AOR 2008 « AMP, Diagnostic prénatal et Diagnostic génétique »

Résumés résultats et publications

Chercheur Sujet de recherche Thème

BAHON-RIEDINGER

Isabelle

Dosage des Auto-anticorps anti-récepteurs des folates chez

les mères d’enfants atteints de Spina Bifida ou

d’Anencéphalie

4

BERTHIAU Denis Enquête d'éthique clinique sur des cas d'assistance

médicale à procréation (AMP) "dérangeants" au plan

éthique

1

BONNEFONT Jean-Paul Amélioration des procédures de diagnostic prénatal des

maladies génétiques résultant de mutations de l’ADN

mitochondrial

4

BOURROUILLOU

Georges

Diagnostic anténatal des remaniements chromosomiques

par CGH array utilisant l’ADN fetal libre circulant dans le

liquide amniotique

4

DOCO-FENZY Martine Extension d’une plate-forme informatique sécurisée pour la

gestion du contrôle de qualité externe rétrospectif et

prospectif en cytogénétique (EPICQE)

4

DOMMERGUES Marc Elaboration d’un indicateur de qualité des images

d’échographie fœtale au deuxième trimestre de la

grossesse. Impact sur les pratiques

4

LE BOUC Yves Evaluation du risque de pathologies liées à l'empreinte

parentale après Assistance Médicale à Procréation (AMP)

3

LEFEVRE Annick La maturation in vitro des ovocytes frais ou cryopréservés :

aspect épigénétique, analyse de la méthylation de l'ADN et

du profil d'acétylation des histones

2

LEPORRIER Nathalie Etude des micro-remaniements chromosomiques chez des

fœtus polymalformés par CGH-array sur ADN fœtal libre du

surnageant de liquide amniotique.

4

LEVY-MOZZICONACCI Génotypage plaquettaire fœtal : Diagnostic prénatal non

invasif sur sang maternel

4

LUCAS Josette Etude rétrospective par CGHarray de 50 cas de clarté

nucale ≥ 4 mm ou d’hygroma kystique du 1er trimestre à

caryotype normal

4

PLOTTON Ingrid Préservation de la fertilité à l'adolescence dans les troubles

de la spermatogenèse : étude prospective

3

SAUVAT Frédérique Greffe d’ovaire non pubère chez la brebis : étude de

l’induction de la puberté, fertilité et risque épigénétique dans

la descendance

4

SCHUBERT Benoît Vitrification des ovocytes : étape pré-clinique en vue d’une

utilisation dans le cadre de la préservation de la fertilité

2

VEKEMANS Michel Etude de patients présentant une avance staturale

syndromique par hybridation comparative sur puce à ADN

4

VIVILLE Stéphane Génétique de l’infertilité masculine 2

Thème de recherche : AMP, diagnostic prénatal et diagnostic génétique

1) Etudes en sciences humaines, économiques et sociales, ainsi qu’en santé

publique portant notamment sur les réflexions éthiques que font surgir les enjeux

nouveaux de ces activités ;

2) Sécurité et qualité des pratiques, notamment dans les technologies

innovantes ;

3) Impact des diverses méthodes en matière de santé ;

4) Amélioration des techniques et méthodes.

Dosage des Auto-anticorps anti-récepteurs des folates chez les mères d’enfants

atteints de Spina Bifida ou d’Anencéphalie BAHON-RIEDINGER Isabelle - CHU Rennes

Résumé :

Les auto-anticorps anti-récepteurs des folates sont associés à la survenue de malformations du tube

neural. Cet examen n’est actuellement pas pratiqué en France.

Objectif 1 : Il s’agit de mettre au point les dosages d’Auto-anticorps anti-récepteurs des folates, examen

indispensable aux processus de prise en charge et d’accompagnement des mères et des couples. Il

faut parfaire la méthode : simplification, comparaison à plusieurs populations témoins dont des femmes

présentant des maladies auto-immunes.

Objectif 2 : Il s’agit de détecter l’évolution des taux d’Auto-anticorps anti-récepteurs des folates chez les

mères d’enfant spina bifida. Nous ignorons tout actuellement de l’apparition, de la persistance et de la

disparition de ces anticorps.

Objectif 3 : Il s’agit de déterminer si l’acide folinique pourrait être utilisé en prévention des risques de

récurrences (ce dérivé n’est pas bloqué par les anticorps) mieux que par l’acide folique actuellement

recommandé. Le statut sérique en folates peut-être simplement associé aux résultats auto-immuns.

Objectif 4 : Il s’agit de réaliser une recherche cohérente sur les causes des malformations du tube

neural, en étudiant le polymorphisme des gènes (et notamment des récepteurs) du métabolisme des

folates chez ces mères et dans ces familles, et ultérieurement étude des gènes du développement

embryonnaire du système nerveux central ; ces études étant conjointes avec le centre maladie rare des

anomalies du développement de l’Ouest.

Résultats attendus : On s’attend à environ 50% de cas positifs chez les patientes au cours ou au

décours d’une grossesse, contre moins de 10% chez les témoins. On ignore si les taux sont stables ou

décroissants dans le temps. Ces données seront croisées avec les données biologiques (dosages

sériques des folates), et les durées écoulées entre grossesse et prélèvement. Méthodologie :

Recrutement d’environ 100 femmes ayant ou ayant eu un enfant avec malformation du tube neural par

les centres de diagnostic prénatal, les centres de génétique et les centres de suivi des enfants ou adultes

atteints de spina bifida. Trois cohortes de témoins : 100 femmes vues dans les mêmes conditions

(grossesses, génétique ou suivi adulte), mais qui n’ont aucun antécédent de malformation du tube

neural ; une trentaine de femmes ayant une maladie avec forte présence d’auto-anticorps (maladie

lupique), et une centaine de témoins donneuses de sang appariées pour l’âge. Les prélèvements

concernent des sérums, pour dosage des folates sanguins, et du sang total pour étudier le

polymorphisme des gènes du métabolisme des folates. La mise au point du dosage des autoanticorps

se fait selon une méthode dérivée de celle décrite par Rothenberg et Ramaekers.

Poster

Enquête d'éthique clinique sur des cas d'assistance médicale à procréation (AMP)

"dérangeants" au plan éthique BERTHIAU Denis - GH Cochin Saint Vincent de Paul

Résumé :

Le Centre d’éthique clinique (Cec) est une structure d’aide et d’accompagnement à la disposition de

ceux, patients comme soignants, qui sont confrontés à une prise de décision médicale « éthiquement »

difficile. Dans ce contexte, il a été saisi à plusieurs reprises à propos de demandes d‘accès à l’assistance

médicale à la procréation (AMP) posant problème au plan éthique aux équipes sollicitées. C’est

pourquoi il s’associe aujourd'hui à des équipes médicales d’une part et des associations de patients

d’autre part, particulièrement concernées, afin de mener une étude plus approfondie sur le sujet.

L’objectif est de bien comprendre comment les couples demandeurs fondent au plan éthique leur

demande d’accès à l’AMP quand celle-ci apparaît à première vue « dérangeante » et quels sont les

arguments qui sous-tendent les décisions médicales prises par les équipes soignantes en réponse à

ces demandes ? Il ne s’agit ni de prendre part aux décisions, ni de porter un jugement au plan éthique

sur les argumentations des uns ou des autres, mais plutôt de mettre en lumière la dimension éthique

de ces argumentations. L’étude consistera en une enquête qualitative prospective, c'est-à-dire en une

série d’entretiens menés par un binôme médecin – non médecin selon la méthode d’éthique clinique

auprès d’un échantillon de couples demandeurs d’AMP (45 au moins au total) et auprès des équipes

qui les reçoivent, alors qu’ils sont dans l’un des trois cas suivants, choisis pour être illustratifs de

situations qui peuvent être considérées à première vue comme éthiquement « dérangeantes » :

1. L’un des membres du couple est âgé (homme âgé de plus de 55 ans et/ou femme âgée de plus de

45 ans)

2. L’un des membres du couple est atteint d’une maladie grave et invalidante (suffisamment pour

engager sa qualité de vie ou son pronostic vital à plus ou moins court terme : cancer, SIDA,

mucoviscidose, etc.) ou il est porteur d’une maladie génétique grave et transmissible

3. Il y a une demande d’accès à une technique interdite en France, en l’occurrence la gestation

pour autrui.

Parallèlement une étude quantitative (non concernée par la demande de subvention) sera menée

auprès des 19 centres agréés pour pratiquer l’AMP en France afin de tenter de préciser la proportion

que représentent ces situations « dérangeantes » par rapport à l’ensemble des demandes faites d‘accès

à l’AMP. Le résultat recherché est de produire une connaissance jamais élaborée sur les fondements

éthiques contenus dans une demande d‘AMP éthiquement « dérangeante ». En miroir, il s’agit de

produire cette même connaissance à propos de l’argumentaire éthique propre que développe l’équipe

sollicitée qui va accéder ou non à la demande. Il est aussi de tenter des saisir des tendances qui seraient

révélatrices de valeurs en changement au plan éthique et mériteraient des investigations plus

approfondies. Ce premier matériau d’enquête devrait ainsi pouvoir contribuer à alimenter utilement le

débat public autour de ces questions.

Publication :

Fournier V, Berthiau D, d’Haussy J, Bataille P. Access to assisted reproductive technologies in France:

the emergence of the patients’ voice. Med Health Care and Philos. 31 mars 2012;16(1):55‑68.

Poster

Amélioration des procédures de diagnostic prénatal des maladies génétiques résultant

de mutations de l’ADN mitochondrial BONNEFONT Jean-Paul - Hop NECKER

Résumé :

La chaîne respiratoire mitochondriale est constituée de 5 complexes enzymatiques dont certaines sous-

unités sont codées par l’ADN mitochondrial (ADNmt). Les maladies résultant d’une mutation de l’ADNmt

(syndromes « NARP », « MELAS », « MERRF »…) revêtent une grande hétérogénéité clinique, liée à

la coexistence de molécules d’ADNmt normales et mutées en proportion variable dans les différents

tissus, cellules, mitochondries d’un individu (hétéroplasmie). Il s’agit d’affections graves, avec atteinte

cérébrale fréquente, risque élevé de transmission à la descendance des femmes « mutées » (hérédité

« maternelle »), et sans traitement efficace à ce jour. De ce fait, les couples à risque sollicitent

fréquemment une procédure de diagnostic préimplantatoire (DPI) ou de diagnostic prénatal (DPN). Du

fait du recrutement important de telles familles à Necker, nous avons pu réaliser 3 DPI de ces affections,

les seuls rapportés à ce jour. Cependant, la lourdeur et le faible taux de succès de cette procédure

amènent les couples à se diriger vers le DPN. Le DPN de ces affections est techniquement délicat,

repose sur une évaluation du taux d’hétéroplasmie sur plusieurs tissus fœtaux à plusieurs termes de la

grossesse, et la valeur prédictive d’un taux d’hétéroplasmie prénatal vis-à-vis du phénotype postnatal

demeure incertaine. De ce fait, nous sommes à notre connaissance le seul groupe susceptible de

proposer un DPN de ces affections. L’objectif de ce projet est d’améliorer la fiabilité et simplifier la

procédure de DPN chez les femmes portant une mutation de l’ADNmt. Nous avons entrepris, après

recueil du consentement parental, de collecter des prélèvements maternels (cellules lymphocytaires, du

tractus urinaire, buccales, follicules pileux, peau), fœtaux dans le cadre d’actes de DPN [placenta (10-

12 SA), amniocytes (14–16 SA et 24-26 SA, sang de cordon et placenta dans sa totalité à la naissance],

et des tissus fœtaux (cerveau, cœur, muscle, foie, reins, pancréas, ovaires à 14-22 SA ) récupérés lors

d’IMG en cas de DPN « défavorable », et ce pour diverses mutation de l’ADNmt (NARP, MELAS,

mutation ND3). Après recueil du consentement des parents à l’étude de leur ADN, de celui des enfants

à naître ou des fœtus après IMG, nous nous proposons : 1/ d’améliorer la précision de notre mode de

mesure du taux d’hétéroplasmie (passage d’une approche PCR-restriction à une approche PCR en

temps réel) ;

2/ d’établir, pour différentes mutations de l’ADNmt, si le taux d’hétéroplasmie :

a/ mesuré sur prélèvement unique de trophoblaste est un reflet fidèle de celui du placenta dans

sa globalité b/ est stable i) à différents termes de la grossesse ii) dans les différents tissus

fœtaux analysés (tissus et cellules uniques de trophoblaste, amniocytes, et autres tissus), ce qui

est suggéré par nos données préliminaires

c/ mesuré en période prénatale est un bon outil prédictif de l’état clinique postnatal (suivi clinique

prolongé et à intervalle régulier des enfants nés après DPN)

3/ d’établir pour différentes mutations de l’ADNmt,

a/ l’existence éventuelle de lésions neurodégénératives apoptotiques dans le cerveau de fœtus

ayant fait l’objet d’une IMG (suggérée par nos données préliminaires)

b/ la relation éventuelle entre l’intensité de ces lésions et le taux d’hétéroplasmie dans le cerveau

fœtal.

Il s’agit d’un projet avec bénéfice direct, dans la mesure où les familles impliquées bénéficieront de

l’amélioration des procédures de DPN générée par ce travail, lors d’une grossesse ultérieure.

Publication :

Monnot S, Gigarel N, Samuels DC, Burlet P, Hesters L, Frydman N, et al. Segregation of mtDNA

throughout human embryofetal development: m.3243A>G as a model system. Human Mutation. janv

2011;32(1):116‑25.

Diagnostic anténatal des remaniements chromosomiques par CGH array utilisant

l’ADN fœtal libre circulant dans le liquide amniotique BOURROUILLOU Georges - CHU TOULOUSE

Résumé :

Ce projet consiste en l’utilisation d’un nouveau matériel, l’ADN fœtal libre issu de surnageant de liquide

amniotique, pour l’hybridation sur CGH array bien connue dans le domaine du diagnostic post natal,

afin de l’appliquer au diagnostic anténatal pour la recherche de perte ou de gain de matériel

chromosomique. Cette étude comporte deux parties :

- Une partie qui définit un protocole d’extraction et d’obtention de cffDNA utilisable en CGH

array. 2 équipes dans la littérature, Miura et al et Lapaire et al ont déjà décrit cette méthode et utilisé

ce substrat pour l’hybridation sur puces à ADN. Le but ici est d’optimiser ces résultats pour définir un

protocole reproductible d’obtention d’un matériel utilisable en pratique hospitalière courante. Nous

nous proposons ensuite de tester 40 cffDNA issus de LA, 20 normaux et 20 anormaux dont les

caryotypes auront préalablement été déterminés, ( analyse rétrospective) sur les puces de CGH array

Cytochip* Blue Gnome* déjà utilisées dans le laboratoire. L’utilisation de ce type d’ADN présente un

grand intérêt clinique, puisque contrairement au caryotype, méthode de référence, il ne nécessite pas

de mise en culture et permet donc l’obtention de résultats beaucoup plus rapides (de 3 semaines à 3

jours). De plus par cette absence de culture, le risque de sélection de clones maternels est très faible.

Elle possède en outre un pouvoir de résolution théorique supérieur à la FISH interphasique, et évite la

restriction de la recherche à des remaniements connus ou fréquents.

- Une deuxième partie permettra la caractérisation des performances de la CGH array en prénatal, qui elle-même peut se diviser en 2 parties :

a) une évaluation de la sensibilité de la méthode, c’est-à-dire la capacité de cette méthode

à dire que le résultat est anormal quand il existe effectivement une anomalie, par les tests en

CGH array. 20 liquides amniotiques seront analysés. Ils seront issu de fœtus porteurs d’une

anomalie chromosomique reconnue par la technique de référence, et recrutés selon les critères

médico-légaux habituels amenant à un diagnostic anténatal. Une confrontation des résultats

obtenus par le caryotype et la CGH array sera réalisée

b) une évaluation de la spécificité de la méthode, c’est-à-dire la capacité qu’a ce test de

dire que le résultat est normal quand il n’existe pas d’anomalie. 20 LA analysés en CGH array

alors qu’aucune anomalie n’a été retrouvée selon les méthodes standards que sont le caryotype

et la FISH seront testés. La possibilité de faux positifs (résultats anormaux donnés par la CGH

array alors qu’ils n’existent pas) sera évaluée par la vérification systématique de toute anomalie

en FISH, par l’utilisation des BACs décrits comme anormaux utilisés comme sonde en FISH.

Au total nous nous proposons donc de réaliser une étude préliminaire visant à établir un protocole

d’utilisation de cffDNA utilisable en CGH array et d’évaluer cette méthode d’analyse au cours de

diagnostics anténatals. Cette étude préliminaire ouvrira les portes à une deuxième étude prospective,

visant à prouver la reproductibilité de la technique, et de mieux définir les critères d’analyse.

Extension d’une plate-forme informatique sécurisée pour la gestion du contrôle de

qualité externe rétrospectif et prospectif en cytogénétique (EPICQE) DOCO-FENZY Martine - Association des Cytogénéticiens de Langue Française

Résumé :

Le but de ce projet est de consolider et de compléter l’outil sécurisé permettant aux cytogénéticiens

Français de réaliser leur contrôle de qualité externe (CQE) dans les meilleures conditions de

confidentialité. Le CQE en cytogénétique s’est développé en France depuis 2005 à l’initiative du GFCH

(Groupe Français de Cytogénétique Hématologique) et de l’ACLF (Association des Cytogénéticiens de

Langue Française). La principale difficulté est liée à la gestion d’un grand nombre d’images à expertiser

du fait du grand nombre de laboratoires. Grâce au support du projet PEGH 2006 par l’Agence de

Biomédecine, une plate-forme informatique a été mise en place pour le CQE rétrospectif, constitutionnel

(pré et post-natal). Cette plate-forme informatique permet aujourd’hui une gestion des dossiers rapide,

fiable, et sécurisée. Elle permet de faire l’économie d’une personne pour la réception et l’anonymisation

des dossiers et d’un local pour leur stockage. Il s’agit d’un support technique indispensable pour le

succès du CQE en ligne, testé en 2007. Nous souhaitons créer une base de données supplémentaire

pour développer un contrôle de qualité prospectif, pour les trois secteurs cytogénétiques : constitutionnel

(pré et post-natal), et onco-hématologique ainsi que pour les techniques de cytogénétique moléculaire

comme l’Hybridation In Situ en Fluorescence (FISH). Le CQE prospectif complémentaire du rétrospectif

permettra aux différents laboratoires de cytogénétique français d’analyser les mêmes images des

mitoses proposées sur le site web. Ils répondront en ligne au sein d’un questionnaire par transfert de

fichiers texte, et d’images de mitoses classées. Les experts examinateurs consulteront les dossiers

après anonymisation et transmettront leurs évaluations sur la même base de données commune. Les

évaluations seront comparées au sein d’un même groupe d’experts, puis entre tous les groupes afin

d’harmoniser les résultats. Les résultats seront mis à disposition directement sur la base de données

en ligne. Le but est donc de créer un réseau où tous les cytogénéticiens interviendront en tant qu’évalués

mais aussi à leur tour en tant qu’experts de ce contrôle. Il en découlera la formation des praticiens avec

l’homogénéisation et l’amélioration de la pratique de la cytogénétique comme l’a montré la première

phase du contrôle rétrospectif en ligne. Ce système pourra être adapté à la fois à la cytogénétique

constitutionnelle pré et post natale, à la cytogénétique hématologique et à la cytogénétique des tumeurs

solides. Il pourra s’étendre dans l’avenir aux techniques innovantes telles que la CGH-array.

Elaboration d’un indicateur de qualité des images d’échographie fœtale au deuxième

trimestre de la grossesse. Impact sur les pratiques DOMMERGUES Marc - AP-HP GH Pitié-Salpêtrière

Résumé :

Etat de la question. Du fait du caractère dynamique de l’échographie fœtale, l’interprétation des images

se fait en temps réel. Il n’est pas possible d’améliorer les performances du dépistage par une double

lecture de chaque examen visant à repérer des anomalies. En revanche, la production de clichés

échographiques standardisés conforme à des schémas de référence serait une voie pour améliorer le

dépistage des malformations fœtales. Objectifs. (1) Elaborer un indicateur appréciant la conformité des

clichés échographiques au schéma du référentiel du Comité National Technique de l’Echographie de

Dépistage Prénatal pour l’échographie du deuxième trimestre de la grossesse. (2) Etudier l’impact sur

les pratiques professionnelles de la restitution aux praticiens des scores de conformité de leurs clichés.

Méthode. (1) Une grille de lecture aboutissant à un score de cotation sera établie empiriquement pour

chacun des 9 clichés recommandés, par consensus entre les investigateurs. Une gamme de clichés

sera cotée par 3 échographistes-cotateurs. La faisabilité sera évaluée notamment par le pourcentage

d’items non cotés, la reproductibilité intra cotateur et inter cotateurs. On sélectionnera ainsi les critères

les plus pertinents pour l’élaboration d’un score de conformité au référentiel. La grille de lecture sera

modifiée pour optimiser la concordance, puis testée sur une gamme de cliché par des cotateurs n’ayant

pas participé à sa mise au point. (2) Grâce à l’outil de cotation des images mis au point, une évaluation

des pratiques sera effectuée à trois niveaux : réseau inter hospitalier de l’Est parisien, territoire de santé

75-2 (12000 naissances), évaluation ouverte sans base géographique via internet. L’impact de la

restitution aux professionnels des scores de conformité de leurs clichés sera évalué. La moitié des

échographistes, tirés au sort, recevront les résultats de leur cotation, l’autre moitié ne recevant pas leurs

résultats. Une deuxième évaluation des clichés sera alors réalisée. Résultats attendus : (1) Disposer

d’une grille de lecture permettant une cotation fidèle des clichés d’échographie de dépistage du

deuxième trimestre. (2) Montrer une amélioration des scores de conformité chez les échographistes

ayant reçu les résultats de l’évaluation de leurs clichés, contrairement aux échographistes n’ayant pas

reçu ces résultats. Perspectives : Contribuer à améliorer la conformité au référentiel des clichés

d’échographie de dépistage du deuxième trimestre de la grossesse par la mise au point d’un outil

d’évaluation fiable, dans la perspective d’augmenter la performance du dépistage échographique des

anomalies fœtales au deuxième trimestre de la grossesse.

Publication :

Jaudi S, Tezenas Du Montcel S, Fries N, Nizard J, Halley Desfontaines V, Dommergues M. Online

evaluation of fetal second-trimester four-chamber view images: a comparison of six evaluation

methods. Ultrasound in Obstetrics & Gynecology. août 2011;38(2):185‑90.

Evaluation du risque de pathologies liées à l'empreinte parentale après Assistance

Médicale à Procréation (APM) LE BOUC Yves - Hôpital Armand TROUSSEAU

Résumé : Objectifs et résultats attendus : L’empreinte parentale concerne différentes régions autosomiques et

joue un rôle majeur dans le développement et la croissance du fœtus. Deux étapes sont importantes

pour sa mise en place : la gamétogénèse (apposition) et la période suivant la fécondation

(maintenance). Sur le plan moléculaire, les marques d’empreinte parentale sont des modifications

épigénétiques du génome, parmi lesquelles la méthylation différentielle des deux allèles parentaux est

un élément clé. Des pathologies bien caractérisées comme les syndromes de Wiedemann-Beckwith

(SWB), de Willi-Prader ou d’Angelman (SA) sont en rapport avec des anomalies génétiques ou

épigénétiques de régions soumises à empreinte parentale (régions 11p15 et 15q11). Récemment,

l’AMP a été incriminée dans des pathologies en rapport avec des anomalies épigénétiques de régions

soumises à empreinte parentale chez l’animal (Large Offspring syndrome) et chez l’homme (SWB et

SA), notamment par notre équipe. Dans ces trois modèles, l’anomalie mise en évidence est un défaut

de méthylation d’un locus maternel normalement méthylé entrainant une dérégulation de l’expression

des gènes situés à proximité. Les procédures d’AMP pourraient donc empêcher l’apposition ou le

maintien des marques d’empreintes maternelles. L’objectif principal de ce projet est de déterminer si

l’AMP comporte un risque accru d’anomalie épigénétique dans les régions soumises à empreinte. Si la

réponse à cette première question est positive (résultat attendu), l’objectif est de pouvoir préciser si

certaines procédures d’AMP sont spécifiquement associées à ce risque et donc de les supprimer ou de

les modifier. Ce projet permettra aussi de constituer une banque d’ADN, ARN et de tissu (placenta) pour

analyse ultérieure d’autres modifications épigénétiques non seulement au niveau des loci soumis à

empreinte mais au niveau d’autres régions génomiques soumises à une régulation épigénétique. Ce

projet est déjà soutenu en partie par un PHRC national (P040440) et a reçu l’avis favorable du CPP de

Cochin. Les crédits supplémentaires permettront d’une part d’augmenter le nombre de régions

génomiques analysées, le type de modifications épigénétiques (acétylation, méthylation des

histones…), le nombre de sites impliqués dans le recrutement et le temps de techniciens de recherche

clinique (TEC) pour assurer la qualité du recueil des données.

Publication :

Le Bouc Y, Rossignol S, Azzi S, Steunou V, Netchine I, Gicquel C. Epigenetics, genomic imprinting

and assisted reproductive technology. Annales d’Endocrinologie. 1 mai 2010;71(3):237‑8.

La maturation in vitro des ovocytes frais ou cryopréservés : aspect épigénétique,

analyse de la méthylation de l'ADN et du profil d'acétylation des histones LEFEVRE Annick – INSERM

Résumé :

Pour augmenter le nombre d’ovocytes mûrs, les protocoles standards de Fécondation In Vitro (FIV) font

appel à une stimulation ovarienne par des doses élevées de gonadotrophines avec le risque pour

certaines patientes (1 à 3%) de développer un syndrome sévère d’hyperstimulation ovarienne. Par

ailleurs certaines femmes ne répondent pas aux protocoles de stimulation. Dans ces cas, le

développement d’un procédé fiable de maturation in vitro d’ovocytes prélevés immatures est une

alternative très attractive aux traitements actuels mis en œuvre dans les centres d’AMP. Par ailleurs,

depuis les avancées considérables dans le traitement des cancers, en particulier chez l’enfant, et

l’amélioration de la survie des patients, la prise en compte des effets secondaires à long terme devient

une nécessité. Or, les effets sur la fertilité sont connus, même pour les enfants. La restauration d’un

potentiel de vie procréative devient alors une question à laquelle il faut tenter d’apporter des solutions.

La vitrification d’ovocytes immatures, susceptibles après décongélation d’être mûris in vitro (MIV) puis

fécondés par ICSI (intracytoplasmic Sperm Injection) constitue une alternative prometteuse à la greffe

d’ovaire cryopréservé, particulièrement dans le cas où une récidive est à craindre. Or, des informations

récentes suggèrent que des pathologies liées à des anomalies de l'empreinte parentale sont plus

fréquentes chez les enfants nés via l’AMP comparés à la population générale. L’ovogenèse est le siège

d’importantes modifications épigénétiques qui permettent à l’ovocyte d’acquérir sa capacité fécondante

et développementale, ainsi qu’une « information maternelle » transmissible au zygote. Que ce soit la

culture in vitro dans le cas de la MIV, ou l’emploi de cryoprotecteurs dans le cas de la cryopréservation,

l’environnement de l’ovocyte est modifié pendant une période où son épigénome est reprogrammé. Le

but de ce projet est, afin d’apprécier le degré de sécurité offert par ces nouvelles technologies, d’évaluer

leur impact au niveau de l’épigénome ovocytaire dans le modèle ovin dans un premier puis chez la

femme. Nous proposons de :

- développer un modèle de maturation in vitro de l’ovocyte ovin

- développer un procédé de vitrification pour cryoconserver les ovocytes ovins au stade VG

- évaluer l’impact de différents facteurs, stimulation hormonale, culture in vitro, cryoprotecteurs, sur

l’épigénome des ovocytes après MIV en analysant 1– la méthylation différentielle de gènes soumis à

empreinte parentale (Igf2r, KCNQ1OT1, H19, Peg1/Mest), par la technique de mutagenèse de l’ADN

par le bisulfite de sodium 2- le profil global d’acétylation des histones par immunofluorescence, dans

les ovocytes prélevés à différents stade de leur différentiation.

- déterminer les conditions d’application à l’ovocyte humain des procédés évalués chez l’ovin.

Publication :

Al-Khtib M, Perret A, Khoueiry R, Ibala-Romdhane S, Blachère T, Greze C, et al. Vitrification at the

germinal vesicle stage does not affect the methylation profile of H19 and KCNQ1OT1 imprinting centers

in human oocytes subsequently matured in vitro. Fertility and Sterility. mai 2011;95(6):1955‑60.

Etude des micro-remaniements chromosomiques chez des fœtus polymalformés par

CGH-array sur ADN fœtal libre du surnageant de liquide amniotique LEPORRIER Nathalie - CHU CAEN

«» Résumé : En diagnostic prénatal un caryotype fœtal pratiqué en raison d’un signe d’appel échographique décèle

12,8% d’anomalies chromosomiques. Ce taux est sous estimé car le caryotype standard ne décèle pas

les micro-remaniements responsables d’une partie des syndromes malformatifs. L’application de la

CGH (comparative genomic hybridization) sur une puce (array) décrite par Solinas Toldo en 1997 paraît

la plus appropriée des techniques pour les mettre en évidence. Elle est utilisée actuellement en

cytogénétique clinique, notamment pour identifier la localisation et la taille de réarrangements

subtélomériques et sub-microscopiques chez des sujets avec retards mentaux idiopathiques, mais peu

encore en prénatal car elle doit être interprétée avec prudence. Elle nécessite une validation par une

autre technique, FISH ou QMPSF (quantitative multiplex PCR of short fluorescent) ce qui en prénatal

rallonge encore le délai de réponse surtout si elle est pratiquée sur l’ADN extrait de cellules cultivées.

Appliquer la CGH-array sur l’ADN des cellules cultivées de liquide amniotique dont le caryotype est

normal améliorerait la détection d’anomalies chromosomiques déséquilibrées en décelant les anomalies

sub-microscopiques mais la faisabilité de cette procédure est souvent incompatible avec le délai requis

pour un diagnostic anténatal. Très récemment, Lapaire en 2007 a montré qu’il est possible d’identifier

les anomalies chromosomiques sur de l’ADN fœtal libre par CGH-array à partir d’un volume de 10 ml

de surnageant de liquide amniotique frais ou congelé à –80°C. Ce procédé se prête donc à la détection

d’anomalies chromosomiques sans dépendre d’une culture de cellules. Il est donc particulièrement bien

approprié au diagnostic prénatal du fait du gain de temps qu’il permet. En outre, si elle est validée dans

la mise en évidence de micro-remaniements dans les syndromes polymalformatifs, cela permettrait de

faire des recherches d’anomalies chromosomiques sur des liquides amniotiques du troisième trimestre

de grossesse, quand la culture n’est plus réalisable. Le premier objectif de notre travail est de confirmer

que la CGH-array utilisée en complément de la cytogénétique classique sur des fœtus polymalformés

augmente le taux de détection des anomalies de 10% et de tenter d’évaluer la responsabilité de ces

anomalies dans la genèse des malformations en confrontant l’ADN fœtal aux ADN parentaux. Ce travail

sera réalisé à partir de 45 ADN issus d’amniocytes congelés remis en culture, provenant de grossesses

avec un fœtus polymalformé et un caryotype normal. Ces ADN sont actuellement étudiés par la

technique MLPA dans le cadre d’un appel d’offre interne. Le second objectif est d’appliquer la technique

CGH-array sur de l’ADN fœtal libre du surnageant du liquide amniotique afin d’identifier plus rapidement,

sans attendre la culture cellulaire, les micro-remaniements dans le cadre de syndromes malformatifs

décelés par échographie. Cette étude sera réalisée avec les deux ADN, fœtal libre et cellulaire, du

même liquide amniotique correspondant à 30 grossesses avec fœtus polymalformé et caryotype normal.

Par ailleurs, l’ADN cellulaire et fœtal libre (surnageant congelé à –80°) de toutes les anomalies

chromosomiques retrouvées après caryotype, seront testés sur les puces. Ceci permettra de valider la

technique CGHarray pour les anomalies habituelles.

Publication :

Gruchy N, Decamp M, Richard N, Jeanne-Pasquier C, Benoist G, Mittre H, et al. Array CGH analysis in

high-risk pregnancies: comparing DNA from cultured cells and cell-free fetal DNA: Array-CGH in

prenatal diagnosis using cell free fetal DNA. Prenatal Diagnosis. avr 2012;32(4):383‑8.

Poster

Génotypage plaquettaire fœtal : Diagnostic prénatal non invasif sur sang maternel LEVY-MOZZICONACCI – APHM

Résumé :

La thrombopénie néonatale par allo-immunisation foetomaternelle (TNAF) est liée à une immunisation

maternelle contre les plaquettes fœtales portant des antigènes d’origine paternelle non présents chez

la mère. L’incidence de cette pathologie est d’environ 1 sur 800 à 1000 naissances. Les formes les plus

graves s’associent à un risque majeur d’hémorragie cérébrale (20% à 25% des cas) pouvant entraîner

le décès de l’enfant (15%) ou laisser des séquelles neurologiques graves (15 à 30%). Cette pathologie

peut se manifester dés la 20ème semaine de grossesse par la découverte d’une dilatation ventriculaire

cérébrale majeure voire d’une porencéphalie à l’échographie reflet d’une hémorragie cérébrale. Les

alloanticorps responsables de l’atteinte fœtale sont dirigés contre les alloantigènes plaquettaires : ce

sont les antigènes des systèmes HPA (human platelet antigen). Les corrélations génotype-phénotype

ont été réalisées pour 22 des 24 alloantigènes et montrent que le polymorphisme antigénique résulte

de la substitution d’une base au niveau du gène codant pour la glycoprotéine ce qui correspond à la

présence d’un SNP (single-nucleotide polymorphism) au niveau de la séquence du gène. Nous nous

proposons de développer le diagnostic non invasif du génotypage plaquettaire fœtal (HPA-1, HPA-3 et

HPA-5) à partir du sang maternel. En effet, la seule approche actuelle pour identifier le génotypage

plaquettaire fœtal nécessite un geste invasif inutile depuis le développement de l’analyse de l’ADN fœtal

dans le sang maternel. Pour cela, différentes étapes sont envisagées : Dessin (« design ») des outils

moléculaires de sondes LNA utilisables en PCR quantitative en temps réel, création de gammes

plasmidiques d’étalonnage incluant le SNP d’intérêt permettant de tester les outils dans un contexte de

chimérisme, analyse des plasmas maternels de patientes présentant un risque prouvé ou suspecté

d’allo-immunisation plaquettaire fœto-maternelle, La collaboration étroite avec le centre pluridisciplinaire

de diagnostic prénatal (CPDPN) de l’Hôpital Nord et l’EFS PACA permettra le recrutement et l’analyse

phénotypique et moléculaire des patientes enceintes. Environ 60 patientes seront recrutées pour ce

projet

Etude rétrospective par CGHarray de 50 cas de clarté nucale ≥ 4 mm ou d’hygroma

kystique du 1er trimestre à caryotype normal LUCAS Josette - CHU RENNES

Résumé :

La mesure de la clarté nucale à l’échographie de 12 SA représente un outil majeur de diagnostic

cytogénétique prénatale. Une anomalie chromosomique est présente dans plus de 50% des hygromas

kystiques. Dans l’autre moitié des cas, l’analyse cytogénétique conventionnelle (caryotype) et en

hybridation in situ en fluo (fISH) n’indique pas la présence d’une anomalie. Or ce groupe de patients

représente une population à risque élevé d’anomalie chromosomique submicroscopique accessible à

la méthode des puces à ADN. Cette fréquence peut être estimée entre 10 et 15% compte tenu de

l’importance du nombre des anomalies détectées et du taux d’issues défavorables, même si le caryotype

est normal. Notre objectif est d’analyser rétrospectivement 50 cas d’hyperclarté nucale avec caryotype

normal, sur 24 mois, en étudiant l’ADN de fœtus sur puce oligonucléotidique 4x44K Agilent, afin

d’évaluer le pourcentage de cas pour lesquels un déséquilibre submicroscopique peut être mis en

évidence. Ces informations seront utiles pour informer les couples confrontés durant une grossesse à

un problème de clarté nucale augmentée ainsi que pour le conseil génétique lors des grossesses

ultérieures.

Préservation de la fertilité à l'adolescence dans les troubles de la spermatogenèse :

étude prospective PLOTTON Ingrid - CHU LYON

Résumé :

L’objectif est de développer des mesures d’épargne de la fertilité dans les dysgénésies testiculaires

diagnostiquées en pédiatrie et aboutissant à une stérilité par trouble de spermatogenèse à l’âge adulte.

Certaines observations suggèrent que la spermatogenèse se mettrait en place, au moins partiellement,

à la puberté, puis régresserait avant l’âge adulte. Ceci laisse l’espoir de pouvoir disposer de quelques

spermatozoïdes si on les recherche au bon moment, entre la mise en place de la spermatogenèse et

sa régression. Ces spermatozoïdes pourront être cryoconservés en vue d’une microinjection

intraovocytaire lorsque le patient aura un désir de paternité. On ne sait actuellement reconnaître ni les

cas ni le moment du développement pour lesquels des spermatozoïdes seront disponibles. Notre projet

consiste à recruter des adolescents (15-18 ans) suivis en pédiatrie pour une dysgénésie testiculaire,

soit dans le cadre du syndrome de Klinefelter (47XXY) situation fréquente et homogène soit dans

d’autres dysgénésies testiculaires repérées en raison d’antécédents de cryptorchidie bilatérale ou

d’ambiguïté sexuelle ou encore d’anomalie gonosomique au caryotype. Après estimation de leur

maturité pour la réalisation de spermogrammes par la psychologue du CECOS de Lyon, 3

spermogrammes espacés sur la période de la mise en place de la spermatogenèse (18 mois) seront

réalisés avec cryoconservation des spermatozoïdes si possible. En cas d’azoospermie, le patient sera

inclus dans une étude comparant le pourcentage de cas où la biopsie testiculaire permet d’isoler des

spermatozoïdes, chez les adolescents versus chez les adultes, présentant la même pathologie

constitutionnelle induisant un trouble de la spermatogenèse, mais pris en charge en médecine de la

reproduction pour infertilité. En cas de présence de spermatozoïdes, ceux-ci seront cryoconservés.

Notre protocole permettra :

1) la comparaison du pourcentage de biopsie permettant la cryoconservation de spermatozoïdes

entre les 2 groupes de patients azoospermiques par dysgénésie testiculaire, « adolescents » versus «

adultes ». Les comparaisons seront stratifiées sur les sous-groupes « Klinefelter » et « Autres

dysgénésie testiculaires »,

2) la recherche de facteurs pronostiques de la présence de spermatozoïdes dans la biopsie

testiculaire, les marqueurs des fonctions testiculaires (volume et situation des testicules, FSH, Inhibine

B, AMH, LH, Testostérone, Testostérone biodisponible, SHBG, Estradiol) seront comparés chez les

sujets azoospermiques ayant des biopsies «avec » versus « sans » spermatozoïdes testiculaires, dans

les groupes «adolescents» et «adultes»

3) la recherche de facteurs pronostics de la possibilité de réalisation de spermogrammes et des

résultats des spermogrammes lors de la phase de préinclusion chez les adolescents

4) la recherche de marqueurs précoces prédictifs de la présence ou non de spermatozoïdes dans

le sperme ou dans les biopsies testiculaires dans les données rétrospectives des dossiers du suivi

pédiatrique.

5) L’étude du transcriptome des cellules de Sertoli des biopsies des azoospermies pour

comprendre la physiopathologie des troubles de la spermatogenèse et envisager des mesures

thérapeutiques s’appuyant sur la correction des dysfonctions sertoliennes.

Publication :

Plotton I, Brosse A, Lejeune H. [Is it useful to modify the care of Klinefelter’s syndrome to improve the

chances of paternity?]. Ann Endocrinol (Paris). déc 2010;71(6):494‑504.

Greffe d’ovaire non pubère chez la brebis : étude de l’induction de la puberté, fertilité et

risque épigénétique dans la descendance SAUVAT Frédérique -INSERM

Résumé :

Le but de ce projet est l’étude des possibilités de restauration de la fonction ovarienne après

cryoconservation de cortex ovariens prélevés avant la puberté (définissant la notion de cortex

immature), chez la brebis. En particulier, cette étude porte sur la possibilité d’instauration d’une puberté

spontanée après greffe chez l’animal non-pubère, la restauration d’une activité hormonale cyclique et

la possibilité de restauration de la fertilité. Le deuxième volet de ce projet est l’évaluation d’anomalies

épigénétiques dans la descendance, liées à une anomalie de la mise en place de l’empreinte parentale

au cours de cette technique (manipulation des ovaires, cryoconservation et réimplantation…). Chez la

brebis adulte, les techniques de cryoconservation ainsi que les possibilités de gestation ont déjà été

rapportées. A l’inverse, aucune publication ne fait état du devenir de cortex ovarien cryoconservé avant

la puberté. Cette étude chez la brebis est réalisée parallèlement à une étude similaire dans un modèle

murin. Ce projet a débuté en 2006 et a permis la mise au point du modèle chirurgical (prélèvement puis

réimplantation orthotopique non vascularisée, chez des animaux non pubères), une évaluation

préliminaire de l’initiation d’une fonction endocrine (déclenchement d’une puberté spontanée quand la

réimplantation a lieu chez un animal non pubère) ou reprise d’une activité hormonale cyclique quand la

réimplantation a lieu chez un animal pubère, ainsi que l’obtention de gestation au cours de la première

saison sexuelle. Les résultats attendus pour la poursuite de ce projet porte, chez ces 12 brebis déjà

opérées :

- Analyse de la fonction endocrine par des dosages sérique mensuels de progestérone et oestradiol

comme reflet de la fonction ovarienne et des dosages de FSH comme reflet de la réserve ovarienne.

Le but de ces dosages est double : confirmer les résultats préliminaires sur les possibilités

d’instauration d’une puberté spontanée et de restauration d’une activité cyclique mais également

évaluer la durée de vie des greffons.

- Etude des possibilités de fertilité à long terme et en fonction des groupes d’étude.

- Etude des greffons après épuisement (défini par un taux de FSH élevé et arrêt des gestations) en

immunohistochimie ainsi qu’une étude de la néovascularisation (en comparant les brebis ayant eu ou

non des gestations)

- Etude épigénétique de Mest/Peg1 et Igf2R sur l’ADN génomique des descendants et celui des

ovocytes recueillis au niveau des greffons. Le but est d’évaluer les risques d’anomalies sur des gènes

soumis à empreinte liés à la manipulation du cortex ovarien comme cela a été montré chez l’homme

après des techniques d’assistance médicale à la procréation (surincidence de syndrome de

Wiedemann- Beckwith).

Ce projet a pour but la validation de la cryoconservation de cortex ovarien avant la puberté et surtout

les modalités de la réimplantation ainsi que les risques pour la descendance.

Publication

Sauvat F, Bouilly J, Capito C, Lefevre A, Blachere T, Borenstein N, et al. Ovarian function is restored

after grafting of cryopreserved immature ovary in ewes. The FASEB Journal. 1 avr 2013;27(4):1511‑8.

Vitrification des ovocytes : étape préclinique en vue d’une utilisation dans le cadre de

la préservation de la fertilité SCHUBERT Benoît - AP-HP GH Pitié-Salpêtrière

Résumé :

La vitrification ovocytaire est une technique d’assistance médicale à la procréation récente qui peut

constituer une nouvelle option parmi les techniques de préservation de la fertilité de la femme avant un

traitement stérilisant. Les données actuelles de la littérature tendent à montrer de meilleurs taux de

succès qu’avec la technique de référence : la congélation lente. Actuellement, 43 enfants sont nés après

fécondation in vitro d’ovocytes vitrifiés. Le but de notre étude est d’évaluer la vitrification d’ovocytes

matures et immatures avec 2 systèmes de vitrification ovocytaire aseptique disponibles. Nous utiliserons

le modèle souris pour cette étape pré-clinique. Les ovocytes frais ou décongelés feront l’objet d’une

analyse morphologique (analyse microscopique, coloration vitale, coloration du fuseau méiotique et des

chromosomes) et d’une analyse fonctionnelle (fécondation in vitro). Nous pourrons ainsi évaluer le

comportement des ovocytes matures et immatures avec 2 systèmes de vitrification aseptique en

comparant leurs résultats entre eux et avec ceux de la congélation lente. Ainsi ces résultats nous

permettront de guider notre attitude thérapeutique pour offrir à nos patientes une technique efficace qui

réponde aux règles de sécurité sanitaire les plus exigeantes.

Projet annulé.

Etude de patients présentant une avance staturale syndromique par hybridation

comparative sur puce à ADN VEKEMANS Michel - AP-HP Hôpital Necker Enfants Malades

Résumé :

De nombreux syndromes comportent une avance staturale (AS). Si les progrès de la génétique

moléculaire ont permis d'identifier les bases moléculaires de certaines de ces conditions, de nombreux

cas restent encore inexpliqués. L'observation d'anomalies chromosomiques associées à une AS

syndromique suggère que certains de ces syndromes pourraient être la conséquence d'anomalies

chromosomiques cryptiques.L'hybridation génomique comparative sur puces à ADN représente une

avancée majeure qui permet l'exploration globale des chromosomes humains avec une résolution 10

fois supérieure à celle des techniques de cytogénétique classique. Notre projet a donc pour objectif

d'évaluer par cette technique la fréquence et la nature des remaniements chromosomiques dans une

population de patients présentant une avance staturale syndromique puis d'utiliser ces connaissances

pour identifier de nouvelles entités cliniques associées à une AS et de nouveaux gènes responsables

d’anomalies de la croissance. Depuis plusieurs années, et en collaboration avec l'association L'Eveil

syndrome de Sotos, nous avons recueilli les prélèvements de plus de 160 patients présentant une AS

syndromique rentrant dans un cadre connu (Sotos, Weaver, Marshall-Smith, etc.) ou non. Malgré des

explorations cliniques, biochimiques et moléculaires extensives, dans plus de 50% des cas, la cause de

l'anomalie de croissance demeure inexpliquée. Parallèlement, l'équipe du Dr L. COLLEAUX a

développé dans son laboratoire une plateforme d'analyse par CGH-array. Ses travaux précédents

montrent que l'utilisation d'une puce «pan-génome» avec une résolution de l'ordre de 1 Mb, conduit à

l'identification d'un remaniement chromosomique pathogène chez 15% de patients retardés mentaux

syndromiques. Ces résultats attestent de la puissance d'analyse de cette nouvelle technique et de son

intérêt potentiel pour l'étude de cohorte de patients. Notre projet vise donc à analyser par CGH-array 80

patients présentant un syndrome d'AS idiopathique avec trois objectifs principaux :

1) Caractériser la nature et la fréquence des anomalies chromosomiques associées à une AS. Ce travail

sera réalisé en utilisant une puce commercialisée par la société Affymetrix® et permettant

l'exploration de l'ensemble du génome avec une résolution d’environ 40 kb.

2) Définir de nouvelles entités nosologiques

3) Etablir des corrélations génotypes/phénotypes pour identifier de nouveaux gènes impliqués dans des

syndromes d'AS.

Les résultats attendus sont une meilleure caractérisation des anomalies chromosomiques responsables

d'une avance staturale. Outre l'importance de ces résultats pour le diagnostic, la caractérisation des

anomalies moléculaires à l'origine de ces phénotypes sera d'un réel bénéfice pour les patients et leur

famille. En effet, le diagnostic moléculaire fournit les éléments essentiels pour proposer un conseil

génétique aux familles concernées et permet d'adapter la prise en charge en particulier sur le plan du

risque tumoral. De plus, l'étude clinique détaillée de ces anomalies devrait permettre de définir de

nouvelles entités nosologiques et d’aider la démarche diagnostique pour les futurs patients. Enfin, les

remaniements ainsi identifiés seront un outil de choix pour caractériser par une approche de type «gène

candidat» de nouveaux gènes dont le dysfonctionnement serait à l’origine d’anomalies de la croissance.

Publication :

Malan V, Chevallier S, Soler G, Coubes C, Lacombe D, Pasquier L, et al. Array-based comparative

genomic hybridization identifies a high frequency of copy number variations in patients with syndromic

overgrowth. European Journal of Human Genetics. 2010;18(2):227–232.

Génétique de l’infertilité masculine

VIVILLE Stéphane – IGBMC

Résumé :

Actuellement, environ 12% des couples sont confrontés à une infertilité. Dans la moitié des cas, la cause

est masculine. Il peut s'agir d'une anomalie quantitative ou qualitative du sperme comme une anomalie

morphologique des spermatozoïdes tératozoospermie), ou encore la combinaison de plusieurs

anomalies. La globozoospermie est une tératozoospermie rare mais sévère caractérisée par une

absence d'acrosome spermatique dont la tête apparaît globuleuse. Cette anomalie peut être observée

de façon homogène sur tous les spermatozoïdes ou seulement sur une proportion variable (20 à 90%)

d'entre eux. La globozoospermie résulte d'un trouble de la spermatogenèse. L'étiologie en est toujours

mal connue même si une contribution génétique est avancée à partir de la publication de plusieurs

cases report familiaux ainsi qu’à partir de 3 modèles murins impliquant les gènes Csnk2A2, Hrb et

GOPC7-9. Récemment, l'exploration par puces à ADN d'une famille consanguine comprenant 3 frères

globozoospermiques et 3 frères fertiles nous a permis la mise en évidence d'une mutation homozygote

dans le gène SPATA16. SPATA16 n'est exprimé que dans le testicule et la mutation mène à une

infertilité isolée en dehors de tout syndrome.

Dans cette continuité, nous envisageons des études ultérieures à partir d'autres familles afin d'isoler

d'autres acteurs de la formation de l'acrosome. Ceci permettra dans un premier temps d'affiner la

dissection des mécanismes impliqués dans la formation d'un organite cellulaire aussi spécialisé que

l'acrosome. Dans un deuxième temps, la grande spécificité d'expression tissulaire comme de fonction

de SPATA 16 ou de ses partenaires impliqués dans la formation de l'acrosome pourrait en faire

d'excellentes cibles pour des contraceptifs chimiques masculins.

Publications :

1. ElInati E, Kuentz P, Redin C, Jaber S, Vanden Meerschaut F, Makarian J, et al. Globozoospermia is

mainly due to DPY19L2 deletion via non-allelic homologous recombination involving two

recombination hotspots. Human Molecular Genetics. 15 août 2012;21(16):3695‑702.

2. El Inati E, Muller J, Viville S. Autosomal mutations and human spermatogenic failure. Biochimica et

Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease. déc 2012;1822(12):1873‑9.

3. Koscinski I, ElInati E, Fossard C, Redin C, Muller J, Velez de la Calle J, et al. DPY19L2 Deletion as

a Major Cause of Globozoospermia. The American Journal of Human Genetics. mars

2011;88(3):344‑50.

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