80
100 =-0.354 p=0.009
Virémie cumulée 10 ans(log10 (ARNVIH) xjours)
CD
4 N (
%)
0 5000 10000 15000 200000
20
40
60
80
100 =0.336 p=0.01
HIV DNA (log10 copies/106 PBMC)
%C
D4 N
1 2 3 40
20
40
60
80
100=0.224 p=0.11
ARN VIH < 80 copies/ml
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Tropisme
CD
4 N (
%)
R5 X4R50
20
40
60
80
100 p=0.001
Les % de lymphocytes T CD4 naifs sont plus élevés chez les sujets ayant des virus X4R5
Virus X4R5 (« tropisme génétique »)=virus « archivé »-Stades avancés de la maladie (déplétion CD4)-Plus infectieux pour les lymphocytes T CD4 naifsque les virus R5
ARN VIH < 80 copies/ml
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Les % de lymphocytes T CD4 naifs sont pas liés à la sévérité clinique/immunologique de la
maladie
stade CDC
CD
4 N (
%)
non C C0
20
40
60
80
100 p=0.18
CD4 nadir (%)C
D4 N
(%
)0 10 20 30
0
20
40
60
80
100 =0.107 p=0.58
ARN VIH < 80 copies/ml
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Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents »
Kohler, Blood 2009
L’expression de la molécule CD31 définit deux populations de lymphocytes T CD4 naifs Le % de lymphocytes T CD4 naifs CD31+ est un marqueur de l’activité thymique
PBMC congelés, n=57, cytométrie en flux
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Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont plus élevés chez les
sujets ayant un ARN VIH plasmatique détectable
ARN VIH plasmatique
%C
D4 N
CD
31+
par
mi
CD
4 N
< 80 copies/ml >= 80 copies/ml50
60
70
80
90
100
p=0.003
% parmi les lymphocytes T CD4 naifs
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Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont positivement corrélés
au nombre de lymphocytes T CD4
CD4/µl
%C
D4 N
CD
31+
par
mi
CD
4 N
0 500 1000 150050
60
70
80
90
100 =0.487 p=0.002
CD4N (%)%
CD
4 NC
D31
+ p
arm
i C
D4 N
0 20 40 60 80 10050
60
70
80
90
100=0.252 p=0.14
Nombre lymphocytes T CD4 % CD4 naifs
ARN VIH < 80 copies/ml
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Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont négativement corrélés
à l’immunosuppression antérieure
CD4 nadir (%)
%C
D4 N
CD
31+
par
mi
CD
4 N
0 10 20 3050
60
70
80
90
100=0.474 p=0.002
Durée CD4%<15% (mois)%
CD
4 NC
D31
+ p
arm
i C
D4 N
0 50 100 15050
60
70
80
90
100=-0.536 p=0.0004
ARN VIH indetectables
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Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » ne sont pas liés à l’histoire
virologique, ni au tropisme viral
Virémie cumulée 10 ans(log10 (ARNVIH) xjours)
%C
D4 N
CD
31+
par
mi
CD
4 N
0 5000 10000 1500050
60
70
80
90
100 =-0.159 p=0.33
Durée cumulée sur 10 ansARN VIH < 500 copies (mois)
%C
D4 N
CD
31+
par
mi
CD
4 N
0 50 100 15050
60
70
80
90
100 =0.102 p=0.54
HIV DNA (log10 copies/106 PBMC)
%C
D4 N
CD
31+
par
mi
CD
4 N
1 2 3 450
60
70
80
90
100 =0.171 p=0.30
Tropisme
%C
D4 N
CD
31+
par
mi
CD
4 N
R5 X4R550
60
70
80
90
100 p=0.50
ARN VIH indetectables
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont plus
élevés chez les filles
Sexe
%C
D4 N
CD
31+
par
mi
CD
4 N
M F50
60
70
80
90
100 p=0.002
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Analyses multivariées Sujets ARN VIH indétectable-%CD4 naifs
Naive T CD4
(% among CD4 lymphocytes)
Estimate [ 95% CI] P
Age
15-17 years
18-19 years
20-24 years
Reference
2.7
-2.4
[-4.8;10.3]
[-11.0;6.2]
0.54
CD4 cell count
Per 100 cells/µl
1.7 [0.40;3.99] 0.01
Viral tropism
X4R5
R5
Reference
-9.9 [-16.4;-3.5]
0.004
Cumulative viremia (10 yrs)
Per 1000 log10 copie x days
0.90 [-0.12;1.93] 0.08
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
Analyses multivariées Sujets ARN VIH indétectable-%CD4 RTE
CD4 RTE (% among naive CD4)
Estimate [ 95% CI] P
Age
15-17 years
18-19 years
20-24 years
Reference
-2.4
-1.1
[-6.4;1.6]
[-5.5;3.4]
0.47
CD4 cell count
Per 100 cells/µl 0.93 [0.21;1.65] 0.01
Sex
Male
Female
Reference
4.5 [1.0;8.0]
0.01
Lifetime duration of CD4% <15%
Per 100 months -5.7 [-10.3;-1.1] 0.02
Plasma IL-10 (100x per pg/ml) 1.3 [-0.2;2.9] 0.09
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Chez les sujets ARN VIH plasmatique détectable… en bref
Prudence, manque de puissance
Lié aux lymphocytes T CD4 (%CD4 naifs, mais pas %CD4 RTE)
Non lié quantité d’ARN VIH plasmatique
Non lié à l’âge
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Conclusions
Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs et l’activité thymique (%RTE)
→ Sont positivement corrélées au nombre de lymphocytes T CD4 (≈adultes)
→ Ne sont pas diminuées/sont augmentées par la réplication du VIH (≠ adultes)Comparaison sujets ARN VIH détectable/indétectableHistoire virologique chez les sujets ARN VIH indétectable
Interprétation : la destruction des lymphocytes T CD4 par la réplication du VIH est compensée par une production accrue de lymphocytes T CD4 naifs dans le thymus
Décrit chez l’enfant infecté (corrélation positive TREC-ADN VIH)Décrit chez certains adultes (<40 ans) et avant immunosuppression sévère
F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre
DiscussionMaintien activité thymique élevée et de proportions de lymphocytes T CD4 naifs préservées avec ou sans suppression de la réplication virale
→ Résultat remarquable compte tenu des caractéristiques des sujets IMMIP médiane 17 ans après l’infection, nadir %CD4 = 8% (5-11)Puberté : début involution du thymus
→ Equilibre virologique/immunologique « pédiatrique », déjà observé via l’absence d’association ADN VIH-nombreCD4 (Avettand-Fenoel, JID, 2012)
→ Un bémol : Chez les sujets avec suppression de la réplication virale, le % de RTE est négativement corrélée à la durée d’immunosuppression sévère
→ Une inconnue : combien de temps cette activité thymique élevée va-t-elle durer?
→ Work in progress : impact des autres mécanismes immunologiques (activation, homéostasie…)
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Remerciements
INSERM U1018
Y. Benmebarek
N. Bouallag-Bonnet
J. Lechenadec
J. Warszawski
ANRS
M. Trumeau
L. Marchand
Laboratoire de virologie-EA3620 U. René DescartesV. Avettand-FenoelC. Rouzioux
Institut Pasteur de ParisUPIPV puis EPVOF. BuseyneC. ClairetP. LoucheT. MontangeY. Rivière URIRC. DidierD. Scott-Algara
Sites hospitaliers ANRS-CO-10S. Blanche, F. Veber, M.C. MoureyA. Chacé, M. Bonnard C. Dollfus, G. VaudreG. Firtion, N. BoudjoudiM. Levine, A. Faye, C. Poder, S. Leveillé A. MayJ.P.Viard, A. MaignanC. Floch-TudalS. LemerleV. Jeantils, S. Tassi
Support financier
ANRS
Fondation AREVA