Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité...
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Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles
(évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)
Laboratoire Rosier Davenne Domaine Saint Perret
789 Avenue Sainte Catherine 84140 Avignon - Montfavet
Email : [email protected] Tel : 04 90 22 22 22 Fax : 04 90 22 22 24
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Introduction
L’objectif de cette étude est d’apprécier le pouvoir inhibiteur de certaines Huiles Essentielles sur l’enzyme 5-lipoxygénase, qui contrôle la formation des leucotriènes, médiateurs de l’inflammation.
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Sommaire PRINCIPE p.3 METHODE p.6 RESULTATS p.8
Résultats des Tests p.10
Graphique Récapitulatif p.11
CONCLUSION p.12 ANNEXE p.15
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PRINCIPE
Cédrol cristal
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La 5-lipoxygénase est une enzyme présente dans les cellules de l’épiderme et dont l’activité est la première étape de la transformation de l’acide arachidonique en leucotriènes pro-inflammatoires.
Mécanisme de l’inflammation de la peau :
Les leucotriènes sont des molécules biologiquement actives qui jouent un rôle très important dans la réaction inflammatoire.
Membranephospholipidique Acide Arachidonique PGE2
LTB4 Pro-inflammatoire
Pro-inflammatoirePLA2 2 COX
5 LOX
PLA2 : Phospholipase A2PGE2 : Prostaglandine E2LTB4 : Leucotriène B4LTB5 : Leucotriène B5EPA : Acide Eicosapentaénoique
Acide Linoléique
Acide Stéaridonique
EPA5 LOX
LTB5
LOX : lipoxygénaseCOX : cyclo-oxygénase
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L’étude permet donc de tester des substances inhibant la production de leucotriènes, mettant ainsi en évidence des actifs anti-inflammatoires potentiels.
Le principe de la technique est de produire in-vitro la réaction enzymatique naturelle en mettant l’enzyme en présence de son substrat dans les conditions nécessaires.
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METHODE Juniperus oxycedrus L.
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On suit en continu pendant 10 minutes l’apparition du produit de la réaction par spectrométrie UV à 233 nm, et l’on compare la vitesse initiale de la réaction enzymatique sans ajout et avec ajout de quantités croissantes de la substance à évaluer.
L’inhibition se traduit par diminution de la vitesse de réaction et l’on détermine la concentration (en ppm) qui correspond à une inhibition de 50% de la vitesse initiale (IC50).
Le protocole est décrit en Annexe.
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RESULTATS
Pinus halepensis
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Les meilleurs résultats concernant les Huiles Essentielles sont répertoriés dans le tableau ci-après.
A noter que la Camomille Romaine dont l’effet anti-inflammatoire est reconnu, n’a aucun effet d’inhibition de la 5-lipoxygénase.
Activité relative :
IC50 = 5 ppm : produit de référence (NDGA) 5 ≤ IC50 < 10 ppm : excellente inhibition
10 ≤ IC50 < 25 ppm : très bonne inhibition
25 ≤ IC50 < 50 ppm : bonne inhibition
50 ≤ IC50 < 100 ppm : activité négligeable
IC50 > 100 ppm : pas d’activité
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Résultats des Tests Matières Premières IC50 (ppm) Activité
NDGA (produit de référence) Acide Nor Déhydro Guaïérétique
5 Référence
α Bisabolol Naturel 15 Très bonne inhibition
Composition E1 LRD 17 Très bonne inhibition
HE Bois de Cadier LRD 20-25 Très bonne inhibition
Cédrol Naturel LRD 30 Bonne inhibition
HE Pin d’Alep LRD 30-35 Bonne inhibition
HE Camomille Romaine France 100 Pas d’inhibition
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Graphique Récapitulatif
0 5 10 15 20 25 30 35IC50 (ppm)
NDGA
alpha Bisabolol
Composition E1
HE Bois de Cadier
Cédrol
HE Pin d'Alep
Référence
augmentation de l’inhibition
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CONCLUSION
Juniperus oxycedrus L.
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L’enzyme 5-lipoxygénase catalyse la formation de leucotriènes, qui sont de puissants médiateurs impliqués dans des processus inflammatoires spécifiques (psoriasis) ou des réactions allergiques, par régulation de l’activité des cellules de Langerhans.
L’utilisation de certaines huiles essentielles permet donc de réduire la production de leucotriènes et ainsi de mettre en évidence des actifs anti-inflammatoires potentiels.
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L’ensemble des Huiles essentielles étudiées lors de ces tests sont disponibles au Laboratoire Rosier Davenne.
Le laboratoire vous propose aussi la conception de synergies aromatiques améliorant les propriétés apaisantes de vos produits cosmétiques.
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ANNEXE Protocole Expérimental
Dans des cuves en Quartz, on ajoute successivement : 10 µl de la solution à tester (pour le témoin : 10 µl du
solvant utilisé pour solubiliser le produit à tester) 2,8 ml de tampon phosphate 0,0022M (Na2HPO4 :
1,79g, KH2PO4 : 1,36g, NaCl : 7,02g, H2O qsp 1L) 1 unité d’enzyme 5-lipoxygénase Agiter doucement 175 µl de solution « blanc » d’acide arachidonique dans
la cuve de référence (100 µl d’éthanol 95%, 100 µl NaOH 0,1M, 800ul H2O)
175 µl de solution d’acide arachidonique dans la cuve de réaction (concentration finale 400 µM) (2 mg d’acide arachidonique, 100 µl d’éthanol 95%, 100 µl NaOH 0,1M, 800 µl H2O.)
Lecture à 233 nm pendant 10 minutes.
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