Carcinomes

Triple-négatifs / Basal-like

Carcinomes triples négatifs –basal-like

2001-2003 2004-2005 2005 -2008 2009-2010

Nielsen et al

Identification des BLC par

immunohistochimie et histologie

Description des autres types histo

avec phénotype basal

Carcinomes Basal-like sporadiques

=

Phénocopies des BRCA1

2011-2012

Identification des carcinomes basal-like

à partir des analyses des profils d’expression

de carcinomes canalaires infiltrants

Récepteurs

Oestrogènes -

Récepteurs

Oestrogènes +

Basal-like ERBB2 Luminal A, B, C

Sorlie et al, PNAS 2001

RO +

Sous-types

RO-

Sous-types

Basal-like Her2+/ER-Luminal B Luminal ANormal

-like

Hu et al., BMC Genomics 2006

Caractéristiques du profil d’expression des carcinomes

triple-négatifs et basal-like

Rakha et al JCO 2010

Luminal A 44%; Luminal B 24%; Luminal HER2 6,5%; BLC 9,8%; TN non BCL 8,5%

Fréquence des types moléculaires

définis par immunohistochimie

Luminal A= RO + et /ou RP +, Ki67 <14% ou grade I / II (index mitotique bas)

Luminal B = RO + et /ou RP +, Ki-67 > 14% ou grade II (index mitotique fort) ou III

luminal/HER2 = RO + et/ou RP + et HER2 +

HER2 = RO- /HER2+

Basal-like = RO 0% et RP 0% et HER2 0 et EGFR + et /ou CK5/6 +

“Triple-negative (TN):

tumors that did not express EGFR or CK5/6 were considered = TN non basal”

Kennecke et al JCO 2010

60 à 85 % RO +ve RO-ve

Grade III ou II avec forte prolifération

RO- et RP – (0% de cellules marquées)

ERRB2 -ve

Définition des carcinomes triple négatifs

pas de définition encore reconnue dans la classification de l’OMS

révision en cours de publication

Basal-like

Sporadique ou BRCA1

MetaplasiqueMédullaire

Identification des carcinomes basal-like en pratique clinique

Grade 3

Immunophénotype « BASAL-LIKE /BRCA1 like»

RO

RP TP53

KRT14

ERBB2

KRT5/6

EGFR

KRT8/18 KIT

Sites métastatiques des tumeurs triples

négatives/basales-like

Foulkes et al NEJM 2010

Survie sans métastase des triple négatifs comparée

aux non triple-négatifs.

Dent et al, adapted by Foulkes et al NEJM 2010

Réponse complète à la chimiothéraie néoadjuvante

améliore le pronostic à 3 ans.

Foulkes et al NEJM 2010

Groupe hétérogène sur le plan morphologique15-18% des carcinomes mammaires

Triples négatifs

Basal-like

Sporadique ou BRCA1

MétaplasiquesMédullaires

Adénoïdes

kystiques

t(12;15) (ETV6; NTRK3)

Secrétants

juvéniles

t(6;9) (q22-23; p23-24) (MYB ;NFIB)

Carcinome MEDULLAIRE

Rare < 2% des carcinomes mammaires mais 10% des carcinomes BRCA1

Masse arrondie, lobulée, assez bien limitée

Macroscopie : tumeur molle, beige, grise de contours arrondis, hémorragie et

kystisation nécrotique

Reproductibilité des critères histologiques difficile

Architecture syncitiale >75%

Caractère bien limité complet microscopique

Infiltrat mononucléé modéré à marqué

Atypies nucléaires modérées à marquées

Absence de structure glandulaire

Pas de composante in situ

Meilleur pronostic (radio/chimiosensibilité , stroma lymphoïde)

Breast Cancer Linkage Consortium, Lancet 1997

Ellis IO et al, WHO classification, 2002

Longacre et al, Mod Path , 2006

Carcinome MEDULLAIRE

Bertucci, F. et al. Cancer Res 2006;66:4636-4644

Marquage anti-actine musculaire lisse

Basal-like

Médullaire

Basal-like Médullaire

Stroma actine musculaire lisse positive Stroma très peu abondant AML -

Bertucci, Can Res 2006

Carcinomes in situ de type basal-like = lésions précurseurs des

BLC infiltrants

• 5 à 10% des carcinomes in situ

Livasy, Hum Path 2007

Bryan, Mod Path 2006

Vincent-Salomon, Clin Can Res 2008

CCIS triples négatifs RO-RP-HER2-

Profil génomique

CK5/6+ CK 14-

Basal-like

TP53*

RO-

RP-

HER2 -

Vincent-Salomon, Clin Can Res 2008

Altérations génomiques des carcinomes TN/BL

Guedj et al

Oncogene 2011

Types d’altérations chromosomiques différentes

suivant le type moléculaire

Kwei et al 2010 Mol Oncol

Gains et pertes

Amplicons

Mutations rares :

TP53

PTEN …

Les cancers du sein

"BRCAXs"

80%

Cas

héréditaires

BRCA1 et BRCA2

Prédisposition génétique

mais sans contexte familial évocateur

Cas sporadiques

85% sont triples négatifs

et basal-like

15% sont luminaux B

Altérations génomiques des BRCA1 et basal-like sporadiques

Gène PTEN :

Mutations dans 35% des cas, réarrangements de grande taille

mutations ponctuelles dans les BLC sporadiques

Gène P53Même taux de mutations

BRCA1: 28/28 cas mutés

sporadiques 26/27 cas mutés

Type de mutations différentes:BRCA1: mutations complexes

sporadiques: mutations ponctuelles

Instabilité du chromosome X

Richardson et al ,Cancer cell, 2006

Vincent-Salomon, Ganem, Manié et al, Can Res 2007

Manié et al Can Res 2009

Manié et al en préparation

> 92%

RNA FISH Xist

Profils en puces ADN (SNP6.0 Affymétrix)

Elodie Manié, PhD,

Groupe MH Stern, U830 INSERM

Manuscrit en préparation

1. Profils très similaires

2. Trés nombreuses altérations

0e+00 2e+05 4e+05 6e+05 8e+05 1e+06

-10

0-5

00

50

10

0

Frequency of alterations in 30 sporadic and 18 BRCA1 BLCs

kSNP

Fre

qu

en

cy

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13141516171819202122 23

Altérations génomiques des BRCA1 et basal-like sporadiques

Rôle de la régulation négative de BRCA1 dans les carcinomes

basal-likes sporadiques?

Surexpression du gène ID4 (répresseur de BRCA1)

Méthylation du promoteur de BRCA1

carcinomes médullaires (67%)

carcinomes métaplasiques (63%)

carcinomes basal-like (14%)

Turner et al, Oncogene 2007

Hedenfalk et al, NEJM 2001

Esteller et al, JNCI 2000

Triple negLuminal A

Grade 2

Tumeurs primairesLignées

ERBB2Triple negLuminal B

72ans BRCA1

Nature, April 2010

Séquençage ADN, carcinome basal-like, patiente Africaine Américaine

Tumeur primaire Métastase cérébrale Xénogreffe

Mutations ponctuelles

Dans des gènes

109078

328

51710

225

34Réarrangements génomiques

Gains et pertes

chromosomiques

15597101

20027173

34 34

Données récentes du séquençage massif des TN/BLC

- Pair-end RNA sequencing : Robinson et al Nature 2011,

- Translocations récurrentes impliquant des gènes de la famille NOTCH

- Séquençage de l’ADN, de l’ARN de 104 TN/BLC : Shah et al Nature 2012

- Hétérogénéité des spectres de mutations

- TP53, PI3KCA, PTEN : mutations anciennes dans l’histoire naturelle de la tumeur

= clonales et dominantes

- Seules 36% des mutations identifiées sont retrouvées au niveau de l’ARN

(exprimées)

Cellule souche d’origine des carcinomes basal-like = progéniteur luminal

BRCA1-/- adénomyoépithéliome

BRCA1-/- phénocopie des carcinomes

basal-like

Phénotype des basal-like n’orientent pas vers leur

cellule d’origine.

Toutefois les BLC expriment les CK8/18 !!!

Septembre 2010

Cellule d’origine des carcinomes basal-like

Carcinome apocrine

• Pas de signification pronostique

• Peuvent survenir dans un contexte de mutation constitutionnelle PTEN

• Différenciation apocrine associée aux autres types

– Dans 12 à 57% des canalaires

– Cytoplasme éosinophile granulaire, noyaux centraux nucléolés

• Immunophénotype :

– Bcl2- RO et RP-

– ERBB2 + ( jusqu’à 50% des cas)

– GCDFP15 +

– Récepteur aux Androgènes +

– FOXA1 +

• Entité moléculaire RO- et R aux androgènes + avec gènes communs

aux tumeurs ERBB2 activéesFarmer et al, Oncogene 2005

O’Malley et al, Histopathology 2008

Banneau et al, Br Canc Res 2010

Carcinomes claudines low

• RO négatifs

• Up-régulation

de marqueurs de cellules souches : CD44+/CD24-

de l’EMT : Vimentine, SNAIL, SLUG, TWIST

• Down regulation de E-cadhérine

• Pas de mutation de PI3KCA

• Gènes down régulés très similaires à ceux downrégulés dans les

carcinomes métaplasiques• (protein transport, intracellular transport, transport, male meiosis, and ubiquitin-dependent protein catabolism)

Henessy et al Can Res 2009

Recommendations issues

d’un consensus d’expert international

• Pas de correspondance parfaite entre profil

d’expression et détermination immunohistochimique

• Privilégier l’appellation “Triple-négatifs”

• Faire au minimum

RO, ERBB2 et KI67

- cut-off et évaluation du Ki67 doivent

être encore améliorés

- cut-off Ki67 se situe entre 13 et 17%

(>15% devrait être exact)

M Kaufmann et L Pustzaï, Cancer 2010

Recommandations du International Breast Path Group

Identifier les triples négatifs et les basal-like a des conséquences cliniques

• Pas de thérapie ciblée

• Chimiothérapie cytotoxique indiquée

• Taille pas la même valeur pronostique dans ce groupe.

• Terme “basal-like” pour l’instant inutile dans les CR de pathologie

• Toutefois, suivant la classification de Nielsen et al, valeur pronostique de ce type tumoral

avec cut-off > 1% de cellules +ve en CK5/6 et / ou EGFR

Importance de l’identification de marqueur prédictifs de réponse aux inhibiteurs de PARP +++ ou au cisplatine (essais en cours)

Badve et al Modern Path 2010

Foulkes et al Nat Review Clinical Oncology 2010

SABCS 2010, AACR 2012

Différents sous-types histologiques

MétaplasiqueMédullaire

Carcinome

adénoïde kystiqueCarcinome

sécrétant juvénilet(6;9) (MYB ;NFIB)t(12;15) (ETV6; NTRK3)

Canalaire peu différencié de grade III

Spectre des carcinomes triples négatifs/basal-like

« Basal-like »

grade 3

BRCA1Médullaires

Triples négatifs

à stroma lymphoïde

Adénoïdes

kystiques

Métaplasiques

Triples-négatifs

Sécrétants

juvéniles

Moléculaire

Apocrine

Claudine

-low