Crp

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    21-May-2015
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    Science

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Dépistage de la CRP

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  • 1. PROTEINE -C- REACTIVEAbdsalah(CRP)Raction dagglutination auLATEXPar S / Abdessemed

2. AbdsalahDfinition Synthtise principalement par le foie,sa demi-vie est de 6 heures. Nomme ainsi parce qu'elle estprcipitable par un polysaccharideextrait de la capsule du pneumocoque. C'est un examen biochimique sensible,prcoce, non spcifique. 3. Il n'existe pas de dficit congnitalconnu de cette molcule. Elle migre dans les bta ou gamma-globulinesAbdsalah l'lectrophorse. Le trac n'est le plus souvent pasmodifi lorsque la CRP est < 100. 4. C'est une protine de l'inflammation,dont le taux peut tre multipli par 500 1000 lors d'inflammations aigus. Sa valeur normale est infrieure 10-12mg/l.Abdsalah 5. Dans le cadre des infections, la CRPreste normale en cas de virose. Elle nes'lve qu'en cas d'infectionbactrienne et diminue rapidement dansles 48 heures d'une antibiothrapie bienconduiteAbdsalah 6. L'lvation du taux de CRP estgalement un facteur pronostic: plusl'lvation est rapide et importante,plus l'inflammation est svreAbdsalah 7. AbdsalahPrincipe Le test PCR- Latex est un testdagglutination rapide pour la dtectiondirecte et semi quantitative sur carte deprotine C- ractive (PCR). Le ractif, est une suspension departicules de latex recouvertesdanticorps anti- PCR humaine, quisagglutinent en prsence de PCR dans lesrum des patients. 8. AbdsalahRactifs PCR- Latex. Suspension de particulesde latex recouvertes danticorps anti-PCR humaine, azide de sodium 0.95 g/l.la prparation est calibre de manire dtecter entre 6mg/L et 250 mg/L dePCR. Contrle positif. Srum humain, azidede sodium 0,95 g/l. Contrle ngatif. Srum animal, azidede sodium 0,95 g/l. 9. Matriel:- Agitateur rglable 100 r.p.m- Cartes tests- Agitateurs usage unique Echantillon:- Srum : stable pendant 48h 2-8C.- Les srums hmolyss et lipmiques nesont pas adquats pour le test ; ilsrisquent de donner des rsultats errons.Abdsalah 10. AbdsalahPROTOCOLE Pralablement, sortir les ractifs et leslaisser squilibrer la temprature dela pice Dposer 50l dchantillon et une gouttede chaque contrle dans les cerclesindividualiss sur la carte test. 11. Agiter lgrement le flacon de latexavant de lutiliser. Dposer une goutte de ractif PCR- Latexdans chaque cercle prs de lchantillon tester. Mlanger avec un agitateur usage uniquede manire recouvrir totalement lredfinie par le cercle. Utiliser un nouvelagitateur pour chaque chantillon. Faire tourner la carte 100 r.p.m. pendant2 minutesAbdsalah 12. Lecture et Interprtation Aprs avoir retir la carte de lagitateurrotatif, examiner loeil nu la prsence oulabsence dagglutination dans la minutequi suit, Une agglutinationvisible indique laprsence deprotine -C-ractive 6mg/LAbdsalah 13. Un srum positif doit tre titr. Pourtitrer. Faire des dilutions sries dedeux en deux dans une solution saline 9 g /l. le titre dun srum est dfini commetant la plus grande dilution donnant unrsultat positif.Abdsalah 14. La concentration approximative dunsrum en PCR (mg /L) peut tre obtenuen multipliant le titre par la limite desensibilit (6mg/L).Abdsalah 15. C'est l'association la VSde 3 protines de laraction inflammatoire quipermet de diagnostiquer,quantifier, dater et suivre laraction inflammatoire encouplant une protine decintique rapide ( CRP) etdeux protines cintiquelente (ORO et HTP )L'exemple du schma associ ( septicmie E.Coli chez une femme de40 ans ) montre que alors que la VS n'est pas encore modifie J 10,le profil protique confirme la gurison cliniqueAbdsalah 16. Apprcier l'anciennet dela raction inflammatoireLes diffrences decintique des 3 protinespermettent dediffrencier les ractionsaigus des ractionschroniques---- La CRP synthtiseds la 8me heure atteintsa concentration maximumen 24 heures.---- L'orosomucode etl'haptoglobine sontdcales d'environ 24heures.Abdsalah 17. AbdsalahLimites de la Mthode Des facteurs rhumatodes danslchantillon interfrent dans le dosagede la protine C- ractive. Linterfrence est limine (< 125UI/ml) laide dun absorbant. Ajouter1 goutte dabsorbant sur chaquechantillon avant de dposer le latex. 18. AbdsalahNOTES la sensibilit du test diminue bassetemprature. Les meilleurs rsultatssont obtenus des tempraturessuprieures 10C. une lecture diffre peut rsulter enune surestimation du titre de PCR. Limportance de lagglutination nest pasindicatrice de la concentration en PCRdans les chantillons tests 19. les srums contenant de fortesconcentrations de protine - C- ractivepeuvent donner des ractionsfaussement ngatives (effet de prozone). il est conseill de retester tous leschantillons ngatifs en nutilisant que10l de lchantillonAbdsalah 20. Abdsalah