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Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen

Faculté de Médecine VétérinaireService de Thériogénologie des animaux de production

Année 2009-2010

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Objectif général

Ce chapitre a pour but de présenter les méthodes hormonales et non hormonales pour confirmer la gestation chez les ruminants. Selon les cas elles font l’objet de rappels anatomiques et physiologiques pour en faciliter leur compréhension et justification pratique. Le diagnostic échographique a été présenté dans le chapitre relatif aux applications de l’échographie en reproduction bovine. Le lecteur consultera avec profit l’iconographie du chapitre présentée dans un fichier Power Point annexé.

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Objectifs spécifiques de connaissance● Enumérer trois critères de choix d’une méthode de constat de la gestation ● Enumérer les méthodes de constat de gestation utilisées en pratique chez la

vache.● Enoncer les stades d'application au constat de gestation des dosages

hormonaux● Enoncer les contraintes des prélèvements en vue d'un dosage de la

progestérone et de la PAG● Enoncer les principaux critères de confirmation de la gestation par palpation

manuelle transrectale en fonction du stade de gestation chez la vache● Enoncer les critères de constat de la gestation par échographie au cours des

deux premiers mois de gestation chez la vache● Enumérer les méthodes de diagnostic de gestation qui chez les petits

ruminants ont trouvé une application en pratique● Enoncer les critères de constats de gestation par échographie

transabdominale chez les petits ruminants

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Objectifs spécifiques de compréhension

● Justifier les intérêts d'un constat précoce (<60 jours) de gestation chez la vache

● Justifier les intérêts d'une constat tardif (>=60 jours) de gestation chez la vache

● Comparer les avantages et inconvénients des méthodes hormonales et non hormonales de diagnostic de gestation utilisés en pratique chez la vache.

● Comparer les avantages et inconvénients des méthodes de diagnostic de gestation utilisés en pratique chez les petits ruminants

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Généralités

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Le constat de gestation : préambule

●Constat de gestation ou de non-gestation ? = méthode de lutte contre l ’infécondité décision de réforme optimisation de la période de reproduction : espèces saisonnières

● Autres objectifs Nombre de fœtus : jument, petits ruminants ... Sexe du fœtus : jument, vache… Viabilité fœtale Quantification de la ME

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Critères de choix d’une méthode de diagnostic de gestation ou de non gestation

● Précocité du diagnostic● Stade de gestation possible de l ’animal● Sensibilité ou spécificité de la méthode●Degré d’exactitude●Matériel à mettre en œuvre● Expérience du clinicien●…..

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Méthodes de constat de gestation

●Méthodes hormonales : identification de modifications spécifiques ou non de la gestation

●Méthodes non-hormonales : identification de modifications physiques ou comportementales inhérentes à la gestation

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Méthodes hormonales

● Progestérone● PAG (PSPB)● eCG (PMSG)●Oestrogènes● EPF● Zygotine●Hormone placentaire● Trophoblastine (interféron)● Facteurs de croissance

●Détection des chaleurs● Taxis externe●Développement abdominal●Développement de la glande

mammaire● Palpation transrectale● Palpation transabdominale● Echographie : mode A et B●Radiographie

Méthodes non hormonales

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Méthodes spécifiques (+ en pratique) bo cv ov po

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------●Détection des chaleurs + + + +●Biopsie vaginale - - + +● Induction d’œstrus - - - +●Early Pregnancy Factor + + + +●Progesterone + + + +●PMSG (eCG) - + - -●Oestrogènes + + + +●PSPB (PAG) + - + -●Développement de la mamelle + + + +●Taxis externe + + + -●Palpation transrectale + + - -●Radiographie - - + +●Echo Doppler + + + +●Echo mode A + + + +●Echo mode B + + + + ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

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Diagnostic hormonal de la gestation chez les ruminants

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NG

G

IAJ21

Le diagnostic de gestation par la progestérone

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Progestérone

●Méthodes : sang, lait (RIA ou ELISA)● Avantages

Précocité Sensibilité élevée (97 %) vs spécificité (75 %) Valeur prédictive des Dg - élevée : 95 % vs 85 % (Dg +) : ME

● Inconvénients Prélèvements de sang Conservation du prélèvement Laboratoires (RIA) Date d’insémination : fausses interprétations possibles Non spécifique de la gestation

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Dosage de la progestérone dans le sang

● J 20 à J 23 après l'insémination ● sur tube hépariné

centrifugation dans l'heure suivant le prélèvement pipetage du plasma identification du tube congélation ou envoi au laboratoire (CER Marloie)

● sur tube sec contenant de l'azide de sodium (5 mg/ml de sang) identification du tube conservation à 4°C et envoi au laboratoire

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Dosage de la progestérone dans le lait

● premiers jets (moins riches en MG) de la traite du matin● J 21 à J 23 après la dernière insémination

tube renfermant un agent conservateur, le dichromate de potassium (500 mg/ml)

identification du tube conservation à 4°C et envoi au laboratoire (CER Marloie)

●Résultats >= 2 ng (sang) ou >= 5 ng (lait) : confirmation de la gestation < 2 ng (sang) ou < 5 ng (lait) : exclusion de la gestation

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d’après Thibier et al., 1977

Groupes de femelles nombre DG + DG -

Génisses de races 336 65 93à viandeVaches allaitantes 201 75 98

Génisses de races 1394 74 94laitièresVaches laitières

Plasma 189 62 96Lait 466 63 94

Valeurs prédictives (%)

Valeurs prédictives du diagnostic de gestation par dosage de la progestérone (Prof. N. Hagen ENV Toulouse)

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La PAG (Pregnancy Associated Glycoprotein) ou PSPB (Pregnancy Specific Protein type B)

● Espèces concernées : vache, chèvre, brebis, chevreuil, renne●Concentrations (vache)

J20 à J30 : augmentation J30 à J35 : détection plasmatique J35 à J280 : augmentation progressive J0 à J100 : diminution progressive (demi-vie : 7 jours)

● Prélèvements de sang Tube sec ou hépariné Conservation 9 à 15 jours à 4°C

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0

10

2020

50

80100

900

500

mise bas

80 160 240 320jours

20

PSPB (ng/mL)

d’après Sasser et al, 1986

Evolution des concentrations sériques de PSPB au cours de la gestation

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PSPB 617 88 98

P4 617 71 98

d’après Humblot, 1991

nombre valeurs prédictives (%) d’animaux DG+ DG-

Valeurs prédictives du diagnostic de gestation par dosage de la PSPB plus de 30 jours après IA et de la progestérone à 21 jours

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d’après Humblot et Gary, 1994

65605550454035300

2

4

6

8

10

12

14

0

1

2

3

Jours après IA

Progestérone(ng/mL)

PSPB(ng/mL)

PGF2 alpha

Evolution des concentrations de progestérone et de PSPB après avortement induit à J40

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d’après Tainturier et al, 1987

10 30100 150 200 250 temps (jours)

2000

1000

sulfate d’œstrone(pg/mL)

4262

mise bas

Evolution du taux de sulfate d’œstrone plasmatique au cours de la gestation chez une génisse

Principe : Aromatisation placentaire des androgènes fœtaux Viabilité unité foeto-placentaire

Dosage du sulfate d'oestrone

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• Plasma ou lait• 100 jours après l’IA ou la saillie : seuil 150 pg/mL• Dosage radioimmunologique •Valeurs prédictives proches de 100%

Diagnostic tardif, confirmation de gestation

Dosage du sulfate d’œstrone

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Diagnostic non hormonal de la gestation : la palpation transrectale

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Données anatomiques de l ’utérus gestant (vache)

J Corne Cotylédon A. utérine Lg foetus Lg de la tête

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------30 2 - 4 cm 4 - 6 mm 1 cm40 4 - 6 4 - 6 250 5 - 7 4 - 6 3.5 - 5.560 6 - 9 4 - 6 6 - 870 7 - 10 0.5 - 0.75 cm 5 - 7 7 - 10 1.5 cm80 9 - 12 0.5 - 1.0 5 - 7 8 - 13 3.590 10 - 13 1.0 - 1.5 5 - 7 13 - 17 5.5120 13 - 18 1.5 - 2.5 7 - 9 22 - 32 10.5150 18 - 23 2.5 - 4.0 7 - 10 30 - 45180 4.0 - 5.0 9 - 13 40 - 60210 5.0 - 7.5 13 - 15 55 - 75240 6.0 - 9.0 13 - 15 60 - 85270 8.0 - 12.0 15 - 19 70 – 100---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

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Données anatomiques de l ’utérus gestant

J Taille Position Migrationdu fœtus de l ’utérus de l ’utérus

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------30 Pelvienne40 Pelvienne50 Pelvienne60 Souris Pelvienne70 Pelv.-abdo. Descente80 Pelv.-abdo Descente90 Rat Pelv.-abdo Descente120 Petit chat Pelv.abdo Descente150 Gros chat Abdominale basse180 Beagle Abdominale basse210 Abdominale Remontée240 Abdominale haute Remontée270 Abdominale haute----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

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Gestation 37 jours

Gestation 60 Jours

Photos : gestation de 37 et 60 jours

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Gestation 60 jours

Photos et schéma : gestation de 60 jours

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Photos et schéma : gestation de 105 jours

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Schémas : gestation de 2 mois et 7 mois

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Photo et schéma d’une gestation extra -omentale à gauche (coupe L3)

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Schéma d’une gestation extra -omentale à gauche coupe L3

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Photos : divers stades de gestation (1 à 3 mois)

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Photos : gestation de 2 à 3 mois

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AGE LONGUEUR POIDS CARACTERES MORPHOLOGIQUES(mois) (cm)VEAU (race Salers)

1 2,5 cm 0,6 g Ebauches membres et paupières2 8 cm 20 g Paupières couvrant globe oculaire

Division doigts, fermeture sternum3 13-15 cm 170 g Compartiments gastriques distincts4 23 cm 800 g Sabots jaune opaque5 37 cm 2,4 kg Taches onglons, descente testicules6 50 cm 8 kg Pigmentation, pilosité périphérie, cils7 60 cm 15 kg Crins queue, poils phalanges, coudes, nuque8 80 cm 25 kg Poils courts et doux (sauf ventre, face int. membres)9 85 cm 35 - 45 kg Poils longs, incisives, molaires…

AGNEAU - CHEVREAU1 1 cm Division doigts3 15 - 16 cm Peau nue4 32 cm Premiers poils5 45 - 50 cm Toison complète

Caractéristiques fœtales en fonction du stade de gestation (Mialot 2006)

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L ’examen échographique de l ’utérus gravide

● Evolution de l'image échographique de la vésicule embryonnaire et de l ’embryon au cours de la gestation

● Détermination de l’âge de l ’embryon/fœtus● Détermination du sexe fœtal● Gémellité● Changements de position● Diagnostic de la ME● Résultats des diagnostics de gestation● Echographie et prélèvement de liquides foetaux

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Echographie et 1ers stades de gestation

● - 0 h : zygote : 0.1 mm● + 72 à 96 h : arrivée dans l’utérus● + 5 J : morula● + 6 J : jeune blastocyste : 100 cellules● + 7 J : blastocyste : 0.16 mm● 9 J : hatching (sortie de la pellucide)● + 16 J : vésicule embryonnaire : phase d’élongation● + 20 J : cellules binuclées : phase d’adhésion● + 21 J : diagnostic de gestation par la progestérone● + 25 J : diagnostic de gestation par échographie● + 35 J : diagnostic de gestation par la PSPB (PAG)● + 50-60 J : fin de l’organogénèse: embryon : 50 mm

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Le diagnostic de gestation chez les petits ruminants

● Palpation transabdominale : parfois difficile et tardif●Diagnostic transrectal (tige rigide) : risque de lésions rectales●Dosages hormonaux problèmes pratiques

J18ème J19ème : progestérone >J25 : PAG Chèvre : > J50 sulfate d’oestrone dans le lait ou le sérum

●Radiographie abdominale > J65 mais problèmes pratiques ● Echographie : the best