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GENOMIQUEAmplification PCR I qPCR

Glowing Products for ScienceTM

qPCR par BiotiumBiotium propose une gamme complète pour la PCR quantitative. Leurs sondes fluorescentes, développées spécifiquement pour cette application, améliorent la fiabilité des résultats.

EvaGreen® colorant pour qPCRSensible, sûr et stable

● Sûr et plus respectueux de l'environnement ● Haute sensibilité ● Détecté en utilisant les paramètres de l'instrument pour le SYBR® Green ● Visualisation directe des produits de PCR dans les gels ● Extrêmement thermostable (voir la référence : Mil. Med. 2014, 179(6):626-32). ● Le seul colorant de qPCR utilisé en Droplet Digital™ PCR (ddPCR)

L'EvaGreen® est un colorant d'ADN de nouvelle génération avec des caractéristiques idéales pour une utilisation en PCR en temps réel (qPCR). Les scientifiques de Biotium ont conçu un colorant avec plusieurs propriétés essentielles à l'esprit, dont l'inhibition de la PCR, la sécu-rité, la stabilité et les spectres de fluorescence du colorant. Le résultat de cet effort est un colorant supérieur à tous les autres colorants pour la PCR et l'analyse des courbes de qPCR.

Produit Réf. QtéEvaGreen® Dye, 20X in Water 31000-T 1 mL

31000 5 x 1 mL

Sondes fluorescentes & réactifs associés pour la biologie moléculaire

Produits Liés

Fluorescent 1-10kb DNA Ladder with EvaGreen® and blue tracking dyes M-237 100 tests

Il permet l'estimation de la taille et de la concentration des fragments d'ADN sur gel d'agarose générés par PCR ou digestion par restriction.

Autres marqueurs de taille décrits section Génomique | Electrophorèse | Marqueurs de poids moléculaire

EvaGreen® se fixe à l'ADN double brin suivant un mécanisme “disponible sur demande”.

E.29

GENOMIQUEAmplification PCR I qPCR


Fast Plus EvaGreen® qPCR Master MixesCheetah™ Taq est la polymérase de démarrage à chaud - modifiée avec une chimie proprié-taire de Biotium. Contrairement au concurrent G, qui prend 10 minutes ou plus pour être acti-vée, la Cheetah™ Taq est complètement active en 2 minutes, ce qui la rend particulièrement adaptée pour un haut débit de détection par PCR en temps réel .

Des qPCR Master Mix, pratiques et prêt-à-l'emploi, combinent le colorant EvaGreen® et Cheetah™ Taq. Biotium propose également le Fast Probe Master Mix sans colorant, pour les réactions de PCR utilisant des sondes. Ce mix est largement utilisé dans les plates-formes de PCR microfluidiques.

Produit Réf. QtéFast Plus EvaGreen® qPCR Master Mix(no ROX) 31020-T 1 ml (100 rxn)for BioRad, Qiagen, Roche, Cepheid 31020 2 x 1 ml (200 rxn)

31020-1 5 x 1 ml (500 rxn)31020-2 50 x 1 ml (5000 rxn)

(Low ROX) 31014-T 1 ml (100 rxn)for ABI 7500, ViiA 7, Stratagen 31014 2 x 1 ml (200 rxn)

31014-1 5 x 1 ml (500 rxn)31014-2 50 x 1 ml (5000 rxn)

(high ROX) 31015-T 1 ml (100 rxn)for ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, StepOne 31015 2 x 1 ml (200 rxn)

31015-1 5 x 1 ml (500 rxn)31015-2 50 x 1 ml (5000 rxn)

Fast Probe Master Mix(no ROX) 31005-T 1 ml (100 rxn)for BioRad, Qiagen, Roche, Eppendorf, Illumina, Cepheid 31005 2 x 1 ml (200 rxn)

31005-1 5 x 1 ml (500 rxn)31005-2 50 x 1 ml (5000 rxn)

(with ROX) 31016-T 1 ml (100 rxn)for ABI 7500, 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 31016 2 x 1 ml (200 rxn)ABI StepOne, StepOne Plus 31016-1 5 x 1 ml (500 rxn)and Stratagene MX4000P, MX3000P, MX3005P 31016-2 50 x 1 ml (5000 rxn)

Cheetah™ Taq nécessite seulement 2 minutes d'acti-vation par la châleur. Comparaison du démarrage de l'activité polymérase de la Cheetah™ Taq et du concurrent G après incubation à 95°C dans du Tris pH 8,0 50 mM.

Cheetah™ Taq nécessite seulement 2 minutes d'activation par la châleur. Comparaison du démarrage de l'activité polymérase de la Cheetah™ Taq et du concurrent G après incubation à 95°C dans du Tris pH 8,0 50 mM.

Activ

ité re

lative

(%)

0

20

40

60

80

100

0 1 2 5 10 20Minutes à 95°C

Concurrent GCheetah Taq

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ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIRE

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Sondes nucléaires I Colorants des ADN & ARN

Colorants des acides nucléiques à base de Propidium

Propidium Iodide (PI)L'Iodure de propidium est un intercalant des acides nucléiques, imperméant à la membrane. Le colorant est communément utilisé pour colorer sélectivement les cellules mortes dans une population de cellules. Un double marquage en vert avec la Calcein AM, le CFDA ou l'Annexin V-FluoProbes® 488 est courant. Il est également utilisé comme contre-colorant en imagerie. Toutefois, il nécessite des cellules fixées ou perméabilisées, et donc seulement non viables. Le PI colore également l'ARN double brin, qui peut être éliminé avec une ribo-nucléase. Il est excitable par une laser à 488 nm. Il est ainsi très utilisé en cytométrie de flux, mais également en microscopie confocale.

Propidium Monoazide Bromide (PMA et PMAxx)Le PMA est un colorant d'ADN photoréactif. Le colorant est faiblement fluorescent par lui-même, mais devient plus fluorescent une fois lié aux acides nucléiques. Il se fixe préfé-rentiellement à l'ADN double brin avec une haute affinité. Après photolyse, le radical azido photoréactif du colorant est converti en un radical nitrène. Ce réactif réagit facilement avec tout fragment hydrocarboné au niveau du site de liaison pour former une liaison covalente stable azote-carbone, conduisant ainsi à une modification permanente de l'ADN. Le colorant est presque totalement imperméable à la membrane. Il peut donc être utilisé pour modifier spécifiquement l'ADN des cellules mortes, tout en laissant l'ADN des cellules viables non marqué. L'application principale est la PCR Viable (v-PCR ou "Viability PCR"). Elle sert à la détection des cellules pathogènes viables par PCR quantitative en présence des cellules mortes dont l'amplification de l'ADN est bloquée par le PMA.

Les scientifiques de Biotium ont récemment inventé un nouveau colorant amélioré pour la v-PCR, appelé PMAxx. Le PMAxx fonctionne de manière très similaire au PMA, mais avec une activité beaucoup plus grande, pour une meilleure distinction entre les cellules mortes et vivantes.

Pour les bactéries gram négatif, il est fortement recommandé d'utiliser le PMA Enhancer avec le PMA. Il améliore la discrimination entre les bactéries gram-négatif vivantes et mortes.

Voir également la section Génomique | Amplification PCR | Quantification de bactéries vi-vantes par PCR

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéPropidium iodide 535 / 617 FP-31238B 100 mgPropidium iodide, Pure Grade 535 / 617 FP-R1345A 25 mgPropidium iodide, 1 mg/ml in water 535 / 617 FP-36774A 10 mlPropidium iodide buffer, 50 µg/ml in PBS, filtered 535 / 617 40048 2 mlPropidium MonoAzide (PMA) 510 / 610 FP-BZ9340 1 mgPMA, 20 mM in H2O 510 / 610 40019 100 µlPMAxx, 20 mM in H2O 510 / 610 40069 100 µlPMA Enhancer for Gram Negative Bacteria, 5X Solution 31038 16 mlPMA-Lite LED Photolysis Device E90002 1 u

PMAxx permet une meilleure distinction entre les bactéries vivantes et mortes.

G.29

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIRESondes nucléaires I Colorants des ADN & ARN

Intercalants classiques

Hexidium IodideL'Iodure d'Hexidium est un colorant d'acide nucléique fluorescent. Il permet de déterminer le Gram par absorption différentielle à travers les parois cellulaires bactériennes. La différen-ciation entre les bactéries gram-positives et gram-négatives des eaux usées traitées a été réalisée par analyse en cytométrie de flux.

Acridine OrangeL'Acridine Orange interagit avec les ADN et ARN. Toutefois la chromatine condensée ne permet pas l'accès à l'intercalant.

Acridine HomodimerL'Acridine Homodimer est soluble dans l'eau. Ce colorant a une affinité extrêmement élevée pour les régions riches en bases AT, qui le rend particulièrement utile pour le zébrage chro-mosomique. L'acridine homodimer émet une fluorescence bleu-vert lorsqu'il est lié à l'ADN. En raison de sa plus grande luminosité et photostabilité, l'acridine homodimère est recom-mandée comme une alternative à la quinacrine pour le zébrage chromosomique.

ACMA (9-amino-6-chloro-2-methoxyacridine)L'ACMA est un intercalant de l'ADN, spécifique des régions poly (d(AT)).

HSA Tracer (Hydroxystilbamidine)L'Hydroxystilbamidine est aussi connu sous le nom FluoroGold® ou HSA Tracer. Il est utilisé comme traceur rétrograde pour les neurones et aussi comme colorant en histochimie.

LDS 751Le LDS 751 est un colorant d'acide fluorescent perméable aux cellules, qui peut être bien excité avec un laser à 488 nm, même si le pic d'excitation est à ~ 543 nm. Son émission dans le proche infra rouge convient bien au multimarquage Lors de sa liaison à l'ADN double brin, la fluorescence augmente de 20 fois.

7-AAD (7-Aminoactinomycin D)Le 7-AAD est un intercalant dont la fluorescence se décale lors de son association à l'ADN. Il se fixe spécifiquement à la région GC, qui en fait un colorant utile pour le zébrage chro-mosomique.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéHexidium iodide 518 / 600 FP-38915A 5 mgAcridine homodimer 418 / 500 FP-98990A 10 mgAcridine orange 418 / 500 FP-05920A 1 gACMA 419 / 483 FP-155822 25 mgHydroxystilbamidine, methanesulfonate 360 / 450 FP-40766A 10 mgHydroxystilbamidine, 4 % in H2O 360 / 450 FP-JW7290 200 µlHSA Tracer 360 / 450 UP544200 10 mg7-AAD 524 / 648 FP-132303 1 mg7-AAD, 1 mg/ml in DMSO 524 / 648 FP-1J7621 1 mlLDS 751 543 / 712 FP-973841 25 mg

FP-97384A 1 gActinomycin D 442 / - 09086A 5 mg

09086B 10 mg

Structure de l'Hexidium Iodide

N+

NH2

CH2CH2CH2CH2CH2CH3

NH2

-

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Colorants du sillon mineur de l'ADN

DAPI, Dihydrochloride (4',6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride)Le DAPI, DiHCl fixé à l'ADN présente une fluorescence bleu, et peut aussi être excité en UV. La fluorescence bleue du DAPI est associée au sillon mineur de l'ADN double brin, avec une liaison préférentiellement aux groupes de bases AT. Le DAPI est un excellent contre-coloration nucléaire, montrant des motifs de bandes distinctes dans les chromosomes. Il est également utilisé pour les études du cycle cellulaire et la détection de mycoplasme. Le DAPI est un colorant très sensible qui peut être utilisé pour détecter une seule molécule d'ADN en solution, et à détecter des femtogrammes d'ADN dans des cellules individuelles et les chloroplastes.

DAPI, DilactateLe DAPI Dilactate est identique au DAPI diHCl à l'exception de leurs contre-ions. Les contre-ions dilactate rendent le colorant plus soluble dans l'eau.

Hoechst 33258, 33342, 34580Les Hoechst sont des colorants bisbenzimides qui se lient aux sillons mineurs de l'ADN. La fluorescence dépend du pH (supérieur au pH 5), et des agents tensioactifs. Leur utilisation a été popularisée grâce à leur relativement non toxicité, à leur capacité à être excités par des sources de lumière les plus courantes, et leur aptitude au multimarquage (grand décalage de Stokes).

Ils émettent une fluorescence lorsqu'ils sont liés à l'ADN. Ils sont fonctionnellement très simi-laires, et peuvent être utilisés dans les cellules vivantes.

Hoechst 33342 est souvent utilisé pour distinguer des noyaux pycnotiques condensés dans des cellules apoptotiques et des études du cycle cellulaire en combinaison avec le BrdU ou l'EdU.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéDAPI, Dihydrochloride 344 / 450 FP-37186B 10 mg

37186D 25 mgDAPI, Dihydrochloride, Ultra Pure Grade 344 / 450 FP-371867 10 mgDAPI, Dihydrochloride, 10 mM in water 344 / 450 40043 1 mlDAPI, Dihydrochloride, 10 mM in water 344 / 450 FP-CJF800 2 mlDAPI Dilactate 344 / 450 FP-66034A 10 mg

FP-66034D 25 mgHoechst 33258, pentahydrate 352 / 461 FP-61248A 100 mg

FP-61248B 1 gHoechst 33258, pentahydrate, 10 mg/ml in Water 352 / 461 FP-41387A 10 mlHoechst 33258, pentahydrate, 20 mg/ml in Water 352 / 461 FP-BB1330 5 mlHoechst 33258, pentahydrate, Ultra Pure Grade 352 / 461 FP-P62759 100 mgHoechst 33342, 10 mg/ml in water 350 / 461 FP-59046A 10 mlHoechst 33342, 20 mg/ml in water 350 / 461 FP-BB1340 5 mlHoechst 33342, 20 mg/ml in water, photostabilized 350 / 461 FP-JQ7560 100 µlHoechst 33342, trihydrochloride, trihydrate 350 / 461 FP-71131A 100 mgHoechst 33342, Ultra Pure Grade 350 / 461 FP-99964A 100 mg

FP-99964B 1 gHoechst 34580 392 / 440 FP-R1286A 5 mg

Structure du DAPI

NH

NH2

NH

NH2

NHHCI

G.31


Colorants des cellules vivantes

RedDot™1, colorant du noyau dans le rouge lointainLe RedDot™1 colore spécifiquement le noyau des cellules vivantes. La coloration ne néces-site pas d'étape de lavage. La photostabilité est améliorée par rapport aux colorants DAPI et Hoechst. Le RedDot™1 n'ai pas utilisable avec des produits de fixation. Pour des cellules fixées et perméabilisées, il est recommandé d'utiliser le RedDot™2. Le RedDot™1 peut ser-vir pour l'analyse du cycle cellulaire basée sur le contenu en ADN. Son signal fort et sa gamme linéaire étendue le distinguent des autres marqueurs.

DMAOLe DMAO est un colorant d'acide nucléique fluorescent vert, qui colore les cellules, y com-pris des bactéries, à la fois vivantes et mortes avec des membranes cellulaires intactes ou endommagées. Il est utilisé dans le kit de dosage de viabilité cellulaire en association avec l'EthD-3, colorant rouge des cellules mortes.

DRAQ5™Le DRAQ5™ est un colorant d'ADN fluorescent dans le rouge lointain, pour l'analyse des cellules vivantes ou fixées.

MycoLight™ Green JJ98 et JJ99Les MycoLight Green™ JJ98 et JJ99 sont perméables à la quasi-totalité des membranes cellulaires, notamment les cellules de mammifères et de bactéries. Leur coefficients d'ex-tinction sont supérieurs à 50 000 cm-1M-1. Leurs rendements quantiques sont typiquement supérieurs à 0,4 lorsqu'ils sont liés à des acides nucléiques. Ils peuvent marquer l'ARN et l'ADN des cellules eucaryotes vivantes et mortes. De plus le MycoLight Green™ JJ98 est particulièrement utile comme marqueur du noyau dans les tests bactériens, car il colore les bactéries vivantes et mortes gram-positif et gram-négatif.

LCS1Les LCS1 sont des colorants d'acides nucléiques à base de cyanine. Ils couvrent l'ensemble des spectres grâce aux différents versions : Nuclear Green™, Nuclear Orange™, Nuclear Red™ et Nuclear Violet™. Particulièrement utiles pour le marquage des bactéries à Gram-positif et Gram-négatif, ils se distinguent par un signal exceptionnellement fort.

Le Nuclear Red™ LCS2 a des longueurs d'onde plus élevées que la version LCS1, qui le rend compatible avec les filtres CYanine5.

Cellules HeLa colorées avec MitoView Blue™ (cyan) et RedDot™1 colorant nucléaire rouge lointain (magenta).

Cellules HeLa marquées avec le MycoLight™ Green JJ98.

Cellules HeLa marquées avec le Nuclear Green LCS1 et le Cell Navigator Mitochondria Staining Kit.







Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéRedDot1™, 200X in water 662 / 694 40060-T 25 µl (15-20 tests)

40060 250 µl40060-1 1 ml

RedDot2™, 200X in DMSO 665 / 695 40061-T 25 µl40061 250 µl40061-1 1 ml

DMAO, 2 mM in DMSO 488 / 525 40012 1 mlDRAQ5™, 5 mM solution 646 / 697 DR50200 200 µlMycoLight™ Green JJ98 484 / 504 24000 100 μlMycoLight™ Green JJ99 484 / 504 24001 100 μlNuclear Green™ LCS1 503 / 526 17540 0,5 mlNuclear Orange™ LCS1 514 / 555 17541 0,5 mlNuclear Red™ LCS1 622 / 645 17542 0,5 mlNuclear Red™ LCS2 651 / 681 17545 0,5 mlNuclear Violet™ LCS1 401 / 459 17543 0,5 mlPUR-1 459 / 478 17560 1 mgNuclear Yellow 355 / 495 FP-M1477A 25 mgPropidium Iodide, UltraPure grade 535 / 617 FP-R1345A 25 mgThiazole Orange, UltraPure grade 512 / 533 FP-241491 100 mgDAPI, Dihydrochloride 344 / 450 FP-37186B 10 mg

37186D 25 mgDAPI, Dihydrochloride, Ultra Pure Grade 344 / 450 FP-371867 10 mgDAPI, Dihydrochloride, 10 mM in water 344 / 450 40043 1 mlDAPI, Dihydrochloride, 10 mM in water 344 / 450 FP-CJF800 2 mlDAPI Dilactate 344 / 450 FP-66034A 10 mg

FP-66034D 25 mgHexidium iodide 518 / 600 FP-38915A 5 mgHoechst 33258, pentahydrate 352 / 461 FP-61248A 100 mg

FP-61248B 1 gHoechst 33258, pentahydrate, 10 mg/ml in Water 352 / 461 FP-41387A 10 mlHoechst 33258, pentahydrate, 20 mg/ml in Water 352 / 461 FP-BB1330 5 mlHoechst 33258, pentahydrate, Ultra Pure Grade 352 / 461 FP-P62759 100 mgHoechst 33342, 10 mg/ml in water 350 / 461 FP-59046A 10 mlHoechst 33342, 20 mg/ml in water 350 / 461 FP-BB1340 5 mlHoechst 33342, 20 mg/ml in water, photostabilized 350 / 461 FP-JQ7560 100 µlHoechst 33342, trihydrochloride, trihydrate 350 / 461 FP-71131A 100 mgHoechst 33342, Ultra Pure Grade 350 / 461 FP-99964A 100 mg

FP-99964B 1 gHoechst 34580 392 / 440 FP-R1286A 5 mgHydroxystilbamidine, methanesulfonate 360 / 450 FP-40766A 10 mgHydroxystilbamidine, 4 % in H2O 360 / 450 FP-JW7290 200 µlHSA Tracer 360 / 450 UP544200 10 mgLDS 751 543 / 712 FP-973841 25 mg

FP-97384A 1 g

G.33


Colorants des cellules fixées ou mortes

RedDot2, colorant du noyau dans le rouge lointainLe RedDot™2 est imperméable à la membrane. Il marque le noyau des cellules mortes ou avec une membrane dégradée. Le RedDot™2 est idéal pour les cellules fixées et perméabi-lisées, et les coupes de tissus. Il ne nécessite pas de traitement RNase.Le RedDot™2 est très thermostable et photostable. Il ne nécessite pas d'étape de lavage.

Nuclear Blue DCS1, colorant bleu du noyau Le Nuclear Blue™ DCS1 est un colorant cyanine, qui pénètre dans les cellules avec des membranes plasmiques dégradés.

Nuclear Green DCS1, colorant vert du noyau Le Nuclear Green™ DCS1 est particulièrement utile pour la coloration des bactéries gram-positives et gram-négatives, dans lequel des signaux exceptionnellement lumineux sont nécessaires.

Nuclear Orange DCS1, colorant orange du noyau Le Nuclear Orange™ DCS1 distingue clairement les cellules mortes de bactéries, de levures ou de mammifères des cellules vivantes. Il a un coefficient d'extinction beaucoup plus élevé que l'iodure de propidium.

Nuclear Red DCS1, colorant rouge du noyau Le Nuclear Red™ DCS1 permet d'analyser le contenu en ADN dans des cellules mortes et apoptotiques. Il est excité par le laser He-Ne, qui est largement utilisé en cytométrie en flux.

Analogues au Thiazole OrangeLes dimères de cyanine, DiTO™ et DiYO™, sont des dimères symétriques de colorants cya-nine avec une sensibilité exceptionnelle pour les acides nucléiques. Les colorants DiTO™ présentent une forte affinité pour l'ADN double brin et se lient également à l'ADN simple brin et à l'ARN.En plus des dimères TO et YO, les colorants TWO-PRO™ sont également utilisés pour la coloration des cellules mortes. Leur affinité pour l'ADN est plus faible que celle des dimères TO et YO.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéNuclear Blue™ DCS1 350 / 641 17548 0,5 mlNuclear Green™ DCS1 503 / 526 17550 0,5 mlNuclear Orange™ DCS1 528 / 576 17551 0,5 mlNuclear Red™ DCS1 642 / 660 17552 0,5 mlDiTO™-1, 1 mM DMSO Solution 515 / 531 17575 0,2 mlDiTO™-3, 1 mM DMSO Solution 642 / 661 17576 0,2 mlDiYO™-1, 1 mM DMSO Solution 514 / 535 17580 0,2 mlDiYO™-3, 1 mM DMSO Solution 642 / 660 17581 0,2 mlTWO-PRO™ 1, 1 mM DMSO Solution 491 / 509 17571 0,2 mlTWO-PRO™ 3, 1 mM DMSO Solution 612 / 631 17572 0,2 ml7-AAD 546 / 647 FP-132303 1 mgPropidium Iodide, UltraPure grade 535 / 617 FP-R1345A 25 mg

Cellules HeLa marquées avec la Phalloidin-iFluor™ 680 et le Nuclear Green™ DCS1.

Cellules vivantes et mortes colorées avec le DiTO™-1.





Coloration différentielle de l'ADN et l'ARN

Acridine OrangeLa coloration différentielle des ADN / ARN par l'Acridine Orange peut être effectuée pour l'évaluation simultanée du contenu des cellules en ADN et ARN. L' Acridine Orange présente des caractéristiques spectrales différentes lorsqu'il est lié à l'ADN ou à l'ARN, qui émettent une fluorescence verte ou rouge respectivement avec une excitation à 488 nm.

Hoechst 33342 / Pyronin YL'analyse du cycle cellulaire peut être fait au moyen d'une coloration différentielle de l'ADN et de l'ARN. La détermination de la teneur en ARN, en plus de l'ADN, permet de distinguer la phase G0 des différentes étapes jusqu'aux cellules en G1. La Pyronin Y interagit avec l'ARN double brin et l'ADN double-brin par intercalation. Etant donné que les interactions de la Pyronin Y avec l'ADN sont supprimées en présence de Hoechst 33342, la Pyronin Y peut être utilisée comme le fluorochrome spécifique de l'ARN.

Methyl Green / Pyronin YLa coloration différentielle est dépendante des concentrations relatives de Methyl Green et Pyronin Y, et du pH de la solution de coloration.

Stain-AllLe Stain-All est approprié pour la coloration différentielle des acides nucléiques et des pro-téines. Il colore l'ARN en bleu-violet, l'ADN en bleu et les protéines en rouge. Sur un gel de polyacrylamide, il est possible de détecter à partir de 3 ng d'une digestion d'ADN pBR322 / Hae III (fragment de 123 pb) et de 90 ng ARNt.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéAcridine Orange 500 / 526, 650 FP-05920A 1 gAcridine Orange, 10 mg/ml in water 500 / 526, 650 FP-021092A 10 mlHoechst 33342, 10 mg/ml in water 350 / 461 FP-59046A 10 mlPyronin Y 546 / 565 FP-IT2831 100 mgMethyl green, Ready to use counterstain solution FP-ZD1370 15 mlMethyl green, zinc chloride salt N12390 25 gStain-All, UltraPure Grade 573 / 609 10050 25 mg

Produits LiésRNase A solution 10 mg/ml 734123 5 ml

G.35

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIREMitochondries I Sondes fluorescentes pour mitochondries

Les mitochondries sont les centrales énergétiques des cellules eucaryotes, où elles peuvent représenter jusqu'à 25% du volume de la cellule. Leur structure et leur état varient considé-rablement selon le type de cellule, le stade du cycle cellulaire ou l'état métabolique intra-cellulaire. Les mitochondries sont en train de devenir un marqueur de nombreuses mala-dies dégénératives, en particulier dans le système nerveux. Alors que l'indicateur clé de la mitochondrie est l'énergie, c'est-à-dire la production d'ATP par le métabolisme du sucre, la phosphorylation oxydative et l'oxydation des lipides, la détection des premières étapes de l'apoptose - la mort cellulaire programmée - et d'autres états pré-létales sont souvent suivis par les premiers changements au niveau de la polarisation de la membrane mitochondriale ou de sa structure.

Colorants des mitochondries dans les cellules vivantes

Rhodamine 123La Rhodamine 123 est une sonde perméable à la membrane, qui a la caractéristique de s'accumuler dans les mitochondries. En excès, d'autres compartiments cellulaires sont éga-lement colorés. Elle a été utilisée dans diverses activités enzymatiques et mitochondriales, ainsi que pour la mesure du potentiel transmembranaire. Contrairement aux carbocyanines, elle ne marque pas le réticulum endoplasmique. La Rhodamine 123 a également été utilisée comme colorant pour laser et a des effets sur la croissance des cellules.

Rhodamine B, hexyl esterLa Rhodamine B, hexyl ester, de charge positive, s'accumule dans les mitochondries. Sa fluorescence orange est compatible avec les filtres du TRITC.

10-Octadecylacridine orange bromideSonde fluorescente de la membrane mitochondriale utile pour analyser les mitochondries par cytométrie en flux. Elle sert à mesurer les changements dans la masse mitochondriale au cours de l'apoptose.

Nonyl acridine orange (NAO, Acridine orange 10-nonyl bromide)Le Nonyle acridine orange marque les mitochondries des cellules vivantes. Ce marquage ne dépend pas du potentiel membranaire des mitochondries. Il est utile pour les études à long terme, l'isolement des mitochondries, le criblage de médicaments, les mesures de la résistance aux médicaments et de l'apoptose. Il est cependant toxique à forte concentration. Le Nonyl l'acridine orange se lie aux phospholipides tels que la cardiolipine (Ka = 2,106 M-1) chargée négativement, le phosphatidylinositol et la phosphatidylsérine (Ka = 7,104 M-1). Il peut être utilisé pour mesurer les changements de la masse des mitochondries.

Cell Navigator™ Mitochondria Staining KitsLes Cell Navigator™ Mitochondria Staining kits sont conçus pour marquer les mitochondries des cellules vivantes avec un ensemble complet de couleurs. Les kits utilisent des colorants exclusifs, qui s'accumulent sélectivement dans les mitochondries. Les indicateurs mitochon-driaux sont conservés dans les mitochondries pendant une longue durée et montrent une bonne photostabilité. Cette fonctionnalité clé augmente considérablement l'efficacité de la coloration.

Cellules HeLa marquées avec le Cell Navigator™ Mitochondria Staining Kit, Red.



Mitochondries I Sondes fluorescentes pour mitochondries

MitoView™ Les MitoView™ Blue et MitoView™ 633 sont cellules perméants. Ils s'accumulent dans la membrane mitochondriale où leur fluorescence augmente fortement.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéMitoView™ Blue 398 / 440 70052 20 x 50 µgCell Navigator™ mitochondrion staining kit, Orange II 399 / 550 22673 500 testsNonyl acridine orange 495 / 522 FP-58566A 100 mg10-Octadecylacridine orange bromide 495 / 520 FP-AM525A 20 mgCell Navigator™ mitochondrion staining kit, Green 498 / 520 22666 500 testsRhodamine 123 507 / 529 FP-473722 25 mg

FP-47372A 50 mgRhodamine 123, UltraPure Grade 507 / 529 FP-R1380A 25 mgCell Navigator™ mitochondrion staining kit, Orange 545 / 575 22667 500 testsRhodamine B, hexyl ester, perchlorate 556 / 578 FP-89216A 10 mgMitoRed Viable Cell Stain 560 / 580 R237-10 8 x 50 µgCell Navigator™ mitochondrion staining kit, Red 575 / 600 22668 500 testsMitoView™ 633 622 / 648 70055 20 x 50 µgCell Navigator™ mitochondrion staining kit, NIR 640 / 659 22669 500 tests

Colorants des mitochondries dans les cellules fixées

MitoTracer™Le MitoTracer™ Green FM est essentiellement non fluorescent en solution aqueuse, et devient fluorescent une fois qu'il est accumulé dans l'environnement lipidique des mitochon-dries. Ainsi le bruit de fond est négligeable, permettant de visualiser clairement les mito-chondries dans les cellules vivantes immédiatement, sans étape de lavage. Indépendant du potentiel de membrane mitochondriale, il permet de déterminer la masse mitochondriale.Les MitoTracer™ Orange CMTMRos et MitoTracer™ Far Red 680 s'accumulent dans les mitochondries actives, en fonction du potentiel mitochondrial.

MitoView™ GreenLe MitoView™ Green est un colorant indépendante du potentiel membranaire mitochondrial. Il peut être utilisé pour l'imagerie des mitochondries suivant la dépolarisation mitochondriale, ou après fixation.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéMitoTracer™ Green FM 490 / 516 FP-97458A 20 x 50 µg

FP-974589 1 mgMitoView™ Green 490 / 523 70054 20 x 50 µgMitoTracer™ Orange CMTMRos 551 / 576 FP-67256A 20 x 50 µgMitoTracer™ Far Red 680 682 / 712 FP-F9976A 250 mg

Mesure de l'activité mitochondriale

ResazurinLa Resazurine est réduite dans les mitochondries. Elle permet de mesurer l'activité méta-bolique des mitochondries. Elle est aussi couramment utilisée pour le dosage de la viabilité cellulaire.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéResazurin, sodium salt 571 / 585 FP-06224B 100 mg

FP-06244A 1 gFP-06224C 50 g

Cellules HeLa marquées avec le MitoView™ Green.

Changement du potentiel membranaire mitochon-driale induit par FCCP dans les cellules Jurkat, marquée au JC-10™.

G.37

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIREMitochondries I Sondes fluorescentes pour mitochondries

Mesure du changement du potentiel membranaire mitochondrial induit par le FCCP avec la sonde Mito-Lite™ Orange dans des cellules Jurkat (kit # 22804).

MitoLite™Les MitoLite sont les colorants utilisés dans les Cell Meter™ Mitochondrion Membrane Po-tential (MMP) Assay Kits. Ils s'accumulent suivant le potentiel membranaire mitochondrial. Bien retenus dans les cellules, ils conviennent aux analyses longues. Ils marquent les cel-lules proliférantes ou non-proliférantes, en suspension ou adhérentes.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéJC-1 515 / 529 FP-52314A 5 mg

FP-52314C 50 mgJC-1, 100X in DMSO + 10X Buffer 515 / 529 FP-52314B 1 kitJC-1 chloride 515 / 529 FP-AM304A 5 mgJC-10 510 / 525 22204 5 x 100 µlDiSC3(3) 520 / 595 FP-46820A 250 mgDiSC3(3), UltraPure Grade 520 / 595 FP-35991A 25 mgCell Meter™ Mitochondrion Membrane Potential Assay Kit, Orange Fluorescence Optimized for Flow Cytometry

546 / 575 22804 100 tests

Cell Meter™ Mitochondrion Membrane Potential Assay Kit, Orange Fluorescence Optimized for Microplate Reader

546 / 575 22805 500 tests

Cell Meter™ NIR Mitochondrion Membrane Potential Assay Kit, Optimized for Flow Cytometry

646 / 659 22802 100 tests

Cell Meter™ NIR Mitochondrion Membrane Potential Assay Kit, Optimized for Microplate Reader

646 / 659 22803 500 tests

MitoLite™ Green 498 / 520 22675 500 testsMitoLite™ NIR 640 / 659 22678 500 testsMitoLite™ Orange 545 / 575 22676 500 testsMitoLite™ Orange 405 399 / 550 22679 500 testsMitoLite™ Red 575 / 600 22677 500 tests




Cytosqelette I Marquage de la F-Actine

Phalloïdines marquées

Marquage de F-actine par Phalloïdines - FluoProbes®

Les Phalloïdines marquées aux FluoProbes® offrent un large choix de couleurs pour visua-liser la F-actine en microscopie. Les dérivés fluorescents de la phalloïdine se sont révélés être extrêmement utiles dans la localisation des filaments d'actine dans les cellules vivantes ou fixées ainsi que pour visualiser des filaments d'actine individualisés in vitro. La Phalloï-dine se lie aux filaments d'actine beaucoup plus étroitement que les monomères d'actine. La Phalloïdine fonctionne différemment suivant sa concentration dans les cellules. A faibles concentrations dans le cytoplasme, la phalloïdine recrute les formes moins polymérisées de l'actine cytoplasmique ainsi que la filamine en ïlots stables de polymères d'actine agrégés, mais elle ne perturbe pas les fibres du stress, à savoir des faisceaux épais de microfilaments.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéFluoProbes 350 - Phalloidin 353 / 432 FP-1J8670 300 uFluoProbes 390A - Phalloidin 390 / 479 FP-YE5160 10 nmol

FP-YE5160 20 nmolFluoProbes 405- Phalloidin 400 / 423 FP-1G6270 300 uFluoProbes 405B – Phalloidin 405 / 460 FP-CA9870 300 uFluoProbes 415 - Phalloidin 418 / 465 FP-BP1240 300 uFluoProbes 425A - Phalloidin 436 / 484 FP-YE5170 10 nmol

FP-YE5171 20 nmolFluoProbes 430 - Phalloidin 444 / 487 FP-1J6410 300 uFluoProbes 488 - Phalloidin 493 / 519 FP-YE5180 10 nmol

FP-YE5181 20 nmolFluoProbes 490 - Phalloidin 491 / 515 FP-JO2830 300 uFluoProbes 495-X5 - Phalloidin 495 / 520 FP-47548A 300 uFluoProbes 505 -X5- Phalloidin 505 / 530 FP-AZ0130 300 uFluoProbes 532A - Phalloidin 532 / 553 FP-YE5190 10 nmol

FP-YE5191 20 nmolFluoProbes 547 - Phalloidin 557 / 574 FP-AZ0330 300 uFluoProbes 547H - Phalloidin 557 / 572 FP-BZ9620 300 uFluoProbes 550A - Phalloidin 554 / 576 FP-YE5200 10 nmol

FP-YE5201 20 nmolFluoProbes 554 - Phalloidin 551 / 572 FP-1J7420 300 uFluoProbes 555 - Phalloidin 547 / 572 FP-1J6340 300 uFluoProbes 556 - Phalloidin 548 / 573 FP-BV4620 300 uFluoProbes 565A Phalloidin 563 / 592 FP-YE5210 10 nmol FP-YE5211 20 nmolFluoProbes 590A - Phalloidin 580 / 599 FP-YE5220 10 nmol FP-YE5221 20 nmolFluoProbes 594 - Phalloidin 586 / 616 FP-DZ2360 300 uFluoProbes 633A - phalloidin 629 / 657 FP-YE5230 10 nmol

FP-YE5231 20 nmolFluoProbes 635 - Phalloidin 647 / 671 FP-1K0450 300 uFluoProbes 647 - Phalloidin 652 / 673 FP-BA0320 300 uFluoProbes 647H - Phalloidin 653 / 675 FP-BZ9630 300 uFluoProbes 647N - Phalloidin 644 / 669 FP-YE5240 10 nmol

FP-YE5241 20 nmolFluoProbes 651 - Phalloidin 656 / 678 FP-1J7430 300 uFluoProbes 655A - Phalloidin 633 / 684 FP-YE5250 10 nmol

FP-YE5251 20 nmolFluoProbes 681- Phalloidin 691 / 708 FP-BC3520 300 uFluoProbes 682 - Phalloidin 690 / 709 FP-BG0480 300 u

Phalloidine-FluoProbes® 505

G.39

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIRECytosquelette I Marquage des tubulines

Phalloïdines marquées aux fluorochromes classiques et groupements actifs

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéPhalloidin - Amino FP-BT5900 100 µgPhalloidin -C6-C6 – Biotin, synthetic FP-JO4830 1 mgPhalloidin – AMCA 353 / 442 FP-GCY020 300 uPhalloidin- Coumarin, synthetic 384 / 470 FP-JO4810 1 mgPhalloidin – FITC 495 / 520 FP-47548A 300 uPhalloidin- 5-FAM, synthetic 492 / 518 FP-JO4791 1 mg

FP-JO4792 5 mgPhalloidin – Rhodamine 542 / 565 FP-475741 300 uPhalloidin- 5-TAMRA, synthetic 546 / 579 FP-JO4800 1 mg

FP-JO4801 5 mgPhalloidin -C6-CR110, synthetic 498 / 521 FP-JO4820 1 mgPhalloidin-SR101 (Sulfo-rhodamine), synthetic 583 / 603 FP-033991 300 u

FP-033992 1 mgFP-033993 5 mg

Cell Navigator™ F-Actin Labeling KitsLes Cell Navigator™ F-Actin Labeling Kits sont conçus pour marquer la F-actine dans les cellules fixées. Les kits utilisent les conjugués de phalloidine fluorescents. Les conjugués de la phalloïdine ont une affinité pour la F-actine. Les kits fournissent tous les composants essentiels avec un protocole de marquage optimisé, nécessitant un minimum de temps.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéCell Navigator™ F-actin labeling kit, blue fluorescence 353 / 442 22660 1 kitCell Navigator™ F-actin labeling kit, green fluorescence 498 / 520 22661 1 kitCell Navigator™ F-actin labeling kit, orange fluorescence 546 / 575 22663 1 kitCell Navigator™ F-actin labeling kit, red fluorescence 583 / 603 22664 1 kit

Cellules CPA marquées avec le Cell Navigator™ F-actin labeling kit, blue fluorescence.




Cytosqelette I Marquage de la F-Actine

Visualisation de l'actine dans les cellules vivantesDans les cellules vivantes, les structures d'actine peuvent être observées par incorporation d'actine marquée par fluorescence, par l'expression de l'actine -GFP ou un sous-domaine de la protéine de liaison à l'actine marqué par fluorescence. L'actine fluorescente est le marqueur le plus précis des structures d'actine, mais il est parfois difficile à charger dans les cellules par micro-injection ou par réactif de transfection de protéine. Récemment, des sondes non cytotoxiques pour cellules vivantes (SiR-actine et SiR-tubuline), perméable aux cellules, et ont été publiées dans Nature Methods.

SiR-Actin KitLa SiR-actine est basée sur la liaison du produit naturel jasplakinolide sur la F-actine. La SiR-actine est perméable à la cellule et hautement spécifique pour la F-actine. La Sir-actine marque la F-actine endogène, sans nécessité de manipulation génétique ou de surexpres-sion. Son émission dans le rouge réduise la phototoxicité et l'autofluorescence de l'échan-tillon. La SiR-actine est compatible avec les protéines fluorescentes GFP et mCherry. Elle est utilisée en microscopie confocale, imagerie SIM ou STED dans les cellules et les tissus vivants.

Actines marquéesLes actines marquées à la Rhodamine servent dans les études de polymérisation de l'actine in vivo (micro-injection dans les cellules) ou les études de mobilité in vitro avec l'actine-F et la myosine.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéRhodamine actin (muscle actin), Rabbit 535 / 585 AR05-B 10 x 20 µg

AR05-C 20 x 20 µgRhodamine Actin protein (non-muscle actin), Human 535 / 585 APHR-A 4 x 10 µg

APHR-C 20 x 10 µgSiR-Actin Kit (50 nmol SiR-Actin + 1 umol verapamil) 652 / 674 CY-SC001 50 - 200 testsSiR-Tubulin Kit 652 / 674 CY-SC002 1 kitCytoskeleton Kit (SiR-Actin and SiR-Tubulin) 652 / 674 CY-SC006 1 kit

Produits LiésJasplakinolide, inducteur de polymérisation de l'actine in vitro FP-33663A 50 µgLatrunculin A, actin polymerization inhibitor FP-47143A 100 µgLatrunculin B, actin filament modulator FP-T8183A 1 mg

Cellules MCF10A en culture 3D marquées à la SiR-actin.

G.41

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIRECytosquelette I Marquage des tubulines

Autres sondes pour le marquage des tubulines

PaclitaxelLe Paclitaxel est un agent antimicrotubule, qui favorise l'assemblage des microtubules de dimères de tubuline et stabilise les microtubules en empêchant la dépolymérisation.

DCVJLe DCVJ (9-(2,2-Dicyanovinyl)julolidine) qui se lie à un site spécifique sur le dimère de tubu-line, sert pour suivre la polymérisation de la tubuline dans les cellules vivantes. Le DCVJ émet une forte fluorescence verte lors de sa liaison à la calmoduline. Les surfaces hydro-phobes de tubuline ont également été étudiées avec les sondes sensibles à leur environne-ment, les Nile Red et Prodan.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéPaclitaxel 228 / - FP-08426A 5 mg

FP-08426B 25 mg084261 250 mg084262 500 mg084263 1 g084264 2 g084265 5 g084266 10 g

Paclitaxel, 2mM in DMSO 228 / - TXD01 100 µlDCVJ 456 / 493 FP-65921A 25 mg

EZE080 5 mgNile Red 552 / 636 FP-46875A 25 mgProdan 361 / 498 FP-47039A 25 mg

Autres anticorps primaires à retrouver dans la section Immunologie.

Produits LiésAnti-Tubulin 8C0381 50 µgAnti-Desmin 8C0171 50 µg




Autres structures cellulaires I Sondes pour les organites acides

Sondes pour les organites acidesLes sondes de pH acide marquent sélectivement les organites acides tels que lysosomes, endosomes, exosomes, spermatozoïdes et acrosomes. Leur fluorescence est dépendante du pH, mais contrairement à la plupart des colorants fluorescents existants, leur intensité de la fluorescence augmente de façon spectaculaire lorsque le pH diminue de neutre à acide. L'absence de fluorescence à l'extérieur de la cellule permet d'éliminer les étapes de lavage. Cela permet la détection spécifique des compartiments cellulaires acides avec une variabilité réduite du signal et une meilleure précision en imagerie ou en cytométrie de flux.

Voir section Analyse Biologie Cellulaire | Indicateurs de pH | Indicateurs pour pH acide

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéPDMPO 405 / 550 FP-44201A 1 mgPDMPO, SE 405 / 550 FP-022900 1 mgPDMPO Dextran 405 / 550 FP-024010 1 mgProtonex™ Green 500 443 / 505 21215 1 mgProtonex™ Green 500 Dextran 443 / 505 21217 1 mgProtonex™ Red 600 575 / 597 21207 1 mgProtonex™ Red 600 Latex bead conjugate 575 / 597 21209 1 mg

Lectines pour le marquage des glycoconjugués

Con ALa Concanavaline A (Con A) se lie de manière sélective aux α-methyl-mannopyranoside > α-D-Mannose > α-D-Glucose > α-N-acetyl-D-glucosamine. Dans les solutions modérément acides (pH 4.5 à 5.6), la Con A existe sous forme de dimère; au-dessus de pH 7, elle est sous forme de tétramère. Con A est une métalloprotéine qui nécessite un Ca2+ et un Mn2+ par sous-unité pour sa fixation aux glucides. Lorsque la Con A est succinylée avec de l'anhy-dride succinique, elle est irréversiblement convertie en un dimère qui conserve la même spécificité de liaison sucre-lectine. Elle sert à l'immunolocalisation des produits oncogènes, des enzymes intracellulaires spécifiques, des protéines virales et des composants du cytos-quelette.

WGALe WGA (Wheat Germ Agglutin) se lie sélectivement à la N-acétylglucosamine et aux résidus d'acide N-acétylneuraminique (GlcNacβ(1,4) GlcNacβ(1,4) GlcNac > GlcNacβ(1,4) GlcNac > GlcNac >> sialic acid (Neu5Ac) >> GalNAc). Le WGA marque spécifiquement la membrane plasmique. Il est retenu après fixation et perméabilisation au formaldéhyde avec du Triton X-100. Ainsi ce conjugué de lectine fluorescente peut également être utilisé pour marquer les cellules fixes; Toutefois, pour éviter le marquage des composants intracellulaires, les cellules fixées au formaldéhyde ne doivent pas être perméabilisées avant le marquage. Il est important de noter que le WGA marqué peut stimuler une activité biologique, comme le regroupement des protéines de surface cellulaire glycosylées.

PNALa lectine PNA (Arachis hypogaea) est spécifique du β-galactose terminal. Elle se fixe préfé-rentiellement aux structures galactosyl (β-1,3) N-acetylgalactosamine.

G.43

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIREAutres structures cellulaires I Lectines pour le marquage des glycoconjugués

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéCon A – CF™350 347 / 448 29015 5 x 1 mgCon A – FITC 492 / 517 FP-MS8700 25 mgCon A – FITC 492 / 517 FP-47496A 5 mgSuccinyl Con A – FITC 492 / 517 FP-MS5670 10 mgCon A – CF™488A 490 / 515 29016 5 x 1 mgCon A – TMR 546 / 575 FP-523261 1 mgCon A – TRITC 554 / 570 FP-MS9250 5 mgSuccinyl Con A – TRITC 554 / 570 FP-MS9930 5 mgCon A – CYanine3 555 / 570 FP-WT8681 1 mgCon A – FluoProbes 547H 560 / 575 FP-FL9270 10 mgCon A – CF™594 593 / 614 29017 5 x 1 mgCon A – SR101 596 / 615 FP-MT0000 5 mgSuccinyl Con A – SR101 596 / 615 FP-MS9990 5 mgCon A – CF™633 630 / 650 29018 5 x 1 mgCon A – CYanine5 646 / 662 FP-LV5760 1 mgCon A – CF™640R 642 / 662 29019 5 mgCon A – CF™680 681 / 698 29020 5 x 1 mgCon A – CF™770 770 / 797 29058 5 x 1 mgCon A FP-222407 1 gCon A – Alkaline Phosphatase FP-MS7170 1 mgCon A – HRP FP-MS6550 1 mgSuccinyl Con A – HRP FP-MS9890 1 mgCon A – Biotin FP-MS9690 5 mgSuccinyl Con A – Biotin FP-MS9690 5 mgWGA– CF™350 347 / 448 29021 5 x 1 mgWGA– CF™405S 404 / 431 29027 5 x 1 mgWGA– CF™405M 408 / 452 29028 5 x 1 mgWGA– CF™488A 490 / 515 29022 5 x 1 mgWGA– CF™594 593 / 614 29023 5 x 1 mgWGA– CF™633 630 / 650 29024 5 x 1 mgWGA– CF™640R 642 / 662 29026 5 x 1 mgWGA– CF™680 681 / 698 29029 5 x 1 mgWGA– CF™680R 680 / 701 29025 5 x 1 mgWGA– CF™770 770 / 797 29059 5 x 1 mgPNA– CF™488A 490 / 515 29060 1 mgPNA– CF™568 562 / 583 29061 1 mgPNA– CF™594 593 / 614 29062 1 mgPNA– CF™640R 642 / 662 29063 1 mg

De nombreuses autres lectines sont disponibles sur demande à [email protected]




Lysosomes

LysoVueDes amines faiblement basiques s'accumulent de manière sélective dans les compartiments cellulaires ayant un faible pH interne. Elles peuvent être utilisées pour étudier les lysosomes. Les sondes LysoVue sont des sondes fluorescentes acidotropiques pour le marquage et le suivi des organites acides dans les cellules vivantes.

Cell Navigator™ Lysosome Staining KitsLes Lysosomes sont des organites cellulaires qui contiennent des enzymes hydrolase acide qui dégradent les débris cellulaires. La membrane autour d'un lysosome permet aux en-zymes digestives de travailler au pH dont ils ont besoin. Les lysosomes fusionnent avec les vacuoles autophagiques et libèrent leurs enzymes dans les vacuoles autophagiques, digérant ainsi leur contenu. La taille d'un lysosome varie de 0,1 à 1,2 µm. Le pH de 4,8, à l'intérieur des lysosomes est acide par rapport au cytosol légèrement basique (pH 7,2). Le lysosome maintient cette différence de pH par pompage des protons du cytosol à travers la membrane par l'intermédiaire de pompes à protons et des canaux d'ions chlorure. La membrane lysosomale protège le cytosol, et donc le reste de la cellule, des enzymes de dégradation.

Les Cell Navigator™ Lysosome Staining Kits sont conçus pour marquer les lysosomes des cellules vivantes avec les colorants LysoBrite™, les indicateurs lysotropiques propriétaires qui s'accumulent sélectivement dans les lysosomes. Les colorants LysoBrite™ sont des composés hydrophobes qui entrent facilement dans les cellules vivantes intactes. Ils sont ensuite piégés dans les lysosomes. Les kits de coloration Cell Navigator™ sont adaptés à l'étude des cellules en suspension ou des cellules adhérentes.

Autres structures cellulaires I Traceurs cellulaires

Cellules HeLa marquées avec Cell Navigator™ Lysosome Staining Kit, Red.

Stabilité du signal du Cell Navigator™ Lysosome Staining Kit (# 22658) dans les cellules HeLa.

G.45


LysoViewLysoView™ 633 est un colorant fluorescent rouge lointain qui a une sélectivité élevée pour le marquage des organites acides dans les cellules vivantes. Le LysoView™ 633 permet une coloration lysosomale hautement spécifique sans étape de lavage. Avec l'absorption et l'émission à 634/659 nm, le colorant peut être détecté en utilisant un ensemble de filtres CYanine5.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéLysoVue™ Blue DND-22, 1mM DMSO 373 / 422 FP-97578A 20 x 50 µlLysoVue™ Yellow HCK-123, 1mM In DMSO 465 / 535 FP-80459A 20 x 50 µlLysoVue™ Green DND-26, 1mM in DMSO 504 / 511 FP-97677A 20 x 50 µlLysoVue™ Red DND-99, 1mM in DMSO 576 / 589 FP-70708A 20 x 50 µlCell Navigator™ lysosome staining kit, Blue 353 / 442 22655 500 testsCell Navigator™ lysosome staining kit, Green Ex405 405 / 505 22651 500 testsCell Navigator™ lysosome staining kit, Green 450 / 505 22656 500 testsCell Navigator™ lysosome staining kit, Orange 542 / 556 22657 500 testsCell Navigator™ lysosome staining kit, Red 575 / 597 22658 500 testsCell Navigator™ lysosome staining kit, Deep red 596 / 619 22659 500 testsCell Navigator™ lysosome staining kit, NIR 636 / 650 22652 500 testsLysoBrite™ Blue 353 / 442 22642 500 testsLysoBrite™ Green 450 / 505 22643 500 testsLysoBrite™ Orange 542 / 556 22644 500 testsLysoBrite™ Red 575 / 597 22645 500 testsLysoBrite™ Deep Red 596 / 619 22646 500 testsLysoBrite™ NIR 636 / 650 22641 500 testsLysoView™ 633 634 / 659 70058 1 ml

LysochromesUn lysochrome est un colorant soluble dans la graisse qui a une forte affinité pour les graisses. Ils sont donc utilisés pour la coloration des triglycérides, des acides gras, et des lipoprotéines. Ils peuvent également être utiles pour marquer les lipoprotéines et d'autres lipides. Quelques exemples : Sudan IV, Oil Red O et Amido Black.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéSudan IV 513 / - N13862 100 gSudan III 503 / - 08002A 25 gSudan Black B 596 / - 279042 50 gOil Red O 518 / - N13002 100 g

Autres structures cellulaires I Traceurs cellulaires

Marquage des lysozomes en violet avec le Lyso-View™ 633 et du noyau en bleu avec le Hoechst.

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Coloration des cellules I Traceurs cellulaires

Coloration des cellules fixées

Cell Explorer™ pour cellules mortesLes Cell Explorer™ sont un ensemble d'outils pour le marquage de cellules pour les analyses en microscopie à fluorescence des fonctions cellulaires. Le marquage efficace de cellules fournit un procédé puissant pour étudier les événements cellulaires dans un contexte spatial et temporel. Les fluorochromes ont été sélectionnés pour leur photostabilité élevée.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéCell Explorer™ Fixable Dead Cell Staining Kit, Blue 353 / 442 22600 200 testsCell Explorer™ Fixable Dead Cell Staining Kit, Blue Ex.405 410 / 450 22500 200 testsCell Explorer™ Fixable Dead Cell Staining Kit, Green Ex.405 408 / 512 22501 200 testsCell Explorer™ Fixable Dead Cell Staining Kit, Green 498 / 521 22601 200 testsCell Explorer™ Fixable Dead Cell Staining Kit, Orange Ex.405 398 / 550 22502 200 testsCell Explorer™ Fixable Dead Cell Staining Kit, Orange 547 / 573 22602 200 testsCell Explorer™ Fixable Dead Cell Staining Kit, Red 583 / 603 22603 200 testsCell Explorer™ Fixable Dead Cell Staining Kit, Red-FCM 523 / 617 22599 200 testsCell Explorer™ Fixable Dead Cell Staining Kit, Deep Red 649 / 660 22604 200 tests

Coloration des cellules vivantes

CalceinLes calcéines sont des sondes fluorescentes pour le marquage du cytoplasme des cellules vivantes. Les formes AM sont perméables à la cellulaire. Une étape de lavage peut être nécessaire pour réduire au minimum le bruit de fond.

Cell Explorer™ pour cellules vivantesLes kits Cell Explorer™ pour cellules vivantes sont un ensemble d'outils pour le marquage de cellules pour l'étude des fonctions cellulaires en microscopie à fluorescence. Le marquage est réalisé de manière uniforme dans les cellules vivantes.

Dextrans fluorescents, fixablesLes dextrans conjugués CF™ sont utilisés comme sonde fluorescente pour étudier des pro-cessus cellulaires tels que la perméabilité cellulaire, la phagocytose, l'endocytose ou pour étudier les mécanismes d'administration biomoléculaire. Les colorants CF™ sont des colo-rants fluorescents supérieures avec une luminosité exceptionnelle et photostabilité remar-quable.

CFDA-SELe CFDA-SE (aussi noté CFSE) est une sonde perméable au membrane cellulaire. Elle s'accumule facilement à l'intérieur des cellules viables où elle se fixe de façon covalente aux protéines intracellulaires. Les cellules marquées peuvent être suivies sur plusieurs semaines in vivo.

Par ailleurs, des colorants de noyaux peuvent marquer les cellules vivantes. Ils sont décrits dans la section Sondes nucléaires | Colorants des ADN & ARN | Colorants des cellules vivantes

Cellules vivantes marquées par le Cell Explorer Red.

Cellules CPA marquées au CytoCalcein™ Violet 500.

G.47

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIREAutres structures cellulaires I Traceurs cellulaires

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéCalcein AM, Blue 360 / 445 FP-95397A 1 mgCalcein Blue 360 / 445 FP-11141B 25 mgCalcein AM 494 / 517 FP-895514 1 mg

FP-895515 20 x 50 µgCalcein AM, UltraPure Grade 494 / 517 FP-HG6250 1 mgCalcein AM, 1 mg/ml in dry DMSO 494 / 517 FP-855422 1 mlCalcein AM, 4mM in DMSO 494 / 517 FP-FI9820 100 µlCalcein 494 / 517 FP-466251 100 mgCalcein Orange AM 525 / 550 FP-ZE7840 1 mgCalcein Orange 525 / 550 FP-UVC280 1 mgCalcein Red AM 560 / 574 FP-UVC460 1 mgCalcein Red 560 / 574 FP-UVC470 1 mgCalcein Deep Red 646 / 659 FP-ZE7850 1 mgCytoCalcein Violet 450 408 / 450 22012 1 mgCytoCalcein Violet 500 410 / 500 22013 1 mgCell Explorer™ Fixable Live Cell Tracking Kit, Green 495 / 515 22621 200 testsCell Explorer™ Fixable Live Cell Tracking Kit, Red 575 / 600 22625 200 testsCell Explorer™ Live Cell Labeling Kit, Blue 360 / 445 22606 200 testsCell Explorer™ Live Cell Tracking Kit, Blue 403 / 445 22620 200 testsCell Explorer™ Live Cell Labeling Kit, Blue Ex.405 410 / 450 22614 200 testsCell Explorer™ Live Cell Labeling Kit, Green Ex.405 410 / 500 22615 200 testsCell Explorer™ Live Cell Labeling Kit, Green 495 / 515 22607 200 testsCell Explorer™ Live Cell Labeling Kit, Orange Ex.405 398 / 545 22616 200 testsCell Explorer™ Live Cell Tracking Kit, Orange 528 / 541 22622 200 testsCell Explorer™ Live Cell Tracking Kit, Red 575 / 600 22623 200 testsCell Explorer™ Live Cell Tracking Kit, Deep Red 637 / 650 22624 200 testsCell Explorer™ Live Cell Labeling Kit, Red 646 / 659 22609 200 testsCF™488A-Dextran 10,000 MW, Anionic and Fixable 490 / 515 80110 1 mgCF™543-Dextran 10,000 MW, Anionic and Fixable 541 / 560 80111 1 mgCF™555-Dextran 10,000 MW, Anionic and Fixable 555 / 565 80112 1 mgCF™568-Dextran 10,000 MW, Anionic and Fixable 562 / 583 80113 1 mgCF™594-Dextran 10,000 MW, Anionic and Fixable 583 / 614 80114 1 mgCF™640R-Dextran 10,000 MW, Anionic and Fixable 642 / 662 80115 1 mgCF™680R-Dextran 10,000 MW, Anionic and Fixable 680 / 701 80116 1 mgCMAC, Blue Cell Tracking Reagent 353 / 466 FP-63323A 5 mgCMHC, Blue Cell Tracking Reagent 373 / 470 FP-46539A 5 mgCMFDA, Green Cell Tracking Reagent 492 / 517 FP-38855A 1 mgCMTMR, Orange Cell Tracking Reagent 541 / 565 FP-12662A 1 mgCFDA-SE 494 / 521 FP-52493A 25 mg

FP-LQU970 5 x 500 µg5-CFDA-SE 495 / 519 FP-AM4969 10 mg

FP-AM496A 25 mgFP-AM496B 50 mgFP-AM496C 250 mg

6-CFDA-SE 495 / 519 FP-AM497A 10 mg




Comptage de cellules, viabilité et prolifération I Viabilité

Mesure de viabilité par colorimétrie

Cell Counting Kit (CCK-8)Le kit de comptage des cellules CCK-8 permet un dosage colorimétrique sensible pour la détermination de la viabilité cellulaire et leur prolifération.

● Stable à +4°C ● Rapide à utiliser : prêt-à-l'emploi, sans attendre de décongélation et sans lavage● Procédure simple : ajouter le réactif et mesurer la DO

Principe : colorant moins toxique, car situé à l'extérieur de la cellule

Le sel de tétrazolium soluble dans l'eau (WST-8) est réduit par l'activité déshydrogénase dans les cellules pour donner du formazan de couleur orange, qui est soluble dans le mi-lieu de culture tissulaire. La quantité de colorant formazan, générée par les activités des déshydrogénases dans les cellules, est directement proportionnelle au nombre de cellules vivantes. La sensibilité de détection du CCK-8 est supérieure à celle des autres sels de tétrazolium tels que le MTT, XTT, MTS ou WST-1.

Analyse en microplaque

UptiBlue™, réactif de comptage des cellules vivantesL'UptiBlue™ est un indicateur d'oxydo-réduction, qui produit un changement colorimétrique et un signal fluorescent en réponse à l'activité métabolique. Le descriptif du produit est plus détaillé dans la section suivante pour la mesure de la viabilité par fluorescence.

La réduction liée à la croissance cellulaire provoque le changement de l'indicateur redox de la forme oxydée (bleue, non fluorescent) en forme réduite (rouge fluorescent).

Mode de détection au choix :● Spectrophotométrie : mesures d'absorbance à 570 nm et 600 nm● Fluorimétrie : excitation à 530-560 nm et émission à 590 nm

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéCell Counting Kit (CCK8) 450 / - CK04-11 1 000 tests

CK04-13 3 000 testsCK04-20 10 000 tests

UptiBlue™, Viable Cell Counting Reagent 570, 600 / - UP669412 25 mlUP669413 100 mlUP669415 500 ml

Stable 1 an à +4°C.

UptiBlue™ de la forme oxydée (bleue) à la forme réduite (rouge)

G.49

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIREComptage de cellules, viabilité et prolifération I Viabilité

ResazurinCet indicateur redox est utilisé pour déterminer les niveaux d'énergie des cellules, et comme donneur d'électrons dans les dosages utilisant la Horseradish peroxydase (HRP). La HRP transforme la Resazurine en Résorufine, qui est détectée en colorimétrie ou fluorimétrie. L'application de la Résazurine est courante pour étudier la cytotoxicité à médiation cellulaire, la prolifération cellulaire et l'activité métabolique des mitochondries.

WST-1Le WST-1 en sel de tétrazolium est clivé en formazan par un mécanisme cellulaire complexe qui se produit principalement à la surface. Cette bioréduction est surtout dépendante de la production par glycolyse du NAD(P)H dans les cellules viables. Par conséquent, la quantité de colorant formazan formé est directement corrélée au nombre de cellules métabolique-ment actives dans la culture. Il convient pour la prolifération cellulaire et les dosages de cytotoxicité.

MTTLe MTT est un sel de tétrazolium qui est couramment utilisé pour détecter le métabolisme réducteur dans des cellules dans les études de viabilité, prolifération et cytotoxicité. Après réduction, les sels de tétrazolium sont transformés en produits très colorés qui peuvent être facilement quantifiés par mesure colorimétrique. Le MTT forme un produit formazan pourpre qui doit être solubilisé avant quantification. Le MTT est particulièrement utile pour le criblage de composés antiviraux et anticancéreux, et pour les études de l'effet de la cytokine sur la prolifération cellulaire.

XTTLe XTT fournit une méthode simple pour déterminer le nombre de cellules vivantes en uti-lisant les lecteurs de microplaques. La détermination du nombre de cellules vivantes est souvent utilisée pour évaluer la vitesse de prolifération cellulaire et pour cribler des agents cytotoxiques. Le XTT est un dérivé de tétrazolium. Similaire au MTT, le XTT mesure la via-bilité des cellules sur la base de l'activité des enzymes mitochondriales dans les cellules vivantes, qui réduisent le XTT, et qui sont inactivés peu de temps après la mort cellulaire. Contrairement au MTT, le XTT est réduit à un produit de couleur orange très soluble dans l'eau alors que le MTT formazan est insoluble. Il élimine ainsi l'étape de solubilisation requise pour le test au MTT. La quantité de produit soluble dans l'eau générée à partir de la réduc-tion du XTT est proportionnel au nombre de cellules vivantes dans l'échantillon et peut être quantifiée par photométrie à 475 nm. Le développement de la couleur en continu permet des mesures au cours du temps pour une gamme de détection étendue.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéResazurin Sodium Salt, >85 % 570, 600 / - FP-06224C 50 gResazurin Sodium Salt, >96 % 570, 600 / - FP-06224B 100 mg

FP-06224A 1 gResofurin, Sodium Salt 570, 600 / - FP-95432B 100 mg

FP-95432A 5 x 20 mgWST-1 438 / - F98880 100 mg

F98881 500 mgF98882 1 g

WST-1 Cell Proliferation Kit 438 / - 10008883 96 tests(WST-1 powder + Electron mediator solution) 10008883 480 tests

Spectres d'absorption des colorants WST au formazan.

1.5

1.0

0.5

0400 500 600 700

Abso

rban

ce

Longueur d’onde (nm)

WST-1WST-3WST-4WST-5

1.5

1.0

0.5

0400 500 600 700

Abso

rban

ce

Longueur d’onde (nm)

WST-8WST-9





Réactifs avantageux à votre mesure Mesure de viabilité par colorimétrie (suite)

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéWST-3 433 / - T33230 100 mgWST-4 550 / - T33240 100 mgWST-5 550 / - T33250 100 mgWST-8 450 / - QZ8430 100 mgWST-9 BB4490 100 mg1-Methoxy-PMS, Electron mediator T31990 100 mgMTT 550 / - 659393 100 mg

FP-65939A 1 gFP-65939B 5 g

MTT Cell Viability Assay Kit 550 / - 30006 1 kitXTT 475 / - FP-40936A 100 mgXTT Cell Proliferation Assay Kit 475 / - 30007 1 000 tests

4891-025-K 2 500 tests

Mesure de viabilité par fluorimétrie UptiBlue™, réactif de comptage des cellules vivantesL'UptiBlue™ est un indicateur d'oxydo-réduction, qui produit un changement colorimétrique et un signal fluorescent en réponse à l'activité métabolique. Ce colorant sans danger et non toxique a prouvé son utilité pour l'analyse quantitative de la viabilité cellulaire et de la proli-fération cellulaire, pour des analyses de cytokine et dans des études de cytotoxicité in vitro. Compatible avec de nombreuses espèces, l'UptiBlue™ est validé sur les lignées cellulaires animales et humaines, les bactéries et les champignons. Il ne nécessite pas de centrifuga-tion, et il fonctionne sur les cellules attachées ou en suspension. Sa sensibilité produit un signal reproductible à partir de 80 cellules.

Applications :● Déterminations de la prolifération cellulaire : soluble dans l'eau, stable en culture, et non toxique● Analyses de la viabilité cellulaire : activité métabolique et cytotoxicité influencent l'inten-sité du signal● Dosages des cytokines : mesure de la prolifération induite par les cytokines - les cellules peuvent être réutilisées ensuite pour d'autres expériences

La croissance cellulaire en continue maintient un environnement réduit tandis que l'inhibition de la croissance maintient un environnement oxydé. La réduction liée à la croissance pro-voque le changement de l'indicateur redox de la forme oxydée (bleue, non fluorescent) en forme réduite (rouge fluorescent).

Mode de détection au choix :● Spectrophotométrie : mesures d'absorbance à 570 nm et 600 nm● Fluorimétrie : excitation à 530-560 nm et émission à 590 nm

Calcein AM Cell Viability Assay KitLa Calcéine AM est un marqueur de cellules fluorescent vert largement utilisé. La Calcéine AM est perméable à la membrane, et peut donc être introduit dans les cellules par incubation. Une fois à l'intérieur des cellules, la calcéine AM est hydrolysée par les estérases endogènes en calcéine fortement chargée négativement. La calcéine fluorescente est retenue dans le cytoplasme des cellules vivantes. Le Calcein AM Cell Viability Assay Kit est conçu pour quantifier le nombre de cellules vivantes en fonction de l'intégrité de leur membrane cytoplas-mique. Il est un véritable test en point final pour la viabilité cellulaire. Le signal fluorescent est proportionnel au nombre de cellules vivantes dans l'échantillon.

UptiBlue™ de la forme oxydée (bleue) à la forme réduite (rouge).

G.51


Réactifs avantageux à votre mesureViability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live & Dead CellsLe Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live & Dead Cells colore en vert et en rouge les cellules vivantes et mortes, respectivement. Le dosage utilise deux sondes qui détectent une activité d'estérase intracellulaire dans les cellules vivantes et l'intégrité de la membrane plasmique dans les cellules mortes. Les cellules vivantes sont marquées avec la Calcéine AM en solution. Les cellules mortes sont marquées en rouge grâce à une solution d'éthidium homodimère III (EthD-III), colorant de l'ADN imperméable à la membrane. Le kit est adapté à la microscopie en fluorescence, au lecteur de microplaques et à la cytométrie en flux. Les principes de dosage est applicable à la plupart des types de cellules eucaryotes, y com-pris les cellules adhérentes et certains tissus, mais pas aux bactéries ou aux levures. Cette méthode d'évaluation de la viabilité des cellules à base de fluorescence peut être utilisée à la place de l'exclusion du bleu de trypan, à la libération de 51Cr, et des méthodes similaires pour déterminer la viabilité cellulaire et la cytotoxicité. L'EthD-III a une plus grande affinité de liai-son à l'ADN et une fluorescence plus intense que l'EthD-I (70% plus lumineux que l'EthD-I).

Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Bacteria Live & Dead Cells

● Double détection : détecter les cellules vivantes et mortes dans une même population de cellules● Simple et rapide : 15 min d'incubation et mesure sans lavage● Économique : Effectuer la viabilité et la cytotoxicité en même temps● Polyvalent : Analyse compatible en cytomètrie de flux et microscopie à fluorescence en utilisant les paramètres de la fluorescéine et de l'iodure de propidium.

Ce kit fournit une coloration fluorescente distincte sur les bactéries vivantes (en vert) et les bactéries mortes (rouge) à l'aide des sondes DMAO et EthD-III. Le kit fonctionne également sur les cellules mammifères. Le DMAO est un colorant d'acide nucléique-vert fluorescent qui colore toutes les cellules vivantes et mortes avec des membranes de cellules intactes ou endommagées. L'EthD-III est un colorant d'acide nucléique fluorescent rouge qui colore uniquement les cellules mortes avec les membranes cellulaires endommagées. Avec un mé-lange approprié de DMAO et d'EthD-III, les cellules avec des membranes cellulaires intactes ont une fluorescence verte, alors que les cellules avec des membranes cellulaires endomma-gées ont fluorescence rouge. Le kit est approprié pour une utilisation en microscope à fluo-rescence et en cytomètie de flux. Le principe d'analyse basé sur l'intégrité membranaire est général, et peut s'appliquer à la plupart des types de bactéries et des cellules mammifères.

Bacterial Viability and Gram Stain KitLe Bacterial Viability and Gram Stain Kit contient trois composants : CF™ 488A-WGA, DAPI et EthD-III en solutions pour distinguer les bactéries vivantes et mortes, ainsi que les gram-négatives et gram-positives. L'agglutinine de germe de blé marquée en vert se lie spécifiquement à la N-acétylglucosamine de la couche de peptidoglycanes de bactéries gram-positives. Le composant d'analyse de la viabilité bactérienne est basé sur l'intégrité de la membrane cellulaire. L'EthD-III est un colorant de liaison d'acide nucléique qui est imperméable à la membrane. Il colore sélectivement les cellules avec des membranes plas-miques dégradées. Toutes les cellules sont colorées en bleu avec le DAPI, colorant d'ADN perméable à la membrane.

Le Bacterial Viability and Gram Stain Kit a été testé sur les espèces bactériennes suivantes: Bacillus subtilis subsp. subtilis, Escherichia coli, Micrococcus luteus, Pseudomonas fluores-cens, et Staphylococcus epidermidis.

Principe du dosage de la Viabilité avec la calcéine AM.





Réactifs avantageux à votre mesure Live-or-Dye™ Fixable Viability Staining KitsLes Live-or-Dye™ Fixable Viability Staining Kits sont conçus pour la discrimination entre les cellules vivantes et mortes en cytométrie de flux et en microscopie. Les colorants sont imper-méables à la membrane cellulaire et réagissent avec les amines. Les colorants pénètrent dans les cellules mortes qui ont une membrane dégradée, et se lient de manière covalente aux amines libres des protéines intracellulaires.Les Live-or-Dye™ sont extrêmement stables, permettant aux cellules d'être fixées et per-méabilisées sans perte de fluorescence ou de transfert de colorant entre les cellules. Le pro-tocole de coloration a été optimisé pour maximiser la discrimination entre cellules vivantes / mortes avec un minimum de coloration des cellules vivantes, afin d'éviter les interférences avec des immunomarquages. La gamme de huit colorants couvre un large spectre de fluo-rescence, pour une flexibilité maximale dans les analyses en multi-marquage.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéUptiBlue™, Viable Cell Counting Reagent 530-560 / 590 UP669412 25 ml

UP669413 100 mlUP669415 500 ml

Calcein AM Cell Viability Assay Kit 494 / 517 30026 1 000 testsViability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live & Dead Cells 494, 530 BF4710 300 tests

/ 517, 620 BF471E 150 testsViability/Cytotoxicity Assay Kit for Bacteria Live & Dead Cells 503, 530 / 530,

620BU1040 1 000 tests

Bacterial Viability and Gram Stain Kit 358, 490, 530 / 461, 515, 620

32001 200 tests

Calcein AM, 1mg/ml in DMSO 494 / 517 FP-855422 1 mlEthidium Homodimer (EthD-1), 2 mM in DMSO 528 / 617 FP-AT758A 0,5 mlEthidium Homodimer (EthD-2), 1 mM in DMSO 535 / 624 FP-67125A 200 µlEthidium Homodimer (EthD-3), 2 mM in DMSO 530 / 620 FP-BP9340 200 µlLive-or-Dye™ 350/448 350 / 448 32002-T 50 tests

32002 200 testsLive-or-Dye™ 405/452 405 / 452 32003-T 50 tests







32008 200 tests

Cellules Jurkat tuées ou non à la châleur, puis marquées avec les colorants Live-or-Dye™.

Cellules HeLa marquées avec le Live-or-Dye™ 488/515, traitée à l'éthanol 15 % pendant 10 minutes pour tuer une fraction des cellules.

G.53


Réactifs avantageux à votre mesureMesure de viabilité par Luminescence

ATP-Glo™ Bioluminometric Cell Viability Assay KitL'ATP-Glo™ Bioluminometric Cell Viability Assay Kit utilise l'oxydation dépendante de l'ATP de la D-luciférine par la luciférase. La lumière produite dépend de la quantité d'ATP dans une culture cellulaire, qui est proportionnelle au nombre de cellules viables. Le kit ATP-Glo™ peut être utilisé pour détecter l'ATP à partir d'une seule cellule ou de 0,01 picomole d'ATP. La linéarité du signal pour la détection de l'ATP est obtenue sur six ordres de magnitude. Le dosage est de type flash, conçu pour la détection en utilisant un luminomètre. Le signal luminescent est stable pendant au moins une minute.

ATP Determination Kit, 0,1 to 100 pmolCe kit de dosage sensible est optimisé pour la détermination rapide de faibles niveaux d'ATP pré-existant ou d'ATP formé en systèmes cinétiques. Après 10 minutes d'incubation du réactif de dosage, les concentrations d'ATP à partir de 0,1 pmol peuvent être déterminées avec pré-cision en utilisant le signal luminescent linéaire de la réaction de la luciférase. La diminution du signal luminescent et de la sensibilité est observée après des temps d'incubation de plus de 30 minutes.

ATP Determination Kit, 0,01 to 10 µM, up to 4h readingLe kit de détermination de l'ATP à signal stable est basé sur le système de luciférase-lucifé-rine. Ce dosage est optimisé pour les applications pour des concentrations d'ATP allant de 10 nM à 10 µM en place. Le signal de luminescence est stable pendant au moins 4 heures.

PhosphoWorks™ Luminometric ATP Assay Kit, Bright GlowLe PhosphoWorks™ Luminometric ATP Assay Kit, Bright Glow fournit un test par lumines-cence rapide, simple et homogène pour la détermination de la prolifération cellulaire et la cytotoxicité dans des cellules de mammifères. Le dosage peut être effectué dans un format de plaque de 96 puits et de 384 puits. La grande sensibilité de ce test permet la détection de l'ATP dans de nombreux systèmes biologiques, les échantillons de l'environnement et les denrées alimentaires. Le kit Bright Glow peut détecter un signal à partir de 10 cellules/puits. Le signal est stable pendant plus d'une heure.

PhosphoWorks™ Luminometric ATP Assay Kit, DTT-FreeLe PhosphoWorks™ Luminometric ATP Assay Kit, DTT-Free n'utilise pas de DTT, et possède un signal de luminescence stable pendant 4 heures. Le dosage peut être effectué dans un format de plaque de 96 puits et de 384 puits. Le kit DTT-Free peut détecter un signal à partir de 100 cellules/puits.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéATP-Glo™ Bioluminometric Cell Viability Assay Kit - / 560 30020-T 50 tests

30020-1 200 tests30020-2 1 000 tests

ATP Determination Kit, 0,1 to 100 pmol , (20-100 tests/ml) - / 560 FP-S2841A 10 mlFP-S2841B 30 mlFP-S2841C 100 ml

ATP Determination Kit, 0,01 to 10 µM, up to 4h reading - / 560 FP-BU1200 10 ml(20-100 tests/ml) FP-BU1201 30 ml

FP-BU1202 100 mlPhosphoWorks™ Luminometric ATP Assay Kit, Bright Glow - / 560 21610 1 plaquePhosphoWorks™ Luminometric ATP Assay Kit, DTT-Free - / 560 21612 1 plaque

21613 10 plaques

Quantification de dilutions en série de facteur 10 de cellules Jurkat en suspension avec l'ATP-Glo™ Bioluminetric Cell Viability Assay.

10000

1000

100

10

1

1 10 100 1000 10000

Nombre de cellules

Lum

ines

cenc

e




Comptage de cellules, viabilité et prolifération I Prolifération

Cycle cellulaire

CytoTell™ GreenPour analyser les populations cellulaires hétérogènes, le CFDA-SE est l'indicateur de la prolifération cellulaire préférée. Il est largement utilisé pour l'analyse en temps réel de la cellule. Cependant, il existe quelques problèmes graves associés à l'utilisation de CFDA-SE pour la prolifération des cellules : 1). Le CFDA-SE est toxique pour les cellules, car il affecte de nombreuses fonctions des protéines en se fixant dessus ; 2). Le CFDA-SE a une réponse lente et s'avère peu pratique à utiliser. L'intensité de fluorescence des cellules marquées CFDA-SE en deuxième génération est diminuée de plus de 10 fois par rapport à la première génération. Il faut à attendre une autre génération pour commencer l'analyse de la proliféra-tion cellulaire; 3). L'élimination du milieu est nécessaire. Les milieux pour l'analyse cellulaire contiennent des composants sur les quels le CFDA-SE va réagir.

Le CytoTell™ Green a été développé pour éliminer les limitations du CFDA-SE. Il peut être utilisé pour le suivi à long terme des cellules marquées. L'analyse peut débuter dès les cel-lules non divisées et la première génération. Les cellules marquées avec CytoTell™ peuvent être fixées et perméabilisées pour l'analyse de cibles intracellulaires à l'aide de fixateurs contenant du formaldéhyde et des tampons standards de perméabilisation à base de sapo-nine.

ViaFluor™Cell Proliferation KitLes colorants ViaFluor™ diffusent passivement dans les cellules et marquent de manière co-valente les protéines intracellulaires. Les cellules sont ainsi marquées sur le long terme. Les fluorochromes ne sont excitables qu'après leur hydrolyse par les estérases intracellulaires. Les colorants réagissent ensuite avec les amines intracellulaires formant des conjugués fluorescents qui sont conservés dans la cellule. Immédiatement après coloration, une seule population fluorescente sera détectée par cytométrie de flux. A chaque division cellulaire, les cellules filles héritent environ de la moitié du marqueur fluorescent, ce qui permet de déter-miner le nombre de divisions cellulaires qui se produisent après marquage. La coloration peut être fixée par le formaldéhyde. Les kits de dosage de prolifération cellulaire contiennent dix flacons à usage unique de colorants, du DMSO anhydre pour préparer les solutions de colorant, et un protocole de marquage détaillé.

Cell Clock™ AssayLe Cell Clock™ Assay est un système de mesure en temps réel des quatre phases prin-cipales du cycle cellulaire des cellules en culture in vitro. Le test utilise un colorant redox perméable à la membrane.Après incubation, un changement de couleur se produit dans les cellules, avec une couleur distincte dans les cellules en phases G0-G1, S, G2 et M.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéCytoTell™ Blue 22251 500 testsCytoTell™ Green 22253 500 testsCytoTell™ Orange 22257 500 testsCytoTell™ Red 22255 500 testsViaFluor™405-SE Cell Proliferation Kit 408 / 452 30068 1 kitViaFluor™ CFSE Cell Proliferation Kit 495 / 519 30050 1 kitViaFluor™ 568 Cell Proliferation Kit 570 / 606 30080 1 kitCFDA-SE (CFSE) 495 / 519 FP-52493A 25 mgBacStain, CFDA solution 495 / 519 BS03-10 100 testsCell Clock™ Assay C1000 100 tests

C2000 400 tests

Suivi de la prolifération cellulaire de cellules Jurkat avec le CytoTell Green et le CFDA-SE pendant 9 jours.

Le ViaFluor 568™ a été utilisé pour suivre la division cellulaire au cours du temps. Les pics apparaissent de droite à gauche avec un rouge atténué à chaque génération.

Analyse d'images de cellules CHO marquées avec le Cell Clock™ Assay (phases : GO/G1 en jaune, S en vert, et G2 et M en noir).

G.55

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIREComptage de cellules, viabilité et prolifération I Prolifération

Prolifération cellulaire par dosage de la synthèse d'ADNFluoProbes® EdU, dosage de la prolifération cellulaire par "click chemistry"

● Quantification de l'ADN nouvellement synthétisé● Protocole simple : Evite la dénaturation de l'ADN ● Détection par petite molécule : excellente diffusion in vivo

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéEdU (5-ethynyl-2'-deoxyuridine) FP-MM982A 10 mg

FP-MM9829 25 mgFP-MM982B 100 mg

FluoProbes® 488 azide 493 / 517 FP-YE4970 1 mgFluoProbes® 532A azide 532 / 553 FP-YE4980 1 mgFluoProbes® 547H azide 550 / 575 FP-1H0970 1 mgFluoProbes® 550A azide 554 / 576 FP-FI2090 1 mgFluoProbes® 565A azide 563 / 592 FP-YE4990 1 mgFluoProbes® 590A azide 594 / 624 FP-YE5000 1 mgFluoProbes® 633A azide 629 / 657 FP-YE5010 1 mgFluoProbes® 647N azide 644 / 669 FP-YE5020 1 mgFluoProbes® 647H azide 653 / 675 FP-1H0960 1 mgFluoProbes® 655A azide 663 / 684 FP-YE5030 1 mgFluoProbes® 680A azide 680 / 700 FP-GV3640 1 mgFluoProbes® 700A azide 700 / 719 FP-GV3650 1 mgFluoProbes® 725A azide 725 / 752 FP-LO5630 1 mgFluoProbes® 740A azide 740 / 764 FP-LO5620 1 mgFluoProbes® 749H azide 759 / 780 FP-1K2840 1 mgFluoProbes® 800 azide 777 / 791 FP-JV1870 1 mgFluoProbes® 782 azide 783 / 800 FP-1K3340 1 mgFluoProbes® 831 azide 844 / IR FP-JV1940 1 mgCYanine3 azide 555 / 570 FP-HO7250 1 mgCYanine3 azide, 10 mM in DMSO 555 / 570 FP-EV0900 100 µlDi-Sulfo-CYanine3 azide 548 / 567 FP-1C4660 1 mgCYanine3.5 azide 591 / 604 FP-CY3AZ0 1 mgCYanine3.5 azide, 10 mM in DMSO 591 / 604 FP-FZ8760 100 µlCYanine5 azide 646 / 662 FP-CY5AZ0 1 mgCYanine5 azide, 10 mM in DMSO 646 / 662 FP-EV0910 100 µlDi-Sulfo-CYanine5 azide 646 / 664 FP-1C4670 1 mgCYanine5.5 azide 674 / 707 FP-GO7260 1 mgCYanine5.5 azide, 10 mM in DMSO 674 / 707 FP-FZ8770 100 µlTetra-Sulfo-CYanine5.5 azide 678 / 701 FP-LQV310 1 mgCYanine7 azide 750 / 773 FP-1A6270 1 mgCYanine7 azide, 10 mM in DMSO 750 / 773 FP-1A6260 100 µlDi-Sulfo-CYanine7 azide 749 / 776 FP-1H8710 1 mgCYanine7.5 azide 750 / 773 FP-1A6310 1 mgCYanine7.5 azide, 10 mM in DMSO 750 / 773 FP-1A6300 100 µlAMCA azide 353 / 455 FP-GDA480 1 mg7-hydroxycoumarin azide 404 / 447 FP-IOK790 1 mgCoumarin 343 azide 455 / 463 FP-BLUAZ0 1 mgFAM azide, 5(6)-isomers 496 / 516 FP-DQP151 1 mgFAM azide, 5-isomer 496 / 516 FP-EV0920 1 mgFAM azide, 6-isomer 495 / 520 FP-IOI490 5 mgFAM-PEG3-azide (protected), 6-isomer 495 / 520 FP-DQO511 1 mgFAM-PEG3-azide (unprotected), 6-isomer 495 / 520 FP-DQO471 1 mg6-Carboxy-fluorescein PEG azide 495 / 520 FP-FJ0011 25 mgTET azide, 5-isomer 521 / 536 FP-IOJ060 5 mgTET azide, 6-isomer 522 / 532 FP-IOJ620 5 mg




Comptage de cellules, viabilité et prolifération I Prolifération

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéTET-PEG3 azide 521 / 536 FP-DQO481 1 mgJOE azide, 6-isomer 520 / 548 FP-SNX440 5 mgHEX azide, 5-isomer 535 / 556 FP-IOJ050 5 mgHEX azide, 6-isomer 536 / 557 FP-IOJ610 5 mgHEX-PEG3 azide 535 / 556 FP-DQO491 1 mgSIMA azide, 5-isomer 535 / 557 FP-IOI180 5 mgSIMA azide, 6-isomer 534 / 558 FP-IOI500 5 mgTAMRA azide, 5-isomer 544 / 576 FP-DQP12A 1 mgTAMRA azide, 5-isomer, 10 mM in DMSO 544 / 576 FP-EV0880 100 µlSulfoRhodamine B azide, 5-isomer 568 / 584 FP-IOK950 1 mgROX azide, 5(6)-isomers 576 / 601 FP-1B2390 1 mgROX azide, 5-isomer 576 / 601 FP-SJI030 25 mgROX azide, 5-isomer, 10 mM in DMSO 576 / 601 FP-EV0950 100 µlFluoProbes FL azide, Neutral probe 503 / 510 FP-SJH850 1 mg

EdU-Click™Cell Proliferation Assay KitsLa détection de la prolifération cellulaire est d'une importance capitale pour suivre la vitalité de la cellule, la détermination ou l'évaluation de la génotoxicité des médicaments anticancéreux. Les essais de prolifération cellulaire, avec l'EdU (5-éthynyl-2'-désoxy-uridine),fournissent une alternative supérieure aux dosages au BrdU (5-bromo-2'-désoxy-uridine). Les analyses Edu-Click™ évite les anticorps, et donc ne nécessitent pas la dénaturation de l'ADN pour la détection du nucléoside incorporé. De plus l' Edu-Click™ utilise la chimie click pour la détec-tion avec un large choix de colorants fluorescents. Le protocole de détection simplifié réduit le nombre total d'étapes et diminue significativement le temps nécessaire à l'expérience.

● Très fiable et facile à réaliser grâce à la chimie click● Procédé de détection rapide (seulement 30 min.)● Compatible avec le multiplexage● Des conditions douces, sans dénaturation de l'ADN

BrdU Cell Proliferation Assay KitCe kit est basé sur l'incorporation de BrdU dans les cellules cultivées en plaques de culture. Au cours des dernières 2 à 24 heures de culture, le BrdU est ajouté. Le BrdU est incorporé dans l'ADN des cellules en division. Il est ensuite détecté par un anticorps, qui implique de fixer, perméabiliser et dénaturer l'ADN. Tout cela se fait en une seule étape par un traitement avec la solution de fixation. La HRP catalyse la conversion du substrat chromogénique tétra-methylbenzidine (TMB) d'une solution incolore en solution bleu (ou jaune après l'ajout du réactif d'arrêt), dont l'intensité est proportionnelle à la quantité de BrdU incorporée dans les cellules. Le produit de réaction coloré est quantifié en utilisant un spectrophotomètre.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéEdU-Click™ 488 496 / 516 BCK-EdU488-1 100 testsEdU-Click™ 555 546 / 579 BCK-EdU555-1 100 testsEdU-Click™ 594 584 / 603 BCK-EdU594-1 100 testsEdU-Click™ 647 646 / 662 BCK-EdU647-1 100 testsBrdU FP-18538A 100 mgBrdUTP, 10 mM in TE buffer FP-T8199A 25 µl

FP-T8199B 100 µlanti-BrdU, monoclonal Mouse IgG1, clone MoBu-1 AZD840 100 µgBrdU Cell Proliferation Assay Kit 450, 550 / - ORB109970 200 testsChemiluminescent BrdU Cell Proliferation Assay Kit ORB109974 200 tests

FluoProbes EdU, dosage de la prolifération cellulaire par "click che-mistry" (suite)

Méristème d'Orge marqué avec l'EdU-Click™ 555.

G.57

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIREComptage de cellules, viabilité et prolifération I Cytotoxicité

Cytotoxicité cellulaireaCella™-TOX : Bioluminescence Non Radioactive Cytotoxicity Assay (GAPDH)

● Polyvalent - utile pour mesurer l'activité des cellules T, des cellules primaires, NK,complé-ment et autres agents lytiques. Le test peut être réalisé dans un milieu complété en sérum.● Homogène - en une seule étape, aucun lavage. ● Rapide – résultats en 3-5 minutes● Non destructif – permet d'analyser d'autres paramètres

Le kit aCella™-TOX mesure la libération de glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) dans les cellules mammifères et bactériennes. La méthode Acella™-TOX a été validée avec de nombreux modes de cytolyse, dont la cytotoxicité cellulaire (cellules T) dé-pendante du complément, des agents porogènes, la lyse par antibiotique des bactéries, et lyse mécanique ou par un détergent. La méthode est très générale, étant donné que toutes les cellules connues expriment de grandes quantités de GAPDH, et, contrairement à d'autres enzymes, le GAPDH est très facilement libéré du cytoplasme lors de la lyse cellulaire. Grâce aux formulations spécialement adaptées, la sensibilité de la méthode peut être amenée au niveau d'une cellule eucaryote, ce qui est impossible avec une autre méthode en phase liquide.

Cell Meter™ Colorimetric Cell Cytotoxicity Assay Kit

● Facilement adaptable à l'automatisation sans mélanger ou de séparation.● Mesure par absorbance en plaques 96 ou 384 puits ● Sensible et précis: à partir de 300 cellules.

Ce kit ne nécessite pas de pré-mélange des composants et a une sensibilité plus élevée par rapport aux dosages à base de tétrazolium (tels que MTT et XTT). Les composants du kit sont très stables et à la faible cytotoxicité, donc l'incubation de 1h peut être prolongée de 24 à 48h. La cytotoxicité est proportionnelle au ratio DO570/DO605.

Cell Meter™ Fluorimetric Cell Cytotoxicity Assay Kit Ce kit fournit un test rapide, simple, précis et homogène pour la détection par fluorescence des cellules viables. Ce dosage est basé sur la résazurine oxydée bleu non fluorescente, qui est réduite à un colorant fluorescent rouge (résorufine) en acceptant un électron de la chaîne respiratoire mitochondriale dans les cellules vivantes. La quantité de résorufine produite est directement proportionnelle au nombre de cellules vivantes.

Cytotoxicity LDH Assay Kit

● Système de dosage colorimétrique basé sur le WST● Solution de travail stable 2 mois après reconstitution

Le Cytotoxicity LDH Assay Kit détermine la cytotoxicité en mesurant l'activité lactate dés-hydrogénase (LDH) libérée des cellules endommagées. La LDH libérée selon le schéma suivant. La LDH catalyse la déshydrogénation du lactate en pyruvate qui réduit le NAD en NADH. Le NADH réduit le sel de tétrazolium soluble dans l'eau (WST) en présence d'un médiateur d'électrons pour produire un colorant formazan orange. La quantité du colorant formazan ainsi formée est proportionnelle à celle du LDH libérée dans le milieu.La cytotoxicité peut être mesurée avec les cellules vivantes (dosage homogène). En outre, un dosage non homogène, qui est effectué en utilisant le surnageant de culture de cellules, est également possible. Contrairement aux produits concurrents, la solution de travail re-constituée est stable plusieurs mois.

Les valeurs de Log(EC50) sont -2,612 pour l'aCella™-TOX et -2,77 pour 51Cr.

Comparaison directe du 51Cr et de l'aCella™-TOX sur un même donneur avec des cellules Daudi.

0.0001 0.001 0.01 0.1 1 10log Rituxan µg/mL

%AD

CC +

/-SD

-50

0

50

100aCella-TOX51Cr

La solution de travail est stable 2 mois.

Kit Dojindo

Concurrent P

Concurrent R

Condition de stockage (+4°C)

1 semaine

Non stockable

2 mois

Mesure des doses de D-LDH avec l'Amplite Fluori-metric D-LDH Assay Kit.

10000

1000

100

1 10 100

RFU

(Ex/E

m =

540/5

90 nm

)

Dose de D-Lactate Deshydrogénase (mU/ml)




Comptage de cellules, viabilité et prolifération I Cytotoxicité

Amplite™ Lactate Dehydrogenase Assay Kit (LDH assay)Les LDH Assay Kits offrent deux méthodes, par fluorescence ou par absorbance, pour détec-ter soit la L-lactate déshydrogénase (L-LDH) ou la D-lactate déshydrogénase (D-LDH). Les dosages sont robustes, et peuvent être facilement adaptés pour une grande variété d'appli-cations qui nécessitent la mesure de la L-LDH / D-LDH.Les Amplite™ Lactate Dehydrogenase Assay Kits 13809 et 13813 Kits fournissent une méthode basée sur l'absorption pour la détection de lactate déshydrogénases dans des échantillons biologiques tels que le sérum, le plasma, l'urine, ainsi que dans des échantillons de culture cellulaire. Dans le dosage enzymatique couplé, la LDH est proportionnellement liée à la concentration de NADH qui est spécifiquement suivie par une sonde du NADH chromogène. Les dosages sont spécifiques pour la LDH. Le signal d'absorption peut être lu en utilisant un lecteur de microplaque à ~ 575 nm. La sensibilité est de 3 mU/ml de lactate déshydrogénase dans un volume réactionnel de 100 µl.Les Amplite™ Lactate Dehydrogenase Assay Kits 13808 et 13812 sont basés sur la détection de la lactate déshydrogénase par fluorescence. Dans ces dosages enzymatiques couplées, la LDH est proportionnellement liée à la concentration de NADH, qui est spécifiquement suivie par une sonde fluorescente du NADH. Les dosages sont spécifiques pour la LDH. Le signal de fluorescence peut être lu en utilisant un lecteur de microplaques à fluorescence avec λex/em = 540 / 590 nm. La sensibilité est de 1 mU/ml de lactate déshydrogénase dans un volume réactionnel de 100 µl.

RubyGlow™ Luminescent Cytotoxicity Assay KitContrairement à d'autres dosages par luminescence émettant une lumière verte, ce kit de dosage luminescent produit une lumière rouge (619 nm) pour la mesure de la cytotoxicité en fonction de la production d'ATP dans les cellules métaboliquement actives. Cette longueur d'onde rend le kit compatible avec d'autres mesures simultanées sur les mêmes échantillons.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéaCella™-TOX, Bioluminescence Cytotoxicity Assay - / 562 CLATOX100-3 500 tests(GAPDH) CLATOX100-4 1000 testsCell Meter™ Colorimetric Cell Cytotoxicity Assay Kit 570, 605 / - 22780 5-10 plaques

22780-B 25-50 plaquesCell Meter™ Fluorimetric Cell Cytotoxicity Assay Kit 571 / 585 22781 1 000 testsCytotoxicity LDH Assay Kit 490 / - CK12-01 100 testsAmplite™ Colorimetric D-Lactate Dehydrogenase Assay Kit 575 / - 13809 200 testsAmplite™ Colorimetric L-Lactate Dehydrogenase Assay Kit 575 / - 13813 200 testsAmplite™ Fluorimetric D-Lactate Dehydrogenase Assay Kit 540 / 590 13808 200 testsAmplite™ Fluorimetric L-Lactate Dehydrogenase Assay Kit 540 / 590 13812 200 testsRubyGlow™ Luminescent Cytotoxicity Assay Kit - / 619 M1576 100 tests

Mesure de la cytotoxicité : Des tests de cytotoxicité sont largement utilisés pour cribler la cytotoxicité dans des banques de composés. L'évaluation de l'intégrité de la membrane cellulaire est l'une des façons les plus courantes pour mesurer la viabilité cellulaire et les effets cytotoxiques. Le colorants peuvent être soit libérés des cellules (LDH), soit disponibles pour un marquage cellulaire en passant à travers une membrane celluaire dégradée (bleu trypan, colorants de noyaux). La cytotoxicité peut également être contrôlée en utilisant un indicateur redox. Les cellules viables réduisent les réactifs (MTS, résazurine) en un produit coloré. En plus d'utiliser des colorants pour indiquer le potentiel redox des cellules afin de surveiller leur viabilité, les chercheurs ont mis au point des dosages qui utilisent la teneur en ATP en tant que marqueur de viabilité. Plusieurs approches sont décrites dans d'autres sections du catalogue : viabilité cellulaire, étude de l'intégrité membranaire, colorants de noyaux, mesure d'activité enzyma-tique.

G.59

ANALYSE DE BIOLOGIE CELLULAIREComptage de cellules, viabilité et prolifération I Viabilité bactérienne

Mesure de la viabilité bactérienneLes kits de dosage de la viabilité bactérienne sont décrits dans la section Biologie Cellulaire | Comptage de cellules, viabilité et prolifération | Mesure de viabilité par fluorimétrie. Les kits de dosage par qPCR avec possibilité de cibler le type de bactérie sont décrits dans la section Génomique | Amplification PCR | PMA Real Time PCR kits.

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéViability/Cytotoxicity Assay Kit for Bacteria Live & Dead Cells 503, 530 / 530, 620 BU1040 1 000 testsBacterial Viability and Gram Stain Kit 358, 490, 530 32001 200 tests

/ 461, 515, 620CF™594 WGA 593 / 614 29023-1 1 mgPMA™ dye, 20 mM in H2O 40019 100 uLPMAxx™ dye, 20 mM in H2O 40069 100 uLPMA-Lite™ LED Photolysis Device E90002 1 unitéPMA™ Real-Time PCR Bacterial Viability Kit - Salmonella enterica (invA) 31033 200 testsPMA™ Real-Time PCR Bacterial Viability Kit - Mycobacterium tuberculosis (groEL2)

31034 200 tests

PMA™ Real-Time PCR Bacterial Viability Kit - Staphylococcus aureus (nuc) 31035 200 testsPMA™ Real-Time PCR Bacterial Viability Kit - Staphylococcus aureus (mecA) 31036 200 testsPMA™ Real-Time PCR Bacterial Viability Kit - E. coli O157:H7 (ORF Z3276) 31037 200 testsPMA™ Real-Time PCR Bacterial Viability Kit - E. coli (uidA) 31050 200 testsPMA™ Real-Time PCR Bacterial Viability Kit - Listeria monocytogenes (hly) 31051 200 testsPMA™ Enhancer for Gram Negative Bacteria, 5X Solution 31038 16 ml

WWW.INTERCHIM.COM > LIFE SIENCES > Cell Biology > Cells Assays > Toxicology, Toxicity Assays



Apoptose I Changements cytoplasmiques


Activités des Caspases

NucView™ Caspase Subtrates

● Double fonctions : détection de l'activité caspase-3/7 et visualisation de la morphologie nucléaire apoptotique● N'interfère pas avec l'activité de la caspase, permettant un suivi de la caspase en temps réel● Coloration rapide en milieu de culture cellulaire sans lavage● Tolérant à la fixation au formaldéhyde et à la perméabilisation● Détectable par microscopie à fluorescence, cytométrie en flux, ou lecteur de micro-plaques● Pour une utilisation avec des cellules adhérentes ou en suspension

Le subtrat de caspase NucView™ fournit un outil pratique pour la détection de l'apoptose dans des cellules intactes en microscopie confocale ou en cytométrie de flux.Contrairement à d'autres substrats fluorescents de la caspase ou inhibiteur de caspase (fluo-rescent), les substrats NucView™ peuvent être utilisés pour détecter l'activité caspase au sein des cellules intactes sans inhiber la progression de l'apoptose. Les substrats NucView™ sont constitués d'un colorant fluorescent de l'ADN couplé à la séquence de reconnaissance d'une caspase. Le substrat, qui est initialement non-fluorescent, pénètre dans la membrane plasmique, puis dans le cytoplasme. Dans les cellules apoptotiques, la caspase clive le subs-trat, libérant le colorant de l'ADN, qui migre vers le noyau de la cellule et marque l'ADN. Ainsi, les substrats NucView™ sont bifonctionnels, ce qui permet la détection de l'activité de la caspase et la visualisation des changements morphologiques dans le noyau au cours de l'apoptose. La coloration est également fixable au formaldéhyde.

Les colorants NucView™ 405 et NucView™ 488 sont excités par un laser à 405 nm et 488 nm, respectivement. Le NucView™ 530 est détecté avec les filtres de la CYanine3. Ils peuvent être associés à d'autres fluorochromes, comme le marqueur de mitochondries, Mito-View, le marqueur de noyau, RedDot ou l'indicateur d'apoptose, Annexin V marquée. Des combinaisons d'un colorant NucView avec une deuxième sonde fluorescente sont proposées sous forme de kits.

La technologie NucView™ est protégée par les brevet US N° 8.092.784 et 8.586.325

Produit Ex / Em (nm) Réf. QtéNucView™ 405 Caspase-3/7 Substrate, 1 mM in DMSO 429 / 469 10405-T 10 µl

10405 100 µlNucView™ 488 Caspase-3 Enzyme Substrate, 1 mM in DMSO 500 / 530 10402 100 µlNucView™ 488 Caspase-3 Enzyme Substrate, 1 mM in PBS 500 / 530 10403 100 µlNucView™ 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells 500 / 530 30029-T 25 tests

30029 100 testsNucView™ 530 Caspase-3 Enzyme Substrate, 1 mM in DMSO 528 / 563 10406-T 10 µl

10406 100 µlNucView™ 488 and 500 / 530 30062 100 testsMitoView™ 633 Apoptosis Assay Kit 622 / 648NucView™ 488 and 500 / 530 30072 100 testsRedDot™ 2 Apoptosis/Necrosis Assay Kit 488-647 / 695Dual Apoptosis Assay with NucView™ 488 Caspase-3 Substrate and Sulforhodamine 101-Annexin V

500 / 530 594 /615

30030 50 tests

Dual Apoptosis Assay with NucView™ 488 Caspase-3 Substrate and CF™ 594 Annexin V

500 / 530 593 / 614

30067 50 tests

Dual Apoptosis Assay with NucView™ 488 Caspase-3 Substrate and CF640R Annexin V

500 / 530 642 / 662

30073 50 tests

Cellules HeLa colorées avec le NucView™ 405.

Produits Liés - INTERCHIM: Home · Pour les bactéries gram négatif, il est fortement recommandé...

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