Modèle d’allergie alimentaire et respiratoire chez la souris

222

R

A

E

L

Grégory BOUCHAUD, PhD, Département ALIM H, INRA

Philippe AUBERT, IE, IMAD, INSERM U913

Prévalence : 3,34 % de la population (khalfaoui et al., 2003)

Aliments impliqués : 90 % des allergies alimentaires chez l'enfant : lait, oeuf, blé, soja, arachide et poisson (Burks et al., 2011)

Allergies alimentaires (AA)

Symptômes : la peau (dermatite atopique), appareil respiratoire (asthme), douleurs abdominales, anaphylaxie.

Prévalence : 10 % de la population mondiale

Allergènes: acariens, pollens, poils d’animaux

Symptômes : Uniquement respiratoire (asthme, rhinite)

Allergies respiratoires (AR)

Uniquement respiratoire (asthme, rhinite)

- Hyperactivité bronchique

- Inflammation

- Bronchoconstriction.

Marche atopique (MA)

Marche atopique : Transfert de symptômes d’origine alimentaire(dermatite, AA) à des symptômes d’origine respiratoires

(asthme, rhinite)

Effet d’une allergie alimentaire sur la survenue et le développement de l’asthme allergique

Projet

Mise au point d’un modèle d’allergie successive mimant la marche Mise au point d’un modèle d’allergie successive mimant la marche atopique : Recherche de biomarqueurs de prédisposition et étude des

mécanismes immunologiques.

modèle : Oeuf et acarien

Résultats: Physiologie pulmonaire

Mesure de l’hyper-réactivité bronchique (pléthysmographie)

Résultats: Physiologie pulmonaire

Mesure de l’hyper-réactivité bronchique (plethysmographie)

L’allergie alimentaire augmente l’hyper-réactivité bronchique dans l’asthme allergique aux acariens au cours de la marche atopique.

Bihouée T, Bouchaud G and Chesné J et al Resp. Research 2014

Résultats: Physiologie pulmonaire

Mesure de l’hyper-réactivité bronchique (flexivent)

6

8

10 CTL

RAFA+RA

FA**

L’allergie alimentaire augmente l’hyper-réactivité bronchique dans l’asthme allergique aux acariens au cours de la marche atopique.

Bihouée T, Bouchaud G and Chesné J et al Resp. Research 2014

0 5 10 15 200

2

4

métacholine (mg/ml)

Résultats: Inflammation

Mesure de l’infiltrat cellulaire dans les lavages broncho-alvéolaires et les poumons.

L’allergie alimentaire augmente l’infiltrat cellulaire et en particulier l’éosinophilie dans l’asthme allergique aux acariens au cours de la

marche atopique. Bihouée T, Bouchaud G and Chesné J et al Resp. Research 2014

double allergies et fonctions digestives:

� motricité intestinale

Résultats: Physiologie intestinale

� perméabilité intestinale

Gavage rouge carmin (T0)

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la motricité intestinale in vivo

� Temps de transit total (oro-anal):

Emission 1ère fèces rouge (T1)

Temps de transit total

Gavage rouge carmin (T0)

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la motricité intestinale in vivo

� Temps de transit total (oro-anal):

Emission 1ère fèces rouge (T1)

Temps de transit total

Temps de transit total est semblable dans les 4 groupes

� Évaluation du transit colique

Animal

Relevé des fecesCage

Nombre fèces émises

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la motricité intestinale in vivo

Relevé des feces(2Heures)

Cage individuelle

Caractérisation des fèces

Poidsfrais

Poidssec

% humidité

Nombre feces émises

20

CTLFARA

Résultats: Physiologie intestinale

� Évaluation du transit colique

Caractérisation de la motricité intestinale in vivo

0 15 30 45 60 75 90 105 1200

5

10

15

RAFA+RA

time (min)

**

Nombre feces émises % humidité

20

CTLFARA

Résultats: Physiologie intestinale

� Évaluation du transit colique

Caractérisation de la motricité intestinale in vivo

Le transit colique et le % d’humidité dans les fèces est semblable dans les 2 groupes (FA et RA+FA)

0 15 30 45 60 75 90 105 1200

5

10

15

RAFA+RA

time (min)

**

la motricité intestinale : conclusion

� Le transit intestinal global n’est pas modifié

Résultats: Physiologie intestinale

� Le transit colique est:

- chez les FA et FA+RA / aux CT et au RA.

- semblable entre FA et FA+RA

� Le % d’humidité dans les feces est semblable

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo

� Évaluation de la perméabilité in vivo

- Transcellulaire (HRP, 40 KDa)

- Paracellulaire (acide sulfonique-FITC, 400 Da)

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo

gavage

� Évaluation de la perméabilité in vivo

- Transcellulaire (HRP, 40 KDa)

- Paracellulaire (acide sulfonique-FITC, 400 Da)

Prélèvement sanguinMesure de la fluorescence

(Acide sulfonique)Et

Mesure de l’activité enzymatique(HRP)

Perméabilité in vivo

gavage

1 heure

Perméabilité paracellulaire

� Évaluation de la perméabilité in vivo

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo

la perméabilité paracell. est supérieure chez les FA et les FA+RA / au CT et RA

la perméabilité paracell. est semblable chez les souris FA et FA+RA

Perméabilité paracellulaire

Perméabilité transcellulaire

� Évaluation de la perméabilité in vivo

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo

la perméabilité transcell. est semblable entre les 4 groupes

- Transcellulaire (HRP, 40 KDa)

- Paracellulaire (acide sulfonique-FITC, 400 Da)

Chambre de Ussing

� Évaluation de la perméabilité ex vivo : jéjunum et colon proximal

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo

Pôle apical(lum. Intest.)

Pôle basolatéral(compart. sang.)

Chambre de Ussing

Muqueuse intestinale

Perméabilité paracellulaire

� Évaluation de la perméabilité ex vivo : jéjunum

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo

la perméabilité paracellulaire est supérieure chez les souris FA+RA / au souris RA au niveau du jéjunum

Perméabilité paracellulaire Perméabilité transcellulaire

� Évaluation de la perméabilité ex vivo : jéjunum

Résultats: Physiologie intestinale

Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo

la perméabilité transcellulaire est semblable entre les 4 groupes

la perméabilité paracellulaire est supérieure chez les souris FA+RA / au souris RA au niveau du jéjunum

la perméabilité intestinale : conclusion

� La perméabilité paracellulaire in vivo est:

- chez les FA et FA+RA / au CT et RA.

Résultats: Physiologie intestinale

- significativement chez les FA+RA / aux RA.

� La perméabilité transcellulaire n’est pas modifiée in et ex vivo

- significativement chez les FA+RA / aux RA.

� La perméabilité paracellulaire du jéjunum est:

- significativement chez les FA+RA / aux RA.

- est semblable chez les FA et les FA+RA

Conclusion

L’allergie alimentaire influe sur le développement de l’asthme allergique

Au niveau physiologique:- Augmentation de l’hyper-réactivité bronchique

- Perturbation de la physiologie intestinale

Au niveau cellulaire- Augmentation de l’infiltrat cellulaire pulmonaire

- Augmentation des marqueurs de l’allergie (IgE, IgG, Histamine)

Remerciement

Equipe Allergie

Sandra Denery

Marie Bodinier

IMAD, INSERM U913

Michel Neunlist

INSERM U1087

Antoine Magnan

David Lair

Tiphaine Bihouée-Roussey

Marie-Aude Cheminant