Lebanese Science Journal, Vol. 14, No. 1, 2013 49

TUDE DE L'ACTIVIT ANTIOXYDANTE

ET ANTIBACTRIENNE DES EXTRAITS

D'UN ENSEMBLE DES PARTIES DE LA

FLEUR DU CAPPARIS SPINOSA L.

A. Meddour, M. Yahia1, N. Benkiki1, A. Ayachi2

Dpartement des sciences de la nature et de la vie, Universit de Biskra, Algrie 1 Laboratoire des biotechnologies des molcules bioactives et de physiopathologie

cellulaire, Dpartement de biologie, Universit de Batna, Algrie 2 Laboratoire de microbiologie, Dpartement de vtrinaire, Universit de Batna,

Algrie

bioasmed@yahoo.fr

(Received 18 March 2011 - Accepted 13 July 2011)

RSUM

Dans le cadre de la valorisation des plantes mdicinales de la flore

algrienne et mditerranenne, on sest intress ltude dune espce endmique,

Capparis spinosa L.

Le but de cette tude est d'valuer lactivit antioxydante par le test au

DPPH et antimicrobienne par la mthode de diffusion en milieu glos des extraits

bruts prpars partir d'un ensemble des parties de la fleur du Capparis spinosa (des

bourgeons fleurs, fleurs et les fruits immatures).

L'valuation de l'activit antioxydante par le test de DPPH, a rvl un

grand pouvoir antioxydant surtout pour l'extrait mthanolique (78,34%). Les extraits

polaires se sont rvls dpourvus de toute activit anti-bactrienne. Par contre, les

extraits apolaires sont actifs contre Staphylococcus aureus.

Mots-cls: Capparis spinosa, molcules bioactives, polyphnols, activit antioxydan-

te, activit antimicrobienne

ABSTRACT

Investigation of the endemic species Capparis spinosa L. was conducted

within the general framework of valorization of the medicinal plants of the Algerian

and Mediterranean flora.

The aim of this study is to evaluate the antioxidant activity and antibacterial

activity of the crude extract of the buds, flowers and immature fruits of Capparis

spinosa.

Evaluation of the antioxidant activity by the test of DPPH, revealed a great

antioxidant capacity especially for the methanolic extract (78,34%). The polar

fraction of the extract does not show any antibacterial activity. To the contrary, the

non polar extract was found to be active against Staphylococcus aureus.

mailto:bioasmed@yahoo.fr

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Keywords: Capparis spinosa, bioactive molecules, polyphenols, antioxidant activity,

antimicrobial activity

INTRODUCTION

Capparis spinosa (le cprier) est une plante de la famille des Capparidaceae

(Quezel & Santa, 1962), vivace arbustive spontane, xrophyte et hliophile

(Benseghir-Boukhari & Seridi, 2007), trs rpandue dans les pays du bassin

mditerranen (Aghel et al., 2007; Romeo et al., 2007). Elle est lune des rares

espces arbustives qui prsente autant de qualits avec de nombreux usages. Elle

fournit un condiment recherch, la cpre, qui correspond au bouton floral de la plante

(Douieb et Benlemlih, 2010). Elle est utilise galement comme fourrage, plante

mellifre et ornementale. Elle possde, surtout, des qualits mdicinales importantes

utilises dans la mdecine traditionnelle. (Benseghir-Boukhari & Seridi, 2007). Les

diffrentes parties du C. spinosa ont t rapportes pour avoir des activits

biologiques comprenant les activits antioxydante (Germano et al., 2002),

antifongique (Ali-Shtayeh & Abu-Ghdeib, 1999), anti-hpatotoxique (Gadgoli &

Mishra, 1999) et anti-inflammatoire (Al-Said et al., 1988).

Parmi les activits biologiques des plantes mdicinales, ces dernires

annes l'attention s'est porte sur l'activit antioxydante en raison du rle qu'elle joue

dans la prvention des maladies chroniques telles que les pathologies du cur, le

cancer, le diabte, l'hypertension, et la maladie d'Alzheimer en combattant le stress

oxydant (Cole et al., 2005; Liu, 2003; Riboli & Norat, 2003).

MATRIEL ET MTHODES

Matriel vgtal et prparation des extraits

Le matriel vgtal, constitu d'un mlange de bourgeons fleur, fleurs et

fruits immatures de lespce Capparis spinosa rcolt des rgions de Tigharghar

wilaya de Batna et d'Ain Zatout wilaya de Biskra (Est d'Algrie), en mai et juin

2010, est sch l'ombre, et broy.

La prparation des extraits est ralise selon la mthode de Diallo et al.,

(2004) avec modification.

Extraction avec des solvants polarit croissante

250 g de la poudre ont t extraits avec 2000 ml dther de ptrole et plac

sous agitation pendant 24 heures. Aprs filtration, le marc est ensuite successivement

agit pendant 24 h. avec 2000 ml de dichloromthane et 2000 ml de mthanol.

A la fin de lextraction, les trois extraits, ther de ptrole (Ep),

dichloromthane (DCM) et mthanolique (MeOH), ont t concentrs sous vide

lvaporateur rotatif respectivement aux tempratures de 37C, 39C et 41C.

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Macration aqueuse

50 g du matriel vgtal broys ont t macrs dans 500 ml deau distille

temprature ambiante, sous agitation, pendant 24 heures. Le macrt a t ensuite

filtr, le filtrat obtenu a t congel -4C pendant une nuit puis lyophilis.

tude phytochimique

Tests prliminaires

Les flavonodes, les tanins et les alcalodes ont t caractriss dans les

extraits par des ractions colores.

Les ractifs de caractrisation classiques ont permis de mettre en vidence

les groupes chimiques suivants: les flavonodes par la raction la cyanidine (Paris et

al., 1969), les tanins par lajout de trichlorure du fer (Dohou et al., 2003) et les

alcalodes par le ractif de Dragendorrff (Konkon et al., 2006).

Chromatographie sur couche mince

Le support utilis dans cette tude est une plaque de gel de silice:

(2020cm, 60F254). Les systmes de migration utiliss sont: l'ther de ptrole /n-

butanol /acide actique (4/80/16) (V/V/V) et dichloromthane/ mthanol (86/14)

(V/V) pour les extraits polaires (H2O, MeOH) et ther de ptrole / actate dthyle aux

proportions de (80V /20V) pour les extraits apolaires (Ep, DCM). Cinq composs

phnoliques sont utiliss comme standards; des flavonodes: querctine (Qur), rutine

(Rut) et catchine (Cat), et des acides phnoliques: acide gallique (AG) et acide

cafique (AC). La visualisation des taches a t faite sous UV 254 nm et 366 nm et

par le mlange vanilline sulfurique.

Dosage des polyphnols

Le dosage des polyphnols totaux a t effectu avec le ractif

colorimtrique Folin Ciocalteu selon la mthode dcrite par (Borneo et al., 2009).

Dosage des flavonodes

La mthode du trichlorure daluminium (AlCl3) dcrite par (Dohou et al.,

2003) est utilise pour quantifier les flavonodes dans les extraits.

Tests des activits biologiques

Test d'activit antioxydante

Effet capteur du radical diphnylpicrylhydrazyl (DPPH)

Pour dpister l'activit antioxydante de C. spinosa, le test au DPPH a t

utilis selon le protocole dcrit par Velazquez et al. (2003).

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Le DPPH, un radical libre de couleur violette, est rduit en un compos de

couleur jaune en prsence de composs anti-radicalaires (Molyneux, 2004).

Dans des tubes on a introduit 750 l de chaque extrait et 1,5 ml de la

solution mthanolique de DPPH (2,4 mg/100 ml), aprs agitation, les tubes sont

placs lobscurit temprature ambiante pendant 30 minutes. La lecture a t

effectue par la mesure de labsorbance 517 nm.

Les rsultats sont exprims en tant quactivit anti-radicalaire ou linhibition

des radicaux libres en pourcentages (I %) en utilisant la formule suivante:

I % = [1 (Abs chantillon Abs Contrle ngatif)] x 100

O: I %: Pourcentage de lactivit anti-radicalaire (AAR%);

Abs chantillon : Absorbance de l'chantillon ;

Abs Contrle ngatif : Absorbance du contrle ngatif ;

Activit antimicrobienne

Lactivit antimicrobienne des extraits a t dtermine par la mthode de

diffusion en milieu glos cit par (Treki et al., 2009).

Trois souches de rfrence ATCC, provenant du laboratoire de bactriologie

de CHU de Batna, sont testes: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa et

Staphylococcus aureus.

Les diffrentes souches bactriennes ont t repiques par la mthode des

stries, puis incubes 37C pendant 18 24 heures afin dobtenir une culture jeune et

des colonies isoles qui ont servi par la suite prparer linoculum en les trempant

dans des tubes de solution deau distille strile afin davoir une densit cellulaire

initiale ou une turbidit voisine celle de 0,5 McFarland.

Aprs lajustement de la turbidit de la suspension servant dinoculum, on a

tremp un couvillon dans la suspension et on a tal la surface entire avec la glose

Mueller Hinton trois reprises. Aprs chaque application, on a tourn la bote de 60

environ en vue dassurer une distribution homogne de linoculum. Enfin, on a

couvillonn partout autour du bord de la surface de la glose.

Des disques de papier Wathman striles (6 mm de diamtre) sont imprgns

de concentrations croissantes dextraits secs repris avec le dimthyle sulfoxyde

(DMSO) et appliqus, laide dune pince, sur la surface du milieu GMH. Les botes

de Ptri ont t incubes pendant 24 heurs 37C.

Lactivit antibactrienne a t dtermine en mesurant laide dune rgle

le diamtre de la zone dinhibition.

Analyse stat