BEN HADJ ALI Samiha Laboratoire de Bactériologie,

Institut Pasteur de Tunis

Le 16 Février 2017

Buts

Protection: du personnel des personnes en dehors du laboratoire de l'environnement

IntroductionLa majorité des contaminations recensées par Sulkin et Pike En

1978 sont dues : aux bactéries : 42% dont 71 décès sur 1701 cas Aux virus : 29 % dont 55 décès sur 1179 cas Les infections les plus fréquentes contractées au laboratoire de

Microbiologie sont (Pike 1978): Brucellose Fièvre Q Hépatite Fièvre typhoïde Tularémie, Tuberculose …..

Contaminations au laboratoiredues à divers micro-organismes(Sulkin puis Pike, 1978-CNRS)

Type deMicro-organisme

Nombre de casrecensés(%)

Nombrede décès

Nombred’agents

biologiques

Nombre decas publiés

BactériesVirusRickettsiesChampignonsChlamydiaeParasites

1704 (42 %)1179 (29 %)598 (14 %)354 (09 %)128 (03% )116 (03 %)

7155255102

378589317

7449153813137174

Total 4079 (100%) 168 ( 4.1 %) 2498

Infections les plus fréquentescontractées au laboratoire de Microbiologie

(Pike 1978-CNRS)Infections Nombre de cas Nombre de décès

BrucelloseFièvre QHépatitesFièvre typhoïdeTularémieTuberculoseDermato mycosesEncéphalite équine du VenezuelaPsittacoseCoccidioimycose

42628026825822519416214611693

513202401102

Contaminations /Infectionscomment et pourquoi ?

Tout simplement soit:Qu’aucunes directive d’hygiène n’ont été

entreprises au sein du laboratoire.Ou les directives d’hygiène ne sont pas respectées

par le personnel. Qui est responsable de les instaurer ? Y’a t-il une procédure qualité qui recense tous les micro-organismes

pathogènes utilisés à l’IPT et les moyens de prévention à appliquer en cas d’accident ?

Y’a-t-il une procédure qui recense les souches multi-résistantes ( bactéries , BK, et virus … ) et la manière d’éliminer leur déchets :

très hauts risques infectieux dont la thérapie est difficile à trouver!!! Y’a-t-il un audit ou une inspection pour évaluer les dysfonctionnements au

niveau des infrastructures mises en place dans les laboratoires?

4 Niveaux de Sécurité Biologique (BSL): fonction de la pathogénicité

des micro-organismes utilisés 1- non pathogènes 2- modérément pathogènes 3- causant des maladies sévères ou potentiellement létales (HIV, Bacillus anthracis)4- risque élevé de transmission par aérosol et causant des

infections létales (EBOLA) Le Laboratoires de diagnostic microbiologique: BSL-2( Biohazard Safety Level 2= Niveau de Sécurité Biologique 2)

Classification des niveaux de risques établie selon: La pathogénicité du micro-organisme et sa virulence La résistance du micro-organisme dans l’environnement - Chaleur, froid - Dessiccation - Antiseptiques Le mode de contamination • Voie pulmonaire • Voie digestive • Voie cutanée et transcutanée • Voie conjonctivale L’existence d’un traitement efficace ( difficile pour les multi-résistants !!) • Préventif: vaccination • Curatif: antibiotiques…

Risque infectieux : inhérent à la situation ( micro-organismes pathogènes sont là malgré les contrôles existants )

Sécurité : mesures à prendre face à un risque

quelles sont les mesures de sécurités biologiques à mettre en place?

Mesures de sécurités biologiques

1. Infrastructures 2. Pratiques microbiologiques 3. Elimination des déchets 4. Hygiène du lieu de travail 5. Hygiène et prévention personnelle

1. Infrastructures : Le local

Un panneau de risque biologique doit être suspendu sur chaque porte d'accès des laboratoires.

L'accès au laboratoire est limité.Portes et fenêtres des lieux de travail doivent être fermées

pendant le travail.Utilisation d’une hôte à flux laminaire PS II : protection

du produit biologique et du manipulateur.

2. Pratiques microbiologiques standards(1)

Pas de pipetage à la bouche Utilisation de matériel jetable de préférence Aiguilles et seringues: jetables et le recapuchonnage des aiguilles est

proscrit.

2. Pratiques microbiologiques standards(2)

Minimiser la production d’aérosols! Lorsqu'il y a possibilité de production d'aérosols

entraînant un risque d'infection aérogène, la manipulation d'échantillons doit s'effectuer sous un flux de sécurité de classe II (PS II).

Port de gants obligatoire pour éviter :- Le risque de contact cutané avec du matériel infectieux,

une surface ou un équipement contaminés.- Le risque d’un récipient ouvert contenant du sang ou un

autre liquide biologique.

2. Pratiques microbiologiques standards(3)

Désinfection des récipients d'échantillons dont l'extérieur est souillé avant toute manipulation

Contrôle de l'identité des micro-organismes de référence utilisés.

Pratiques microbiologiques spéciales

Prélèvements respiratoires ou de tissus

Production d'aérosols potentiellement infectieux(Exemple BK ) les multi-résistants PS3 ??

Manipulation sous un flux laminaire de classe II PS2

Mesures de sécurité supplémentairespour le laboratoire des

mycobactéries(BK)

Port des gants obligatoire pour toutes les manipulations de cultures.

Port d'une blouse à usage unique obligatoire Cette blouse ne doit pas quitter le laboratoire de tuberculose. Les blouses à usage unique doivent être jetées dans les poubelles biologiques réservées à cet effet (sacs appropriés

dangereux).Entrée du laboratoire restreinte au personnel autorisé.

3. Elimination des déchets et classification Les déchets sont classés en 4 groupes :

A. Déchets médicaux ne posant pas de problème, composition similaire à celle des déchets urbains B. Déchets spéciaux 1. Danger de contamination (contenant du sang, des excrétions etc.….) 2. Danger de blessures inactivation des déchets contaminés

3. Médicaments périmés avant de les sortir des Laboratoires 4. Cytostatiques C. Infectieux D. Autres déchets spéciaux (chimiques, radioactifs…)

Déchets infectieux solides

• Cultures de microorganismes ou de cellules• Échantillons de patients, reste d'analyse• Objets ayant touchés des échantillons (Tips depipetage de sérum, …)

Fermeture du sac avecune attache zip

Dépôt dans les chariotsprévus à cet effet

Autoclavage

Déchets infectieux liquides

• Tubes de cultures• Flacons de cultures• Les Objets tranchants

Inactivation chimique

(eau de Javel)

Evier

Déchets présentant un danger de blessure

• Aiguilles, lames et pipette Pasteur• Objets tranchants

Incinération

4- Hygiène du lieu de travail (2)

Place de travail: responsable: personnel technique - maintient de l'ordre - nettoyage et désinfection après chaque travail ou à la fin de chaque journée, et après chaque souillure par du matériel viable.

4. Hygiène du lieu de travail (3) Equipements: responsable: personnel technique - Désinfection selon fiche technique Un équipement devra être désinfecté avant de le sortir du laboratoire (lors de changement de laboratoire, ou réparation ou mise à la casse). Surfaces (sols et murs): responsable: service d’hygiène. - Selon le plan d'hygiène En cas de présence d'insectes ou de rongeurs, faire appel au service approprié pour leur élimination. Les animaux de compagnie sont interdits d'accès.

5. Hygiène personnelle (1)

Port de la blouse fermée (ou autres vêtements de protection):– obligatoire dans les lieux de travail!– La blouse reste dans le laboratoire!!!

5. Hygiène personnelle(2)

Il est interdit de manger, de boire, de fumer, de manipuler des verres de contact, d’utiliser des produits cosmétiques ou d’entreposer de la nourriture dans les lieux de travail.

5. Hygiène personnelle (3)

Lavage/désinfection des mains

Il convient de se désinfecter (solution alcoolique) ou de selaver (savon désinfectant) soigneusement les mains:• à la fin de chaque opération de travail• après le port de gant• avant de quitter le laboratoire

Prévention personnelle (1)• Vaccination contre les hépatites B: hautement recommandée pour tout le personnel• Vaccination contre le méningocoque: recommandé pour le personnel des laboratoires de diagnostique• Vaccin contre la grippe: recommandé•Test à la tuberculine à l'engagement, puis à rythme annuel s'il est négatif (chaque année pour le personnel du labo de BK)• Mise à jours des vaccins généraux (Tétanos …): Ces contrôles devraient être faits par la Médecine du

Personnel lors de l'engagement

Prévention personnelle (2)

•Grossesse suspectée ou confirmée:Informer le médecin du personnel ou/et le supérieurresponsable, afin que soient appréciés et discutés lesrisques éventuels du poste de travail actuel.

Pourquoi ? Pour protéger la biologie de la procréation et les futures générations.

Ne sont pas autorisées pour les femmes enceintes

(*: + 3 premiers mois d’allaitement) les manipulations du virus HIV, herpès simplex ou varicelle*les manipulations de sang ou autres liquides biologiques HIV ou HBV ou HCV positifs ou suspects de l’être. les manipulations de prélèvements déclarés infectieux . les manipulations d’agents bactériens* (tuberculose, listeria,

gonocoque), viraux (en l’absence d’immunité démontrée : CMV, virus varicelle-zona, herpès, rougeole, rubéole, parvovirus B19) ou parasitaire (toxoplasmose): l’évaluation doit être rigoureuse.

* Les activités avec des agents infectieux dans le cadre des laboratoires de recherches doivent dans tous les cas être évalués avec la Médecine du personnel.

Mesures en cas de contamination (1)

Contamination par du liquide??(tube de bouillon de culture ourécipient contenant un liquidebiologique cassé, etc.)

Contamination par contact??(plaques de milieux de cultures quitombent par terre, échantillon cliniquequi tombe sur la surface de travail,etc...)

Mesures en cas de contamination (2)

Porter des gants Recouvrir de papier absorbant imbibé de désinfectant. Eviter de verser le désinfectant de haut(surtout pour les sprays), ce qui peut engendrer des aérosols Laisser agir Éponger et jeter le matériel souillé dans un conteneur adéquat (Ne jamais manipuler du verre cassé directement avec les mains, même gantées, mais utiliser une brosse et une ramassoire,…)

Mesures en cas d'accident Mesures d'urgences - Piqûre et blessures: laver immédiatement la partie lésée à

l'eau et au savon, la rincer abondamment et la désinfecter (alcool ou Bétadine).

- Projections sur les muqueuses (bouche, yeux): rincer abondamment avec du sérum physiologique ou à défaut de l'eau du robinet.

Conseil médical rapide -Semaine, nuit, week-end et fériés: Tél d’urgence nécessaire. Déclarer l'accident - Déclaration avec le responsable du service adressée à la

Médecine du personnel (obligation légale)

EXEMPLES DE DÉSINFECTANTS SELON LES NORMES FRANÇAISES

AFNOR

Quelques désinfectants utilisés en France (selon les normes françaises)

Stérilium (alcool, ammonium quaternaire): désinfection des mains

Septochuv 2000 (alcool, ammonium quaternaire): désinfection des surfaces

Lysetol AF (amines) désinfection des instruments (trempage)

Effets de ces désinfectants sur les différents micro-organismes

Stérilium mains

Septochuvsurfaces

Lysetolinstruments

Bactéries végétatives

+++ +++ +++

Mycobactéries ++ +++ +++

Virus +++ +++ +++

Champignons +++ +++ +++

Spores - - ±

Les désinfectants de l’IPT

CONCLUSION

Un cadre légal est nécessaire et même obligatoire Etablissement d’ordonnances – Ordonnance sur l'utilisation d’organisme en milieu confiné. – Ordonnance sur la protection des travailleurs contre les

risques liés aux micro-organismes. – Ordonnance sur la protection de la maternité. Recommandations à instaurer: – Prévention des maladies professionnelles dans les

laboratoires de microbiologie diagnostique.

CONCLUSION

Prévention des atteintes à la santé lors des opérations dedésinfection. Prévention des maladies infectieuses transmises par voie sanguine (AES).Tuberculose dans le cadre professionnel: Risques et

prévention surtout avec la présence des souches multi-résistantes( vaccin inefficace ?).

Vaccination du personnel de santé. Allergie au latex pour certaines personnes.

Suggestions à l’équipe d’hygiène , comité de sécurité et de santé du travail et aux

laboratoires de MicrobiologieRecenser et répertorier tous les micro-organismes

pathogènes utilisés et isolés à l’Institut Pasteur de Tunis ( Souches de références , isolats conservés….)Etablir une procédure pour leur conservation et pour leur

élimination dans le but d’une bonne gestion du risque infectieux.

Sensibiliser tout le personnel et surtout les ouvriers de l’intérêt à porter pour l’inactivation avant d’éliminer les déchets à risque infectieux (tri- entreposage et autoclavage)

Et aux autorités: direction et ministères , d’allouer plus de rigueur et surtout les moyens nécessaires

( autoclaves suffisants , tri, emballage, entreposage …) pour bien les éliminer et inactiver leurs virulences car

notre sécurité et santé sont en jeu ( surtout pour les multi résistants ).

Tous les prélèvements biologiques en phase pré- analytique sont inconnus donc on doit prendre les mêmes directives d’hygiènes et précautions .

MERCI