D.E.A. D'AMELIORATION DES PLANTES - 1979

ETUDE DU POLYMORPHISME ENZYMATIQUE

CHEZ LE MIL (PENN/SETUM AMERICANUM S. SP. AMERICANUMj

Rapport de stage

N'DRI COULIBALY

ORSTOM:Biologie et Amélioration

des Plantes utiles

RAPPORT DE STAGE

ETIJDE DU POLYr1>RPHISME ENZyt,\ATIQUE C:~EZ LE r··UL

(PENN1SETLM N'ER1CAN~ S~ SP A1"ER1CANLW

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TABLE DES MATIERES

-:-=-=-

PAGES

A. 1NTRODUCT ION •••••• 0 • 0 0 ..

B. LE MATER 1EL VEGETAL. 0"." 0.......... 2

C. LE SYSTEME ENZYMAT 1QUE ETUD 1E 8

3. APPORT DU VIOLACEUM ••••••••••••••• o ••••••••••••••••

1 1.. MtrHODOLOG 1E .

1. MISE AU POINT BIBLIOGRAPHIQUE ..

III. RESLILTATS •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••

8

8

12

12

14

14

14

33

~ ~ .

...............................2.2. Variabilité inter-échanti 1Ion

2.1. Variabilité intra-échanti lion

1. DESCR 1PT ION DES ZYMOGRAMMES ••••••••••••••••••••••••

2. LES DEUX NIVEAUX DE VARIABILITE ••••••••••••••••••••

1V. 0 1SCUSSION - CONCLUSION •••••••••••• 0 ••••• 0 •••••••••••• 34

BIBLIOGRAPHIE

A. INTRODUCTION

Le recours à la mutagénèse, aux formes sauvages apparentées aux

espèces cultIvées, les nombreuses prospectIons dans les centres d'orl-

gloe et de dIversifIcatIon des végétaux, répondent au souel de dIsposer

à tout moment d'un matérIel 9égétal génétl~uement dIversifié; en effet,

c'est de cette varIabIlIté que dépend le nIveau du progrès réalisé en

ftn de cycle de sélectIon; aussI, est-II Indispensable d'en évaluer

l'ampleur, au moIns en début de programme. Généralement, cette dIversité

est est1mée par la mesure des vartatlons phénotypIques entre tndlvldus,

dont une part revIent à l'envIronnement; du faIt de l'Interférence des

facteurs du mIl leu, Il n'exIste pas de relatIon bijective entre le géno-

type et le phénotype. Une méthode blochlmlque p l'électrophorèse, penmet

d'aborder le problème de la variabilIté génétIque avec une précIsIon metl-

leure que les procédés classIques.

Les méthodes électrophorétlques exploItent la propriété qu'ont les

partIcules de migrer dIfféremment suIvant leur charge électrique, lorsqu'on

les place dans un champ3électrlque ; en les appliquant aux protéInes,

elles permettent de dévoiler aisément, moyennant certaines précautions,

la diversité des systèmes génIques; en effet, chaque protéIne est ca-

ractérisée par sa charge électrique quI dépend de son contenu en acIdes

aminés; ce contenu est révélateur d'un certain fragment d'A.D.N. ;

réclproquemment, toute modIfication affectant le gène est traduite dans

la protéine, et s1 el le conduit à une varIation significatIve de la

charge électrique peut être détectée par l'analyse électrophorètlque

(on e$Tlme à au moIns 25%, le pourcentage de mutations ponctuel les

pouvant être ainsi révélées). La conséquence Immédiate est la possIbI-

lIté de construire des distances génétiques (PERNES, 1975) et non des

dIstances phénotypiques entre Individus.; de plus, on peut étudIer si-

multanément la variabilIté au niveau de plusieurs loci (lEWüNTIN, 1974) ;

un autre avantage est què J'effet d'une substitutIon al léllque sur la

mobilité électrique de la protéine ne dépend pas de l'environnement

(LEWONTIN, 1974).

Dans le cas des enzymes, l'électrophorèse permet de meTtre en

évidence différentes formes moléculaires ayant la même spécifIcIté en-

zymatIque ; ces formes ont été désignées par le tenne d"'lsozymes" par

MARKERT et MOLLER (1959). Nous nous proposons d'étudier la variabIlité

de celles des estérases des grains de mIl; mals p auparavant, Il nous

semble Important d'évoquer quelques caractéristiques des échantillons

et du système enzymatIque analysés_.

B. LE MATERIEL VEGETAL

le mil, Pennisetum conericanum 6.sp americanum~ est une céréale

cultivée pour les besoIns de l'alimentation humaine dans les parties

sèches de l'Afrique Tropicale, de l'Inde, et du Pakistan; cette gra-

mInée, al 1agame, dlploTde (2n D 14) et du type métabolique C4 côtoie'

dans la même espèce, des sous-espèces sauvages, dont P. mo~~i68imum,

P. vio~aaeum

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L' I! Il l'''UAMnCI 1 C~ nI: Mil

1-- -----ESPECES PENNISETUM PURPUREUM SCHUMACH

SECTION PENNISETUM

.L __. _IPENNISETUM AMERICANUM (l.) LEEKE

tétraplolde (2n = 28) ; perenne diploïde (2nannuel 1e

14 )

parent sauvagedu mil cultivé

P. Violaceum Lam.P. Mollissimum Hochst

SOUS-ESPECES1

s.sp AMERICANUM

cultivé

P. typhoidesP. Nigritarum

-----r-------·---· --------.---.- -------. 1s. sp MONODII s. sp STE'NOSTIlCIlYUM

morphologiquementIntermédiaire entres. sp americanum ets. sp monodii

etc. . .. etc. . .. Sh 1bras

CLASSiFICATION DES PENNISETUM (BRUNKEN 1977)

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Nous avons analysé 38 échantll Ions (fig. 5), af~n de voIr sI la

varIabIlIté décrIte par les prospecteurs se retrouvait au niveau des

esté rases car~y' Iques.

C. LE SYSTEME ENZYMATIQUE ETUDIE

1. MISE AU POINT BIBLIOGRAPHIQUE

les estérases forment une famille enzymatIque dont le rôle est

d'hydrolyser les lIaIson esters. El les ont été étudIées chez plusIeurs

organismes, animaux et végétaux; aInsI, chez le poIsson d'eau douce

Catostomus c~~kii~ la varIatIon des estérases du sérum est dOo à la

ségrégation de deux allèles codomlnants d'un même gène, qui se mani-

feste é 1ectrophorétl quement par trois phénotypes (RJ:CHARD, K. KOEHN,

1969) ; cette sItuation se rencontre aussI chez Dro8ophi~a me~anogaster,

où les Isozymes 6F et 6S sont contrôlés par deux allèles du locus est-6

(WRIGHT, 1963). Chez le maTs (S.. 1 1964-1965), le comportement

électrophorétlque de l'estérase pH 7,5, codé par le gène El montre une

seule bande chez les Individus homozygotes, et l'apparition d'une

troIsIème bande, chez les hybrIdes, sItuée à mI-dIstance entre les

bandes pare~tales ; l'enzyme seraIt un dImère (SCHWARTZ, 1960 ; WORD,

1977 ; SHANNON, 1978). Les travaux effectués dans le laboratoire d'é-

lectrophorèse de l'O.R.S.T.O.M. par HOUDIARD (1977) et par DUBAYlE

M.C. (1978), sur le mIl, conduisent aux mêmes conclusIons. Enfin,

on note une varIation quai Itatlve et quantitative des Isozymes en

fonctIon des tIssus, et du stade de développement de la plante

2. PREPARATION DU GEL DE POlYACRYLAMIDE A 7,5%

Nous avons utilisé la méthode de DAVIS, nommée "Dise-électropho-

rèses", dans 1aq ue Ile 1e ge 1 est mou 1é en forme de cy 11ndres dressés

verticalement pendant la migration; dans une fiole à vide on met :'

- une part de la solution 1

- une part de la solution 2

- deux parts de persulfate d'ammonium (voir composItion des

solutions tableau I~ ; après dégazage du mélange. celui-ci est coulé

dans des tubes de verre de 12 cm de long et d'environ 0,6 cm de diamè-

tre Intérieur; la ~éllflcatlon qui se fait à 19abrl de l'air (on dé-

pose une goutte d'eau au-dessus du gel) et à la température ambiante

dure au moins une heure.

3. EXTRACTION DES ESTERAS ES

La graine est écrasée à la main dans, un mortier, avec un pl Ion,

et [a farine recueIl Ile dans un petit tube dans lequel on ajoute

200 ~I de tampon d'extraction (voir composition tableau Il). Après

homogénéisation, la suspension est laissée au repos pendant au moins

20 mn (les extraits peuvent être conservés plusieurs jours dans la

chambre froide) ; Il n'est poInt besoin de centrlfuger~

4. ELECTROPHORESE

Dans le swrnageant, on ajoute une goutte de bleu de bromophénol

1%0, qui permet de suivre la migration. 100 ~I d'extraits sont déposés

sur la colonne de gel, préalablement enfilée dans le bac supérieur de

l'appareil à électrophorèse APElAB (voir fig. 6) ; le bac comporte un

gel destiné à recevoir l'extrait témoin obtenu en mélangeant les farines

de trois lignées dont les uniques bandes, homodlmères, représent6nt

chacune un allèle (allèle R2 pour llGUI ; R6 pour THIOTANDE ; R4 pour

Jl04). La migration a 1leu en chambre froIde, et dure environ 2 h 30 mo

sous un ampérage de 2,5 mA par tube de gel.

5. REVELATION

la méthode utIlisée est celle de SHAW et PRASARD 1970 (voir solu-

tion d'Incubation tableau IV page ~)~

Solution 1

TABLEAU 1 gel de polyavrylamlde 7,5 %

HCl 1 N : 24 ml

TRIS: 18,15 mg (Trlshydronymethyl-amlnométhane)

TEMED : 0,23 ml (Tetra méthyl éthylène-dIamIne)

H20 Jusqu'à 100 ml

SolutIon 2 Acrylamlde: 28 g

BI5 : 0,735 g (Méthylène - bis - acrylamlde)

H20 jusqu'à 100 ml

Solution 3 PERSULFATE D'AMMONIUM: 140 mg/l00 ml

TABLEAU fi Tampon d'extractIon

TGSM : 0,75 ml

TRITON X 100 à 1% : 150 MI (élImine les IIprdes membranalres)

DMSO à 10% : 100 MI (amélIore l'extraction des enzymes par aug-

mentatIon de la perméabilité cellulaIre)

TGSM : - Tampon de mIgration Trls-glycrne (tableau 1JI)

- Saccharose 40% (alourdIt l'extraIt lors de la mlgratron)

- Mercapto ethanol 20 mM

TABLEAU III

-3Tampon de mIgratIon TRIS-GLYCINE 4,95.10 MpH 8,3TRIS: 6 g

GLYCINE: 28,8 g

H20 jusqu'à 1 lItre à drtuer 10 fols au moment de l'emploi

TABLEAU IV

RévélatIon des estérases :

FAST BlUERR : 100 mg

TRIS-HCl 0,05M pH 7,1 : 97 ml

a, ~ NAPHTYl ACETATE 1% : 3 ml

11 .

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t\G.b: ~C.HEMA 1)E LOAffAREILA ELEC.TRO?HORE5E....

l'emploi simultané de ~ et a -naphtyl- acétate permet de dissocier

les Isomères ~ et a des estérases j l'Incubation dure 15 mn et a lieu

à l'obscurité et à la température ambiante j la détermination des

allèles se fait par comparaison avec le tube témoin et en s'aidant

d'un négatoscope.

III. RESULTATS

1. DESCRIPTION DES ZYMMOGRAMMES (fig. J page~~)

les esté rases migrent de la cathode vers l'anode. Dans la nomen-

clature des bandes, les chiffres Indiquent l'ordre chronologique de

découverte des allèles et non celui de la migration j J'emploi d'un

mélange à parts égales de a et ~ naphtyl acétate comme substrat de la

réaction de révélation permet de distinguer deux types de bandes sui-

vant la couleur~

1.1. lES BANDES MARRONS

El les révèlent la présence des Isomères a des estérases

nous en avons dénombré quatre~ toutes communes aux 38 échantll Ions

étudiés j leur déterminisme génétique n'est pas encore élucidé; deux

d'entre el les, les bandes m4 et m6, facilement lisIbles car Intensément

colorées~ sont présentes dans toutes les graines; les deux autres, m3et m5, manifestent une faible activité, parfois difficilement décelable

une durée d'Incubation prolongée (30 à 45 mn) appliquée à quelques échan-

tll Ions a révélé la présence simultanée des quatre bandes marrons dans

toutes les graines j mals les bandes roses tendent à se foncer, ce qui

~eut rendre difficIle la distinctIon entre les deux types de ~andès, surtout entre,la m6 et [a R] qui sont juxtaposées; pour cette ralson~ ce traitement

a été évité. le manque de variabilité qui semble exister au niveau des

bandes marrons~ nous a amené à les exclure du reste de l'analyse qui ne

concernera que les roses.

1.2. lES BANDES ROSES

Elles sont sIgnificatives de la présence des Isomères ~ et

migrent plus vite que les précédentes; Il n'y a aucune amblguité de

R1R3R1R6R1R5R1R2R4R4R3R3R6R6R5R5R2R2R1Rl

Rl _R2 _ ._-""1

R5_1-....jR6_ 10---1

R3 _-I-~R4_

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RlR2R5R6R3R4

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-R1R4 R2R5 R2R6 R2RJ R2R4 R5R6 R5R3 R5R4 R6R3 R6R4 R3R4

F\G.l REPRE&ENTATION SCHEMATIQUE DES DIFFERENTSles chiffres indiq'uent l'ordre de découverte des allèles

~ Position des allèles

Z YM OGRAM MES

...w

lecture à leur niveau, et leur déterminisme génétique est bien connu:

les variations observées sont dOes à la disjonction d'allèles d'un même

locus; l'enzyme étant un dimère, le zymogramme correspondant à chaque

graine comporte, soit une bande (homozygotie), soit trois bandes (hétéro-

zygotie) ; dans ce dernier cas, la bande hybride, hétérodimère, est

située à mi-distance entre les homodimères "parentales".

2. LES DEUX NIVEAUX DE VARIABILITE

2.1. VARIABILITE INTRA-ECHANTILLON (voir dernière page)

A l'intérieur de l 'échanti 1 Ion, on note une grande varia-

bi 1 ité al lél ique d'une graine à l'autre; nous avons dénombré six al lè-

les dans chaque échanti 1 Ion, sauf cinq d'entre eux qui en présentent

cinq (voir tableau des fréquences al léliques, fig. 8, page 15 et 16)

cela entraine la présence d'un grand nombre de zymogrammes différents

(page 13). Les individus se distinguent aussi par le nombre de bandes

-une ou trois- qui traduit la variabi 1 ité à l'intérieur d'un locus:

homozygotie, et hétérozygotie.

Les fréquences alléliques à l'intérieur d'un échantillon

sont très inégales: dans chaque champ Sénoufo et Lobi, l'allèle pré-

dominant est soit R1 soit R2 • Chez les Malinké, la première place re-

vient à R3 ou R5 ou R6 (voir tableau des fréquences al léliques (fig. 8,

page 15-16) ; cela se répercute sur la fréquence des zymogrammes : les

plus fréquents sont les combinaisons des allèles R1

ou R2 chez les

Sénoufo et Lobi, alors qu'i 1 s'agit des combinaisons de R3 ou de R6chez les Malinké.

La multipl icité des allèles se comprend aisément quand on

sait que le matériel végétal étudié n'est pas une structure à base

génétique étroite, type 1ignée ou hybride F" mais un amalgame de cul-tivars traditionnels n'ayant fait l'objet d'aucune sélection poussée.

2.2. VARIABILITE INTER-ECHANTILLON

El le peut être abordée en considérant deux critères:

d'une part, la variation qualitative et quantitative des allèles, et

d'autre part, cel le des génotypes représentés par les zymogrammes.

-14

2.2.1. VARIATIONS DES FREQUENCES ALLELIQUES

A part cinq échanti 1Ions qui révèlent la présence de

cinq allèles, tous les autres en possèdent six i la sélection des se-

mences effectuée par les Malinké ne semble pas préjudiciable au maintien

des allèles dans les champs i le critère présence-abseoce d'un allèle

donné ne peut servir à distinguer les échanti 1Ions, les uns des autres

par contre, le tableau des fréquences (page 15-16 et le classement page

17 ainsi que les représentations graphiques page 18 à 23) montrent

une très grande diversité des fréquences al lél iques i ils permettent, en

outre, de constater les faits suivants:

- Les échanti 1Ions peuvent se classer en deux groupes: le

groupe Sénoufo-Lobi, et le groupe Mal inké i dans le premier ensemble,

les allèles les plus fréquents sont R1 et R2 i chez les M~I inké, ce rôle

est dévolu à R3, R5 et R6•

- Entre mi Is Sénoufo et mi Is Lobi, la distinction est dif-

fici le si l'on considère uniquement R1 et R2 i par contre, les fréquen-

ces R3

, R4, R5 et R6 nous indiquent qu'i 1 s'agit de deux groupes bien

distincts.

- Le graphique 14 page 23 montre qu'i 1 existe un gradient de

la fréquence R6, d'est en ouest (un cl ine) qui se ju~tapose à celui des

isohyètes (carte 1).

Afin de mieux discriminer les différents échanti 1Ions, nous

avons appl iqué la technique de l'analyse des composantes principales

au tableau des fréquences al lél iques.

14 bis

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Classement des fréquences al léllques moyennes suivant les

ethnIes

ordre décroIssant

Zymogrammes les plus fréquents suIvant les échantillons

SENOUFO et LOBt : R1 RI' RZ RZ' R1 RZ (les 3 principaux).

1

A mallnkéso ~énoufos• lobls

F \ C., ~ . V A RIAT ION 5 G E0 G R A PHI QUE 5 0 E$ FR Eau EN CES A L LE LI QUE S R1

I~

....C1Q.

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...

\FIG.-\.OVARIATIONS GEOGRAPHIQUES DES FREQUENCES AllEllQUES R2

A malinl(eso -senoufoS• lobis

sfI CA ....U).

Il

mils

6. malinl

,"

,,1,

)

1

n-,lls

A malinl

FIc, ,\,~ .. VARIATIONS GE.OGRAPHIQUES DES FREQUENCES AllElIQUES R5

0. malin/

ç \

ANALYSE DES COMPOSANTES PRINCIPALES

a - but et prIncIpe

La méthode, quI a l'avantage d'être exempte d'hypothèses restrIc-

tIves, a pour prIncIpe de se ramener à partIr d'une matrIce de grandes

dImensIons, à un petit nombre de variables Indépendantes entre elles,

appelées facteurs, quI sont des combinaIsons lInéaIres des varIables

InitIales; el le aboutIt à la projection du nuage de points de départ,

dIffIcilement vlsuallsable, dans le plan des facteurs principaux pris

deux à deux. Mathématiquement, chaque axe factorIel est donné par le

vecteur propre associé à chaque valeur propre de la matrIce carrée

symétrique 0 x D' (0 ~ matrice Initiale, D' = transposée de 0) ; la

recherche des facteurs se fait par diagonal Isatlon de 0 x D'.

b - SIgnificatIon des axes

le traltement à l'ordInateur des données nous fournIt le tableau

des saturations (corrélation des varIables InItiales avec les facteurs)

et le pourcentage de variance expliquée par chaque axe (tableau 1 et Il

page "'1 ). Nous n'exploiterons que les troIs premiers axes quI repré-sentent 85% de la varlabl lIté:

- axe 1 : forte Influence positIve de R2 et assez forte Influence

négatIve de R6- axe 2 marqué posItivement par Rl et négatIvement par R3

- axe 3 forte partIcIpatIon posItIve de RS et assez forte

partIcipatIon négatIve de R3

c - projectIons dans le plan des axes prIncipaux

c.l - plan des axes 1 et 2 (graphique 15 page 'V( >.La projectIon dans ce système d'axes ne permet pas de dlstJ:n-

guer des agrégats bIen nets j des échantll Jons, proches géographIquement,

se retrouvent éloIgnés sur le graphIque; cela confirme la grande dIversI-

té des f réq uences ail é 11ques ; en outre, corrme 11 ava 1t été noté p.1 us tôt,

Il n'apparatt aucune dIscrImInatIon entre mIls Sénoufo et mIls Lob 1 quI

se caractérisent par de fortes fréquences en R1

et en R2 ;

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DIVERSITE DES FREOUENCES ALLELIOUES _ PLAN DES FACTEURS' ET 2

• MALINKES

• SENOUFOS

6 LOOIS

par contre, les Loblsemblent se dIstInguer par leur position qui rap-

pelle leur richesse en R3 et R6 ; toutefoIs leur faible effectIf lImIte

la portée de cette analyse.

c.2 - plan des axes 1 et 3 (graph 1que 16 page 'VI).

Les échantll Ions lob! se distinguent très nettement par leur

position en dessous de l'axe 1 ceux des Sénoufo se répartissent en

majorIté au dessus de cet axe, mals quelques uns d'entre eux se retrou-

vent avec les Lobls, ce quI Indique une grande varIabIlité des fréquen-

ces al/éllques au nIveau des champq Sénoufo. Les MalInkés se sIgnaient

plus nettement IcI encore par leur position à la périphérie du nuage

de poInts; de plus Ils sont très distincts l'un de l'autre; les fré-

quences R3, R5 et R6, les plus élevées sont rencontrées séparément dans

les échantl lions MalInké j cela est sans doute le résultat de la sélec-

tion des semences qui favorIserait ces al [èles.

c.3 - plan des axes 2 et 3 (graphique 17 page~~ ).

Cette représentation est semblable à la précédente: les

lobl sont tous sItués en dessous de l'axe 2 ; les Sénoufo se retrou-

vant un peu partout p mals en majorité au-dessus de cet axe.

En conclusIon, l'analyse des composantes principales nous

a révélé l'Importance de l'axe troIs dans la dIstinctIon entre mils

MalInké, Sénoufo et Lobl ; cela Indique le rôle dIscriminatoire des

allèles R3 et R5 qui sont fortement corrélés à cet axe.

2.2.2. VARIABILITE AU NIVEAU DES ZYMOGRAMMES

Les six allèles répertoriés peuvent s'assocIer de plusieurs

manières qui se manIfestent, électrophorétlquement et théoriquement par

21 zymogrammes différents schématiquement représentés figure 'lf3'- page1 11

Le tableau des fréquences des zymogrammes (fIg. 18 page ,~

à ~\..) appelle les remarques suivantes:

- aucun échantll Ion ne possède sImultanément tous les 21

zymogrammes théoriques; le nombre varIe de 7 à 17.

- aucun zymogramme n'est présent à la fols dans tous les

38 écAà~tlhlons.

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Lorsqu'on considère les groupes ethniques on note que

- les échantillons Mallnkésont tous, les zymogrammes

R6R6 et R2R6 ; Il Y a absence totale de R4R4

les mils Lob 1 sont caractérIsés par la présence simul-

tanée des zymogrammes R2Rz, R2R3 et R2R4- les échantll Ions lobl prêsentent le plus grand nombre de

zymogrammes : en moyenne 13,6 pour les lob 1 ; 12,3 pour les Sénoufo j

12 pour les Malinké.

Toutes ces variations peuvent être liées à cel les des

fréquences alléllques, ou dOes à un échantillonnage d'IndivIdus Insuf-

fisant.

3. APPORT DU VIOLACEUM

Dans la collectIon, certaIns faux épis manIfestaient des carac-

tères de la sous-espèce sauvage Pennisetum vioLaceum. En ce qui concer-

ne les estérases, on ne note aucun apport allél Ique par Violaceum ; ce

résultat est conforme à celuI de DUBAYlE M.C. dont les travaux (1973)

ont montré que la populatJon sauvage sénégalaIse S.L. 68 de P. vioLaceum

contJent les même allèles que les formes cultivées.

}}

IV - DISCUSSION - CONCLUSION

L'analyse électrophorétlque des estérases des grains de mil de

C5te d'Ivoire a conduIt aux prIncipaux résultats suivants

- Les six allèles mis en évidence, sont présents da s presque

tous les échantillons mals leurs fréquences sont très fluctuantes

d'un champ à l'autre.

- les fréquences R1 et RZ ne peuvent servIr de critère de discri-

minatIon valable pour laquelle 11 faut recourir aux allèles R3, R4, R5ri~

- les échantIllons MalInké se sItuent à la périphérIe du nuage de

poInts quelque soit le système d'axes utIlisé pour sa représentatIon

graphrque.

- Le groupe de Mils Sénoufo se sIgnale par une grande variabIlIté

des fréquences al léllques ce résultat peut être mIs en parai lèle avec

le poly.~orphisme décrit par les prospecteurs au nIveau des caractéristi-

ques du faux-épis; l'Incite à se poser la question suivante: exlste-

t-TI une corrélation signifIcative entre caractéristiques du faux épis

et le comportement électrophorétlque et la fréquence des Isozymes d'eB-

térase ? mals certains facteurs limItent la portée de l'analyse et

rendent difficile l'Jnterprétatlon des données:

- le bJals d'échantillonnage: Il se sJtue à trois nIveaux

tout d'abord, les échantillons récoltés ne sont pas représentatifs de

tous les mils de Côte d'Ivoire j comme le montre la carte des prélève-

ments, ceux-cl n'ont pas été étendus plus au sud de la zone prospectée;

de ce fait les rssultats ne sont pas extrapolables à toute la région

qui s'adonne à la culture du mil. EnsuIte; le nombre d'échantIllons ré-

coltés par ethnie est très Inégal et trop faible pour autoriser une In-

terprétation statistique convenable. Enfin, on peut se p0ger la question

de savoIr si les faux épIs récoltés ct la trentaine de graines analysées

représentent bien le champ.

- le manqu~ d'uniformité des techniques culturales: les

pratiques culturales ne sont pas Identiques chez les Sénoufo ; ainsi

les prospecteurs notent que certains paysans sélectionnent leurs se-

mences ; d'autres, pratiquent le démarlage ; mals Il est dommage que

l'on ait pas spécifié les champs dans lesquels ces opératIons ont lieu.

Malgré ces restrIctIons, le crItère présence-absence d'un

allèle donné nous permet de faire un rapprochement entre nos résultats

et ceux de TCHAlA (communication personnelle) sur mils du Mail,

Sénégal, Cameroun, Togo, NIger et Centrafrique: dans ces pays, les

échantII Ions analysés renferment presque tous les allèles R1 à R6 ;

Ils ne diffèrent des nôtres que par un seul allèle (R7 au Cameroun et

au Niger; Re au Togo; Rg au Sénégal). Au Mal f, zone de grande cultu-re de mil et au nord de la Côte d'Ivoire, on rencontre les mêmes allèles

(R1 à R6) ; à la suite de cette comparaison, Il semble dlfflcl le de

trouver un plus grand nombre d'allèles en Côte d'Ivoire, que dans les

grands centres de culture du mil

B 1 B LlO G R A PHI E

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