Microbiologie Travailler dans le labo de microbiologie.

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Microbiologie Travailler dans le labo de microbiologie

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Microbiologie

Travailler dans le labo de microbiologie

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Au début du labo

• Se laver les mains aussitôt que vous entrez dans le laboratoire– Aide à prévenir la

contamination des cultures avec des microorganismes de votre flore naturelle

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Avant de commencer – À la fin

• Faire la désinfection de votre espace de travail– Aide à prévenir la

contamination des cultures avec des microorganismes de votre environnement

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Avant de quitter le labo

• Se laver les mains avant de quittez le laboratoire– Aide à prévenir la

contamination de l’environnement

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Travailler avec des solutions

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Définitions

• Solution–Mélange de 2 substances ou plus dans une phase

unique

– Solution composée de deux composantes• Soluté

– Partie qui est dissoute ou diluée – Habituellement la plus petite quantité

• Solvant (ou Diluent)– Partie de la solution dans laquelle le soluté est dissout –

Habituellement le plus grand volume

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Concentrations

Concentration = Quantité de soluté

Quantité de solution (Pas solvant)

Quatre façons d’exprimer les concentrations:– Concentration Molaire (Molarité)

– Pourcentages

– Masse par volume

– Rapports

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Molarité

• No de Moles de soluté/Litre de solution

–Masse de soluté/PM de soluté = Moles de soluté

–Moles de soluté/vol en L de solution = Molarité

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Pourcentages

• Les concentrations en pourcentage peuvent être exprimé en tant que :– V/V – volume de soluté/100 ml de solution

– m/m – Masse de soluté/ 100g de solution

– m/V – Masse de soluté/100 ml de solution

• Tous représentent des fractions de 100

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Pourcentages (suite)

• %V/V– Ex. 4.1L soluté/55L solution =7.5%• Dois avoir les mêmes unités en haut et en bas!

• % m/V– Ex. 16g soluté/50ml solution =32%• Dois avoir des unités du même ordre de grandeur en

haut et en bas!

• % m/M– Ex. 1.7g soluté/35g solution =4.9%• Dois avoir les mêmes unités en haut et en bas!

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Masse par volume

• Une quantité de masse par un volume– Ex. 1kg/L

– Connaître la différence entre une quantité et une concentration!• Dans l’exemple ci-dessus 1 litre contient 1kg (une

quantité)– Quelle quantité retrouverait-on dans 100ml?

– Quel est le pourcentage (m/v) de cette solution?

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Les Rapports

• Façon d’exprimer la relation entre différents constituants

• Exprimé d’après le nombre de parties de chaque composante– Ex. 24 ml de chloroforme + 25 ml de phénol + 1

ml d’isoamylalcool• Donc 24 parties + 25 parties + 1 partie

• Rapport: 24:25:1

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Les Dilutions

Réduire une Concentration

Une Fraction

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Dilutions

• Dilution = produire des solutions plus faibles à partir de solutions plus fortes

• Exemple : Faire du jus d’orange à partir de concentré. Mélanger une cannette de jus d’orange concentré avec trois (3) cannettes d’eau

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Dilutions (suite)

• Les dilutions sont exprimées comme une fraction du nombre de parties du soluté sur le nombre total de parties de la solution (parties de soluté + parties de solvant)

• Dans l’exemple du jus d’orange, la dilution serait exprimée comme 1/4, pour une cannette de jus (1 partie) à un TOTAL de quatre parties de solution (1 partie de jus + 3 parties d’eau)

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Un autre exemple :

• Si vous diluez 1 ml de sérum avec 9 ml de saline, la dilution serait écrite 1/10 ou dite « un dans dix », car vous exprimez le volume de la solution étant diluée (1 ml de sérum) par le volume final TOTAL de la dilution (10 ml totaux).

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Un autre exemple :

• Une (1) partie d’acide concentré est diluée avec 100 parties d’eau. Le nombre de parties totale de solution est 101 parties (1 partie d’acide + 100 parties d’eau). La dilution est écrite comme 1/101 ou dite “un dans cent un ”.

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Dilutions (suite)

• Les dilutions sont toujours une fraction qui décrit la relation d’UNE partie de soluté sur un nombre total de parties de solution

• Donc le numérateur de la fraction doit être 1

• Si plus d’une partie de soluté est diluée, vous devrez transformer la fraction

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Exemple:

• Deux (2) parties d’un colorant sont diluées avec huit (8) parties de solvant– Le nombre de parties total de solution est 10

parties (2 parties de colorant + 8 parties de solvant)– La dilution est initialement exprimée comme 2/10– Pour transformer la fraction afin d’avoir un

numérateur de un, utilisez une équation de rapport et de proportion :

• La dilution est exprimée comme étant 1/5

=2

10

1

x=

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Problème

1. Deux parties de sang sont diluées avec cinq parties de saline– Quelle est la dilution?

2. 10 ml de saline sont ajoutés à 0,05 L d’eau– Quelle est la dilution?

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Dilutions en Série

• Dilutions faites à partir de dilutions

• Les dilutions sont multiplicatives

– Ex.

– A1: 1/10

– A2: 1/4

– A3: 0.5/1.5 = 1/3

– La dilution finale de la série = (A1 X A2 X A3) = 1/120

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Le Facteur de Dilution

• Représente l’inverse de la dilution• Exprimé comme le dénominateur de la fraction suivi

de “X”– EX. Une dilution de 1/10 représente un facteur de dilution

de 10X • Le facteur de dilution permet de déterminer la

concentration originale– Conc. finale X le facteur de dilution = conc. initiale

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Déterminer la fraction requise (La Dilution)

Ex. Vous avez une solution de 25 mg/ml et vous voulez obtenir une solution de 5mg/ml

La fraction est égale à 1/le facteur de dilution= 1/5 (la dilution)

Qu’est que j’aiQu’est que je veux

Déterminer le facteur de réduction (Le facteur de dilution) =

Donc le facteur de réduction est de: 25mg/ml5mg/ml = 5 (Facteur de dilution)

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Déterminer les quantités requises

• Ex. Vous désirez 55 ml d’une solution qui représente une dilution de 1/5– Utilisez une équation de rapport et de proportion:– 1/5 = x/55 = 11/55

• Donc 11 ml de soluté / (55 ml – 11 ml) de solvant

• = 11 ml de soluté / 44 ml de solvant

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Problème

• Préparer 25mL d’une solution de 2mM à partir d’un stock de 0.1M– Quel est le facteur de dilution requis?

– Quelle est la dilution requise?

– Quelles volumes de solvant et de soluté sont requis?