Génétique des populations de Plasmodium falciparum en Afrique

Post on 27-Jan-2017

416 views 0 download

Transcript of Génétique des populations de Plasmodium falciparum en Afrique

����������� �������������� ��� ���������������������������� �������� ���� ����������� �����

�������������������������� ���������� �������������� ��������� �����������������������

���������� ���������������������� ���������������������� ������������������������������������������������������ ���������������� ���������������������������������������������� ��� �������� �������

������������������������������

������������������ ���������!���� ���������!����

� � � �� �� � � �� ������������� ��������������� �������������� �������

!������!������

�� �"������������"�����������" #����������������$������������������������������������%&

" ��������������

" #������������������������������������������������������ '

�� �"�"������ ������ ����������������� ������ ����������� �� ������ ����������" (��� $ )����*+ ���&���,�������� '

" #���������������,��$ ������-����&�./������0

" #�����������������������������������

�� !"!"���������������� �� ������ ����" 1��������������������������� '

" 1����������������������'

" 2����������3#���������������3���������� �����.��0'

�� #"�!��������$�#"�!��������$��������%����������%���

&' �

� � �� ����� ����� � �� ����� �������� ��������(�����������(���

����4�������������

� � �� ����� ����� � �� ����� ������������������(�����������(���

����4�������������

&')�*&'+�

���,

� � �� ����� ����� � �� ����� ������������������(�����������(���

����4�������������

���,

� � �� ����� ����� � �� ����� ������������������(�����������(���

����4�������������

1������5���6��������������#����4�����

#����4����

1������5���6������������

#����4�������������������1������5���6�������������7����

���,

� � �� ����� ����� � �� ����� ������������������(�����������(���

�,�- �(���.���� ������� ��/��������� �0��$�1� �

���,

� � �� ����� ����� � �� ����� ������������������(�����������(���

�,�- �(���.���� ������� ��/��������� �0��$�1� �

� ���1��0���������������

!�����!�����/��0��/��0��

#��4����������

2����2��������������

3�/����3�/������������ �������� ���� �� ��/�������� ��/������

������ ���� ������ �������������� ���������� ����

�������� �������� ���� ��� ������ ���

/� �������

�����������

��1�0�/�0�� 1��1�0�/�0�� 1

3�/����3�/�����/���������/���������������� ��������� ���

�������� �������� ���� ��� ������ ���

8����������������������� ���������'

4(�4(� ����� ����� ����� �1����� �1 � ���� � ���� ������ ���������� ����55

#�����6������������� ���� �� �����5

���������������������������������� �������� ���� �� ���5�� ���5

���������������������������������� �������� ���� �� ���5�� ���5

���������������������������������� �������� ���� �� ���5�� ���5

�������(�6��(������������(�6��(��������������� �������� ���� �� ���5�� ���5

9������ ���������������������� )����*+ ����:����

�������������6����������������

�"�"������ ������ ������������������ ������ �������������� ������ ����������

SouthSouthDananéDanané

�������������� ������ ���2;<��������������������:�������� ���4�����$ 7&����������

���������� ����������������������

����������������������������������������������������������������55

=>�?�

@A�?�

�������$B=&) ��7, -

#�������$B@&) ��7,8-

������ $=@&�) ��7 �-

�������$BC&�) �7��+-

D�����$=@&) ��7+8-

) ��9�- ���� ����(��0������) ����1

����������E�����;<2����:��� �������

�����������

� �����������

��������� ��

����� �������

��� ����������

�������

�������������� �� ������ ��������1����1

8��������������������'

:0��0�/����� �����: 0��0�/����� �����55

(����������=(����������B

/���������������������������'

(����������=(����������B

9�������:

/�����=

/�����B

-������

/�����=

/�����B

-������

:0��0�/����� �����: 0��0�/����� �����55

(����������=(����������B

9�������:

/�����=

/�����B

-������

/�����=

/�����B

-������

:0��0�/����� �����: 0��0�/����� �����55

(����������=(����������B

1�5���������������!�������������

/�����=

/�����B

-������

/�����=

/�����B

-������

:0��0�/����� �����: 0��0�/����� �����55

(����������=(����������B

+�������������=�������������� ��

/�����=

/�����B

-������

/�����=

/�����B

-������

:0��0�/����� �����: 0��0�/����� �����55

(����������=(����������B

+�������������=�������������� ��

/�����=

/�����B

-������

/�����=

/�����B

-������

:0��0�/����� �����: 0��0�/����� �����55

(����������=(����������B

+�������������B�������������� ��+�������������=�������������� ��

/�����=

/�����B

-������

/�����=

/�����B

-������

:0��0�/����� �����: 0��0�/����� �����55

(����������=(����������B

+�������������B�������������� ��+�������������=�������������� ��

/�����=

/�����B

-������

/�����=

/�����B

-������

:0��0�/����� �����: 0��0�/����� �����55

(����������=(����������B

(��������(����������=�$��������&�F�(����������B�$���� &

(��������(����������=��$�����&�� (����������B�$� &�

:0��0�/����� �����: 0��0�/����� �����55

�������������������������������������������,�����������������

����������������������������������������

�����������������������������

1�������:������ ��%������� ��/����� ��/ �;����� ��%������� ��/����� ��/ �;���

$-��������������B>>>�#����������G ���&

����� ������������� ������������0���1/�0��/����0���1/�0��/

H�=@

H�B@

H�I

����� ��������% �1�����0������/6����� ���/���� �������

���� ��<����������0���1/�0��/� /�������%��� ��

����� ������������� ������������1�������1���

���� �

( !�:�������������� �����������

#������������F��$�������������&

���� �G�����������

����������������������������6��(������ ��������������������������������6��(������ ����(��0�(��0�=��=��

������������ ����������:����������������J������� �������:����������������������

2���������������

(����������= (����������BF

2���������������

(����������= (����������B�

>���������K������������ ������L>�>A���������K��������������������������������>�>A6>�=A��#������>�=A6>�BA��/���M>�BA��������N��������������������������������

=��������-������������������5���

����F�> ����F�=

������������������������(�����������(�����������

$$ ������-����O ������-����O�������>������������>�����&&

��������������������������N�������N�������33��:���:�

$1����$1���� �6����6���**��0�����0���>�����>�����&&

���������������������������������� �������� ���� �� ����(��0������ ���� ����(��0������ ��/ �;���/ �;�������������������������������������������

?�/6 6(�

��� �?�������N�������

�@#@!�

�� ��

�@���

�@���

�@�&�

�@&&&

=��9������/�� ���1�����A

������������������������(�����������(�����������

$$ ������-����O ������-����O�������>������������>�����&&

��������������������������N�������N�������33��:���:�

$1����$1���� �6����6���**��0�����0���>�����>�����&&

/��,����/��,��������4������������4��������:������:������ �����������:������������:�����������������������������������������������BB3������3������>�����C�#�� �������">�����C�#�� �������"

?�/6 6(���F>�P>

��� �?�������N�������

�@#@!�

�� ��

�@���

�@���

�@�&�

# ; �

�@&&&

=��9������/�� ���1�����A

3��; ���#���<����6���/

D�3��; ���#���<����6���/

!��

���������������������������������� �������� ���� �� ����(��0������ ���� ����(��0������ ��/ �;���/ �;�������������������������������������������

��������3��; �����������3��; ���#���<����6���/#���<����6���/

/�����-

/������

=�����������

/�����-

/������

!����� ����������������������

=�����������

��������3��; �����������3��; ���#���<����6���/#���<����6���/

/�����-

/������

!����� ����������������������

=�����������

��������3��; �����������3��; ���#���<����6���/#���<����6���/

/�����-

/������

!����� ����������������������

=����������� B������������

��������3��; �����������3��; ���#���<����6���/#���<����6���/

��������3��; �����������3��; ���#���<����6���/#���<����6���/

/�����-

/������

!����� ����������������������

=����������� B������������

K������� ����������������������

��������3��; �����������3��; ���#���<����6���/#���<����6���/

/�����-

/������

!����� ����������������������

=����������� B������������

K������� ����������������������

/��,����F���������.���0����� ��� ��������.���0����������������������4��������

#�����������������

6 K����������������������� �����������6 9������ /��,��������4��������

+�������������������

#��������������������'�Q%�'

���0����0��������� ���������������� ����������������������������������

1�4������������������������

-�2� �9�2�2�-�-�2�-�-�2�-�-�2�-�-�2�-�-�-�9�2� �-�9�2�-�9� �-�-�2�2�-�2�2�-�2�2�-�2�2�-�2�2�2� �-�9�2�

:��������,�������������K-

=�A ��������������������� �����$2--&���$ -&���$2-&�

@������������������������� �������������'

!/��A��!/��A��/���� �������/���� �������

$--2& !����� R����=

$-222-2& !�����R����B�$����J�������������&

$-2& !����� R����@

����,�����K-

�����5��������������������� ������� ����� �����������������������

'�������� ��������'�������� ��������

#�������������� ��B6@,���������������������������������������

=&�#��������������������5������ ������� ����� �����������������������

B&�1�S�����:��� A>���@A>���� ��������� ��<>���

���������1���������1

��������������K- Q���������������K-

1�4���������������������������������,�����K-������������������������� ����������������������

�����������$���������K-&

����� �K-

�"�"���������1���������1>�>��0����� �/����� ���4�/ ��0����� �/����� ���4�/ � #D��#D��

8"8"�����6����1�����6����1>> ��<��������<������ ��=� �;���=� �;���#D�� ��#D�� �� ��������������� =;���

E �1��� ����E �1��� ����

2����� ������� ����������

������������������61�61�0���00��;���0���00��;���

/�������������������

#������������

#������������

TU

!������������

!����������������

��1/�0��/��1/�0��/

0%

5%

10%

15%

20%

25%

118

218

221

223

225

228

231

233

235

237

239

242

245

252

255

259

263

270

283

326

Freq

uenc

y

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

91 94 98 101 110

�������������������:������������:�

/�:�������������/�:�������������

-��������S�

#�������������:���������������������������

,","E �1��� ����E �1��� ��������������0���� /������0���� / "������ ���������� "������ ���������� ������������������ �0�/�/���0�/�/��)"�#��� ���)"�#��� ��� 6��(���6��(��� /���� �����������/���� ����������� �� �������� ����������������������������+"�+"������/��� ����1/�0��/�����/��� ����1/�0��/ �<���

F�������&9�������� ���� �� �������������� ������� ������������� ���5

7��������B ������� ���� (���������������������������������'

7��������@!��������#������������������3#������+��������3 ����������������� ������'

!"�!"��������������������� ����<��������� ����<�������

���������� �������� ���� �� �������������5�� �������������5

�����������!���������������������������6��������-����

� K������������������������������:���������������� ������������'

���������� �������� ���� �� �������������5�� �������������5

-� �V (��:��� ��������������:����������:��������$��5����������5&

C��������������������������������������$<�����=;�������������������&

DjiboutiDjiboutin(42)n(42)

DakarDakarn(37)n(37)

SouthSouthDananéDananén(118)n(118)

NiameyNiameyn(43)n(43)

$������ ���!���������������� �� ���� B>><�-W2#�&

�=!>��=!>�(��0�(��0� �/���� �����������@ �/���� �����������@

-3.0 -1.5 0.0 1.5AXE I

-1.70

-1.02

-0.34

0.34

1.02

1.70

AX

E II

NiameyDjiboutiDakarDanané

Sites

�������������������� �����������

$������ ���!���������������� �� ���� B>><�-W2#�&

����������������������������6��(������ ��������������������������������6��(������ ����(��0�(��0�=��=��

������������ ����������:����������������J������� �������:����������������������

2���������������

(����������= (����������BF

2���������������

(����������= (����������B�

>���������K������������ ������L>�>A���������K��������������������������������>�>A6>�=A��#������>�=A6>�BA��/���M>�BA��������N��������������������������������

=��������-������������������5���

����F�> ����F�=

�������:����������:��� ��������������������������:����:����������������������������������������

θθθθθθθθ==0.1890.189(0.121(0.121--0.265)0.265)

θθθθθθθθ==0.2100.210(0.152(0.152--0.272)0.272)

θθθθθθθθ==0.2460.246(0.166(0.166--0.321)0.321)

DjiboutiDjibouti

DakarDakar

SudSudDananéDanané

NiameyNiamey

�����������������������������������������

3 �������������� ����6��(������ �������/ #G�6���� ����0��������

>���������K������������ ������

L>�>A��������K��������������������������������>�>A6 >�=A��#������>�=A6 >�BA��/���M>�BA��������N��������������������������������

=��������-������������������5���

$������ ���!���������������� �� ���� B>><�-W2#�&

�������:������������������:���������������������:���:���������������������������������������

θθθθθθθθ==0.1050.105(0.081(0.081--0.172)0.172)

θθθθθθθθ==0.2460.246(0.166(0.166--0.321)0.321)

θθθθθθθθ==0.0840.084(0.074(0.074--0.171)0.171)

DjiboutiDjibouti

DakarDakar

SudSudDananéDanané

NiameyNiamey

θθθθθθθθ==0.1890.189(0.121(0.121--0.265)0.265)

θθθθθθθθ==0.2100.210(0.152(0.152--0.272)0.272)

θθθθθθθθ==0.2460.246(0.166(0.166--0.321)0.321)

��� ��%����� ��%������������ ������������� ��������������� �������� ���� �� ������ ����

6��(�����0�6��(�����0� ��� �� �� ����� �� �� ��# � �H�# � �H� ����0���0�� ����0���0������������

>���������K������������ ������

L>�>A��������K��������������������������������>�>A6 >�=A��#������>�=A6 >�BA��/���M>�BA��������N��������������������������������

=��������-������������������5���

$������ ���!���������������� �� ���� B>><�-W2#�&

=���6��(�����������=���6��(��������������������� (��0(��0/���� �����������/���� �����������

θθθθθθθθ==0.0260.026(0.008(0.008--0.048)0.048)

DjiboutiDjibouti

DakarDakar

SudSudDananéDanané

NiameyNiamey

K���� ����������:������,�6K�����

���,�����!����� ����� ��������

θθθθθθθθ==0.1050.105(0.081(0.081--0.172)0.172) θθθθθθθθ==0.0840.084

(0.074(0.074--0.171)0.171)

θθθθθθθθ==0.1890.189(0.121(0.121--0.265)0.265)

θθθθθθθθ==0.2100.210(0.152(0.152--0.272)0.272)

θθθθθθθθ==0.2460.246(0.166(0.166--0.321)0.321)

>���������K������������ ������

L>�>A��������K��������������������������������>�>A6 >�=A��#������>�=A6 >�BA��/���M>�BA��������N��������������������������������

=��������-������������������5���

$������ ���!���������������� �� ���� B>><�-W2#�&

�������9��������������������9����������������������� �������� ���� �� ������ ����/ �;���/ �;������ /�����5� /�����5

?�/6 6(�

#G�6���D� /�1

# � �H

!��

�� �� �@���

�@���

�@�&�

�@&+'

�@��

�@&�,

�@�&�

�@�8 �@�+8

# ; �

&�������B�������>�����" ����

�������� #��������������������������

������������������������������

5

5

!�������1����������!�������1������������������������������������ �������������,���������������,��33���������'���������'

?�/6 6(�?�/6 6(�

#G�6���#G�6���D� /�1D� /�1

# � �H# � �H

!��!��

�� �� �� �� �@����@���

�@����@���

�@�&�

�@�&�

�@&+'�@&+'

�@�� �@��

�@&�,�@&�,

�@�&��@�&�

�@�8 �@�8 �@�+8�@�+8

θθθθθθθθ = = 0.1930.193

# ; �# ; �

&�������B�������>�����" �������0��&������B�������>�����" ����

����������= ����������=

��� ������������������������ ����������������������������������-�����

F�������&9�������� ���� �� �������������� ������� ������������� ���5

F��������F��������9�9������� ���� ��� �������������� ����� �������������� ���� ���� ���5�� ���� ���5

7��������@!��������#������������������3#������+��������3 ����������������� ������'

K��/��,��������4��������

!����� �������������������

K���������

/��,��������4��������

K������� ���������������:��� ����

1������%

No LinkageNo Linkagedisequilibriumdisequilibrium

SudSudDananéDanané

No LinkageNo Linkagedisequilibriumdisequilibrium

NiameyNiamey

No Linkage No Linkage disequilibriumdisequilibrium

DakarDakar Linkage Linkage DisequilibriumDisequilibriumDjiboutiDjibouti

6 1����������������������� �����������6 G����������������5�������6 1������

Q���������9������ /��,��� ����4�������� ����X������'

3��; ���3��; �������<����6���/����<����6���/

" �������� ��������

" ������

" 1��������

" ���� ��������

" !��������������

" #���������

0

50

100

150

200

250

Jan 19

97MarMay Ju

lSep Nov

Jan 19

98MarMay Ju

lSep Nov

Jan 19

99MarMay Ju

lSep Nov

Jan 20

00MarMay Ju

lSep Nov

Jan 20

01MarMay Ju

lSep Nov

Jan 20

02MarMay

1998 1999 2002

Mon

thly

inci

denc

e of

clin

ical

mal

aria

atta

cks

sampling periods of clinical malaria isolates, Djibouti-city, CHA Bouffard

$!����� ��(�������������������� ���� G���+����������� B>>AO==@=;6@B=�&

1998 1999 2002

0

20

40

60

80

K1K1 Mad20Mad20 RO33RO33 3D73D7 FC27FC27

msp1msp1 block2block2 msp2msp2

percentage

�� 6���������6��������� 6���������6��������� �� 6��;��6��;�� ��� ����� !�� ! ������� �������������#G�6���#G�6���

Isolates with only one allele detected by locus

Q�����������������������������������

$!����� ��(�������������������� ���� G���+����������� B>>AO==@=;6@B=�&

0%

20%

40%

60%

80%

100%

19981998(Sept.-Dec., n=46)

19991999(April, n=61)

20022002(March-May, n=32)

Unb

iase

d ex

pect

ed h

eter

ozyg

ocity

Unb

iase

d ex

pect

ed h

eter

ozyg

ocity msp1msp1 block2block2

msp2msp2

#���� ���������������%�����1������������/��

����������%�����1����������%�����1���0��0� �������� �������� ���� �� ����� ���6����6����>> ������� ��� ������0�������� ��� ������0� &'''&'''����/������/��

$!����� ��(�������������������� ���� G���+����������� B>>AO==@=;6@B=�&

����������B

����� �5��������V�/�����������������������������5����� ��

R���������������������������������� �������������������������:������������� �����������

F�������&9�������� ���� �� �������������� ������� ������������� ���5

F��������9������� ���� ��� �������������� ���� ���� ���5

F��������F��������9��� ����� � �� ��� ��/������9��� ����� � �� ��� ��/��������� � �� ���������� � �� ����������� �������������� �������� ���� ��%�����1�5��%�����1�5

������������������������� �� ��/����� F�K���� ����������������J�����J���

����������1F�K���� ����������������������

���/6�� ������� ��������������#�%�����1

����������9��������� �����F 9������ �����F�G5������������S��������

F�- ����������S�������

� ��:����������������������������������������������������������,���:������������������

9��������� �����6������������� �����������

9��������� �����������������������

@������������� =��������

�����������2������������ � #������������� V�9��������� �������+��R��������

Trans < 1 b/Trans < 1 b/perspers/y/yP rate <5%P rate <5%DjiboutiDjibouti

Trans < 1 b/Trans < 1 b/perspers/y/yP rate <5%P rate <5%

DakarDakar

Trans > 300 b/Trans > 300 b/perspers/y/yP rate >80%P rate >80%

southsouthDananéDanané

Trans < 1 b/Trans < 1 b/perspers/y/yP rate <5%P rate <5%�������� 30%30%

NiameyNiamey

$������ ���!���������������� �� ���� B>>A����������&

9��������� �����6������������� �����������

#�������������������� ��������������:����������������

�����������2������������ � #������������� V�9��������� ������+� R��� ����

TransTrans < 1 b/pers/y< 1 b/pers/yMean MultMean Mult.: 1.31.: 1.31

DjiboutiDjibouti

TransTrans < 1 b/pers/y< 1 b/pers/yMean MultMean Mult.: 1.41.: 1.41

DakarDakar

TransTrans > 300 b/pers/y> 300 b/pers/yMean MultMean Mult.: 2.68.: 2.68

southsouthDananéDanané

TransTrans < 1 b/pers/y< 1 b/pers/yMean MultMean Mult.: 1.63.: 1.63

NiameyNiamey

$������ ���!���������������� �� ���� B>>A����������&

H=0.53H=0.53DjiboutiDjibouti

������ ����������������� ������������������������������ �����

#�����������������

H=0.76H=0.76NiameyNiamey

H=0.73H=0.73DakarDakar

3� ����������������������%�����1

H=0.76H=0.76SouthSouth

DananéDanané

H=0.76H=0.76SouthSouth

DananéDanané

�X��������/�:�������������������������:����������� �����

#��������������������:������������������� �����

H=0.76H=0.76NiameyNiamey

H=0.73H=0.73DakarDakar

H=0.53H=0.53DjiboutiDjibouti

H=0.53H=0.53DjiboutiDjibouti

H=0.76H=0.76SouthSouth

DananéDanané

��,��V�K������/�: ������������������������������������������� �����

#���������������������������������

!���6���� ��������

H=0.76H=0.76NiameyNiamey

H=0.73H=0.73DakarDakar

�/���������������%�����1

#����������������� ���������S�������'

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

Djibouti Dakar Niamey Danané

Mul

tiplic

ity

00,10,20,30,40,50,60,70,80,91

Het

eroz

ygos

ity

Multiplicity Heterozygosity

L�=�J���JY L�=�J���JY L�=�J���JY M@>>�J���JY

� � �� ��� ��/������ ����� � ����A� ����0������������%�����1�6���%��

!���������!���������

/��������������� �����������������:�����

6 ������������������������������V���������������

6 �������������������������

DananDananéé

NiameyNiameyDakarDakar

DiengaDienga

DjiboutiDjibouti

THIAGOTHIAGO

TEMEYE SALANETEMEYE SALANE

SANINTESANINTENDIAKHAYENDIAKHAYE

MALLAMALLA

FATIFATINN

TIPTENGATIPTENGA

S29S29--3030NIOKO II S26NIOKO II S26

PISSY S17PISSY S17

KATKATEE

YOUKOUTYOUKOUT

TCHOLLIRE TCHOLLIRE IIII

SAKDJESAKDJE

BOCKIBOCKI

MELEN/MELEN/NKOLAFENDEKNKOLAFENDEKMIATTA / DJOUZEMIATTA / DJOUZEENDEGUE/ENDEGUE/ABDELONABDELON

ZOEBEFAM/ZOEBEFAM/NKOLEMBOULANKOLEMBOULA

YEN/YEN/MEBAN IIMEBAN II

NIENANIENA

TENASSOTENASSO

Q. SAMAGANQ. SAMAGAN

Q. DOGONAQ. DOGONA

Q. KUINIMAQ. KUINIMA

TIABEDJITIABEDJI

LANDELANDERUNDE/BAITILRUNDE/BAITIL

SAMALSAMALTHIOBOTHIOBO

BANTATABANTATA

ASSONIASSONI

��������%����������%��

Centre Centre MurazMuraz& & InstitutInstitut P. P. RichetRichet

M.C. HenryM.C. HenryS.B. S.B. AssiAssi

InstitutInstitut PasteurPasteuràà ParisParis

O. O. PuijalonPuijalon

IRD IRD Montpellier,Montpellier,F. F. RenaudRenaudP. DurandP. Durand

UnitUnitéé de de RechercheRecherche en en BiologieBiologie & & EpidEpidéémiologie miologie

ParasitairesParasitaires -- IMTSSAIMTSSAC. C. RogierRogier

B. B. PradinesPradinesT. T. FusaiFusai

H. H. BouchibaBouchiba

DGA (DGA (DynapopDynapop), ), SociSociééttéé Pathologie ExotiquePathologie Exotique, SANOFI , SANOFI –– Impact MalariaImpact MalariaService de SantService de Santéé des des ArmArmééeses

MinistMinistèèrere de de la Santla Santéé DjiboutiDjibouti

M.A. M.A. KamilKamil

INSERM U399INSERM U399LaboratoireLaboratoire de de ParasitologieParasitologie et et

MycologieMycologie

P. P. ParolaParola

Hôpital Hôpital PrincipalPrincipalde Dakarde Dakar

B. WadeB. Wade

HôpitalHôpital National National de Niameyde Niamey

E. E. AdehossiAdehossi

HIA HIA LaveranLaveranE. E. GarnotelGarnotel

hervebogreau @ yahoo.fr

�����S���������9������ �����

($�����&F��������J�$��������Z��������&

($�����&F��������J�$��������Z��������&

�����S��������$�&�F�(�$��������&�:���������F�($���������&�Z(�$��������&

F�($�����&�($�����&�Z�($����&�($����&�F�B�($����&�($����&�

#� �!���

�����S���������9������ �����

($�����&F��������J�$��������Z��������&�F�P�J�=B

($�����&F��������J�$��������Z��������&�F�C�J�=B

�����S��������$�&�F�(�$��������&�:���������F�($���������&�Z(�$��������&

F�($�����&�($�����&�Z�($����&�($����&�F�B�($����&�($����&�

���$����&�F��P����$����&�F�C

F�B���$�B�J�@�&���$�=�J�@&�F�C�J�I�

#� �!���

�����S��������9������ ������

" �F=6[��\

(�5(�(B5(�(=5(�-��������� ���(�

(B5(B(=5(B-������B�� ���(B

(=5(=-������=�� ���(=-���������������������

�������������

-��������� ���(�

-������B�� ���(B

-������=�� ����(=

-����������������������������������

#� �!���

�����S��������9������ ������

" �F=6[��\

(�5(�(B5(�(=5(�-��������� ���(�

(B5(B(=5(B-������B�� ���(B

(=5(=-������=�� ���(=-���������������������

�������������

-��������� ���(�

-������B�� ���(B

-������=�� ����(=

-����������������������������������

#� �!���

�����S��������9������ ������

" �F=6[��\ F�=�� .$BJ@&\ Z�$=J@&\ 0F�=�� .AJI0�F�CJI�

(�5(�(B5(�(=5(�-��������� ���(�

$=J@&\(=5(B-������B�� ���(B

$BJ@&\-������=�� ���(=-���������������������

�������������

-��������� ���(�

-������B�� ���(B

-������=�� ����(=

-����������������������������������

#� �!���