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Dr. Jacques PAOLETTI
La réplication chez les La réplication chez les eukaryoteseukaryotes
Les caractéristiques générales.
La réplication de l’ADN chez les eucaryotes est tout à fait comparable à laréplication de l’ADN chez les procaryotes.
Elle est généralement bidirectionnelle, elle est discontinue entre les deux brinsd’ADN.
Des amorces d’ARN sont nécessaires.Cette réplication est également complémentaire, antiparallèle
et dans le sens 5’à3’.
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La réplication chez les La réplication chez les eukaryoteseukaryotes
Caractéristiques particulières.
La replication se fait en de nombreux points d’initiationElle fait intervenir un nombre d’ADN polymérases plus important que chezles procaryotes.De nombreuses protéines interviennent comme facteurs de réplication. Enfin, la réplication de l’ADN des extrémités chromosomiques (ou télomères)commence à être connue de manière plus approfondie.
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Les ADN polymérases eucaryotesLes ADN polymérases eucaryotes
On connait au moins 5 ADN polymérases chez les eucaryotes.
- La polymérase alpha/primase. Cette polymérase est impliquée dans l'initiationde la réplication ("priming").
- La polymérase béta. - La polymérase gamma. Cette polymérase est à localisation mitochondriale,
bien que codée par un gène du noyau cellulaire.- La polymérase delta.- La polymérase epsilon.
La polymérase alpha/primase synthétise les amorces d'ARN.Une protéine appelée PCNA ("proliferating cell nuclear antigen") intervient.L'ADN simple brin au cours de la réplication est stabilisé par des protéinescorrespondant aux protéines SSB du colibacille: Replication Protein A (RPA).Les amorces d'ARN sont détruites par la RNase H.Les lacunes formées sont comblées par les polymérases béta ou alpha.
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La réplication chez les eucaryotesLa réplication chez les eucaryotes
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Yao, N. et al. J. Biol. Chem. 2003;278:50744-50753
Subunit arrangement and structural features of {gamma} Subunit arrangement and structural features of {gamma} complex the E. coli homolog of RFCcomplex the E. coli homolog of RFC
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Réplication du virus SV40Réplication du virus SV40
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Le problème majeur lors de la réplication de l’ADN est l’éliminationpotentielle de l’amorce d’ARN la plus externe ce qui pourrait entraînerun raccourcissement de l’ADN à chaque cycle de réplication.La protection des extrémités des chromosomes des eucaryotes estassurée par une enzyme spécifique: la télomérase.
La La télomérasetélomérase
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5’ 3'TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGAACCC
3’ 5’
5' - TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG-3'3' AACCC 5'
AACCCCAAC (5’)
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AACCCCAAC (5’)
AACCCCAAC (5’)
Télomérase
Mécanisme d'action de la Mécanisme d'action de la télomérasetélomérase
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Les TélomèresLes Télomères
Définition.
Les télomères constituent les extrémités des chromosomes eucaryotes.Ils sont formés par des séquences répétitives d’ADN.A l’extrémité 3’ des chromosomes, on retrouve des copies répétées deséquences de type TTGGGG (retrouvées chez un protozoaire cilié:Tétrahymena) ou TTAGGG (retrouvées chez l’Homme).A l’extrémité 5’, on a les séquences complémentaires riches en cytosine.
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Allongement de la séquence Allongement de la séquence télomériquetélomérique