Origine des repas de sang des anophèles : techniques, intérêts et limites

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ORIGINE REPAS DE SANG- TECHNIQUES,INTERETS et LIMITES RAHASIVELO T. Zanah Médecin responsable site sentinelle de surveillance de fièvre Maevatanana 8 e EDITION ATELIER PALUDISME Mots clés : repas de sang _ anophèles_ détection 1

Transcript of Origine des repas de sang des anophèles : techniques, intérêts et limites

ORIGINE REPAS DE SANG-TECHNIQUES,INTERETS et LIMITES

RAHASIVELO T. ZanahMédecin responsable site sentinelle de surveillance de

fièvre Maevatanana

8e EDITION ATELIER PALUDISME Mots clés : repas de sang _ anophèles_ détection 1

PLAN

• INTRODUCTION:• Définition: anthropophile et zoophile• Les maladies humain à transmission vectorielle• Intérêts de connaitre l’origine de repas sanguin • Indice anthropophile (HBI)• LES TECHNIQUES D’IDENTIFICATION : INTERET ET LIMITE• CONCLUSION:• Méthode la plus utilisée• Sa place dans la lutte anti-vectorielle

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IntroductionLa préférence alimentaire des anophèles: importance sur

épidémiologie et transmission paludisme

Anthropophile=vecteur +repas de sang sur l’hommeZoophilie=vecteur +repas de sang sur les animaux

Les vecteurs majeurs des paludismes humains : repas homme mais animal (disponibilité des hôtes)(An. Gambiae,An. Funestus, etc…)

Evaluation des préférences trophiques et des taux d’ antropophilie des vecteurs est nécessaire

I Dia,al ,bull soc pathol exotic. 2001 ; impact malaria methode enthomologie 2009 3

Pourquoi préférence alimentaire?

ponte ovulaire des vecteurs.

Intérêt de connaitre origine repas de sang:

• Préférence trophique

WHO ,aide-mémoire 207,thème de santé 2010; ;;;

Etudes épidémiologiques

M Alcaide ,al PLoS One. 2009 Sep 21; 4 (9): e7092

• Indice a =nombre de personne piquées par un anophèle en un jour

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• Taux d’ anthropophilie

L’indice d’ anthropophile (Human Blood index HBI)

• La proportion des moustiques ayant pris de repas sanguin sur l’homme par rapport au spécimen testé.

• Indicateur entomologique : suivi de l’efficacité de lutte• Anthropophile > zoophilie• Exemple d’ étude en Maroc:

Les femelles gorgées d’An. labranchiae: 0,033 (test antisérums du bœuf ,mouton, chien, homme)Etude à Madagascar:

An.gambiae=0,98

Pierre Carnevale , al ,Les anophèles 2009; FARAJ C., OUAHABI S., ADLAOUI E. ET AL. Parasite, 2008, 15, 605-610 . Bibliographie Anophele 2006

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« a »= nombre desujets humains piqués en 1jour par un anophèle femelle

• a=taux d’ anthropophile/durée du cycle gonotrophique

Taux d’ anthropophile

(nombre de repas pris sur l’homme/nombre de spécimen étudiée )*100

Pierre Carnevale et al, les anophèles 2009 6

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TECHNIQUE D’IDENTIFICATION DE REPAS DE SANG :INTERET ET LIMITE

TEST SEROLOGIQUE : ELISA REPAS DE SANG

BIOLOGIE MOLECULAIRE : PCR

Différentes méthodes :l'observation directe, la capture surappâts humains ou la caractérisation de la nature du sangpar sérologie

Tests sérologiques :

1. Tests de précipitation2. ELISA3. Agglutination du latex4. Tests en bandelettes

Identification du type d'immunoglobuline présent: l'IgG est l'antigène sanguin le plus commun.

IMPACT MALARIA : 2008:Méthodes d’entomologie médicale8

ELISA REPAS DE SANG(Enzyme Linked Immunosorbent Assay)

INTERETS LIMITES

ELISA est en train de devenir plus populaire

Utilisation : anti-immunoglobulines disponibles commercialement

Sensibilité plus élevée % précipitine

Utilisation facile: homme , vache, chèvre

Difficulté: oiseaux ,reptile

Impact malaria,2008 ,meth .anthomol.; Pierre C. et al les anophèles ,2009

loin la méthode la plus pratiquée

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ELISA REPAS DE SANG : Image montrant l’ensemble du kit utilisé pour une identification sérologique du repas sanguin des moustiques

L'abdomen de la femelle gorgée est

séché sur papier filtre et amené au laboratoire

La première étape de l’identification du repas sanguin est la collection des abdomens de moustiques gorgés, qui sont écrasés sur du papier filtre

Crédits : Liverpool School of Tropical Medicine Image CollectionLe test de précipitines (soit test en double diffusion de type Ouchterlony) est l'une des méthodes habituelles

IMPACT MALARIA : méthode enthomol ogique: OCTOBRE 2008

Image montrant une lame de double diffusion type Ouchterlony utilisée pour le test de précipitines

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Origin of blood-fed mosquitoes captured in MataralELISA repas de sang

HostCDC light

trap

OutsideHouses(human

landings)

Inside House

(humanlandings)

Residualfauna

Cave Drum-trap 1Drum-trap 2 TOTAL

Donkey (Horse) 0 2 (1) 0 1 27 (2) 1 5 (2) 36 (5)

Dog 1 4 (1) 4 (1) 0 10 (2) 1 2 (2) 22 (6)

Human 1 30 (2) 25 (8) 9 31 (3) 2 7 (3) 105 (16)

Goat (Sheep) 4 19 (4) 22 (7) 5 88 (13) 5 36 (3) 179 (27)

Pig 0 3 (1) 4 (1) 0 3 (1) 1 7 18 (3)

Chicken 0 0 (2) 0 0 0 0 1 1 (2)

Cow 1 1 (1) 3 (1) 0 5 (5) 0 2 12 (7)

Other (unidentified)

1 0 0 0 7 2 1 11

Total 8 59 (12) 58 (18) 15 171 (26) 12 61 (10) 384 (66)

HBI 45.1% 43.4% 60.0% 17.2% 16.7% 14.1% 26.8%

Number of single bloodmeals and mixed bloodmeals (in brackets) per host and collection method. The total number of bloodmeals per category should be calculated as number of single meals + number of mixed meals/2

Lardeux et al. Malaria Journal 200711

PCR ( Polymerase Chain Reaction)l'identification de l'ADN de l'hôte vertébré

INTERETS LIMITES

échantillons de différentes classes de vertébrés (mammifères, Aves, Reptilia et Amphibia) et les ectoparasites invertébrés (Arachnides et Insecta)

la résolution des repas de sang mélangé.(electropherogramme

outil universel ,haut débit de diagnostic

Rapidité : An.gambiae (recours ELISA repas de sang)

PCR-RFLP, sensible, rapide, simple et peu coûteuse

M Alcaide, al, PLoS One. 2009 Sep 21;4(9):e7092 Kim KS, al , J Med Entomol. 2009 Sep;46(5):1230-4

restriction fragment length polymorphism

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COMPARAISON

,Mem Inst Oswaldo Cruz. 2001 Gomes LA, al

( Aedes aegypti ou Ae. fluviatilis )Test de précipitation ont montré une meilleure spécificité et la précision et le test ELISA a montré une sensibilité plus

les préférences trophiques et comparative capacités vectorielles d'Anopheles gambiae, Anopheles arabiensis et Anopheles melas

ELISA repas de sang :.Au Sénégal :

Technique de PCR : Identification des espèces du complexe Anopheles gambiae

Fontenille D, al, ORSTOM, Dakar, Sénégal.2006

A Madagascar : ELISA Repas de sang

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CONCLUSION

La méthode la plus utilisée : la caractérisation de la nature du sang par sérologie : ELISA Repas de sang puis PCR

Evaluation des préférences trophiques et des taux d’ anthropophile des vecteurs.

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stratégies de contrôle des vecteurs

MERCI DE VOTRE ATTENTION

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REFERENCE BIBLIOGRAPHIQUE1.I. Dia (1, 2),bull soc Pathol exotic.2001,94,2bis,210-213 :Préférences

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• FARAJ C.,al. Parasite, 2008, 15, 605-610 risque de réémergence du paludisme au Maroc étude de la capacité vectorielle d’ anopheleslabranchia dans une zone rizicole au nord du pays

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