TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

22/10/2015FERRANDI Francesca L2CR : NICOLAS MargotTissu sanguinPr H. Lepidi12 pages

Histologie des organes lymphoïdes

A. Les organes lymphoïdes primaires

I. La moelle osseuse

a. Description

La moelle osseuse se trouve dans l'os spongieux, entre les travées osseuses dans les logetteshématopoïétiques. On distingue la moelle rouge dite « hématopoïétique » de la moelle jaune dite «adipeuse»uniquement constituée d'adipocytes.

La moelle rouge n'est pas présente dans tous les os spongieux mais uniquement dans les os plats (sternum,côtes, os du crane), les os courts (vertèbres) et extrémités des os longs (os iliaque, extrémité supérieure dufémur).

Pour étudier la moelle osseuse d’un patient, on a recours à deux techniques différentes : – Le myélogramme qui est une étude cytologique. On réalise une ponction le plus souvent au niveau du

sternum. Le produit d'aspiration est ensuite étalé sur une lame et coloré à l'aide d'un traitementspécifique au MGG (May Grunwald Giemsa).

– La biopsie médullaire qui est une étude histologique. Le prélèvement provient ici de l'os iliaque (auniveau du pelvis) et son traitement se constitue d'une fixation formolée, d'une inclusion en paraffine etde la formation des coupes tissulaires (3 colorations : HE (Hématine-éosine), Giemsa (pour mettre enévidence les morphologies nucléaires) et réticuline (coloration pour les fibres de réticuline)).

Sur le plan histologique, on distingue deux compartiments distincts : • Le contenant ou tissu réticulé • Le contenu ou tissu hématopoïétique

1/12

Plan

A. Les organes lymphoïdes primaires I. La moelle osseuse II. Le thymus

B. Les organes lymphoïdes secondaires I. Les ganglions lymphatiques II. La rate III.Le système lymphoïde associé aux muqueuses (on le fera lors d'un cours sur l'appareil digestif)

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

Sur un faible grossissement de moelle rouge, on voitles travées osseuses, on est dans une logettehématopoïétique. Ce qui prédomine sont lesadipocytes, ils représentent 50% du volume deslogettes environ et sont de plus en plus nombreuxavec l'âge. Les petites cellules forment le tissu hématopoïétique àdifférents stades de différenciation, maturation.

Le tissu réticulé médullaire (le contenant)

Le tissu réticulé médullaire constitue le micro-environnement cellulaire médullaire. Il a un rôle très importantdans la régulation de l’hématopoïèse, il se constitue de différents types cellulaires :

– Les macrophages– Les fibroblastes médullaires qui synthétisent notamment les fibres de réticuline– Les adipocytes (50% des cellules médullaires) – Les cellules endothéliales des capillaires sinusoïdes de la moelle osseuse. Comme dans le foie et la

rate, ces capillaires sont des capillaires discontinus, c'est à dire que les cellules endothéliales sont nonjointives et la lame basale est discontinue afin de permettre le passage de cellules entières. En effetlorsque les cellules hématopoïétiques arrivent au terme de leur maturation, elles vont passer dans le sangen franchissant la barrière de capillaires sinusoïdes.

Les fibres de ce micro-environnement sont principalement des fibres de réticuline (ressemblant à de petitscheveux au microscope) et des fibres de collagène. Pour mettre en évidence les fibres de réticuline il faut descolorations spéciales, elles forment un maillon délicat à travers lequel les cellules hématopoïétiques viennent sedisposer.

Le compartiment hématopoïétique médullaire

Il correspond aux différentes lignées cellulaires sanguines en formation se situant entre les mailles du tissuréticulé. Ces différentes lignées cellulaires sont :

– Les lignées lymphoïdes : Ly T, Ly B, cellules NK– Les lignées myéloïdes : érythrocytes, granulocytes, monocytes, thrombocytes

2/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

b. Les fonctions de la moelle osseuse

La fonction principale de la moelle osseuse est l’hématopoïèse c'est-à-dire la production, la différenciation et lamaturation des cellules sanguines. Cette hématopoïèse est finement régulée, considérable et adaptative (lamoelle osseuse peut augmenter la production de certains types cellulaires sanguins). Les Ly T sortent immatures de la moelle osseuse et terminent leur maturation au sein du thymus, alors que lesautres cellules sortent de la moelle osseuse à l'état mature.

C'est compliqué car il y a beaucoup de types de cellules différents. On voit les mégacaryocytes qui vont donnerles plaquettes, des érythroblastes qui sont des cellules à noyau très foncé avec un peu de cytoplasme et le typecellulaire le plus représenté qui est celui des cellules granuleuses (petites cellules avec un noyau en virgule).On a aussi des polynucléaires éosinophiles car, une fois matures, ces cellules vont persister avant de passer dansle sang.

Les cellules granuleuses les plus immatures se mettent aucontact des travées osseuses et migrent ensuite, une foismatures vers le centre où sont situés les vaisseaux sanguins.

Ici ce sont des colorations au Giemsa : souvent utilisée pourla MO et qui permet de bien visualiser les noyaux.

On peut faire de l'immuno-marquage : – CD 68 qui marque les macrophages– CD 3 : Ly T, – CD 20 : Ly B moins nombreux– CD 138 : plasmocytes, – CD 15 : lignée granuleuse la plus nombreuse ou avec la

myéloperoxydase, – Glycophorine a : lignée rouge et les érythrocytes des

vaisseaux sanguins – Le facteur 8: les mégacaryocytes.

En ce qui concerne la partie pathologique, il existe des fibroses médullaires : traits noirs comme dessinés aupinceau qui sont plus nombreux que d'habitude. S'ils sont très importants, on parle de syndromemyéloprolifératif.

3/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

La moelle osseuse a aussi d'autres fonctions : – Site de différenciation et maturation des LB (attention leur maturation terminale se fait en dehors de

la moelle osseuse.)– Élaboration des réponses immunitaires : plasmocytes– Filtration et épuration du sang (site d'élimination des GR) par les macrophages

II. Le thymus

C'est un organe lympho-épithélial, il participe à la différenciation et à la maturation des lymphocytes T etpossède de nombreuses cellules épithéliales. C'est le seul organe lymphoïde qui ne contient pas de fibres deréticuline. C'est un organe lobulé situé dans le médiastin antéro-supérieur et entouré par une capsulecollagénique avec de courtes travées intra-corticales qui pénètrent la pulpe thymique partiellement. Il possède deux grandes parties de compositions histologiques différentes :

• Le cortex, partie la plus sombre et périphérique • La médullaire, partie plus claire et centrale.

Il est constitué de deux grands compartiments fonctionnels : • Le tissu de soutien (contenant) • Les cellules lymphoïdes en voie de différenciation et maturation : les thymocytes (contenu)

4/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

a. Composition du tissu de soutien thymique

➢ Le tissu de soutien cortical : Il contient des macrophages et des cellules épithéliales corticales avecun aspect stellaire ou dendritique. Elles possèdent de très longs prolongements qui entourent lesthymocytes. L'absence de fibres de réticuline est compensée par la présence d'un RéticulumEndoplasmique formé de ces prolongements.

➢ Le tissu de soutien médullaire : Il a aussi des cellules épithéliales médullaires mais avec desprolongements plus courts, des macrophages, des cellules interdigitées qui sont des cellulesdendritiques et des corpuscules de Hassal, cellules épithéliales dégénératives qui sont essentiellementde la kératine. CR : ces corpuscules de Hassal sont caractéristiques du thymus.

/!\ Il n'y a pas de fibre de réticuline, le stroma est non conjonctif mais épithélial car il est constitué par lesprolongements cytoplasmiques très développés des cellules épithéliales.

b. Les fonctions du thymus

Les lymphocytes T immatures arrivent de la moelle par le sang dans des vaisseaux qui sont adjacents au cortexet à la médullaire. Ils montent au cortex superficiel et redescendent progressivement le cortex tout en effectuantune différenciation et une maturation. Ils passent ensuite dans la médullaire pour terminer leur maturation.Enfin ils sortent du thymus par les vaisseaux de la jonction cortico-médullaire pour rejoindre les organeslymphoïdes secondaires.

5/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

Rapidement, au sein du thymus, quand les LT sortent de la moelle osseuse, ils n'expriment que la Tdt et CD7.Une fois qu'ils ont pénétré le thymus, ils sont juste sous la capsule et expriment les mêmes marqueurs. Ilsdescendent le long du cortex, d'abord celui externe, et acquièrent le CD1, le 2, le 5 et le 2 intra-cytoplasmique.Après au niveau du cortex profond, les capacités prolifératives commencent à diminuer, et l'ensemble desmarqueurs est exprimé, sauf le CD3 qui est devenu membranaire.

Si le CD3 est membranaire alors le TCR peut être exprimé. Les cellules sont à ce stade doubles positivesc'est à dire CD4 ET CD8, puis dans la médullaire, elles terminent sans capacité proliférative. Le tdt disparaîtainsi que le CD1, elles deviennent alors CD4 OU CD8.Sortie du thymus ces cellules sont matures ! Donc leurs marqueurs sont CD2, CD5, CD7, CD3 membranaire,TCR et CD4 OU 8.

La sélection positive a lieu dans le cortex profond et celle négative dans la médullaire.

Les fonctions du thymus sont donc : ➢ La différenciation et la maturation des thymocytes avec production de LT CD4 ou CD8

➢ L'acquisition de la reconnaissance antigénique par expression du TCR. Cette reconnaissance avec leTCR se fait dans le contexte du complexe majeur d'histocompatibilité du soi : le TCR reconnaît lescombinatoires de molécules de CMH-antigène sous forme séquentielle. S'il n'est pas éduqué et qu'il nereconnaît pas les molécules du CMH du soi, le lymphocyte est éliminé par apoptose c'est la sélectionpositive !

➢ L'acquisition de la reconnaissance du soi (sélection +) et de la tolérance du soi : le lymphocyte nedoit pas reconnaître les molécules du soi avec trop d'avidité (sélection négative). En cas de sélectionnégative il y aura une mort par apoptose, 90% des lymphocytes meurent ainsi.

➢ Il y a quelques sécrétions d'hormones thymiques qui aident à la prolifération et à la maturation desthymocytes

Dans le thymus il n'y a pas d'activité de filtration et de réaction immunologique, et il y a une involutionthymique au cours de la vie qui commence à l'adolescence (de moins en moins de thymocytes, de plus en plusd'adipocytes).

6/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

B. Les organes lymphoïdes secondaires

I. Les ganglions lymphatiques

a. Organisation histologique générale

Le ganglion possède une capsule collagénique qui envoie des travées dans la pulpe ganglionnaire. Il y a 2 grandes régions dans un ganglion :

• La région périphérique : la corticale, subdivisée en deux : ◦ Le cortex, partie superficielle qui présente des follicules lymphoïdes (zone T lymphocytaire B

dépendante) et des zones interfolliculaires ◦ Le paracortex, partie profonde. Les zone interfolliculaires et le paracortex sont identiques à la fois

sur le plan histologique et fonctionnel. Elles forment la zone T dépendante c'est à dire la zone où seconcentrent les Ly T.

• La région médullaire est le site d'action des plasmocytes. Il est réniforme avec une partie convexepercée par de nombreux lymphatiques afférents qui se drainent dans le sinus marginal (sous-capsulaire).Celui-ci se draine dans le réseau de sinus corticaux qui rejoignent le réseau de sinus médullaires pourformer un réseau très anastomotique. Celui-ci va donner un lymphatique efférent au niveau du hile dansla partie concave.

Le tissu de soutien est formé d'une capsule et de travées collagéniques qui s'enfoncent dans le cortex de lapulpe ganglionnaire. On trouve aussi un fin réseau de fibres de réticuline (on utilise donc les mêmes colorationsque pour la moelle).

La vascularisation lymphatique se compose de sinus afférents, qui percent la capsule, et se drainent par lelymphatique sous capsulaire ou marginal. Puis les sinus corticaux qui se drainent dans les sinus médullaires, quisont très anastomosés. Ça ressort au niveau du lymphatique efférent.

La vascularisation sanguine : une artère pénètre le hile, donne des artérioles puis un réseau de capillaires. Ceréseau converge pour donner des veinules qui ressortiront au niveau du hile.

7/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

b. Cytologie

Les différentes cellules du ganglion lymphatique sont : • Les cellules lymphoïdes : LB, LT, NK et tous leurs dérivés.• Les cellules immunitaires accessoires : macrophages et cellules dendritiques. Les cellules dendritiques

sont des cellules interdigitées, elles ont pour fonction de présenter l’Ag aux LT dans les zones Tdépendantes.

• Les cellules folliculaires dendritiques : attention, elles n'appartiennent pas au système dendritiquemais présentent des similitudes comme de longs prolongements et leur rôle est la présentation del'antigène aux LB.

• Les cellules stromales : les cellules endothéliales (lymphatiques et sanguines) et les fibroblastes quisynthétisent des fibres de collagène et de réticuline.

c. Sites d'activité immunologique (Très important!)

Il existe 4 sites d’activité immunologique ganglionnaire dont : 1. Les sinus lymphatiques : zone d'action des macrophages, responsables d'une immunité non spécifique.

Ils captent et détruisent d'éventuels micro-organismes.2. Les follicules lymphoïdes : zone d'action des LB qui génèrent une réponse immunitaire humorale. 3. Le paracortex et les zones interfolliculaires : zone des LT pour une réponse immunitaire cellulaire.

8/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

4. La médullaire : zone des plasmocytes donc c'est la zone de production d'anticorps. Les AC passentdans la lumière des sinus médullaires, sortent par les lymphatiques efférents, rejoignent le canalthoracique et se déversent dans la circulation sanguine.

Les sinus lymphatiques sont la voie d'entrée pour les macrophages et les cellules dendritiques dans leganglion (identifiables par un immunomarquage avec CD23).Ils effectuent une filtration non spécifique : particules, micro-organismes… Tout ce qui est drainé rencontre unganglion lymphatique dans son trajet.

Les follicules lymphoïdes correspondent à la zone B dépendante. Ils peuvent être primaires ou secondaires.Les follicules secondaires produisent, à partir d'un LB naïf activé par l'antigène, deux types de LB, qui sont lamaturation terminale des LB (maturation simple dans la moelle osseuse mais terminale dans les ganglions) :

– Les lymphocytes B mémoire à longue durée de vie, circulant en permanence – Les plasmocytes sécrétant des immunoglobulines de forte affinité qui migrent dans la médullaire.

Le follicule lymphoïde secondaire se compose de deux grandes régions : – Le manteau en périphérie avec des

LB centrocytoïdes– Le centre germinatif divisé en une

zone pâle extérieure et une zone foncéeintérieure avec un polymorphismecellulaire important : des centrocytes etdes centroblastes (identifiables par unimmunomarquage avec CD10) maisaussi des cellules folliculairesdendritiques qui présentent l'antigènedu LB, des LT CD4+ qui permettent sonfonctionnement, des macrophages àcorps tingibles et des cellules NK

Le centre germinatif est le lieu de maturation terminale des LB. Une fois le LB activé, celui-ci va setransformer en centroblaste puis en centrocyte. Ce centrocyte doit posséder sur sa membrane uneimmunoglobuline qui reconnaît l’ag avec une forte affinité. Si l’affinité est trop faible, il est éliminé parapoptose (le macrophage tingible élimine les débris apoptotiques). En revanche s’il est sélectionné il setransforme soit en LB mémoire, soit en immunoblaste pour donner un plasmocyte. Il y a aussi quelques LT etcellules NK. Cette zone est très riche en fibre de réticuline sauf au niveau des follicules lymphoïdes.

9/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

Les zones T dépendantes (paracortex et zones interfolliculaires) sont essentielles pour la circulation et l'entréedes lymphocytes dans les ganglions via des HEV (veinules à endothélium haut) donc par voie sanguine. Deplus, ces zones sont le lieu de présentation des Ag au LT par les cellules interdigitées. Le rapport CD4/CD8 = 2

Ne pas mélanger : – Les macrophages rentrent dans les ganglions par voie lymphatique– Les lymphocytes rentrent dans les ganglions par voie sanguine – Les macrophages et les lymphocytes sortent par voie lymphatique

La médullaire possède 2 grands compartiments : les sinus médullaires très anastomosés (réseau de largescanaux lymphatiques interconnectés) entourés par des cordons médullaires qui sécrètent des AC(plasmocytes).

d. Fonctions des ganglions lymphatiques

Les ganglions lymphatiques ont deux fonctions : • La filtration et l’épuration non spécifique à partir de la lymphe : activité phagocytaire des

macrophages à partir de la lymphe.• L’initiation de la réponse immunitaire : élaboration des réponses immunitaires humorales (LB) et

cellulaires (LT).

Les ganglions sont donc des filtres placés sur la circulation lymphatique. Les ganglions lymphatiques sontdes structures très dynamiques.

II. La rate

a. Organisation générale

Elle possède une capsule collagéno-élastique qui envoie de courtes travées à l'intérieur et possède deux grandssecteurs :

– La pulpe blanche ou rate immunitaire (5-20%) secteur lymphoïde– la pulpe rouge ou rate hématogène

La charpente conjonctive se compose de fibres de réticulines.

b. Vascularisation

L’artère splénique va se diviser en artères capsulaires pour longer la capsule. De là, va partir l’artèretrabéculaire dans les courtes travées donnant une artère centrale qui va se terminer en artère penicillée (lapulpe blanche l'entoure).

c. Organisation de la pulpe

La pulpe blanche s'organise en trois grands secteurs : 1. Les gaines lymphoïdes péri-artérielles qui sont des zones T-dépendantes2. Les corpuscules de Malpighi qui sont des zones B-dépendantes à follicules lymphoïdes 3. Une zone marginale à LB monocytoïdes.

Il n’y a pas de HEV, ici les lymphocytes pénètrent par les capillaires artériels ou engainés de la zonemarginale.

10/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

La pulpe rouge est formée de deux secteurs : • Les sinus veineux ou capillaires sinusoïdes (30%) constitués de cellules endothéliales non jointives. • Les cordons de Billroth qui entourent les sinus veineux et concentrent les cellules comme les

macrophages, plaquettes, globules rouges, fibroblastes, polynucléaires, hématies, fibres de réticuline...(70%)

11/12

TSSI – Histologie des organes lymphoïdes

d. Rôles

La rate est un filtre placé en dérivation de la circulation sanguine : – Elle réalise une filtration-épuration non spécifique à partir de particules véhiculées par le sang et de

cellules âgées ou anormales : c'est la fonction de la pulpe rouge.– Elle élabore les réponses immunitaires contre les antigènes véhiculés par le sang : c'est la fonction

de la pulpe blanche.

Conséquence de la splénectomie : les sujets deviennent très sensibles aux bactéries et peuvent plus facilementfaire des septicémies. C’est pourquoi il est recommandé la vaccination à type pneumococcique notamment.

12/12