POXVIRUSFamille: PoxviridaeGenre: OrthopoxvirusSous-famille: Chordopoxvirinae: infecte lhomme, animaux domestiques et sauvages;Sous-famille: Entomopoxvirinae: infecte diffrents insectes.

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Gnralits des Poxviridae8 genres ( tab. 1).Taille: 300-350 x 200-270 nmGnome: ADN 2 brins, linaire.Rplication dans le cytoplasmeNuclocapside ou core: biconcave, entoure de 2 corps latraux, de fonction inconnue.2 enveloppes:Externe, couverte de tubulesInterne, entourant la capsideInfection: gnralement cytolytique, rarement transformante (yatapoxvirus).

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Morphologie des virusLe virion a la forme dune petite brique ou dune petite savonnette de 300-350 x 200-270 nm (fig. 3).En microscopie lectronique (ME), par coloration ngative, la surface apparat couverte dun rseau entrecrois de tubules, mieux dfinis pour les Parapoxvirus et les Molluscipoxvirus (fig.1) que pour les Orthopoxvirus (fig.2). *

Structure antigniqueLe gnome: ADN linaire, bicatnaire, termin aux 2 extrmits par des boucles en pingles cheveux, elles-mmes prcdes de squences rptes inverses ou ITR (fig.4).Le gnome des principaux poxvirus (variole majeure, alastrim, vaccine, ectromlie, fowlpox) comporte environ 200 gnes. Les gnes essentiels la rplication sont localiss dans la partie centrale du gnome, tandis que les gnes non essentiels la rplication se trouvent aux extrmits.

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Ces derniers correspondent des gnes codant des protines homologues de cytokines (virokines) ou de rcepteurs de cytokines, dinterfrons, dinterleukines, de chimiokines et de facteurs de croissance .Ces gnes sont probablement dorigine cellulaire et ils auraient t capturs par les poxvirus au cours de leur longue co-volution avec leurs htes naturels.*

Au moins 10 enzymes sont prsentes dans le virion; elles interviennent dans la synthse et la rplication de lADN.La structure antignique des poxvirus est trs complexe. Les virus dun mme genre sont apparents gntiquement et antigniquement, ce qui permet de vacciner contre une maladie au moyen dun virus antigniquement proche (ex. variole/vaccine).*

Multiplication des virusAnimaux sensibles: la membrane chorio-allantodienne (MCA) de loeuf de poule embryonn ag de 12 jours est trs sensible linoculation des Orthopoxvirus.Ils y provoquent lapparition de vsicules (ou pox) de taille, daspect et de couleur variables.Les vsicules induites par le virus varioliques sont petites, blanchtres, opaques, bombes, visibles ds le 3 jour, alors que celles du virus vaccinal sont trs larges, blanches, opaques, et celles du monkey-pox, hmorragiques. *

Les cellules infectes contiennent des inclusions intra-cytoplasmiques, les corps de Guarnieri.De plus, la formation des vsicules sur la MCA est limite par la temprature dincubation des oeufs: 40.5o C (virus vaccinal), 39o C (virus du monkeypox), 38.5o C (virus de lalastrim).Le virus vaccinal, inocul par scarification sur la corne du lapin (test de Paul), provoque une kratite purulente en quelques jours, alors que le virus de la variole en est incapable.*

Dune manire gnrale, le virus variolique est moins virulent pour les animaux de laboratoire (example: souriceau nouveau-n, singes) que le virus vaccinal.La mthode classique qui tait utilise pour rcolter le vaccin antivariolique, consistait racler les vsicules purulentes provoques par le virus vaccinal sur le flanc dune gnisse. *

Cultures cellulaires: les Orthopoxvirus peuvent tre cultivs dans une grande varit de cellules: cellules primaires de rein humain, de rein de singe, fibroblastes embryonnaires de poulet et cellules de ligne HeLa, KB, Vero, MRC-5, etc. LECP se traduit par des foyers de ncrose plus ou moins extensifs, apparaissant plus tardivement pour le virus variolique (jusqu 5-6 jours) que pour le virus vaccinal (3 jours).

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En fibroblastes diplodes humains MRC-5, le virus vaccinal induit des foyers dissmins de ncrose cellulaire, sans caractre spcifique.Si lon ajoute des globules rouges de poulet, on met en vidence un phnomne dhmadsorption (HAD) fig.5.Lhmagglutinine responsable a la particularit dtre libre, indpendante du virion.Cycle rplicatif: voyons le cycle rplicatif du virus vaccinal (fig.6).

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*Figure 6. Cycle rplicatif du virus de la vaccine.

Cycle rplicatif du virus de la vaccineLe virion, qui contient lADN gnomique, des enzymes et des facteurs de transcription, sattache (1) aux cellules. Il fusionne avec la membrane pricellulaire, librant le core dans le cytoplasme (2). A lintrieur du core, sur lADN gnomique sont transcrits des ARNm prcoces traduits en une grande varit de protines : des facteurs de croissance, des protines des dfenses immunitaires, des enzymes, ainsi que des facteurs ncessaires la rplication de lADN et la transcription intermdiaire (3).

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La dcapsidation survient (4) et lADN est rpliqu pour former des molcules intermdiaires de PM lev (5).Les gnes intermdiaires des ADN rpliqus sont transcrits en ARNm, eux-mme traduits pour constituer des facteurs de transcription tardifs (6).Les gnes tardifs sont transcrits en ARNm, eux-mme traduits en protines structurales du virion, en enzymes, et en facteurs tardifs de transcription (7).*

Lassemblage commence avec la formation de structures membranaires lches (8).Les intermdiaires de lADN sont rduits en unit gnomiques et celles-ci empaquetes dans des virions immatures (9), lesquels subissent ensuite une maturation (10).Les virions matures sont envelopps par des membranes modifies de lappareil de Golgi, puis transports la priphrie de la cellule(11).La fusion des virions envelopps avec la membrane pricellulaire provoque la libration des virions dans le milieu extracellulaire (12).la rplication virale se droule entirement dans le cytoplasme*

Pouvoir pathogne chez lhomme

Citer les infections provoques par les poxviridae: la variole, la vaccine, monkeypox, cowpox, nodule du trayeur et orf, infections Tanapoxvirus.LA VARIOLE Priode dincubation: 6 -16 jours;Le dbut est brutal, avec les symptmes: Temprature leve,Malaise gnral, Des cphales et des lombalgies.Puis un exanthme apparat entre le 2 et 4 jour, et volue en 7 10 jours:Les macules initiales donnent des papules, puis des vsicules et des pustules (fig.7).Celles-ci se transforment enfin en crotes qui tombent en 2 3 semaines, laissant des cicatrices indlbiles.

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Les lsions suivent le mme stade volutif et dbutent par la face, la paume des mains et la plante des pieds, puis stendent de faon centrifuge. *

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Il existe plusieurs formes cliniques, dont les formes fulminante et hmorragique, sont plus graves. La surinfection bactrienne des lsions cutanes est habituelle et latteinte de la corne est frquemment suivie de ccit.Les malades qui survivent sont souvent dfigurs vie par des cicatrices disgracieuses.*

Il existe 2 formes pidmiologiques de la variole. La variole majeure est mortelle par oedme aigu du poumon.Dans la variole mineure ou alastrim, la mortalit ne dpasse pas 1%. Ces 2 aspects relvent cependant des mmes mesures de prophylaxie.Le malade reste contagieux depuis le 1er jour de lruption jusqu la chute de la dernire crote.*

Diagnostic de laboratoireIndications: elles sont diffrentes suivant quil sagit des infections Orthopoxvirus, ou daffections mineures, purement dermatologiques.Techniques:Infections Orthopoxvirus: les prlvements sont essentiellement cutans. Au stade vsiculeux ou pustuleux, le liquide pathologique servira prparer des frottis pour immuno-fluorescence (IF) ou des grilles pour la microscopie lectronique.

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Au stade des crotes, celles-ci seront dtaches la pince strile. Les ulcrations seront couvillonnes.On peut isoler le virus variolique dun culot urinaire, de la salive ou des larmes.Si lon souponne une variole, les prlvements devront imprativement faire lobjet dun double emballage, soigneusement tiquet et renseign, avant son envoi un laboratoire. Le prlvement na pas besoin de rfrigrateur.La PCR en temps rel (RT-PCR) est utilise pour confirmer la variole.Le diagnostic molculaire permettra lidentification du poxvirus en cause.

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Problmes dermatologiques mineurs: les virus du nodule du trayeur et de lorf ncssitent pour leur isolement des cellules cultives dorigine bovine. LECP y apparat entre le 6 et le 12 jour. On utilise la microscopie lectronique pour faire lidentification. Le virus du molluscum contagiosum est trs difficile isoler en cultures cellulaires et il ny a pas danimal de laboratoire sensible. On utilise la microscopie lectronique ou la PCR pour faire le diagnostic biologique.

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Traitement curatifOn utilise les antiviraux contre les Orthopoxvirus, en particulier des composs du plomb et des inhibiteurs des mthyltransfrases virales, les nuclosides carbocycliques.Le cidofovir ou Vistide, inhibe in vitro la multiplication du virus variolique. Mais le maniement nest pas ais et il est nphrotoxique. Il doit tre prpar avant usage et administr en perfusion vitesse constante, pendant une heure.Il nest pas utilisable en prophylaxie de masse.*

La ribavirine (Virazole) par voie orale et active in vitro (pour souris/cowpoxvirus), prsente les mmes inconvnients.Cependant, le cidofovir en gel dermique 1% ou 3% a t utilis dans le traitement du molluscum contagiosum habituel. La voie i.v. doit tre utilise chez des malades atteints du SIDA ou dautres formes dimmunodpression svre. *

Prventiondpistage rapide et isolement des malades, revaccination autour (et dans) les nouveaux foyers.LOMS, Organisation Mondiale de la Sant, encourage la prparation de nouveaux types de vaccins vivant produit en cultures cellulaires et administr au moyen dune aiguille bifurque. Les poxvirus constituent un matriel de choix pour construire des vecteurs exprimant des protines dintrt mdical, notamment des vaccins.*