Compte rendu Parasitologie 161 (EN.CRPARA.17-06-16

Date d’édition : 21/06/2016

Statut du document : Définitif

Compte rendu Parasitologie 161 Campagne 2016

EN.CRPARA.21-06-16.01 sur 4

Centre Toulousain

pour le Contrôle de qualité en Biologie clinique

COMPTE RENDU : n°161 EEQ : Parasitologie

Association déclarée à la Préfecture de la Haute-Garonne le 30 Octobre 1973

et enregistrée sous le n° W313002633 CTCB - 33 route de Bayonne - 31300 TOULOUSE

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Expert biologiste Coordonnateur des programmes

Vérification du contenu scientifique et autorisation du rapport d’essai d’aptitude

Parasitologie/Mycologie Dr S. CASSAING

[email protected]

Dr S. ALBAREDE Pharmacien Biologiste [email protected]

Documentation

Le compte rendu comporte les éléments suivants : - Une partie commune pour tous les laboratoires :

� Pages explicatives : présentation du programme, présentation du système de notation des laboratoires et informations générales,

� Exploitation statistique, � Commentaire éventuel sur les réponses des participants.

- Une partie propre à chaque laboratoire « Résultats individuels » en annexe 1 :

� Résultats du laboratoire � Evaluation de la performance du laboratoire

Sommaire

1. Présentation du programme d’inter-comparaison page 2 2. Détermination de la notation du laboratoire page 2 3. Scenario et commentaire page 2 4. Fiche technique : Plasmodium vivax page 4



1 - PRESENTATION DU PROGRAMME D’INTERCOMPARAISON Expert du programme : Mme CASSAING, Service de Parasitologie / Mycologie, CHU Toulouse - Institut Fédératif de Biologie Purpan, [email protected] > Fréquence de passage : Deux échantillons sont envoyés dans l’année, accompagnés d’un scénario clinique. > Présentation du programme et des produits de cont rôle utilisés : La recherche du ou des parasites peut se faire à partir de plusieurs types de prélèvements : selles, frottis sanguins. L’envoi peut être soit un liquide de conservation pour les selles, soit un frottis coloré au MGG. Chaque laboratoire doit identifier le parasite et donner son ou ses stade(s) d ‘évolution selon le thésaurus. INFORMATION : Les échantillons sont préparés et testés par notre sous-traitant le Service de Parasitologie / Mycologie de l’IFB Purpan (CHU de Toulouse) selon les modalités internes (procédures et modes opératoires). Les échantillons sont ensuite acheminés au CTCB pour l’emballage et l’expédition. Tous les essais réalisés par le laboratoire sous-traitant permettent de :

• vérifier l’homogénéité des échantillons au sein d’un même lot, • vérifier la stabilité des échantillons afin de garantir qu’ils ne subiront pas de modifications

significatives tout au long de l’essai, • déterminer les valeurs assignées.

2 - DETERMINATION DE LA NOTATION DU LABORATOIRE Le système de notation qualitatif pour l’échantillon 161 repose sur l’échelle d'évaluation suivante : Score A : Identification de Plasmodium vivax Score B : Identification de P. ovale ou de P. vivax associé à P. ovale Score C : Identification de P. vivax associé à l'espèce falciparum, knowlesi ou malariae Score D : Identification de P. falciparum, knowlesi ou malariae ou de 2 espèces « non-vivax » Le résultat attendu est la valeur transmise par l’expert selon le protocole qu’il a défini. Cette valeur est confirmée après l’exploitation des résultats des adhérents : elle devient alors la valeur assignée.

3 - SCENARIO ET COMMENTAIRE Scenario : M. N. a séjourné 9 mois en Asie du Sud-Est (Thaïlande, Laos, Malaisie, …). De retour depuis 3 semaines, il est fébrile depuis 6 jours (38,5°C). Il ne présente ni nausées, ni vomissements. Matériel envoyé : frottis sanguin coloré au MGG Réponse attendue : Plasmodium vivax, nombreux trophozoïtes âgés, quelques gamétocytes Résultats des participants : 360 participants.

- 314 participants (87.2%) ont identifié P. vivax dont 8 en association avec une autre espèce.

- 46 (12,8%) laboratoires n’ont pas identifié P. vivax sur le frottis

- 37 participants (11,7%) ont identifié P. ovale dont 4 en association avec une autre espèce

- 10 participants ont identifié P. knowlesi (2 en association)

- 4 participants ont identifié P. falciparum (dont 1 association)

- 2 participants ont identifié P. malariae (dont 1 association)



Commentaires : Sur ce frottis, présence de nombreux trophozoïtes âgés, de quelques trophozoïtes jeunes et de quelques gamétocytes. La parasitémie était inférieure à 1% (0.6%). L’identification de l’espèce P. vivax reposait sur :

- La taille des hématies parasitées - La présence de plusieurs stades parasitaires - Les granulations de Schüffner - La forme amiboïde des trophozoïtes - La forme et la taille des gamétocytes - La compatibilité de l’espèce avec la zone géographique visitée.

L’absence de co-infection avec plusieurs espèces a été vérifiée par biologie moléculaire.

Il ne fallait pas confondre avec :

- P. ovale : c’est le diagnostic différentiel le plus difficile en raison de caractères morphologiques partagés avec P. vivax : taille augmentée des hématies parasitées, présence de granulations de Shüffner en particulier. Dans le cas de P. ovale, les hématies sont volontiers frangées, toutefois ce caractère n’est pas exclusif de l’espèce. Il est essentiel de lire le frottis dans la zone où les hématies sont parfaitement en monocouche et bien séparées de manière à éviter une « fausse déformation » des hématies parasitées. Chez le patient présenté, quelques hématies frangées étaient présentes.

- P. malariae : les hématies sont de taille diminuée en général. Elles ne contiennent pas de granulations de Schüffner. Présence de trophozoïtes dits en « bande équatoriale ».

- P. falciparum : taille normale des hématies parasitées. Frottis monomorphe. La présence de plusieurs parasites dans l’hématie et de noyaux « en haltère » est fréquente mais ces caractères ne sont pas exclusifs de l’espèce P. falciparum. Selon les conditions de coloration, des tâches de Maurer (dénombrables) peuvent être mises en évidence. Sur le frottis, la présence de granulations de Schüffner de plus en plus nombreuses avec le vieillissement des trophozoïtes, l’association de multiples stades parasitaires et la forme des gamétocytes permettait d’exclure P. falciparum.

- P. knowlesi : cette espèce est rarement isolée. Elle sévit en Asie du sud-est et particulièrement en Malaisie. Il est important de ne pas la négliger en raison du caractère potentiellement grave de l’infection. Les trophozoïtes jeunes ressemblent à ceux de P. falciparum avec la possibilité de plusieurs parasites par hématie. Les autres stades ressemblent à ceux de P. malariae avec notamment des formes en « bande équatoriale» mais l’hématie parasitée est généralement de taille normale.

Rédaction :

Dr. Sophie CASSAING Expert biologiste Parasitologie / Mycologie

Relecture :

Dr. Xavier IRIART Expert biologiste Parasitologie / Mycologie

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- PS : Ces documents doivent être archivés selon la réglementation en vigueur. Pour tout renseignement : COORDONNATEUR / BIOLOGISTE : Stéphanie ALBAREDE - [email protected] ADMINISTRATIF : Marie-Christine ONDERBEKE, Tél. : 05.34.51.49.80 - Fax : 01.57.67.25.90 - [email protected] TECHNIQUE : Delphine GARIMBAY, Tél. : 05.34.51.49.81 - [email protected] QUALITE : Erick SANCHEZ, Tél. : 05.34.51.49.82 - [email protected] INFORMATIQUE : Philippe GONZALVO - [email protected] Information : Les essais d’homogénéité et de stabilité se sont avérés conformes aux modalités décrites dans la procédure de contrôle. Les documents utilisés pour réaliser ce programme d’intercomparaison (préparation des objets d’essai, détermination des valeurs indicatives et assignées, traitement statistique, …) sont disponibles sur demande auprès du CTCB. L’interprétation de ces résultats ne doit pas se faire isolément et doit être rapprochée de ceux obtenus lors des autres opérations de contrôle effectuées dans le cadre de l’évaluation interne et de l’évaluation externe du laboratoire



4 – FICHE TECHNIQUE : Plasmodium vivax

Plasmodium vivax

Répartition géographique

Asie du Sud-Est majoritairement, Amérique du Sud, Océanie, Afrique de l’Est. Sa présence est également décrite à présent en Afrique de l’Ouest

Incubation Environ 15 jours

Hématies parasitées Hématies jeunes, ovoïdes. Taille augmentée. Nombreuses granulations de Schüffner (le nombre augmente avec le développement du parasite).

Stades parasitaires sur les frottis Tous les stades peuvent être observés dans le sang périphérique

Pluri -parasitisme des hématies Rare mais n’exclut pas le diagnostic.

Morphologie (Obj x100 immersion)

Trophozoïte agé

Trophozoïtes amiboïdes avec granulations de Schüffner

Trophozoïte jeune

Granulations de Schüffner visibles mais peu nombreuses

Gamétocyte

Les gamétocytes remplissent généralement l’hématie, souvent ovalisée.

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