Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité...

16
Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase) Laboratoire Rosier Davenne Domaine Saint Perret 789 Avenue Sainte Catherine 84140 Avignon - Montfavet Email : [email protected] Tel : 04 90 22 22 22 Fax : 04 90 22 22 24 Laboratoire Rosier Davenne

Transcript of Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité...

Page 1: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles

(évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

Laboratoire Rosier Davenne Domaine Saint Perret

789 Avenue Sainte Catherine 84140 Avignon - Montfavet

Email : [email protected] Tel : 04 90 22 22 22 Fax : 04 90 22 22 24

Laboratoire Rosier Davenne

Page 2: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

1

Introduction

L’objectif de cette étude est d’apprécier le pouvoir inhibiteur de certaines Huiles Essentielles sur l’enzyme 5-lipoxygénase, qui contrôle la formation des leucotriènes, médiateurs de l’inflammation.

Laboratoire Rosier Davenne

Page 3: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

2

Sommaire   PRINCIPE p.3   METHODE p.6   RESULTATS p.8

  Résultats des Tests p.10

  Graphique Récapitulatif p.11

  CONCLUSION p.12   ANNEXE p.15

Laboratoire Rosier Davenne

Page 4: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

3

PRINCIPE

Cédrol cristal

Laboratoire Rosier Davenne

Page 5: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

4

  La 5-lipoxygénase est une enzyme présente dans les cellules de l’épiderme et dont l’activité est la première étape de la transformation de l’acide arachidonique en leucotriènes pro-inflammatoires.

  Mécanisme de l’inflammation de la peau :

  Les leucotriènes sont des molécules biologiquement actives qui jouent un rôle très important dans la réaction inflammatoire.

Membranephospholipidique Acide Arachidonique PGE2

LTB4 Pro-inflammatoire

Pro-inflammatoirePLA2 2 COX

5 LOX

PLA2 : Phospholipase A2PGE2 : Prostaglandine E2LTB4 : Leucotriène B4LTB5 : Leucotriène B5EPA : Acide Eicosapentaénoique

Acide Linoléique

Acide Stéaridonique

EPA5 LOX

LTB5

LOX : lipoxygénaseCOX : cyclo-oxygénase

Laboratoire Rosier Davenne

Page 6: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

5

  L’étude permet donc de tester des substances inhibant la production de leucotriènes, mettant ainsi en évidence des actifs anti-inflammatoires potentiels.

  Le principe de la technique est de produire in-vitro la réaction enzymatique naturelle en mettant l’enzyme en présence de son substrat dans les conditions nécessaires.

Laboratoire Rosier Davenne

Page 7: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

6

METHODE Juniperus oxycedrus L.

Laboratoire Rosier Davenne

Page 8: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

7

  On suit en continu pendant 10 minutes l’apparition du produit de la réaction par spectrométrie UV à 233 nm, et l’on compare la vitesse initiale de la réaction enzymatique sans ajout et avec ajout de quantités croissantes de la substance à évaluer.

  L’inhibition se traduit par diminution de la vitesse de réaction et l’on détermine la concentration (en ppm) qui correspond à une inhibition de 50% de la vitesse initiale (IC50).

  Le protocole est décrit en Annexe.

Laboratoire Rosier Davenne

Page 9: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

8

RESULTATS

Pinus halepensis

Laboratoire Rosier Davenne

Page 10: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

9

  Les meilleurs résultats concernant les Huiles Essentielles sont répertoriés dans le tableau ci-après.

  A noter que la Camomille Romaine dont l’effet anti-inflammatoire est reconnu, n’a aucun effet d’inhibition de la 5-lipoxygénase.

  Activité relative :

IC50 = 5 ppm : produit de référence (NDGA) 5 ≤ IC50 < 10 ppm : excellente inhibition

10 ≤ IC50 < 25 ppm : très bonne inhibition

25 ≤ IC50 < 50 ppm : bonne inhibition

50 ≤ IC50 < 100 ppm : activité négligeable

IC50 > 100 ppm : pas d’activité

Laboratoire Rosier Davenne

Page 11: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

10

Résultats des Tests Matières Premières IC50 (ppm) Activité

NDGA (produit de référence) Acide Nor Déhydro Guaïérétique

5 Référence

α Bisabolol Naturel 15 Très bonne inhibition

Composition E1 LRD 17 Très bonne inhibition

HE Bois de Cadier LRD 20-25 Très bonne inhibition

Cédrol Naturel LRD 30 Bonne inhibition

HE Pin d’Alep LRD 30-35 Bonne inhibition

HE Camomille Romaine France 100 Pas d’inhibition

Laboratoire Rosier Davenne

Page 12: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

11

Graphique Récapitulatif

0 5 10 15 20 25 30 35IC50 (ppm)

NDGA

alpha Bisabolol

Composition E1

HE Bois de Cadier

Cédrol

HE Pin d'Alep

Référence

augmentation de l’inhibition

Laboratoire Rosier Davenne

Page 13: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

12

CONCLUSION

Juniperus oxycedrus L.

Laboratoire Rosier Davenne

Page 14: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

13

  L’enzyme 5-lipoxygénase catalyse la formation de leucotriènes, qui sont de puissants médiateurs impliqués dans des processus inflammatoires spécifiques (psoriasis) ou des réactions allergiques, par régulation de l’activité des cellules de Langerhans.

  L’utilisation de certaines huiles essentielles permet donc de réduire la production de leucotriènes et ainsi de mettre en évidence des actifs anti-inflammatoires potentiels.

Laboratoire Rosier Davenne

Page 15: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

14

  L’ensemble des Huiles essentielles étudiées lors de ces tests sont disponibles au Laboratoire Rosier Davenne.

  Le laboratoire vous propose aussi la conception de synergies aromatiques améliorant les propriétés apaisantes de vos produits cosmétiques.

Laboratoire Rosier Davenne

Page 16: Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles · 2018. 10. 26. · Activité anti-inflammatoire des Huiles Essentielles (évaluation par la mesure de l’inhibition de la 5-lipoxygénase)

15

ANNEXE Protocole Expérimental

  Dans des cuves en Quartz, on ajoute successivement :   10 µl de la solution à tester (pour le témoin : 10 µl du

solvant utilisé pour solubiliser le produit à tester)   2,8 ml de tampon phosphate 0,0022M (Na2HPO4 :

1,79g, KH2PO4 : 1,36g, NaCl : 7,02g, H2O qsp 1L)   1 unité d’enzyme 5-lipoxygénase   Agiter doucement   175 µl de solution « blanc » d’acide arachidonique dans

la cuve de référence (100 µl d’éthanol 95%, 100 µl NaOH 0,1M, 800ul H2O)

  175 µl de solution d’acide arachidonique dans la cuve de réaction (concentration finale 400 µM) (2 mg d’acide arachidonique, 100 µl d’éthanol 95%, 100 µl NaOH 0,1M, 800 µl H2O.)

  Lecture à 233 nm pendant 10 minutes.

Laboratoire Rosier Davenne