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Guide du prélèvement Version – 3 (Mai 2015) Site du Pont de Chaume – 43 rue des Arts 82000 Montauban

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Guide du prélèvement Version – 3 (Mai 2015)

Site du Pont de Chaume – 43 rue des Arts 82000 Montauban

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1-INTRODUCTION 03 2-LES DIFFERENTS SITES DU LABORATOIRE BIOFUSION 04 3-LISTE DES ANALYSES - REFERENTIEL 07

4-MATERIEL FOURNI PAR LE LABORATOIRE 07 4.1 - Boîte de prélèvements 07 4.2 - Matériel pour prélèvements bactériologiques 08 4.3 - Autre matériel 09 4.4 - Péremption du matériel 09

5-DOCUMENTS INDISPENSABLES 10 5.1 - L’ordonnance 10 5.2 - La prescription spécifique « groupe sanguin » 10 5.3 - La fiche de suivi médical 11 5.4 - Le consentement 12 5.5 - Examens hors nomenclature 12

6-IDENTIFICATION DE L’ECHANTILLON 13

7-LE PRELEVEMENT SANGUIN 14 7.1 - Aspect psychologique du prélèvement 14 7.2 - Préparation du patient 15 7.3 - Réalisation du prélèvement sanguin 16

7.3 – a Prélèvement veineux 16 7.3 – b Recommandations techniques 18 7.3 – c Prélèvements à réaliser impérativement

au laboratoire 20 7.4 - Prélèvements spécifiques 20 7.4 – a Le patient porteur d’une fistule artério-veineuse 20 7.4 – b Le patient perfusé 20 7.4 – c Les hémocultures 21 7.4 – d La gazométrie 22 7.4 – e Le temps de saignement 24

8-LE PRELEVEMENT BACTERIOLOGIQUE 26

8.1 - Instruction d’utilisation d’un écouvillon «eswab» 26 8.2 - Examen cytobactériologique des urines – ECBU 27 8.3 - Examen cytobactériologique des urines

chez les patients sondés 28 8.4 - Mise en place d’un collecteur pédiatrique 28 8.5 - Recueil des urines de 24 heures 29 8.6 - Compte d’ADDIS 30 8.7 - Recueil de selles 30 8.7-a Coproculture 30 8.7-b Parasitologie des selles 31 8.7-c Scotch test ou test de Graham 32

8.7-d Recherche de sang dans les selles 32 8.8 - Prélèvement auriculaire - oreille 33 8.9 - Autres prélèvements ORL 33 8.9 - a Gorge 33 8.9 - b Fosses nasales 34 8.10 - Prélèvement oculaire 34

8.10 - a Conjonctive 34 8.10 - b Cornée 34 8.10 - c Liquide de lentilles 34 8.10 - d Blépharite 35

8.11 - Sécrétions broncho-pulmonaires – expectorations 35 8.12 - Prélèvement vaginal 36 8.13 - Prélèvement urétral 37 8.14 - Spermoculture 37 8.15 - Prélèvements peau- phanère 38 8.15 - a A visée bactériologique 38 8.15 - b A visée parasitologique et/ou mycologique 38 8.16 – Prélèvements particuliers 42

9-PRELEVEMENTS NON CONFORMES 43

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10-HYGIENE ET SECURITE – TRAITEMENT DES DECHETS 45 10.1 - Hygiène des mains 45 10.2 - Utilisation des gants 47 10.3 - Conduite à tenir en cas d’AES 47

« Accident d’exposition au sang » 10.4 - Gestion des déchets 48

11-ACHEMINEMENT ET TRANSPORT DES ECHANTILLONS 50

11.1 - Le transport vers le laboratoire 50 11.2 - Les températures de transport des échantillons 50 sanguins 11.3 - L’acheminement des échantillons 50

12-TECHNIQUES UTILISEES 51

13-ANALYSES COMPLEMENTAIRES/STOCKAGE DES ECHANTILLONS 51

14-EXAMENS URGENTS 51 ANNEXE 1 – PROTOCOLES DE TESTS DYNAMIQUES 52

A. Hélicobacter pylori (test respiratoire) 52 B. HGPO 54 C. Pool de prolactine 58 D. Test à la LH – RH 59 E. Test au Synacthène Immédiat 61 F. Test au Dexaméthasone ou Dectancyl 62

ANNEXE 2 – LISTE DES ANALYSES A TRAITER RAPIDEMENT 63 ANNEXE 3 – CONFIRMATION D’IDENTITE 65 ANNEXE 4 – REFERENTIEL DES ANALYSES 66

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1-INTRODUCTION

Le laboratoire Biofusion vous présente la 3ème version de son guide du prélèvement. Ce document élaboré afin de vous aider dans

votre pratique professionnelle s’inscrit dans la « démarche qualité » du Laboratoire de Biologie Médicale Biofusion.

L’objectif de ce document est d’expliciter le plus simplement possible et de façon exhaustive les différentes informations

nécessaires à la phase pré-analytique selon les nouvelles exigences règlementaires (ordonnance 2010-49 du 13/01/2010).

Parmi ces exigences, et notamment celles de la norme NF EN ISO 15189, les conditions de réalisation et de transmission des

prélèvements biologiques constituent une étape importante impliquant une étroite collaboration entre les préleveurs et le

laboratoire.

Le respect de ces exigences est essentiel pour garantir des résultats d’analyses fiables.

Votre implication et votre participation à cette étape pré analytique nous permettent d’améliorer ensemble le service rendu aux

patients.

Nous restons à votre écoute pour toute remarque ou suggestion qui pourrait contribuer à améliorer notre démarche qualité et à

faciliter notre partenariat.

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2-LES DIFFERENTS SITES DU LABORATOIRE BIOFUSION

SITE BEAUMONT DE LOMAGNE 38 rue Pierre de Fermat

82500 BEAUMONT DE LOMAGNE 05 63 02 41 86 05 63 02 41 96

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 30 à 12H 30 et 14H 30 à 17H 00

Le samedi 8H 00 à 12H 30

SITE BRUGUIERES 89 Av de Toulouse

31160 BRUGUIERES 05 61 82 53 97 05 61 82 54 34

laboratoire.bruguiè[email protected]

LAA LABORATOIRE

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 00 à 13H 00 et 14H 00 à 17H 30

Le samedi 7H 00 à 12H 00

SITE CAHORS 232 rue Joachin Murat

46000 CAHORS 05 65 35 83 33 05 65 35 83 30

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 30 à 12H 15 et 14H 00 à 18H 00

Le samedi 7H 30 à 12H 00

SITE CATHEDRALE 1 pl. Franklin Roosevelt

82000 MONTAUBAN 05 63 66 63 63 05 63 66 42 16

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 00 à 12H 30 et 14H 00 à 18H 30

Le samedi 7H 30 à 13H 00

SITE CASTELSARRASIN 14 bd Pierre Flamens 82100 Castelsarrasin 05 63 04 69 30 05 63 39 08 17

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 30 à 12H 30 et 14H 00 à 17H 30

Le samedi 7H 30 à 12H 00

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SITE MONTECH

27 av André Bonnet 82700 MONTECH 05 63 27 05 85 05 63 27 05 80

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 00 à 12H 30 et 14H 00 à 17H 30

Le samedi de 7H 00 à 12H 00

SITE POMPONNE 72 av. du 11

ème Régiment d’Infanterie

82000 MONTAUBAN 05 63 63 05 17 05 63 63 75 51

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 30 à 13H 00

Fermé le samedi

SITE GRISOLLES 10 rue Adrien Hébrard

82170 GRISOLLES 05 63 67 30 65 05 63 67 33 50

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 00 à 13H 00

Fermé le samedi

SITE CAUSSADE 4 rue de la Gare

82300 CAUSSADE 05 63 65 08 08 05 63 65 08 16

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 30 à 12H 00 et 14H 00 à 17H 00

Le samedi 8H 00 à 12H 00

SITE GRENADE 2 av Président Kennedy

31330 GRENADE 05 61 82 62 33 05 61 82 30 31

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 00 à 13H 00 et 14H 00 à 18H 30

Le samedi 7H 00 à 13H 00

SITE GRISOLLES 10 rue Adrien Hébrard

82170 GRISOLLES 05 63 67 30 65 05 63 67 33 50

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 00 à 13H 00

Fermé le samedi

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SITE SAINT JORY 1 rue Cabourdy 31790 ST JORY

05 61 37 96 00 05 34 27 70 82

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 00 à 13H 00

Fermé le samedi

SITE VILLEBOURBON 146 av Marceau Hamecher

82000 MONTAUBAN 05 63 91 04 25 05 63 91 04 27

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 30 à 13H 00 Fermé le samedi

SITE PONT DE CHAUME 43 rue des Arts

82000 MONTAUBAN 05 63 22 29 99 05 63 22 29 61

[email protected]

Horaires d’ouverture

Du lundi au vendredi : 7H 00 à 19H 00

Le samedi de 7H 30 à 16H 00

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3-LISTE DES ANALYSES – REFERENTIEL

cf. annexe 4

4-MATERIEL FOURNI PAR LE LABORATOIRE

4.1 - Boîte de prélèvements

Le laboratoire met à disposition des préleveurs externes des boîtes rigides « triple emballage » conformes à la réglementation ADR avec marquage UN3373. Ces boîtes contiennent le matériel nécessaire au prélèvement sanguin.

Tubes : emballage primaire fermé, étanche, résistant à une pression de 95 kPa. Aiguilles + corps de pompe. Kit de désinfection (tampon alcoolisé, pansement, compresse ou boule de coton).

Capot transparent : emballage secondaire étanche, équipé de blocs absorbants, avec calage et séparation des tubes en position debout.

Fiche de préconisation. Fiche de suivi médical.

Une boîte = un patient

Ne jamais regrouper à l’intérieur d’une même boîte des échantillons de patients différents

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4.2 - Matériel pour prélèvements bactériologiques

Flaconnage pour prélèvement d’urines : Ce flacon stérile peut être utilisé pour d’autres prélèvements (sécrétions bronchiques, …).

Flaconnage pour prélèvement d’urines avec percuteur.

Flaconnage pour recueil de selles : coproculture, examen de parasitologie des selles.

Système «eswab» : milieu de transport qui maintient la viabilité des bactéries anaérobies et aérobies 24h à température ambiante.

Ecouvillons divers.

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4.3 - Autres matériels

4.4 - Péremption du matériel

Flacon pour recueil urinaire de 24 heures.

Flacon pour recueil urinaire pour compte d’ADDIS.

Flacons pour hémocultures (1 flacon aérobie, 1 flacon anaérobie)

La date de péremption du matériel est vérifiée à la sortie du laboratoire, il est toutefois conseillé de vérifier ces dates avant utilisation du matériel (stock de tubes ou de flacons divers au cabinet du préleveur).

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5-DOCUMENTS INDISPENSABLES

5.1 - L’ordonnance

Certains éléments d’une prescription sont absolument indispensables :

L’identité du patient : - Nom, nom de naissance, prénom et date de naissance à vérifier auprès du patient. - Pour les patients hospitalisés : identité du patient (ou étiquettes autocollantes), nom du service, n° de la chambre, date du prélèvement.

L’identité du médecin prescripteur : - Nom, prénom, adresse, date de la prescription. - Numéro d’inscription à l’ordre des médecins et signature.

La liste des analyses à réaliser.

5.2 - La prescription spécifique « groupe sanguin »

Il est nécessaire de noter tous les éléments cités au chapitre 5.1 :

L’identité du patient : - Nom, nom de naissance, prénom et date de naissance. - Pour les patients hospitalisés : identité du patient (ou étiquettes autocollantes), nom du service, n° de la chambre, date du prélèvement.

L’identité du médecin prescripteur. - Nom, prénom, adresse, date de la prescription. - Numéro d’inscription à l’ordre des médecins et signature.

La demande de groupe sanguin. De plus les éléments ci-dessous sont indispensables :

Le préleveur doit : - mentionner sa propre identité - cocher obligatoirement l’une des cases relatives à la réalisation ou l’absence de transfusion sur le patient dans les quatre derniers mois - et renseigner sur une éventuelle injection d’anti-D (Rophylac®) durant les 4 derniers mois.

Si la prescription est associée à d’autres demandes, prévoir un tube réservé à la réalisation du groupe sanguin.

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5.3 -Fiche de suivi médical

À renseigner impérativement

Toute ambiguïté sur

l’identification du

patient, toute fiche

de prélèvement

incomplète,

l’absence de

prescription

entraîne une non-

conformité qui peut

aboutir à la non

réalisation des

analyses

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Toute urgence médicalement justifiée doit être transmise au laboratoire dans les meilleurs délais et signalée sur la fiche de suivi médical. La fiche de suivi médical doit obligatoirement être complétée des éléments ci-dessous :

L’identité du préleveur, la date et l’heure du prélèvement.

L’identité du patient. - Nom et nom de naissance s’il s’agit d’une femme. - Prénom. - Date de naissance.

Pour la prise en charge, il est essentiel de remplir la rubrique des éléments administratifs demandés dans la fiche de suivi médical. Ces renseignements sont indispensables pour la transmission aux organismes payeurs régimes obligatoires, complémentaires. Ils concernent le numéro de sécurité sociale, nom et prénom de l’assuré si l’assuré n’est pas le patient. Dans le cas contraire, la note sera adressée au patient.

Les informations cliniques pertinentes susceptibles d’avoir des répercussions sur l’interprétation des résultats d’analyses doivent être indiquées sur la fiche de suivi, cela peut être par exemple :

- Tout traitement en cours. - Poids du patient pour la créatinine. - Date des dernières règles en cas de test de grossesse ou de bilan hormonal. - A jeun ou non, - Hyperthermie…

5.4 - Consentement

Certaines analyses nécessitent un accord du patient (recherche de cytogénétique, génétique moléculaire, dépistage du risque de trisomie 21…). Les formulaires sont disponibles sur demande auprès du laboratoire. Il est à noter que l’analyse ne pourra pas être effectuée sans ce document dûment rempli et signé par le prescripteur et le patient.

5.5 - Examens hors nomenclature

Certaines analyses ne sont pas prises en charge par les organismes de remboursement (cf. Annexe 4). Dans ce cas, il convient de faire signer au patient une décharge ; cette décharge devra être jointe au prélèvement.

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6-IDENTIFICATION DE L’ECHANTILLON

Les échantillons destinés à être transmis au laboratoire doivent être parfaitement identifiés : nom de naissance, nom usuel, prénom du patient, date de naissance.

Positionnement des étiquettes codes à barres (prélèvements internes)

La chaîne analytique rejette tous les échantillons dont les règles d’étiquetage ne sont pas respectées.

Tubes de 7 ml Tubes de 5 ml

L’étiquette doit être collée

sur l’étiquette fournisseur existante,

comme exposé ci-contre.

L’étiquette doit être collée

sous le bouchon,

comme exposé ci-contre

Le type de tube à utiliser est indiqué en haut à droite de l’étiquette

Toute ambiguïté sur l’identification des échantillons est une non-conformité qui peut aboutir à la non réalisation des analyses.

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7-LE PRELEVEMENT SANGUIN

7.1 - Aspect psychologique du prélèvement

La personnalisation de l’acte : Le préleveur appelle le patient installé en salle d’attente, par son nom lu sur l’ordonnance. L’identité du préleveur et sa qualification sont clairement lisibles sur le badge de sa blouse.

L’information du patient : Le préleveur signale au minimum au patient qu’il va réaliser une ponction veineuse. Il répond aux éventuelles questions auxquelles il est soumis avec des termes simples et intelligibles. Ces questions portent généralement sur le contenu du bilan à effectuer.

La dédramatisation de l’acte : En toutes circonstances, le préleveur doit rassurer le patient.

Le consentement du patient : La ponction veineuse est un acte courant et peu dangereux. Les conditions et les conséquences sont généralement connues du patient. Il n’est donc pas nécessaire de recueillir un consentement exprimé de façon explicite. La réalisation des analyses génétiques et analyses hors nomenclature nécessite un consentement écrit.

La ponction veineuse chez l’enfant : La prise en charge psychologique s’adresse autant aux parents qu’à l’enfant. Les étapes d’information et de dédramatisation doivent être réalisées pour chacun d’eux dans la mesure du possible et en fonction de l’âge de l’enfant. Un parent peut, s’il le désire, être présent lors de la ponction (ne pas insister s’il ne le souhaite pas). Il y a la possibilité de mettre un « Patch d’Emla® » : pansement anesthésiant qui insensibilise la peau et qui atténue la sensation de piqûre lors de la ponction, ce pansement n’est délivré que sur prescription médicale.

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7.2 - Préparation du patient

L’état de jeûne est un des éléments permettant la bonne exécution technique des analyses et une interprétation pertinente des résultats. C’est pourquoi il est recommandé de prendre un repas léger la veille au soir et de venir à jeun le lendemain pour la prise de sang. La prise d’un verre d’eau est tolérée. Il y a deux causes d’erreurs en l’absence de jeûne :

- Par influence directe - Par artefact analytique dû à la lipémie.

Une période de jeûne stricte d’au moins 12 heures est indispensable pour le dosage du bilan lipidique, d’au moins 8 h pour celui de la glycémie … Pour les autres analyses ne nécessitant pas un état de jeûne, il est toutefois conseillé d’effectuer le prélèvement si possible au moins 2 heures après un repas pauvre en matières grasses.

Des horaires de prélèvement sont à respecter pour des analyses telles que : CTX, cortisol, prolactine… Pour d’autres analyses par exemple dans le cas d’exploration de la fonction ovarienne, le prélèvement doit être réalisé dans une période du cycle bien définie (du 3ème au 5ème jour).

Conformément aux exigences de la nomenclature des actes de biologie médicale, le dosage de médicaments nécessite l’obtention des renseignements suivants : - La date et l’heure du prélèvement. - Le nom du médicament. - La dose journalière. - La date et l’heure de la dernière prise de médicament. - Le motif de la prescription (recherche d’efficacité/toxicité). - L’âge, la taille le poids du patient.

Un régime alimentaire particulier peut être indispensable pour la réalisation de certaines analyses.

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7.3 - Réalisation du prélèvement sanguin

7.3 – a Prélèvement veineux

Le patient doit être confortablement installé. - Procéder avant tout geste invasif à une désinfection hygiénique des mains par lavage au savon antiseptique ou application d’une solution

hydro-alcoolique. - Port réfléchi des gants. - S’assurer de l’identité du patient en lui faisant décliner lui-même son identité, sa date de naissance. - Contrôler l’enregistrement de la prescription (pour les prélèvements réalisés au laboratoire). - S’assurer de la conformité des conditions de prélèvements. - Recueillir d’éventuels renseignements cliniques pertinents. - Sélectionner les tubes de prélèvements, en nature et en nombre, en fonction des examens prescrits. - Poser le garrot et rechercher la veine à prélever rapidement : illustration ci-dessous N°1 - Réaliser une désinfection soigneuse de la peau à l’aide d’un coton imprégné d’une solution antiseptique : illustration ci-dessous N°2

Pour les dosages d’alcoolémie la désinfection doit se faire avec un antiseptique ne contenant pas d’alcool. - Introduire l’aiguille dans la veine sur environ 1 cm : illustration ci-dessous N°3 - Respecter l’ordre de remplissage des tubes : cf. § 7-3-b : Recommandations techniques. - Respecter le volume de remplissage pour les tubes avec anticoagulant liquide, plus particulièrement pour le tube citraté. - Desserrer le garrot: illustration ci-dessous N°4 - Retirer l’aiguille tout en comprimant la veine avec un coton : illustration ci-dessous N°5 - Comprimer le point de piqûre pendant au moins de 2 min: illustration ci-dessous N°6

Le temps de compression doit être rallongé chez les patients sous anticoagulant ou antiagrégant plaquettaire. - Eliminer l’aiguille dans le récupérateur des déchets piquants contaminés immédiatement après le prélèvement: illustration ci-dessous N°7 - Homogénéiser les tubes par 6 retournements successifs lents: illustration ci-dessous N°8 - Identifier impérativement les tubes avec les étiquettes code à barres du patient ou en écrivant lisiblement son nom, prénom, et sa date de

naissance. - Poser un pansement adhésif.

Attention il est strictement interdit de transvaser l’échantillon d’un tube à un autre.

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ILLUSTRATION DU PRELEVEMENT

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7.3 – b Recommandations techniques

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Limite de remplissage maximum

Limite de remplissage minimum

Le rapport sang/anticoagulant permet la réalisation des analyses de façon appropriée.

Tubes avec additifs : certains tubes pour applications spécifiques sont fournis sur demande par le laboratoire.

Le bon remplissage des tubes est IMPERATIF pour les tubes citratés (> 80% du volume)

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7.3 – c Prélèvements à réaliser impérativement au laboratoire

Examens demandés par la Préfecture

Le prélèvement doit être pratiqué au laboratoire ; en effet nous sommes tenus de nous assurer de l’identité du patient.

Tests dynamiques (cf. annexe 1)

- Test de O’Sullivan. - Hyperglycémie provoquée par voie orale. - Hyperglycémie provoquée sur 2 heures. - Pool de prolactine. - Test TRF. - Test LH –RH. - Test au dexaméthasone.

Prélèvements nécessitant une congélation rapide (cf. annexe 2 - Liste des analyses à traiter rapidement)

7.4 - Prélèvements spécifiques

7.4 – a Le patient porteur d’une fistule artério-veineuse

Lorsqu’un patient est porteur d’une fistule artério-veineuse, réaliser toujours le prélèvement sur le bras opposé ; si ce dernier est perfusé, joindre le service de dialyse, seul habilité à réaliser des prélèvements dans une fistule artério-veineuse.

7.4 – b Le patient perfusé

Lorsqu’un patient est perfusé, réaliser le prélèvement sur le bras opposé.

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7.4 – c Les hémocultures

Intérêt : Réalisation d’un prélèvement aseptique de sang veineux afin de rechercher une éventuelle bactériémie. Matériel : - 2 flacons de culture (aérobie + anaérobie). - 1 dispositif de prélèvement spécifique + corps de pompe - 1 garrot. - 1 paire de gants non stériles. - 1 antiseptique. - Compresses stériles. - 1 rouleau de sparadrap.

Conditions de prélèvement : - Prélèvement réalisé au moment du pic fébrile ou bien en cas d’hypothermie avérée - Respecter les conditions d’hygiène et de sécurité notamment sur le lavage des mains et le port de gant. - Décapsuler les flacons aérobie et anaérobie et désinfecter l’opercule avec l’antiseptique. - Mettre le garrot et désinfecter largement le site de ponction. - Prélever d’abord le flacon aérobie puis anaérobie si ailette. - Eliminer l’ailette et le corps de pompe dans le récupérateur à déchets piquants immédiatement après le prélèvement. - Mettre un pansement ou comprimer avec une bande en mousse et une compresse sous celui-ci ; le temps de compression doit être rallongé chez

les patients sous anticoagulant ou antiagrégant plaquettaire. - Homogénéiser les flacons par 2 ou 3 retournements successifs. - Ecrire lisiblement sur les 2 flacons ou étiqueter avec les éléments suivants :

Nom et prénom du patient. Date de naissance. Numéro d’ordre des prélèvements « hémoc 1 » par exemple. Heure de prélèvement. Température du patient.

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- Ecrire lisiblement sur l’ordonnance : Traitement éventuel en cours. Heure de prélèvement. Température du patient.

- Acheminer rapidement les prélèvements au laboratoire à température ambiante. Ne pas coller d’étiquettes ou écrire sur les codes à barres des flacons. Inutile de mettre un pansement sur le bouchon en caoutchouc.

7.4 – d La gazométrie

Acte réservé aux établissements de soins et réalisé uniquement par les biologistes et infirmier(e)s.

Intérêt : Prélever quelques millilitres de sang par ponction artérielle (radiale, humérale ou fémorale), afin d’évaluer l’hématose et l’équilibre acido- basique, par détermination des pressions partielles en oxygène et en dioxyde de carbone du sang. Matériel : - 1 seringue stérile de 2ml spécifique à gaz du sang, pré-héparinée et munie d’un bouchon hermétique. - 1 aiguille (préférer les aiguilles IV ou sous cutanées). - Des compresses stériles. - 1 rouleau de sparadrap. - 1 antiseptique.

Conditions de prélèvement : - Vérifier les recommandations du prescripteur (air ambiant ou avec oxygène). - Désinfecter largement. - Retourner la main du patient en hyper extension pour ponction dans l’artère radiale.

La ponction dans l’artère humérale ou fémorale ne peut être réalisée que dans des conditions particulières. - Repérer l’artère à ponctionner par palpation. - Amorcer la seringue en tirant légèrement sur le piston (en fonction du type de seringue). - Piquer à 45° dans l’artère : soit le piston monte seul, soit il amorce une montée signifiant la possibilité de déclencher manuellement la montée du

sang dans la seringue. - Prélever au minimum 1 à 2 ml de sang. - Retirer l’aiguille et l’éliminer immédiatement dans la boîte à déchets piquants - Remplacer l’aiguille sur la seringue par le bouchon prévu à cet effet.

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Exercer un point de compression de plusieurs minutes : appliquer un pansement compressif à laisser en place pendant 10 à 15 mn afin d’assurer une bonne hémostase.

- Vérifier l’absence de bulle d’air et purger si nécessaire. - Homogénéiser le sang dans la seringue pour favoriser le contact avec l’héparine.

Ecrire lisiblement sur la seringue ou étiqueter avec les éléments suivants : Nom, prénom du patient, date de naissance. - Ecrire lisiblement sur l’ordonnance : le mode de ventilation (respirateur ou oxygène mural) et le débit d’oxygène, noter la température du patient. - Si le temps avant l’acheminement au laboratoire est supérieure à 10 mn, mettre la seringue dans de la glace.

LA GAZOMETRIE

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7.4 – e Le temps de saignement (examen hors nomenclature)

Cette analyse ne peut être réalisée au domicile du patient. Se renseigner au préalable auprès du patient sur la prise éventuelle d’un anticoagulant ou antiagrégant plaquettaire dans les 10 jours qui précèdent le test, dans ce dernier cas le temps de saignement doit être reporté.

Intérêt : Il s’agit d’un test d’exploration de l’hémostase primaire : ensemble de phénomènes aboutissant au colmatage initial d’une brèche vasculaire par formation d’un caillot fibrino-plaquettaire. Le temps de saignement explore le nombre et la qualité fonctionnelle des plaquettes, le rôle du vWF, la qualité du sous endothélium de la paroi vasculaire.

Méthode d’IVY Incision

Matériel : - Gants à usage unique. - Papier buvard. - Désinfectant, compresses. - Dispositif à usage unique « type Surgicutt ». - 1 tensiomètre, 1 Chronomètre.

Temps de Saignement- Méthode Ivy Incision

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Conditions de prélèvement : - Poser le tensiomètre et appliquer une pression permanente de 40 mmHg. - Désinfecter la zone à inciser avec une solution antiseptique. - Réaliser une incision avec le surgicutt sur la face antérieure de l’avant-bras, environ 5 cm sous le pli du coude, parallèlement à celui-ci, en évitant

les veinules superficielles et les éventuelles cicatrices ou contusions. Ce dispositif permet une incision standardisée : 1 cm de long, 1 mm de profondeur pour le modèle adulte.

- Déclencher simultanément le chronomètre. - Appliquer le buvard à proximité de la coupure, toutes les 30 secondes, sans frotter, jusqu’à ce que le papier buvard soit propre. - Arrêter le chronomètre. Le temps de saignement est déterminé par le temps arrondi à 30 secondes. - Noter le temps écoulé depuis l’incision jusqu’à l’arrêt du saignement. - Enlever le brassard, mettre un pansement adhésif sur la coupure.

Valeur de référence : Entre 4 et 8 minutes. Temps plus long chez la femme enceinte, plus court chez l’enfant.

Méthode de Duke

Matériel : - Vaccinostyle. - Papier filtre. - Désinfectant, compresse. - Chronomètre.

Conditions de prélèvement : - Réaliser une incision franche horizontale, à la partie moyenne du lobule de l’oreille, d’environ 5 mm avec un vaccinostyle ou dispositif à incision

unique. - Déclencher le chronomètre dès la première goutte de sang. - Appliquer un buvard à proximité de l’incision, toutes les 30 secondes, sans frotter, jusqu’à ce que le papier buvard soit propre. - Noter le temps écoulé jusqu’à l’arrêt du saignement.

Valeurs de références : Entre 2 et 4 minutes.

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8-LE PRELEVEMENT BACTERIOLOGIQUE ET CYTOLOGIQUE

La réalisation d’un examen de bactériologie dépend de l’indication et des renseignements cliniques fournis, des conditions techniques de prélèvement et du transport de l’échantillon. Chaque échantillon de bactériologie doit être accompagné de renseignements sur la nature du spécimen et sur le site anatomique d’origine, ainsi que sur une éventuelle antibiothérapie. Ces renseignements doivent être notés sur la fiche de suivi médical.

8.1 - Instructions d’utilisation d’un écouvillon «eswab»

- Réaliser le prélèvement. - Dévisser le tube et laisser le milieu liquide à l’intérieur. Plonger l’écouvillon dans le tube. - Briser l’écouvillon, en appuyant sur le point de brisure sur le bord du tube. - Revisser le tube. - Identifier le tube.

UTILISATION D’UN ECOUVILLON «ESWAB»

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1 seul écouvillon par prélèvement

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8.2 - Examen Cytobactériologique des Urines (ECBU)

Intérêt : Sur des urines récemment émises, l’ECBU permet de réaliser une cytologie urinaire, d’isoler et identifier les bactéries responsables d’infections urinaires et de réaliser un antibiogramme si nécessaire.

Matériel : 1 flacon stérile. 1 lingette stérile individuelle imprégnée d’antiseptique.

Conditions de prélèvement : - Si possible au moins 3 heures après la miction précédente - En dehors d’un traitement par antibiotiques (avant/au moins 48 h après l’arrêt du traitement) Préconisations pour le prélèvement : - Se laver les mains - Faire une toilette soigneuse à l’aide de lingette désinfectant remise par le laboratoire ou au savon. - Éliminer le 1er jet dans les toilettes et recueillir le milieu du jet dans le flacon stérile. Refermer soigneusement. - Identifier le flacon avec les nom et prénom du patient si cela n’a pas été fait par le laboratoire - Acheminer rapidement l’échantillon au laboratoire ; conserver l’urine au réfrigérateur (+4°C), pendant au maximum 24h, si l’envoi est retardé. - Cet examen doit être réalisé de préférence sur les urines du matin pour une concentration optimale des germes, ou au moins 3 heures après la

miction précédente.

Cas particuliers de recueil d’urine :

a. Recherche de Chlamydiae et mycoplasme urogénitaux (sur prescription explicite)

Conditions de prélèvement : - Si possible au moins 2 heures après la miction précédente - En dehors d’un traitement par antibiotiques (avant/au moins 48 h après l’arrêt du traitement) Préconisations pour le prélèvement : - Se laver les mains - Faire une toilette soigneuse à l’aide de lingette désinfectant remise par le laboratoire ou au savon. - Recueillir le 1er jet d’urine dans le flacon stérile fourni par le laboratoire et le refermer soigneusement. - Identifier le flacon avec les nom et prénom du patient si cela n’a pas été fait par le laboratoire.

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- Acheminer rapidement l’échantillon au laboratoire ; conserver l’urine au réfrigérateur (+4°C), pendant au maximum 24h, si l’envoi est retardé. - Cet examen doit être réalisé de préférence sur les urines du matin pour une concentration optimale des germes, ou au moins 2 heures après la

miction précédente.

b. Recherche de BK urinaire : Après restriction hydrique la veille, recueillir la totalité des 1ères urines du matin directement dans le flacon stérile, 3 jours consécutifs.

- Identifier le flacon avec les nom et prénom du patient si cela n’a pas été fait par le laboratoire. - Acheminer rapidement l’échantillon au laboratoire.

8.3 - Examen Cytobactériologique des Urines chez les patients sondés

Matériel : - 1 flacon stérile. - 1 lingette stérile à usage unique imprégnée d’antiseptique.

Conditions de prélèvement: - Respecter les conditions d’hygiène et de sécurité, notamment le lavage des mains et le port de gants. - Désinfecter le site de prélèvement : opercule prévu à cet effet ou extrémité de la sonde avant connexion sonde-collecteur. - Piquer dans le site du prélèvement à l’aide d’une aiguille et recueillir le volume d’urines nécessaire pour l’analyse dans un flacon stérile délivré

par le laboratoire. Refermer soigneusement et identifier. - Acheminer l’échantillon au laboratoire dans les 2 heures (acceptable 6 h) ou conserver au réfrigérateur si l’envoi est retardé.

8.4 - Mise en place d’un collecteur d’urine pédiatrique

Intérêt : Sur des urines récemment émises, l’ECBU permet de réaliser une cytologie urinaire, d’isoler et identifier les bactéries responsables d’infections urinaires et de réaliser un antibiogramme si nécessaire. Matériel : - Poche à urine pour enfant. - 1 compresse stérile individuelle imprégnée d’antiseptique.

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Conditions de prélèvement: - Rassurer l’enfant en lui expliquant que cela n’est pas douloureux.

- Respecter les conditions d’hygiène et de sécurité, notamment le lavage des mains et le port de gants. - Procéder à une toilette antiseptique du méat urinaire et de la région périnéale, à l’aide d’une compresse stérile imprégnée d’antiseptique. - Bien sécher la zone de contact de la peau de l’enfant avant d’apposer la partie adhésive de la poche. - Retirer la protection du rabat adhésif : attention à ne pas toucher l’orifice de la poche pour ne pas la contaminer. - Coller la poche sur la peau de l’enfant de sorte que l’orifice se trouve situé au niveau de la zone de miction. - La période de contact entre l’adhésif et la peau de l’enfant doit être inférieure à 30 min : au-delà, renouveler la poche. - Conseiller aux parents de faire boire l’enfant et de contrôler fréquemment la miction. - Dès l’émission d’urines, retirer délicatement la poche et identifier le recueil. - Placer la poche à urine dans un contenant, par exemple un pot à coprologie afin d’éviter d’éventuelles fuites, et acheminer le recueil le plus

rapidement possible au laboratoire.

Remarque : Les urines souillées par des selles ne seront pas acceptées. Dans tous les cas préciser s’il s’agit d’un contrôle après traitement ou si le patient est en cours de traitement antibiotique.

8.5 - Recueil des urines de 24H

Intérêt : Recueillir l’intégralité des urines du patient sur une période de 24H, afin de réaliser l’analyse de certains paramètres de biochimie urinaire.

Matériel : - Flacons de 2 litres en quantité suffisante. - Etiquettes autocollantes rappelant les conditions du prélèvement. Protocole : - Au lever vider la totalité de la vessie dans les toilettes. Inscrire les nom et prénom du patient, la date de naissance, date et heure de début de

recueil sur le flacon. - Pendant les 24 heures suivantes : recueillir la totalité des urines dans le flacon jusqu’à l’heure indiquée au départ.

Dans l’impossibilité d’acheminer rapidement le flacon il peut être conservé 8 heures à température ambiante. Cas particulier du dosage des catécholamines et 5HIA Un régime strict doit être suivi 48h avant et pendant toute la durée de recueil des urines (soit 3 jours de régime). - Catécholamines urinaires : régime sans BANANE, CHOCOLAT, FRUITS SECS, AGRUMES, AVOCAT, TOMATE, PRUNE, KIWI, ANANAS, MOLLUSQUES. - 5HIA urinaires : régime sans BANANE, CHOCOLAT, FRUITS SECS, AGRUMES, AVOCAT, TOMATE, PRUNE, KIWI, ANANAS, MOLLUSQUES.

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8.6 - Compte d’ADDIS – Hamburger –HLM

Intérêt : Test fonctionnel rénal, consistant à mesurer le débit hématies-leucocytes/minutes sur le recueil d’urines, après 3 heures de stase dans la vessie.

Matériel : - Deux grands verres d’eau. - Un flacon fourni par le laboratoire.

Conditions de prélèvement : Chez la femme, le recueil d’urine doit se faire impérativement en dehors des règles. Préconisations pour le prélèvement : - Se lever 3 heures avant l’heure habituelle et uriner dans les toilettes. - Boire deux grands verres d’eau et se recoucher pendant 3 heures exactement. - Se lever, recueillir la totalité des urines dans le flacon fourni par le laboratoire. - Identifier le flacon avec nom, prénom et date de naissance du patient. - Acheminer le flacon au laboratoire le plus rapidement possible.

8.7 - Recueil de selles

8.7 – a Coproculture

Intérêt : Elle vise à rechercher des bactéries responsables d’une diarrhée. Elle peut aussi être réalisée pour rechercher la présence d’une bactérie résistante ou d’un portage sain chez le personnel de cuisine.

Matériel : Pot à coproculture. Conditions de prélèvement : En dehors d’un traitement antibiotique si possible

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Préconisation pour le prélèvement : - Faire le recueil de selles directement dans le flacon stérile fourni par le laboratoire. - Identifier le flacon au nom et prénom du patient si cela n’a pas été fait par le laboratoire. Noter la date et l’heure du recueil. - Pour les bébés, la couche peut être amenée directement au laboratoire. - L'échantillon doit être acheminé rapidement au laboratoire. - Signaler tout traitement antibiotique éventuel suivi par le patient. - Signaler tout voyage à l'étranger réalisé par le patient.

Recherches particulières sur prescription explicite : Clostridium difficile, E. coli O157, coliformes entérotoxiques, vibrion, Bacillus cereus,

Adenovirus et rotavirus chez l’enfant de plus de 5 ans.

8.7 – b Parasitologie des selles

Intérêt : Mettre en évidence une infestation parasitaire (formes végétatives, kystiques, œufs…). Conditions de prélèvement : Si possible faire avant le recueil un régime sans résidu : éviter fruits, légumes « verts » ou champignons, céréales.

Matériel : Pot à coproculture. Conditions de prélèvement : - Le prélèvement doit parvenir au laboratoire dans un délai de 6 heures, ce délai est ramené à 1 heure dans le cas d’une recherche d’anguillule

et à 30 minutes dans le cas de la recherche d’amibes. - En cas de prescription de parasitologie sur 3 jours, respecter un délai d’au moins 48 heures entre 2 prélèvements. - Il est important de signaler tout voyage à l’étranger réalisé récemment par le patient.

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8.7 – c Le scotch test ou test de Graham

Intérêt : Ce test permet de mettre en évidence les œufs d’oxyures (vers intestinaux), très fréquents chez les enfants et très contagieux, entraînant des démangeaisons et des troubles du sommeil. Matériel : Dispositif fourni par le laboratoire (lame porte objet, ruban adhésif transparent, boîte de transport de lame).

Conditions de prélèvement : Le scotch test doit s'effectuer le matin avant la toilette et avant toute émission de selles - Décoller le ruban adhésif de la lame et l’appliquer aux abords de la marge anale, maintenir en appuyant quelques secondes. - Recoller le ruban sur la lame support. - Renouveler l’opération une seconde fois. - Replacer les 2 lames dans le support - Identifier avec nom, prénom, date de naissance - Acheminer rapidement au laboratoire à température ambiante (<12h)

8.7-d Recherche de sang dans les selles

Intérêt : La détection de sang dans les selles est réalisée pour le dépistage précoce du cancer colo-rectal. Le test permet de détecter l’hémoglobine native dans les selles. Préconisations : Eviter l’alcool, l’aspirine, les anti- inflammatoires et médicaments irritants pour l’appareil digestif qui peuvent provoquer des saignements. Leur prise doit être arrêtée au moins 48 heures avant le recueil des selles. Chez la femme, le recueil de l’échantillon doit être éloigné de plus de 3 jours des périodes menstruelles. Protocole :

Recueillir les selles dans le flacon fourni par le laboratoire. Identifier le flacon avec le nom, prénom date de naissance et noter la date et l’heure du recueil. L’échantillon peut être conservé 24 h à

température ambiante ou 72 heures au réfrigérateur avant d’être acheminé au laboratoire.

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8.8 - Prélèvement auriculaire – Oreille

Intérêt : Diagnostic otite externe.

Matériel : Ecouvillon «eswab».

Conditions de prélèvement: Ecouvillonnage du conduit auditif externe.

Cas particuliers : Le prélèvement de pus de paracentèse n’est effectué que par le médecin ORL.

8.9 - Autres prélèvements ORL

8.9 – a Gorge

Intérêt : Diagnostic une angine d’origine bactérienne ou d’une candidose buccale. Dépistage d’un portage sain de staphylocoque doré avant une intervention chirurgicale.

Matériel : - Abaisse langue. - Ecouvillon «eswab».

Conditions de prélèvement : L’émission du son « A » par le patient a pour but de diminuer le réflexe nauséeux. Il peut être utile d’abaisser la langue pour dégager le pharynx et éviter tout contact salivaire. On procède à l’écouvillonnage des amygdales ou de l’amygdale atteinte en cas d’amygdalite unilatérale ou en leur absence des piliers du voile du palais. Ne pas toucher la langue, les joues, les dents, avec l’écouvillon.

Cas particulier : - en cas de suspicion de candidose le prélèvement est effectué au niveau de la langue et de la face interne des joues. - en cas d’ulcération ou d’exsudat (angine de Vincent) : prélèvement à ce niveau.

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- en cas de suspicion de diphtérie : prélèvement sur la périphérie ou sous les fausses membranes Recherches particulières sur prescription explicite : Suspicion d’herpès : le prélèvement au niveau de l’ulcération s’effectue au laboratoire sur un milieu de transport particulier à la recherche de virus.

8.9 – b Prélèvement fosses nasales

Intérêt : Rechercher une infection ou un portage sain du staphylocoque doré avant une intervention chirurgicale.

Matériel : Ecouvillon «eswab».

Conditions de prélèvement : Ecouvillonnage des fosses nasales (1/3 inférieur) : 4 à 5 tours dans chaque narine.

Cas particuliers : Prélèvement rhinopharyngé pour la détection de coqueluche (bordetella pertussis) par PCR et détection du virus de la grippe : prélèvements à réaliser uniquement au laboratoire.

8.10 - Prélèvements oculaires

Conditions de prélèvement : Prélèvement à réaliser avant toute toilette faciale et en l’absence de maquillage.

8.10 – a Conjonctive Frottis conjonctival avec recueil des sécrétions et du pus conjonctival prélevé dans l’angle interne de l’œil avec un écouvillon «eswab».

8.10 – b Cornée Grattage sur la base et les berges de l’ulcère à l’aide d’un écouvillon avec un écouvillon «eswab».

8.10 – c Liquide de lentilles Prélèvement sur flacon stérile type ECBU.

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8.10 – d Blépharite En cas de recherche de Démodex, le prélèvement doit être effectué au laboratoire. La recherche de virus (herpès) ainsi que la recherche de chlamydiae sont réalisés sur des milieux spécifiques et uniquement sur prescription explicite. En cas de recherche de Chlamydia : Effectuer un grattage conjonctival par 4 aller et retour (paupière inférieure et paupière supérieure après retournement), recueillir le maximum de sécrétions puis introduire l’écouvillon dans le milieu pour PCR.

8.11 - Sécrétions broncho pulmonaires – expectorations

Intérêt : Mettre en évidence une infection bactérienne ou mycologique dans les sécrétions bronchiques.

Matériel : Utilisation d’un flacon stérile de type « ECBU ».

Conditions de prélèvement : Si possible en dehors de tout traitement antibiotique. Préconisations de prélèvement : Le matin à jeun après rinçage buccodentaire soigneux, et après avoir éliminé le maximum de salive. Recueil direct du crachat dans le flacon stérile après effort de toux. Si nécessaire, avoir recours à une kinésithérapie en particulier chez les enfants et personnes âgées (séances de clapping). Identifier le flacon avec le nom et prénom du patient date et heure du prélèvement.

Recherches particulières sur prescription explicite : Si recherche de mycobactéries (BK), leur émission étant discontinue, il est préférable de prélever des crachats 3 jours successifs.

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8.12 - Prélèvement vaginal

Intérêt : Mettre en évidence une infection bactérienne ou mycologique ou un déséquilibre de la flore.

Matériel : - Ecouvillon «eswab». - Spéculum stérile à usage unique, gants. - Kit spécifique pour la recherche de Chlamydiae trachomatis par hybridation moléculaire. - Kit spécifique pour la recherche de Mycoplasme : écouvillon dacron dans milieu de transport.

Conditions de prélèvement : Sauf avis contraire du prescripteur, éviter le prélèvement pendant la période menstruelle, en effet durant cette période la flore est modifiée. Le prélèvement doit être réalisé avant ou à distance de tout traitement antibiotique :

Arrêt de l’antibiothérapie > 15 jours pour les Chlamydiae , > 5 jours pour les germes banaux. La patiente doit éviter toute toilette intime, tout traitement local (crème, gel, savon… ) ainsi que tout rapport sexuel dans les 24 heures précédant l’examen. - La patiente est placée en position gynécologique sur la table d’examen. - Le spéculum est mis en place puis ouvert afin de positionner l’orifice du col dans la partie médiane du vagin. - Prélever 1 écouvillon «eswab» : en fonction du contexte clinique, le prélèvement se fera au niveau du cul de sac vaginal et/ou au niveau de

l’endocol. - Identifier chaque prélèvement et noter le site de prélèvement sur chaque écouvillon.

Recherches particulières sur prescription explicite : Recherche de Chlamydiae trachomatis - Eliminer soigneusement les sécrétions de l’exocol avec le 1er écouvillon du kit que l’on jette. - Introduire le 2ème écouvillon du kit dans l’orifice externe du col en lui imprimant un mouvement de rotation pour bien balayer toute la surface de

l’endocol et emprisonner les cellules dans les poils de l’écouvillon que l’on retire d’un geste rapide. - Décharger et casser l’écouvillon dans le milieu de transport fourni.

Recherche des mycoplasmes urogénitaux Gratter la muqueuse vaginale (et exocol) avec un écouvillon dacron puis décharger dans milieu de transport (UMT). Autres recherches : Syphilis, herpès, Recherche de virus HPV Oncogène (exclusivement chez la femme suite à un frottis avec ASCUS).

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8.13 - Le prélèvement urétral

Matériel : - Ecouvillon spécifique pour le prélèvement urétral. - Gants. - Kit spécifique pour la recherche de chlamydiae Trachomatis par hybridation moléculaire.

Conditions de prélèvement : - Le patient ne doit pas uriner dans les deux heures précédant le prélèvement. - Mettre des gants à usage unique. - Prélever 2 écouvillons au niveau du méat urinaire en effectuant 3 ou 4 rotations de façon à recueillir le maximum de cellules : Recherche de Chlamydiae trachomatis chez l’homme : - Introduire l’écouvillon du kit dans l’urètre sur 1 cm en effectuant 3 ou 4 rotations pour recueillir le maximum de cellules. - Chez la femme cette recherche doit être explicite sur la prescription médicale.

Recherche des Mycoplasmes urogénitaux sur prescription explicite : - Introduire l’écouvillon du kit dans l’urètre sur 1 cm en effectuant 3 ou 4 rotations pour recueillir le maximum de cellules.

Remarque : Pour la recherche de Chlamydiae et de gonocoque par PCR, il est possible de recueillir les urines du 1er jet, il faut alors ne pas avoir uriné dans les 2 heures précédant le recueil.

8.14 - Spermoculture :

Intérêt :

- Diagnostic d’une infection ou d’une inflammation génitale haute (orchi-épididymite, prostatite), en différenciant les germes pathogènes d’une

éventuelle contamination par la flore commensale du gland ou du tiers distal de la muqueuse urétrale.

- le contrôle de la qualité du sperme dans le cadre de la FIV et du don de sperme en vue d’insémination artificielle.

Matériel : Récipient stérile spécifique.

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Conditions de prélèvement : Prélèvement de préférence au laboratoire avec indication du contexte clinique. Le prélèvement du sperme est réalisé classiquement après une abstinence de 2 à 5 jours. Après la miction et avant le recueil du sperme, une désinfection soignée du gland, du méat, du sillon balano-préputial, du prépuce et des mains est nécessaire à l’aide d’un antiseptique suivi d’un rinçage à l’eau. Si le prélèvement n’est pas possible au laboratoire, le transport doit être effectué dans les 2 heures à environ 20°C

Recherches particulières sur prescription explicite : Chlamydiae trachomatis, mycoplasmes urogénitaux.

8.15 - Le prélèvement peau – phanère

8.15 – a A visée bactériologique

Matériel : Ecouvillon «eswab».

Conditions de prélèvement : Ecouvillonnage de la lésion cutanée, ulcère, escarre, plaie après détersion et nettoyage. Morsures : après désinfection des zones proximales, pratiquer un écouvillonnage profond. La nature de la lésion doit être précisée, la notion d’immunodépression ou de diabète doit être signalée.

8.15 – b A visée parasitologique et/ou mycologique

Recherche de sarcopte – gale :

Matériel : - Vaccinostyle. - Lames porte-objet. - Lamelles. - Eau distillée. - Microscope.

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Conditions de prélèvement : Il est important d’observer le patient de façon à repérer des lésions typiques afin d’optimiser le diagnostic. Les lésions cutanées au cours de la gale sont de 2 types :

les lésions non spécifiques secondaires au prurit généralisé. Il s’agit d’un prurigo sans localisation particulière pouvant se surinfecter.

La lésion spécifique où sillon scabieux est une petite lésion sinueuse de quelques millimètres correspondant à la femelle sarcopte fécondée dans la couche cornée de l’épiderme. Elles se situent préférentiellement dans les zones suivantes : espaces interdigitaux (mains, pied), sur les faces antérieures des poignets, et aussi autour des mamelons chez la femme, sur le fourreau de la verge chez l’homme, et à la plante des pieds chez le nourrisson. On peut également trouver un érythème papulo-vésiculeux des coudes et de l’abdomen. Dans des formes évoluant depuis plusieurs mois, il peut se constituer un nodule fibreux autour de l’acarien (nodule scabieux).

- Le prélèvement est à réaliser uniquement au laboratoire - Utiliser un matériel différent pour chaque site de prélèvement. - Gratter soigneusement avec un vaccinostyle la couche cornée au niveau des lésions spécifiques (sillon, vésicule perlée, nodule) que l’on

recherchera avec attention. - Déposer sur une lame dans la goutte d’eau distillée ou de KOH les squames recueillies et recouvrir d’une lamelle. - Faire une 1ère observation au microscope.

Recherche de Démodex au niveau des cils

Matériel : - Lames porte-objet. - Lamelles. - Eau distillée. - Pince à épiler.

Conditions de prélèvement : - Préparer 4 lames identifiées : paupière supérieure droite ; paupière supérieure gauche ; paupière inférieure droite ; paupière inférieure gauche. - Déposer 1 goutte d’eau sur chacune des lames. - Arracher 3 à 4 cils au niveau de chaque paupière à l’aide d’une pince à épiler. - Déposer les cils en les séparant bien sur la goutte d’eau distillée et recouvrir d’une lamelle. -

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Recherche de démodex au niveau du front et des ailes du nez

Matériel : - Lames porte-objet. - Lamelles. - Scotch translucide. - Bleu de lactophénol. - Eau distillée.

Conditions de prélèvement : - Préparer 1 lame. - Appliquer un segment de scotch au niveau du front ou des ailes du nez. - Masser du bout des doigts pour le faire adhérer. - Coller le segment de scotch sur la lame.

Prélèvement de peau pied / main – intertrigo (peau glabre et plis) Intérêt : Mettre en évidence une dermatophytose, une candidose ou un pityriasis versicolor

Matériel : - Vaccinostyle ou curette. - Boîte de Pétri.

Conditions de prélèvement : Le prélèvement doit commencer par un interrogatoire détaillé : notion de voyage récent en zone tropicale, métier exercé, animaux de compagnie, notion de traitement antifongique local ou général.

- Gratter l’ensemble de la lésion à l’aide d’une curette et recueillir les squames dans la boîte de Pétri. - Rechercher systématiquement une atteinte des ongles et prélever si c’est le cas. - Individualiser les prélèvements correspondant à chaque localisation.

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Prélèvement de poils - cheveux – folliculite du cuir chevelu – barbe

Matériel : - Pince à épiler. - Boîte de Pétri. - Ecouvillon

Conditions de prélèvement : - Arracher les poils situés au sein de la zone inflammatoire à l’aide de la pince à épiler. - Prélever quelques gouttelettes de pus avec un écouvillon stérile préalablement humidifié.

Prélèvement d’ongle – onyxis

Matériel : - Curette. - Boîte de Pétri. - Paire de ciseaux.

Conditions de prélèvement : Atteinte superficielle

- Gratter la surface de l’ongle à l’aide d’une curette et recueillir les fragments d’ongles dans la boîte de Pétri.

Atteinte proximale - Eliminer le bord libre de l’ongle en le coupant à l’aide d’une paire de ciseau jusqu’au front d’avance du champignon. - Eliminer les premiers produits de grattage. - Gratter les zones hyperkératosiques à l’aide de la curette jusqu’au contact avec les tissus sains : zone où le mycélium est en activité. - Recueillir les débris dans la boîte de Pétri.

Atteinte totale

- Eliminer ce qu’il reste de l’ongle à l’aide d’une paire de ciseaux. - Gratter la table inférieure de l’ongle à l’aide d’une curette et recueillir les débris dans la boîte de Pétri.

Rechercher systématiquement d’autres atteintes et les prélever séparément. Bien individualiser les prélèvements.

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8.16 – Prélèvements particuliers

- Myélogramme : prélèvement uniquement au laboratoire du site Pont de Chaume sur rendez-vous. - Spermocytogramme : prélèvement uniquement sur rendez-vous. - Liquides de ponction :

Ces prélèvements sont réalisés exclusivement par le médecin : liquide d’ascite , liquide pleural , liquide articulaire, LCR.

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9-PRELEVEMENTS NON-CONFORMES

Le laboratoire a mis en place une procédure de critères d’acceptation des prélèvements. Certains prélèvements non conformes pourront être acceptés après dérogation du biologiste, d’autres seront rejetés. Dans tous les cas, le laboratoire vous informera par téléphone des prélèvements rejetés. Le laboratoire est tenu d’informer le prescripteur de cette non-conformité sur le compte rendu du patient.

Tableau récapitulatif

Nature de la Non-conformité : ECHANTILLON Décision

Echantillon non identifié ou illisible (absence du nom et du prénom)

Rejet Ou Acceptation par dérogation du biologiste

Identité discordante (échantillon et/ou documents administratifs)

Rejet Ou Acceptation par dérogation du biologiste (confirmation d’identité indispensable)

Délai d’acheminement de l’échantillon non conforme au référentiel du guide du prélèvement.

Rejet Ou Acceptation par dérogation du biologiste

Prélèvement réalisé sur matériel périmé Rejet Ou Acceptation par dérogation du biologiste

Volume non respecté pour l’hémostase Rejet

Echantillon hémolysé ou lactescent Suivant le cas : Rejet ou Acceptation sur dérogation du biologiste en précisant que l’interprétation du résultat doit en tenir compte

Echantillon coagulé Rejet

Echantillon microbiologique non recueilli dans un contenant stérile

Rejet

Echantillon non conforme du point de vue de l’hygiène et de la sécurité du personnel du laboratoire

Voir le biologiste qui acceptera ou refusera l’échantillon en fonction de l’évaluation des risques

Nature de la Non-conformité : ADMINITRATIF Décision

Absence de la date du prélèvement Acceptation sous réserve de l’obtention de l’information. Si non obtention de l’information : Rejet

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Absence de l’heure du prélèvement Acceptation ou rejet suivant l’analyse demandée

Nature de la Non-conformité : TECHNIQUE Décision

Prélèvement réalisé côté perfusion Rejet

CAS PARTICULIER DU GROUPE SANGUIN ET DE LA RAI

Nature de la Non-conformité Décision

Absence ou non lisibilité sur la prescription : Du nom de naissance, ou du prénom, ou du nom usuel, ou de la date de naissance.

Rejet Excepté si : -information donnée par le patient accueilli sur site, ou par téléphone en cas de prélèvement à domicile (si possible avec confirmation par la carte d’identité). -ou si fiche de suivi médical correctement renseignée par le préleveur.

Erreur sur la prescription : Nom de naissance ou prénom ou nom marital Erreur d’orthographe notamment (s et ss, nom avec un s à la fin et sans s, etc…)

Acceptation si régularisation < 24 heures et avec confirmation par la carte d’identité si possible

Discordance majeure entre identité sur la prescription et la fiche de suivi médical (ex : deux noms différents, date de naissance non concordante)

Rejet

Absence de renseignements pour la demande de groupe et/ou RAI (identité complète, ATCD transfusionnels, injection de Rhophylac si grossesse)

Acceptation sous réserve de l’obtention de l’information. Garder la traçabilité rigoureuse des informations obtenues. Si informations non obtenues : Rejet ou acceptation par dérogation du biologiste.

Absence de date et /ou des heures de prélèvement en cas de double détermination demandées simultanément.

Rejet Excepté si : information indiquée sur la fiche de suivi médical. Traitement d’une seule détermination si pas de régularisation dans les 24h.

Tube décanté ou non adapté (ex tube sec avec gel dans le cadre des RAI)

Rejet

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10-HYGIENE ET SECURITE - TRAITEMENT DES DECHETS

10.1 - Hygiène des mains

But : Prévenir les contaminations, les mains étant un des principaux vecteurs d’infection.

Quelques règles simples : - Les ongles doivent être courts et propres, sans vernis. - Le port de bijoux est déconseillé. - L’utilisation des distributeurs de produit de lavage est recommandée. - Les mains seront séchées à l’aide d’essuie main à usage unique qui sera utilisé pour la fermeture du robinet (en l’absence de commande au pied).

Le lavage est un geste primordial qui se décline en trois catégories :

Le lavage simple réduit les germes constituant la flore transitoire. Réalisé avec un savon doux, aussi souvent que nécessaire, il est obligatoire avant et après être allé aux toilettes, après un mouchage, un éternuement, avant et après avoir mis des gants et enfin avant et après chaque manipulation. Le temps de savonnage est de 10 secondes au minimum. Le lavage hygiénique (ou antiseptique) supprime la flore transitoire, réduit la flore résidente. Il est réalisé avec un savon antiseptique pour chaque geste aseptique. Le temps de savonnage est de 40 à 60 secondes. Le traitement hygiénique des mains par friction de solution hydro-alcoolique : pas plus de 5 applications consécutives, au-delà un lavage simple est nécessaire.

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10.2 - Utilisation des gants

L’utilisation des gants a pour objectif une protection cutanée efficace avec un effet de barrière vis-à-vis des micro-organismes et des produits chimiques. Le port des gants est recommandé lors de la manipulation d’échantillons de sang et chaque fois qu’un contact direct avec un agent infectieux est possible. Le gant n’exclut pas le lavage des mains, Il faut donc les changer entre deux patients ou deux activités ; la durée de protection d’un gant n’excède pas 2 heures. Le port de gants est indispensable lorsque l’opérateur a des lésions cutanées et pour tout prélèvement bactériologique, mycologique, parasitaire. Les gants usagés sont considérés potentiellement contaminés et doivent suivre la filière d’élimination des DASRI.

10.3 - Conduite à tenir en cas d’Accident d’Exposition au Sang (AES)

Est considéré comme un AES : - Toute effraction cutanée provoquée par du matériel souillé de sang ou tout autre liquide biologique. - Toute projection sur les muqueuses, yeux ou sur une peau lésée.

Premiers soins à faire immédiatement : Des kits AES et protections individuelles, sont à disposition sur chaque site ainsi que dans les véhicules du laboratoire. En cas de piqûre, blessure ou contact direct avec une peau lésée :

- laver soigneusement la plaie avec de l’eau et du savon doux. - appliquer sur la blessure pendant au moins 5 mn une solution de Dakin® ou à défaut de Bétadine Dermique® afin de désinfecter la blessure.

En cas de projection sur les yeux : - Rincer abondamment à l’eau ou au sérum physiologique. - Consulter un ophtalmologiste rapidement.

Avertir le biologiste responsable présent immédiatement.

Dans les trois heures suivant l’accident et au mieux, dans l’heure qui suit : Informer le médecin référent en matière de prise en charge AES qui procèdera à l’évaluation du risque infectieux. Les coordonnées des médecins référents sont indiquées sur la plaquette de la conduite à tenir en cas d’AES qui est disponible dans chaque Kit.

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Evaluation du risque infectieux Vérification des dates de vaccination (Tétanos et Hépatite B) Identification de l’origine de l’exposition (objet tranchant ou aiguille) si possible, afin de connaître le statut sérologique (HIV, Hépatite B et C) du patient source. Si le statut est inconnu : les sérologies ne seront réalisées qu’avec l’accord du patient, ou de la famille si le patient n’est pas en mesure d’exprimer son accord. En fonction du résultat, le médecin référent mettra en place des mesures prophylactiques s’il le juge nécessaire.

Déclarer l’accident dans les 48 heures suivantes : - La personne victime d’un AES prévient le plus tôt possible le responsable des ressources humaines ou son secrétariat afin de faire la déclaration

d’accident du travail. - L’employeur adresse à la CPAM la déclaration d’accident du travail dans les 48 heures.

Surveillance médicale : - Entre J0 et J2 : transaminases, sérologie HIV, Hépatite B (anticorps anti-HBS : en cas d’absence, faire un dosage d’AgHbS) et sérologie Hépatite C. - J30 : transaminases, sérologie Hépatite C, sérologie HIV. - J90 : Sérologie HIV, transaminases, sérologie Hépatite C, AgHbS (si AC anti HbS négatif à J0). - J180 : Sérologie HIV, sérologie Hépatite C, transaminases, AcHBC si AcHBS <10 au 1er contrôle.

10.4 - Gestion des déchets

Tout dispositif en contact avec du sang ou du liquide biologique doit être considéré comme potentiellement dangereux et doit donc être éliminé en conséquence. Les objets piquants, coupants, tranchants (aiguilles, seringues, lames,…) issus de l’acte de prélèvement doivent être jetés dans des récupérateurs rigides spécifiques DASRI (attention à bien respecter les limites de remplissage). Les objets contaminés non perforants issus de l’acte de prélèvement (spéculum, abaisse langue…) seront jetés dans les containers cartons avec les objets mous. Les sacs plastiques jaunes spécifiques DASRI sont réservés aux compresses, coton, pansement, gants.

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Objets piquants, coupants

tranchants (OPCT)

Objets piquants, coupants tranchants (OPCT)

OBJETS MOUS

OU SOLIDE NON PERFORANTS OBJETS MOUS

L’élimination des déchets à risques infectieux est à la charge du préleveur (décret N° 97-1048 du 06 novembre 1997).

L’absence d’élimination du matériel piquant, coupant et tranchant dans un récipient conforme ou une aiguille souillée

re-capuchonnée retrouvée dans les boîtes de prélèvement mises à votre disposition par le laboratoire expose notre

personnel à des risques d’accident d’exposition au sang.

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11-ACHEMINEMENT ET TRANSPORT DES ECHANTILLONS

11.1 - Le transport vers le laboratoire Le transport d’échantillons de biologie médicale est régi par l’ADR (Accord européen relatif au transport international des matières Dangereuses par Route) et assimilable au transport de matières dangereuses. Cette règlementation s’applique à tout professionnel transportant des matières biologiques catégorie B (échantillons biologiques). Les infirmiers prenant en charge des échantillons biologiques pour le compte de leurs patients sont responsables de ce transport, ils sont donc aussi concernés par cette réglementation. Le laboratoire se charge quotidiennement de transporter des échantillons prélevés par certains cabinets médicaux ou établissements de soins en lieu et heures convenus avec les préleveurs. En dehors de cette collecte, et sauf accord particulier avec les établissements de soin, le préleveur devra organiser cet acheminement dans les délais fixés sur le référentiel des analyses jusqu’au laboratoire.

11.2 - Les températures de transport des échantillons :

Echantillons sanguins : Un intervalle de 15 à 25°C est préconisé. Les variations de température doivent être évitées ; cette recommandation est également à respecter concernant les tubes vides parfois stockés dans les véhicules.

Echantillons urinaires : Le délai de transmission idéal après le recueil est :

- 2 heures si la conservation est à température ambiante. - 24 heures dans le cas d’une conservation à + 4°C.

Ces échantillons doivent être transportés en sachet avec absorbant.

11.3 - L’acheminement des échantillons.

L’acheminement au laboratoire des échantillons prélevés en interne ou en externe doit suivre certaines recommandations : - L’échantillon et la prescription ne doivent pas être en contact. - L’acheminement doit se faire dans les délais préconisés : cf. référentiel annexe 4. - La température de conservation doit être respectée : cf. référentiel annexe 4

Dans les services des établissements de soins, un système de sachet est mis en place.

Une prescription = 1 patient = 1 sachet

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12-LES TECHNIQUES UTILISEES

Les méthodes analytiques utilisées au laboratoire sont disponibles sur simple demande.

13-LES ANALYSES COMPLEMENTAIRES – STOCKAGE DES ECHANTILLONS

Des compléments d’analyses, peuvent, à titre exceptionnel, être ajoutés après la réalisation des examens à la demande du médecin prescripteur. Cette demande doit être faite par téléphone sous réserve de la stabilité de l’analyse à ajouter et du respect des préconisations pré analytiques. Le laboratoire précisera si la quantité et la qualité du prélèvement sont adaptées à cet ajout d’analyse. Si la demande d’analyse complémentaire est réalisable, une prescription écrite devra parvenir au laboratoire dans les plus brefs délais.

14-EXAMENS URGENTS

Les examens urgents doivent être signalés téléphoniquement par le médecin, ou notés spécifiquement sur la prescription. Ces examens étant prescrits dans le but d’une action rapide face à une éventuelle perturbation majeure ; ils pourront ne pas être effectués à jeun ; l’interprétation du résultat devra toutefois en tenir compte.

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ANNEXE 1 – PROTOCOLES DE TESTS DYNAMIQUES A. Test Respiratoire à l’urée : Hélicobacter pylori

Intérêt : Mise en évidence de la présence d’Hélicobacter pylori dans l’estomac du patient. Contrôle de l’efficacité du traitement d’éradication.

Précautions : - Arrêt de tout traitement antibiotique depuis au moins 4 semaines avant le test. - Arrêt des anti-sécrétoires depuis 2 semaines. - Arrêt des anti-acides et pansements gastro-intestinaux (sels d’aluminium ou de magnésium depuis 24 heures).

Matériel : Le patient doit se procurer le test à la pharmacie sur prescription médicale. Plusieurs types de test sont commercialisés : Les plus courants sont « HELI-KIT® et HELICOBACTER TEST® ».

(Urée 13C : 75mg - acide citrique : 1,4 g) (Urée 13C : 75mg, acide citrique : 1g ) Laboratoire Mayoly-Spindler Laboratoire INFAI

Antisécrétoires Pansements gastriques /antiacides

anti H2 Inhibiteurs de la pompe à protons

Cimétidine : Tagamet®, Stomédine® Ranitidine : Azantac®, Raniplex® Famotidine : Pepcidac®, Pepdine®, Pepciduo® Nizatidine : Nizaxid®…

Omeprazole : Mopral®, Zoltum® Esoméprazole : Inexium® Lanzoprazole : Lanzor®, Ogast® Pantoprazole : Eupantol®, Inipomp®Rabéprazole®…

Acidrine®, Actapulgite®, Bedelix®, Bolinan®,

Contracide®, Gastropulgite®, Gelox®, Isudrine®,

Maalox®, Moxydar®, Phosphalugel®, Rennie®,

Riopan®, Smecta®…

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Les instructions doivent être suivies conformément aux modes opératoires respectifs du test utilisé.

Préparation du patient : - Sujet à jeun depuis la veille, au repos.

Heli-Kit® :

- Dissoudre l’acide citrique du sachet du kit dans 200 ml d’eau - Faire boire au patient 100 ml de cette solution et conserver le reste. - Dissoudre l’urée du sachet du kit dans le volume restant de la solution d’acide citrique (100 ml). - Ouvrir les deux tubes marqués T0 en dévissant le bouchon. - Faire souffler doucement le patient dans l’un des deux tubes T0 à l’aide de la première paille pendant 20 secondes. - Retirer la paille tout en continuant à faire souffler le patient puis reboucher rapidement le tube.

Attention ! Ne pas visser les bouchons Heli kit au-delà du pas de vis, l’étanchéité n’étant alors plus respectée. - Renouveler la même opération avec le deuxième tube T0. - Faire boire au patient la solution d’urée et déclencher le chronomètre. - Faire attendre le patient 30 minutes. - Ouvrir les deux tubes T30 en dévissant le bouchon. - Faire souffler doucement le patient dans l’un des deux tubes T30 à l’aide de la deuxième paille pendant 20 secondes. - Retirer la paille tout en continuant à faire souffler le patient puis reboucher rapidement le tube. - Renouveler la même opération avec le deuxième tube T30. - Vérifier l’étanchéité des tubes bouchés. - Insérer les tubes dans le cartonnage prévu à cet effet et joindre le bon de demande dûment complété. - Pour les correspondants du laboratoire, remettre le kit de transport complet à l’agent de collecte habituel pour un transport à température

ambiante. - Identifier avec les nom et prénom du patient, les 4 tubes de prélèvements (2 tubes T0 et 2 tubes T30).

Helicobacter test INFAI® :

- Ouvrir les deux tubes marqués T0 en dévissant le bouchon. - Faire souffler doucement le patient dans l’un des deux tubes T0 à l’aide de la première paille pendant 20 secondes. - Retirer la paille tout en continuant à faire souffler le patient puis reboucher rapidement le tube. - Renouveler la même opération avec le deuxième tube T0.

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- Faire boire au patient sans attendre 200 ml de jus d’orange (100% jus de fruits) ou 1 g d’acide citrique dans 200 ml d’eau. - Dissoudre l’urée du sachet du kit dans 30 ml d’eau. - Faire boire au patient la solution d’urée et déclencher le chronomètre. - Faire attendre le patient 30 minutes. - Ouvrir les deux tubes T30 en dévissant le bouchon. - Faire souffler doucement le patient dans l’un des deux tubes T30 à l’aide de la deuxième paille pendant 20 secondes. - Retirer la paille tout en continuant à faire souffler le patient puis reboucher rapidement le tube. - Renouveler la même opération avec le deuxième tube T30. - Vérifier l’étanchéité des tubes bouchés. - Insérer les tubes dans le cartonnage prévu à cet effet et joindre le bon de demande dûment complété. - Pour les correspondants du laboratoire, remettre le kit de transport complet à l’agent de collecte habituel pour un transport à température

ambiante. - Identifier avec les nom et prénom du patient, les 4 tubes de prélèvements (2 tubes T0 et 2 tubes T30).

Principe : Dosage du 13 C urée dans un air expiré (rapport entre T0 et T30) Cas particulier : il existe un test spécifique à l’enfant de – de 12 ans (Helicobacter test INFAI® 45 mg pediatrique)

B. Test d’hyperglycémie provoqué par voie orale : HGPO

But : Test de tolérance au glucose indiqué dans l’exploration d’une sécrétion inappropriée d’insuline par les cellules BETA des ilôts de Langerhans du pancréas.

Produit administré: Solution glucosée à absorber fournie par le laboratoire : 75 g de glucose (ou se conformer à la prescription du médecin). Relever le n° de lot et l’enregistrer en commentaire sur le dossier du patient.

Préparation du patient – Durée de l’épreuve : - Sujet à jeun depuis la veille. - L’épreuve dure 180 minutes.

Protocole : - Prélèvement à T0 : glycémie à jeun. - Administration per os de la dose appropriée de solution glucosée. - Prélèvement aux temps suivants : T30 (si prescription explicite), T60, T90 (si prescription explicite), T120, T180 mn après l’ingestion.

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Cas particuliers : - Ce test peut être associé à un dosage du C peptide à chaque temps.

T0 (T30) T60 (T90) T120 T180

Test d’hyperglycémie provoquée par voie orale chez la femme enceinte :

Les conditions de réalisation de ce test peuvent être différentes d’un prescripteur à l’autre. Dans tous les cas, respecter les consignes du médecin si celles-ci sont clairement explicitées.

1) HGPO à 75 g chez la femme enceinte :

But : Il s’agit d’un dépistage précoce du diabète gestationnel.

Produit administré : Solution glucosée à absorber fournie par le laboratoire (75g). Relever le n° de lot et l’enregistrer en commentaire sur le dossier du patient.

Préparation du patient – Durée de l’épreuve : - Sujet à jeun depuis la veille. - L’épreuve dure 120 minutes.

Prélèvement Prélèvement Prélèvement Prélèvement Prélèvement Prélèvement

Absorption du soluté

75 g

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Protocole : - Prélèvement glycémie à jeun au T0. - Administration per os de la solution glucosée (75g). - Prélèvements aux temps T60 et T120.

T0 T60 T120

2) Test de O ’Sullivan

But :

Il s’agit d’un test simplifié d’ Hyper Glycémie Provoquée par voie Orale (HGPO) visant au dépistage précoce du diabète gestationnel. C’est une épreuve qui s’effectue entre la 24ème et la 28ème semaine d’aménorrhée en l’absence de facteur de risque de diabète ou dès la 1ère consultation prénatale s’il existe des facteurs de risque connus.

Produit administré :

Solution glucosée à absorber (50g), fournie par le laboratoire. Relever le n° de lot et l’enregistrer en commentaire sur le dossier du patient.

Préparation du patient – Durée de l’épreuve : - Sujet à jeun depuis la veille - L’épreuve dure 60 minutes

Absorption du soluté

75 g

Prélèvement Prélèvement Prélèvement

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Protocole :

- Glycémie à jeun, T0 - Absorption per os d’une solution glucosée de 50 g de glucose sur une durée inférieure ou égale à 5 minutes - Glycémie à T+ 60 mn

NB : le temps 0 est facultatif (selon prescription médicale)

T0 T60

3) HGPO de confirmation

But : Epreuve complémentaire pratiquée en 2ème intention chez la femme enceinte pour confirmation de positivité du test de O Sullivan.

Produit absorbé :

Solution glucosée à absorber de 100 g de glucose. Relever le n° de lot et l’enregistrer en commentaire sur le dossier du patient.

Préparation du patient – Durée de l’épreuve : - Sujet à jeun depuis la veille. - L’épreuve dure 180 minutes.

Absorption du soluté

50 g

Prélèvement Prélèvement

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Protocole :

- T0 glycémie à jeun. - Absorption de 100 g de glucose. - Prélèvements : T60, T120, T180.

T0 T60 T120 T180

C. LE POOL DE PROLACTINE

But :

Epreuve qui consiste à analyser la sécrétion de prolactine par l’antéhypophyse. La prolactine est une hormone pulsatile menstruelle subissant des variations temporelles, nycthémérales. Sa concentration cyclique est variable car facilement influencée par un état de stress. Il est nécessaire de pratiquer plusieurs prélèvements à des temps différents après une période de mise au repos.

Préparation du patient – Durée de l’épreuve : Le prélèvement s’effectue le matin à jeun entre 8 et 10 heures. Le patient doit être reposé et non stressé, levé depuis au moins 1 heure. Le jeune n’est pas nécessaire. Eviter le café. Généralement, on pratique 2 prélèvements de 10 à 20 minutes d’intervalle, après une mise au repos de 15 à 20 min. Dans tous les cas, se conformer à la prescription du médecin si celui-ci mentionne des prélèvements supplémentaires. L’épreuve dure entre 40 et 60 minutes.

Absorption du soluté

100 g

Prélèvement Prélèvement Prélèvement Prélèvement

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59

Protocole

- Dans la mesure du possible, la pose d’un cathéter est préconisée. - Le 1er prélèvement (pour le pool) est différé de 20 min après la pose du cathéter. - Puis 2 ou 3 prélèvements à 20 min d’intervalle.

T0 T20 T40

D. TEST A LA LH-RH

But : Exploration de la réserve hypophysaire en gonadotrophines.

Produit administré : Stimu-LH® (ampoule de 50µg) laboratoire Ferring SAS. Adulte : 100 µg. Enfant : 100 µg de lh-rh par m2 de surface corporelle sans dépasser 100 µg (dose adulte pour les plus de 15 ans ou plus de 45 kg). Relever le n° de lot et l’enregistrer en commentaire sur le dossier du patient.

Préparation du patient – Durée de l’épreuve : - Examen à réaliser le matin entre 8h et 10h sur un sujet à jeun depuis 12 heures. - Femme en aménorrhée ou en début de phase folliculaire (4ème ou 5ème jour du cycle) et en dehors d’une prise d’oestroprogestatif. ( Arrêté

depuis 1 mois minimum). - Dans un bilan d’une précocité pubertaire et d’un retard pubertaire.

Pose du cathéter / Prélèvement si

autres analyses demandées

P

1 er Prélèvement pour

pool

2ème

Prélèvement pour

pool

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60

- Risques de manifestations allergiques - exceptionnellement nécrose d’un macro adénome. - L’épreuve dure entre 60 minutes et 120 minutes. - Ce test ne peut être réalisé que par un biologiste et/ou une IDE.

Protocole :

- Placer un cathéter veineux et à T0 effectuer le 1er prélèvement. - Injection de Stimu-LH®IV lente.

- Prélèvements sanguins à T30, T60, ± T90 et T± 120 (si prescrit) avec dosage de LH et FSH.

Remarque :

Ce test peut être couplé à des dosages de base ou éventuellement à d’autres tests dynamiques. Il peut, également, être prescrit avec FSH, œstradiol, testostérone, IgF-1 : un seul prélèvement à T0 sauf prescription explicite.

T0 T30 T60

E. LE TEST AU TRH

Prélèvement Prélèvement

Pose du cathéter

Injection du produit

Stimu LH

P

Prélèvement

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61

E. TEST AU SYNACTHENE IMMEDIAT®

But :

Il s’agit d’un test explorant la cortico-surrénale par stimulation par l’ACTH (Synacthène®) du cortisol

Produit administré :

Synacthène® immédiat : ampoule de 0,25 mg/ 1mL (conservée au réfrigérateur).

Relever le n° de lot et l’enregistrer en commentaire sur le dossier du patient.

Préparation du patient – Durée de l’épreuve : A jeun depuis 12 heures et au repos afin de limiter les phénomènes de stress. Arrêt d’un éventuel traitement par corticoïdes depuis 48 h En raison des variations nycthémérales de la sécrétion du cortisol (maximum à 8h et minimum à 24h), il est impératif de réaliser le prélèvement le matin entre 7h et 9h. L’épreuve dure 60 minutes.

Protocole :

- Prélèvement à T0 entre 8h et 9h du matin. - Injection IM de 0.25mg de Synacthène® immédiat dans le quart supérieur externe de la fesse. - Prélèvement sur tube sec à T30 et T60. - En l’absence de précision sur la prescription, doser uniquement le cortisol.

T0 T30 T60

Injection du produit

synacthène®

P

Prélèvement Prélèvement Prélèvement

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62

F. LE TEST AU DEXAMETHASONE OU DECTANCYL®

But :

Freinage de la cortico-surrénale afin de différencier les différents types d’hypercorticismes

Produit administré :

1mg de Dexaméthasone ou Dectancyl®.

Préparation du patient – Durée de l’épreuve : En raison des variations nycthémérales de la sécrétion du cortisol (maximum à 8h et minimum à 24h), il est impératif de réaliser le prélèvement le matin entre 7h et 9h. A jeun depuis 12 heures et au repos afin de limiter les phénomènes de stress.

Protocole : - Prélèvement à J0 entre 7h et 9h (facultatif, selon la prescription médicale). - Entre 23h et minuit le même jour, le patient prend par voie orale 1 mg de dexaméthasone ou Dectancyl®. - Prélèvement le lendemain matin entre 8h et 9h pour dosage du cortisol et éventuellement de l’ACTH.

J-1 J0

Prélèvement à 8h si

prescrit Prise per os du

dectancyl®

entre 23h et minuit

P

Prélèvement entre 8h et 9 h

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ANNEXE 2- LISTE DES ANALYSES A TRAITER RAPIDEMENT (Prélèvement domicile déconseillé) Cette liste n’est pas exhaustive, elle rassemble les examens demandés le plus couramment. Ces analyses sont à traiter et congeler dans l’heure ou les 4

heures suivant le prélèvement.

ACTH – Corticotrophine Plasma EDTA (tube aprotinine)

Aldostérone : Sérum, plasma EDTA

Aldostérone urinaire : Urines de 24h

AMP cyclique : Plasma EDTA

Angiotensine II : Plasma EDTA

Anticorps anti GAD : Sérum

Anticorps anti-récepteur de l’acétylcholine : Sérum ou plasma EDTA

Calcitonine : Sérum

Catécholamines plasmatiques : Plasma EDTA ou hépariné

Chromogranine A : Sérum

CH50, complément hémolytique total : Sérum

CTX (crosslaps): sérum (sans séparateur)

DDimères : Citraté

Facteurs de la coagulation : Plasma citraté

Gastrine : Sérum

GH, hormone de croissance : Sérum

HBPM : Plasma citraté

Héparinémie : Plasma citraté

HCG, chaine bêta libre, sous unité : Sérum ou plasma EDTA

Hépatite B charge virale : Plasma EDTA

Homocystéïne : Plasma EDTA ou hépariné

IGF1, somatomédine C : Sérum

Inhibine B : Sérum

Mycoplasmes : Sérum

NSE, Neuron Spécific Enolase : Sérum

Ostéocalcine : Sérum

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Rénine active : Plasma EDTA

Résistance à la protéine C activée : Plasma citraté

Sérotonine : Sang total hépariné

Testostérone biodisponible : Sérum à jeun impératif

Vitamine A - Rétinol sérum ou plasma hépariné

Vitamine B1, thiamine : Sang total EDTA

Vitamine B6, phosphate de pyridoxal : Sang total EDTA

Vitamine C, acide ascorbique : Plasma hépariné

Vitamine D, 1.25, dihydroxy-vitamine D : Sérum

Vitamine E, tocophérol : Sérum ou plasma hépariné

Vitamine K1, phylloquinone : Sérum (sans séparateur)

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65

ANNEXE 3 – BON DE CONFIRMATION D’IDENTIFICATION

CONFIRMATION D’IDENTIFICATION

Nom et prénom du préleveur :

Médecin : Infirmier (e) :

Confirme l’identité du patient :

Nom et prénom :

Nom de naissance :

Date de naissance :

Comme étant celle correspondant au prélèvement envoyé au laboratoire le :

Signature :

MU-ENR-SEC-001-01

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66

ANNEXE 4 – REFERENTIEL DES ANALYSES (MU-IT-PVT-001-version 3) MU-IT-PVT-001-version 3

REFERENTIEL DES ANALYSES DU

LABORATOIRE BIOFUSION

Partie 1 : Prélèvement sanguins et/ou urinaires Origine des sources : Préconisation des fournisseurs tube recommandé tube accepté OMS : WHO/DIL/LAB/99.1 Rév 2 X = à jeun sauf urgence X = à jeun de préférence

Partie 2 : Bactériologie

Documents de références / Origine des sources : Référentiel / origine des sources : Référentiel en microbiologie : REMIC 4ème édition 2010 Coprologie parasitaire et fonctionnelle : Bailenger édition 1982

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67

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

ACE (Antigène carcino embryonnaire)

8 h 15-25 24 h 1ml P

Acide folique

Acide lactique

Acide urique (sérique ou urinaire)

X 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Acide valproïque

AFP (alpha foetoprotéines) 8 h 15-25 24 h 1ml P

Albuminémie X 24 h 15-25 24 h 1ml P P

Alcoolémie 8 h 2-8 24 h 1 tube P P P

Amikacine 8 h 2-8 24 h 1ml P P

Ammoniémie15

minutesCongelé 24 h

Amylase (serique ou urinaire)

Anticorps anti ADN natif

(DNA)8 h 15-25 J+2 1ml P

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Cf.Folates

Cf. Lactate

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Cf. Dépakine

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 5 mois entre + 2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Pas de désinfection à l'alcool. Le tube doit être bien fermé ;

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 24h entre +2°C et +8°C.

Prélèvement à réaliser une heure après injection IM.

Prélèvement à réaliser sur sang total EDTA. Déposer l'échantillon

sur de la glace et l'acheminer dans les 15 min acheminer sur le

plateau technique dans les 2 heures.

Sauf cas de prescription d'amylasémie motivée, le biologiste médical exécute en lieu et place du dosage de l'amylasémie un

dosage de lipasémie.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

A

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68

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Anticorps anti-cellules

pariétales estomac8 h 15-25 J+3 1ml P

Anticorps anti-centromères

Anticorps anti-erythrocytaires 8 h 15-25Tube

primaire P

Anticorps anti-LKM 8 h 15-25 J+3 1ml P

Anticorps anti-MPO 8 h 15-25 J+3 1ml P

Anticorps anti-mitochondries 8 h 15-25 J+3 1ml P

Anticorps anti-muscles lisses 8 h 15-25 J+3 1ml P

Anticorps anti-nucléaires

(ACAN)8 h 15-25 J + 1 1ml P

Anticorps anti-cytoplasme

des polynucléaires neutrophiles

(ANCA)

8 h 15-25 J+3 1ml P

Anticorps anti-PR3 8 h 15-25 J+3 1ml P

Anticorps anti-ribosomes 8 h 15-25 J+3 1ml P

Anticorps anti peptides

citrullines (ACCP)24 h 15-25 24 h 1ml P

8 h Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Anticorps antigènes solubles

(ECT)

ssa, ssb, sm, rnp, scl70, jo1

P1mlJ+215-25

Stable 5 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 5 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 5 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Cf. ACAN

Stable 5 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 5 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Envoi EFS : En cas de RAI positive pour titrage ou

identification.

Stable 48h.

Stable 5 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 5 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 5 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

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69

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Anticorps anti-thyroperoxydase

TPO 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Anticorps anti-thyroglobuline

Tg8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Antithrombine III 4 h 15-25 24 h Tube plein

Anti XA

Apolipoprotéines A ou B X 24 h 15-25 24 h 1ml P P

ASDOR 8 h 15-25 48 h 1ml P

ASLO 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Beta HCG 8 h 15-25 24 h 1ml P

Beta 2 microglobuline 8 h 15-25 24 h 1ml P

Bicarbonates

Bilirubine totale et conjuguée 8 h 15-25 24 h 1ml P P

BNP 24h 15-25 24 h1 tube

reservé

(PRO)BNP 24h 15-25 24 h 1ml P P P

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 2 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Respecter le niveau de remplissage.

Cf. Héparinimémie

Stable 2 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Préciser la date des dernières règles.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Cf. Reserve alcaline

Conserver à l'abri de la lumière ;

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Prélèvement en tube plastique.

Stabilité 24h entre +2°C et +8°C après séparation du plasma et

des globules ; Sinon plasma congelé.

Stable 8 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Sérum du jour ; Sinon sérum congelé.

Envoi Fronton : Stable 3 jours à température ambiante ; 6 jours

entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

B

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70

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

BW (serologie syphilis) 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

CA 125 8 h 15-25 48 h 1ml P

CA 15.3 8 h 15-25 24 h 1ml P

CA 19.9 8 h 15-25 24 h 1ml P

Calcitonine Immédiatpvt.

labo24 h 1 ml P P

Calcium (serique ou urinaire) X 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Calcium ionisé X 6 h 15-25 24 h 1 tube

Carbamazépine (tégrétol) 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

CDT (Transférine désialysée) 8 h 15-25Mardi

Jeudi

1 tube

reservéP

Chlamydiae serologie

pneumoniae,trachomatis et

psitacci

8 h 15-25 48 h 1ml P P

Chlore (serique ou urinaire) 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Cholesterol X 24 h 15-25 24 h 1ml P P

Cholesterol HDL X 24 h 15-25 24 h 1ml P P

C

Stable 24h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 1h ; Sinon sérum congelé.

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 3 semaines entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Préciser la date et l'heure de la dernière prise .

Prélèvement à réaliser avant une nouvelle prise.

Stable 48h entre +2°C et+8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 24h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Envoi Proxilab: Stable 10 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon 1

mois sérum congelé.

Stable 2 semaines entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Seringue

gazo

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71

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Cholesterol LDL X 24 h 15-25 24 h 1ml P P

Ciclosporine 6 h 15-25 48 h1 tube

reservé

CK

CMV IgG et IgM

(cytomégalovirus)8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Coombs direct 8 h 15-25 24 hTube

primaire

Cortisol X 8 h 15-25 24 h 1ml P

Cotinine urinaire X 8 h 15-25 24 h P

CPK (Créatinine kinase) 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Créatinine ou clairance à la

créatinine 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

CRP 8 h 15-25 24 h 1ml P P

CTX (crosslaps) X 4 h Mardi

Jeudi1ml

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Sang totalEnvoi CBM : Préciser la date et l'heure de la dernière prise.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon 1 mois congelé.

Cf. CPK

Stable 14 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Renseigner si grossesse en cours.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon congeler l'échantillon.

Le recueil d'urine doit etre obligatoirement effectué au laboratoire.

Stable 48h entre +2°C et +8°C.

Envoi Proxilab : Prélèvement le matin à jeun avant 9h.

Décanter et congeler le sérum.Stable 3 mois congelé.

Prélèvement entre 7h et 9h.

Préciser la date et l'heure de la dernière prise.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Préciser le poids du patient.

Stable 2 mois entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 1 mois entre+2°C et +8°C ; Sinon 1 mois sérum congelé.

Eviter l'activité physique intense la veille du prélèvement.

X

Prélèvement uniquement au laboratoire.

Le matériel à prélèvement doit être préchauffé à 37°C.

Coagulation de l'échantillon à 37°C pendant 2 heures.

Centrifugation à 37°C.

Cryoglobuline

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72

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Ddimères 8 h 15-25 24 h1 tube

plein

Dépakine (acide valproïque) 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Digoxine 8 h 15-25 24 h 1ml P

Drogues urinaires 8 h 15-25 24 h P

EBV (Epstein barr Virus) 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Electrophorèse des protéines X 8 h 15-25 24 h 1ml P

Ethanolémie

Facteur rhumatoïdes 8 h 15-25 24 h 1ml P

Facteurs de la coagulation II;

V; VII; X4 h 15-25 24 h

Tube

reservé

Fer 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Ferritine 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Respecter le niveau de remplissage.

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 8 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Respecter le niveau de remplissage.

Stable 4h à température ambiante ; Sinon congeler l'échantillon.

Stable 3 semaines entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

De préférence prélèvement de 8h à 10h (rythme nycthéméral).

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Préciser la date et l'heure de la dernière prise.

Prélèvement à réaliser avant une nouvelle prise.

Stable 48h entre +2°C et +8°C; Sinon sérum congelé.

Préciser la date et l'heure de la dernière prise.

Prélèvement à réaliser avant une nouvelle prise.

Stable 48h entre +2°C et +8°C; Sinon sérum congelé.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon congeler l'échantillon.Le

recueil d'urine doit etre obligatoirement effectué au laboratoire.

D

E

F

Stable 14 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 8 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Cf. Alcoolémie

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73

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Fibrine 8 h 15-25 24 h1 tube

plein

Folates (acide folique / Vitamine B9) X 8 h 15-25 24 h 1ml P

FSH 8 h 15-25 24 h 1ml P

Gamma GT 24 h 15-25 24 h 1ml P P

Gazométrie

Glucose (serique ou urinaire) X 15-25 24 h 1ml P P P P

Respecter le niveau de remplissage.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé pendant 30

jours.

Garder à l'abri de la lumiere.

Groupe sanguin 1ere et 2ème

determination8 h 15-25

Préciser la date des dernières règles.

Stable 48h entre +2°C et +8°C; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C; Sinon sérum congelé.

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

prélèvement artériel sur seringue spécifique Stable 2h entre +2°C et +8°C-renseigner la température du patient

et oxygénothérapie.

Stable 24h sur tube fluoré. Jeûne de plus de 8 heures.

Autres tubes stables 24 h si centrifugés et aliquotés.

Stable 2h sur tube sec si non centrifugés et non aliquoté.

Pour la 2ème determination, un tube prelevé à un moment

différent de la 1ère determination.

Analyse à réaliser sur échantillon frais.

Si analyse différée, conserver entre +2°C et +8°C pendant 48 h. Nom de naissance indispensable, renseignements à compléter sur

éventuelle transfusion récente et/ou injection d'anti-D.

Stable 24h sur tube fluoré ou autres tubes si centrifugés et

aliquotés

Stable 1h sur autre tube non aliquoté

Prélèvement 2h après le début du repas

24 h

Tube

primaire

reservé

Glycémie post prandiale PP

G

P1ml24 h15-25

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74

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Haptoglobine 24 h 15-25 24 h 1ml P

HBPM

Hémoglobine glyquée 24 h 15-25 24 h2 ml sang

totalP P

Hépatite A IgM et IgG 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Hépatite B:

Anticorps anti HbC totaux

(anti Hbc II)

8 h 15-25 24 h 1ml P

Hépatite B: (CoreM/IgM) Ac

anti HbC IgM24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Hépatite B: Anticorps anti HbS 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Hépatite B: Antigène HbS 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Hépatite B: Antigène HbS

confirmation8 h 15-25 24 h 1ml P

Hépatite C 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Stable 8 mois entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Cf. Héparine

Stable 14 jours entre +2°C et +8°C.

Héparinémie /HBPM 4 h 15-25 24 h1 tube

plein

Respecter le niveau de remplissage.

Préciser l'heure d'injection et l'heure du prélèvement, le nom de

l'héparine et la posologie.

HNF: Prél.à mi-distance entre 2 injections.

HBPM : -Fragmine, Fraxiparine, Lovenox: Prél. 3 à 4h après

l'injection.-Innohep: Prél. 4 à 6h après l'injection

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon congelé.

Préciser si contrôle vaccinal.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Préciser le statut vaccinal.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

H

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75

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Hépatite C charge virale 6 h 15-25

Mardi

/Vend

redi

2 tubes P

Hépatite E IgM 8h 15-25 24h 1ml P

Herpès sérologie 8 h 15-25 Jeudi 1ml P

HIV combo 24 h 15-25 24 h 1ml P P

IgA/IgG/IgM 24 h 15-25 24 h 1ml P P

IgE totales 8 h 15-25 24 h 1ml P

IgE spécifiques 8 h 15-25 24 h 1 ml P

Immunoelectrophorèse des

protéines urinaires

Immunoelectrophorèse des

protéines sériques8 h 15-25

4

jours1ml P

Kleihauer 24h 15-25 24 h 1ml

Lactate X30

minutesGlace 24 h P P

Conserver immédiatement l'échantillon sur de la glace.

Séparer le plasma par centrifugation dans les 30 mn après le

prélèvement. Doser immédiatement

Envoi Biopôle : Stable 3 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum

congelé.

Envoyer au moins 1,5 ml de plasma ou de sérum.

Envoi CBM : Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon Sérum

congelé.

Stable 14 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon congelé.

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Cf. PBJ

Stable 8 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 4 mois entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

I

L

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

K

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C.

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76

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

LDH 4h 15-25 24 h 1ml P P

Légionelle urinaire 24 h 15-25 P

LH 8 h 15-25 24 h 1ml P

Lipase 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Lithium 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Lyme 8 h 15-25 24 h 1ml P

Magnésium (serique ou urinaire) 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Méthémoglobine 1 h 15-25 24 h 1 ml P

Microalbumine 8 h 15-25 24 h P

MNI test (PBD) 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Mycoplasmes urogénitaux

sérologieX 3 h 15-25 48 h 1ml P

Mycoplasmes respiratoires

sérologie8 h 15-25

Mardi

/Jeudi1ml P

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Préciser la date et l'heure de la dernière prise. (A prélever 12h

après la dernière prise de lithium).

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C; Sinon congelé.

Envoi CBM : Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum

congelé.

M

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C; Sinon sérum congelé.

Stable 1h à température ambiante ; Sinon conservation à +2°C.

Signaler la température du patient.

Dosage possible sur recueil de 24h ou sur 1 miction.

Stable 4 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 24h à température ambiante ; Sinon 14 jours entre +2°C et

+8°C.

Préciser la date des dernières règles.

Stable 48h entre +2°C et +8°C; Sinon sérum congelé.

Stable 3 semaines entre +2°C et +8°C; Sinon sérum congelé.

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 3h à température ambiante ; Sinon sérum congelé.

Envoi CBM : Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum

congelé.

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77

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Myoglobine HN si patient non hospitalisé

X 8 h 15-25 24 h 1ml P P

NF 8 h 15-25 24 h3 ml sang

total

Oestradiol 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Osmolalité 6 h 15-25 24 h 1 ml P

Parathormone 8 h 15-25 24 h 1ml

Plaquettes 8 h 15-25 24 h3 ml sang

total

PBD

Peptide C 8 h 15-25 24 h 1ml P

Phadiatop 8 h 15-25 24 h 1ml P

Phénotype erythrocytaire

Phosphatase alcaline 24 h 15-25 24 h 1ml P P

Phosphore (serique ou urinaire) 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Potassium (serique ou urinaire) 6 h 15-25 24 h 1ml P P

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Cf. Groupe

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon congelé.

Stable 24h entre +2°C et +8°C ; Sinon congelé.

Stable 24h entre +2°C et +8°C

P

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C.

Stable 48h entre +2°C et +8°C

Cf. MNI test

Stable 8h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

N

Stable 24h entre +2°C et +8°C

O

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Attention: pas de chocs thermiques.

Prélèvement au laboratoire sur tube gel ; Stable 1 semaine entre

+2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

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78

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Préalbumine 8 h 15-25 24 h 1ml P

Procalcitonine 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Progesterone 8 h 15-25 24 h 1ml P

Prolactine 8 h 15-25 24 h 1ml P

Protéines Bence Jones 8 h 15-25 24 h P

Protéines seriques 24 h 15-25 24 h 1ml P P

Protéines urinaire 8 h 15-25 24 h 1ml P

PSA totale et libre 8 h 15-25 24 h 1ml P

RAI (recherche agglutinines

irrégulières)8 h 15-25 24 h

Tube

reservéP

RAST

Reserve alcaline 6 h 15-25 24 h 1ml P P

Réticulocytes 24h 15-25 24 h 1ml

Rubéole IgM + IgG 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 24h entre +2°C et +8°C.

Prélèvement à réaliser le matin avant 10 heures. après une mise

au repos de 30 minutes de préférence à jeun.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Recueil sur urines de 24 heures,

Stable 4 semaines entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 24 h entre +2°C et +8°C

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

R

Stable 6 mois entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Préciser la date des dernières règles.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Voir groupes (Tube sec possible : bouchon rouge uniquement ).

En cas d'identification ou de titrage, voir "anticorps anti-

erythrocytaire"

Cf. IgE spécifiques

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum

congelé.Renseigner si grossesse en cours.

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79

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

SDHEA 8 h 15-25 24 h 1ml P

Sodium (serique ou urinaire) 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Syphilis sérologie

T3L 8 h 15-25 24 h 1ml P

T4L 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Taux de Prothrombine 8 h 15-25 24 h Tube plein

TCA 6 h 15-25 24 h Tube plein

Tégrétol

Testosterone homme X 8 h 15-25 24 h 1ml P

Tetanos 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Thyroglobuline 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Envoi CBM et/ou PURPAN : Préciser la date et l'heure de la

dernière prise.

Prélèvement à réaliser avant une nouvelle prise.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Tacrolimus ou Prograff 8 h 15-25 24 h 1 tube Sang total

Stable 2 semaines entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Cf. BW

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

T

Stable 2 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

S

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.Si

traitement (Levothyrox) le prélèvement doit etre réalisé avant la

prise du médicament.

Respecter le niveau de remplissage. Préciser le traitement et la

pathologie.

Respecter le niveau de remplissage.

Cf. Carbamazépine

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 3 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

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80

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

Toxoplasmose IgM + IgG 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Transaminases ALT (TGP) X 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Transaminases AST (TGO) X 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Transferrine 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Triglycérides X 24 h 15-25 24 h 1ml P P

Troponine 4 h 15-25 24 h 2ml P P

TSH 24 h 15-25 24 h 2ml P P P

Urée (sérique ou urinaire) 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Vancomycine 8 h 15-25 24 h 1ml P P P

Vitamine B9

Vitamine B12 8 h 15-25 24 h 1ml P P

Vitamine DHN si prescrit en dehors des recommandations

HAS

X 24 h 15-25 24 h 1ml P P P

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 8 mois entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 48h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Jeûne de 12 heures au moins.

Stable 24h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Préciser la date et l'heure de la dernière prise.

Prélèvement à réaliser avant une nouvelle prise.

Stable 48h entre +2°C et +8°C; Sinon sérum congelé.

Cf. Folates

Stable 8h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 7 jours entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

V

U

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81

Analyses H

N

J

E

U

N

Conditions

d'acheminement

après le

prélèvement

R

E

N

D

U

Quantité Ur.

VS 8 h 15-25 24 h3 ml sang

total

Waaler rose 8 h 15-25 24 h 1ml P

Particularités et stabilité après traitement de l'échantillon

Stable 72h entre +2°C et +8°C ; Sinon sérum congelé.

Stable 24 h entre +2°C et +8°C

W

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82

BACTERIOLOGIE

D’une manière générale, les délais signalés sont ceux recommandés par les sociétés savantes et les référentiels de microbiologie. Il faut donc comprendre le laps de temps indiqué comme étant le délai idéal à respecter ; Le laboratoire se réserve le droit à toute dérogation motivée. Tous les prélèvements bactériologiques doivent être réalisés si possible avant toute antibiothérapie. Documents de références / Origine des sources : Référentiel / origine des sources : Référentiel en microbiologie : REMIC 4ème édition 2010 Coprologie parasitaire et fonctionnelle : Bailenger édition 1982

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83

Analyses HN Nature de

l’échantillon Matériel

Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai d’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Ag urinaire

légionelle

Urines

4 J 24 h J 0

48 h

Bilharziose

urinaires

Urines

Après un effort physique (marche

rapide 30 mn)

24 h J+1

Coproculture Selles

24 h Le + rapidement

possible

Acceptable 6 h

J+3

Cytologie Urines

24h Idéal 2h

Acceptable 6 h

J 0

24 h

Dermatophytes Tout échantillon

biologique

d’origine humaine

Prélèvement au laboratoire 12 h J+21

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84

Analyses HN Nature de

l’échantillon Matériel

Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai d’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Compte d’Addis urines

cf guide du prélèvement 24 h 6 h J 0

Examen

bactériologique

d’un prélèvement

de cathéter,

chambre

implantable,

prothèse, valves

Dispositifs

implantables :

cathéter, drains,

chambres, autres

dispositifs

médicaux.

Procéder stérilement au retrait du

matériel et insérer les 5 cm de

l’extrémité distale pour les

cathéters longs. Pour les courts

seule la partie insérée est à

prendre.

4 h J+2

Examen

bactériologique

d’un prélèvement

de mèches,

redons, stérilet

Dispositifs

implantables :

mèches, redon,

stérilet, sonde

Prélèvement aseptique du matériel

à demeure

4 h J+2 à J+5

Examen

bactériologique

d’un prélèvement

de placenta,

lochies

Echantillons

périnataux liquide

amniotique,

placenta…)

Aspiration

gastrique

2 h J+3

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85

Analyses HN Nature de

l’échantillon Matériel

Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai D’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Examen

bactériologique

d’un prélèvement

pluri-orificiel chez

nné <12h

Echantillons

périnataux

oreille, anus,

méconium, plis

inguinaux

2h J+3

Examen

bactériologique

d’un prélèvement

ostéo-articulaire

Prélèvement

ostéo-articulaires

2h J+20

Examen cyto-

bactériologique

des urines (ECBU)

urines

24 h Idéal 2h Acceptable 6 h

J+2

24 h

Examen cyto-

bactériologique

d’un liquide de

ponction

Liquides de

ponction,

articulaire,

pleural, ascite...

Cas particulier du liquide

articulaire : une partie doit être

recueillie sur tube citraté ou

hépariné

Idéal 2h

Acceptable 6 h

J+5

J+15 pour

articulaire

Examen cyto-

bactériologique

d’un liquide de

ponction

LCR

Le plus

rapidement

possible

J+5

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86

Analyses HN Nature de

l’échantillon Matériel

Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai d’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Examen cyto-bactériologique d’un prélèvement de la sphère ORL (gorge, nez, …)

Echantillon ORL

24h J+3

Examen cyto-

bactériologique

d’un prélèvement

de peau ou des

phanères

Echantillon

cutanés ou

muqueux,

phanères

24 h J+3

Examen cyto-

bactériologique

d’un prélèvement

de plaie,

écoulement

purulent, tissu…

pus

24 h J+3

Examen cyto-

bactériologique

d’un prélèvement

de produit

d’aspiration ou

brossage ou

lavage

bronchique,

Secrétions

broncho-

pulmonaires

(LBA,…)

Aspiration

bronchique

2 h J+3

Page 88: Version 3 (Mai 2015) - Accueil du prelevement V3... · Le respect de ces exigences est essentiel pour garantir des résultats d’analyses ... au prélèvement sanguin. Tubes: ...

87

Analyses HN Nature de

l’échantillon Matériel

Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai d’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Examen cyto-

bactériologique

d’un prélèvement

de produit

d’origine

pelvienne par

coelioscopie dont

MCP et CHLA

Produit d’origine

pelvienne

Idéal 2h Acceptable 6 h

J+3

Examen cyto-

bactériologique

d’un prélèvement

de pus (collection

fermée) : inclus

anaérobie

Pus

Idéal 2h Acceptable 6 h

J+4

Examen cyto-

bactériologique

d’un prélèvement

génital chez

l’homme PU

Prélèvement

urétral…

Décharger l’écouvillon dans un

flacon Eswab

24 h J+3

Examen cyto-

bactériologique

d’un prélèvement

oculaire

Echantillon

oculaire

24 h J+3

Page 89: Version 3 (Mai 2015) - Accueil du prelevement V3... · Le respect de ces exigences est essentiel pour garantir des résultats d’analyses ... au prélèvement sanguin. Tubes: ...

88

Analyses HN Nature de

l’échantillon Matériel

Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai d’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Examen cyto-

bactériologique

d’un prélèvement

vaginal PV

Génital (vaginal,

col, urètre)

24 h J+3

Examen

parasitologique

des selles

Selles

24 h 6 h 1 h si recherche de formes végétatives

J+2

Hémocultures Sang

24h J+7

Mycoplasme

culture

Génital (vagin,

sperme, col,

urêtre, urine…) Conservation

du milieu entre

2° 8° C

56 h 20 h J+2

Mycoplasme

culture sans milieu

de transport

Génital (vagin,

sperme, col,

urêtre, urine…)

J+2

Page 90: Version 3 (Mai 2015) - Accueil du prelevement V3... · Le respect de ces exigences est essentiel pour garantir des résultats d’analyses ... au prélèvement sanguin. Tubes: ...

89

Analyses HN Nature de

l’échantillon Matériel

Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai d’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Recherche

d’adénovirus

Selles

24 h 6 h J 0

Recherche de

clostridium

difficile

selles

4 J 4 h J 0

Recherche de

Malassezia furfur

Prélèvement

cutané

24 h J 0

Recherche de

Mycobactéries

Tout échantillon

biologique (sauf

urine)

16 h J+1 à J+2

Mois

Recherche de

Mycobactéries

Urines

24h 4 h J+1 à J+2

Mois

48 h

Recherche de

parasites

Tout échantillon

biologique

12 h J 0

Page 91: Version 3 (Mai 2015) - Accueil du prelevement V3... · Le respect de ces exigences est essentiel pour garantir des résultats d’analyses ... au prélèvement sanguin. Tubes: ...

90

Analyses HN Nature de

l’échantillon Matériel

Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai d’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Recherche de

Rotavirus

Selles

24 h 6 h J 0

Recherche de

chlamydiae

Trachomatis par

PCR

Urines 1er jet

Cf guide du prélèvement 24 h 24 h mardi et

jeudi

Sperme, prélèvements génitaux, liquides, urines

Cf guide du prélèvement 48h 24h

Recherche des oxyures (scotch test)

Cutané

24 h J 0

Recherche

d’Escherichia coli

pathogène

Selles

24 h 6 h J+3

Recherche de

Neisseiria

gonorrhoeae par

PCR

Urines

24 h 24 h

Sperme, prél.

génitaux, liq

urines

48h 24h

Sang dans les

selles

Selles

3 J 3 J J0

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91

Analyses HN Nature de

l’échantillon Matériel

Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai d’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Sécretions

broncho-

pulmonaires

Sécrétions broncho-pulmonaires (LBA, expectorations)

16 h J+3

Spermoculture Recueil de sperme

2 h J+3

Urines – sondes Urines sur sonde

24 h Idéal 2h

Acceptable 6h

J+2

24 h

Analyses

Bacteriologie de l’eau

Chimie de l’eau

Piscine de particulier

Matériel Recommandations

particulières

Délai d’acheminement

Max à (+2°C/+8°C)

Délai d’acheminement

Max à T° ambiante (+15°C/+25°C)

Délai de

rendu des

résultats

Flacon spécial

fourni par le

laboratoire

Contacter le laboratoire 24 h 1 semaine

24 h 1 semaine

24 h 1 semaine

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92

Site de Beaumont de Lomagne Site de Bruguières

Site de Cahors Site de Castelsarrasin

Site de Caussade Site de Grenade Site de Grisolles

Site de Montauban-Cathédrale Site de Montauban-Pomponne

Site de Montauban-Pont de chaume Site de Montauban-Villebourbon

Site de Montech Site de Saint-Jory