Sémiologie : hématologie biologique

1- hémogramme normal

Pr Philippe NGUYEN

Dr Sylvie DALIPHARD

Dr Baptiste GAILLARD

Année 2009-10

Définition de l’hémogramme

- Numération des cellules sanguines circulantes

- Blood cell count

- Méthode automatisée

- Valeurs de référence : distinguer le normal du pathologique

- L’un des examens biologiques les plus prescrits en médecine.

HEMOGRAMME

• Nécessité d’un Anticoagulant utilisé : – Les cellules doivent rester en suspension– L’anticoagulant : l’EDTA, chélateur calcique

• Rigidifie les membranes, favorise l’agglutination des plaquettes

• Prélèvement à jeun (optimal) :– Mais réalisable chez le sujet non à jeun (opacité) :

• Le bébé,

• L’urgence,

• Le patient en réanimation (alimentation parentérale par lipides)

HEMOGRAMME

• Méthode automatisée :– A partir du sang total EDTA– Quantitatif +++– Fiabilité de la mesure, reproductibilité (coefficients de variation

des mesures)– Contrôles de qualité

• Méthode « manuelle » :– Sang total EDTA : étalement du sang sur lame (frottis)– Coloration standard – Lecture au microscope– Contrôles de qualité– Qualitatif +++

PNN

Ly

Mono PNE

Exemple : Intrument Beckmann-Coulter : mesure d’impédance

GR Plq GB

EDTA/ Coloration MGG

Bord du frottis

GR Agrégat plaquettaire

Beckman Coulter

Prélèvement sur citrate même patient

Beckman Coulter

Paramètres érythrocytaires

• La numération érythrocytaire a peu de valeur diagnostique (1012/L ou Téra/L)

• L’hémoglobine (g/L) reflète la capacité d’oxygénation et définit la notion d’anémie

• L’hématocrite (L/L) est le rapport du volume érythrocytaire sur le volume sanguin total

Paramètres érythrocytaires

• Le volume globulaire moyen (VGM) est un paramètre constant chez l’individu (hors pathologie) : érythropoïèse physiologique (« normale »)

• VGM = 90 fL (femto = 10-15)

Morphologie : hématies normocytaires

Paramètres érythrocytaires

• TCMH : teneur corpusculaire en hémoglobine : 29 ± 2 pg (pico = 10-12)

• CCMH : concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine : 31 à 36 %– Ne peut être supérieur à 36 %

Morphologie : hématies normochromes

VALEURS NORMALES DE L’HEMOGRAMME CHEZ L’ADULTE (1)

Homme Femme

Leucocytes (Giga/L ou 109/L)

4,0 – 10 4,0 – 10

Hémoglobine (g/L) 130 – 170 120 - 160

Volume globulaire moyen (fL)

85 – 95 85 - 95

TGMH (teneur globulaire moyenne en hémoglobine) (pg)

29 – 34 29 – 34

CCMH (concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine) (% ou g/dL)

31 – 36 31 – 36

Plaquettes (Giga/L) 150 – 400 150 - 400

Numération (réalisée sur automate Coulter*) :

GR/Hématocrite/variations selon l’âge : se reporter aux recommandations de l’ANAES

Paramètres de renouvellement érythrocytaire

• Réticulocytes : ARN (coloration spécifique)– 20 à 120 Giga/L– « normorégénération » hémolyse physiologique

• Erythroblastes circulants– Absents physiologiquement

HEMOGRAMME

ANAES 1998

Valeurs usuelles de l’hémogramme chez les enfants de –1 an (1) :

0-1 mois 1 mois 2 mois 4 mois 6 mois 9 mois 12 mois

Hb (g/dL) 16,6+0,11 13,9 11,2 12,2 12,6 12,7 12,7

Limite inf. 13,4 10,7 9,4 10,3 11,1 11,4 11,3

VGM (µ3) 105,3+0,6 101,3 94,8 86,7 76,3+0,6 77,7 77,5

Limite inf. 88 91 84 76 68 70 71

VALEURS NORMALES DE L’HEMOGRAMME CHEZ L’ADULTE (2)

Formule leucocytaire (réalisée sur automate Coulter*) :

(Giga/L) Homme Femme

Granulocytes neutrophiles

2,5 – 7,5 2,0 – 7,5

Lymphocytes 1,0 – 4,0 1,0 – 4,0

Monocytes 0,2 – 1,0 0,2 – 1,0

Granulocytes éosinophiles

< 0,5 < 0,5

Granulocytes basophiles

< 0,2 < 0,2

Pas de valeur diagnostique de l’expression en %

HEMOGRAMME

ANAES 1998

Valeurs usuelles de l’hémogramme chez les enfants de –1 an (2) :

0-1 mois 6 mois 12 mois

Neutrophiles 4 500 3 800 3 500

(106/L ou

Cellules/µL) 1 000-9 500 1 000-8 500 1 500-8 500

Lymphocytes 5 500 7 300 7 000

(106/L ou

Cellules/µL) 2 000-17 000 4 000-13 500 4 000-10 500

VARIATIONS DES VALEURS DE L’HEMOGRAMME

Exercice physique :- des leucocytes (repos 20 minutes)- démargination des PNN

Altitude : - 3 000 / 4 000 m- en permanence- polyglobulie

Exceptionnel en Francemétropolitaine

VARIATIONS DES VALEURS DE L’HEMOGRAMME

1. En fonction de l’ethnie :- Sujet Noir . diminution modérée de l’hémoglobine

- 1 g/dL ou 10 g/L sans modifications des

constantes érythrocytaires ou du taux de réticulocytes

. neutropénie peu importante isolée (> 0.5 109/L)2. Femme enceinte :

- Diminution du taux d’hémoglobine/hémodilution- Hyperleucocytose : PN (7.109/L)- Diminution modérée du taux de plaquettes

3. Consommation d’alcool « buveurs sociaux »- VGM reste dans les valeurs de référence

4. Tabac- Augmentation du taux de polynucléaires neutrophiles

Difficultés d’interprétation de l’hémogramme

• Difficultés d’interprétation de la numération érythrocytaire, de la concentration d’hémoglobine et de l’hématocrite en cas d’hémodilution– Fausse anémie (hémodilution)

• Thrombo-agglutination sur EDTA – Citrate

Satellitisme plaquettes aux PNN

HEMOGRAMMEFacteurs de variations pré-analytiques :• Liés au prélèvement

– Garrot– Matériel de prélèvement

• Liés à l’échantillon– Conservation : température ambiante, 6 h (optimal < 3 h)– Transport – Anticoagulant thromboagglutination EDTA– Hémolyse Hémoglobine (sous réserve)– Micro-caillots plaquettes

• Liés au patient– Hyperlipémie Hb CCMH TGMH

– Erythroblastes leucocytes

NB : constance du VGM/identité patient sur un délai court