216_S_3.2_CCM

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7/23/2019 216_S_3.2_CCM http://slidepdf.com/reader/full/216s32ccm 1/2  Seconde 216 Santé 3 2013_2014 Activité S-3.2 : Identification d’espèces chimiques par Chromatographie sur Couche ince !CC" #$%& 'A%(I& : La chromatographie de colorants alimentaires. Tom doit analyser la composition de 3 colorants alimentaires (Vert (V), Marron(M), Violet (Vi)) en utilisant le principe de la chromatographie sur couche mince (CCM) dont le protocole expérimental est donné ci-dessous. INFO 1 : Principe de la chromatographie : Une chromatographie permet de saoir si plusieurs esp!ces chimi"ues sont présentes dans une su#stance li"uide et d$identi%ier ces esp!ces. &our réaliser une chromatographie on utilise un support sur le"uel un solant (ou un mélange de solants) migre. 'e solant (ou le mélange de solants) migrant est appelé éluant 'es di%%érentes esp!ces chimi"ues présentent dans l$échantillon déposé sur le support migrent aec l$éluant des itesses di%%érentes permettant ainsi de constater leur présence. &our identi%ier les di%%érentes esp!ces chimi"ues, on place des ré%érences et on compare les rapports %rontaux. ! "apport #rontal d$une e%p&ce : Remarque : 'a itesse de migration dépend de la solu#ilité de l$esp!ce chimi"ue dans l$éluant INFO 2 : Protocole e'périmental pour réali%er un chromatographie %ur couche mince 'iste du matériel   - pla"ue chromatographie (ou papier %iltre) - cue élution munie d$un #ouchon - éluant (exemples mélange d$éthanol et d$eau, eau salée,*) - petit pic en #ois - esp!ces séparer et identi%ier - esp!ces de ré%érences &rotocole - Verser une petite "uantité d$éluant dans la cue chromatographie. - +ermer la cue de %aon ce "ue l$éluant impr!gne la cue. - Tracer délicatement au crayon papier une ligne horiontale cm du #ord de la pla"ue chromatographie (ou papier %iltre). Cette ligne s$appelle la ligne de dép(t - &lacer (au crayon papier) sur la ligne de dép/t autant de croix "ue de dép/ts réaliser et noter les initiales des su#stances analyser. - 0 l$aide d$un pic déposer sur cette ligne une goutte de cha"ue su#stance analyser - &longer la pla"ue dans la cue élution de %aon ce "u$elle trempe dans l$éluant %an% recou)rir  la ligne de dép(t - +ermer la cue chromatographie - 1topper l$élution lors"ue le %ront de l$éluant est 2 cm du #ord de la pla"ue 'e nieau atteint par l$éluant est appelé ligne de #ront de l$éluant. - 1ortir la pla"ue, repérer la ligne de %ront de l$éluant. 'aisser sécher et o#serer. Remarq ue : 'ors"ue les su#stances analyser sont incolores il est nécessaire de rééler la pla"ue chromatographie sous une lampe ultra iolet (UV). Mar"uer alors au crayon papier les tches o#tenues. Tom a suii le protocole ci-dessus a%in d$analyser la composition des 3 colorants alimentaires Vert, Marron et Violet. 4l a pris comme ré%érences un colorant Cyan (C), un colorant Magenta (Mag.) et un colorant 5aune (5). 'ors"ue sur un chromatogramme deux tches ont m6me rapport %rontal alors ces deux esp!ces chimi"ues sont I*+N,I-.+S Ligne de dépôt Front de l’éluant

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 Seconde 216 Santé 3 2013_2014

Activité S-3.2 : Identification d’espèces chimiquespar Chromatographie sur Couche ince !CC"

#$%& 'A%(I& : La chromatographie de colorants alimentaires.Tom doit analyser la composition de 3 colorants alimentaires (Vert (V), Marron(M), Violet (Vi)) en utilisant leprincipe de la chromatographie sur couche mince (CCM) dont le protocole expérimental est donné ci-dessous.

INFO 1 : Principe de la chromatographie :

Une chromatographie permet de saoir si plusieurs esp!ces chimi"ues sont présentes dans une su#stanceli"uide et d$identi%ier ces esp!ces.

&our réaliser une chromatographie on utilise un support sur le"uel un solant (ou un mélange de solants)migre. 'e solant (ou le mélange de solants) migrant est appelé éluant

'es di%%érentes esp!ces chimi"ues présentent dans l$échantillon déposé sur le support migrent aec l$éluant des itesses di%%érentes permettant ainsi de constater leur présence.

&our identi%ier les di%%érentes esp!ces chimi"ues, on place des ré%érences et on compare les rapports %rontaux.

! "apport #rontal d$une e%p&ce :

Remarque : 'a itesse de migration dépend de la solu#ilité de l$esp!ce chimi"ue dans l$éluant

INFO 2 : Protocole e'périmental pour réali%er un chromatographie %ur couche mince'iste du matériel  - pla"ue chromatographie (ou papier %iltre)- cue élution munie d$un #ouchon- éluant (exemples mélange d$éthanol et d$eau, eau salée,*)- petit pic en #ois- esp!ces séparer et identi%ier - esp!ces de ré%érences

&rotocole

- Verser une petite "uantité d$éluant dans la cue chromatographie.- +ermer la cue de %aon ce "ue l$éluant impr!gne la cue.- Tracer délicatement au crayon papier une ligne horiontale cm du #ord de la pla"ue chromatographie

(ou papier %iltre). Cette ligne s$appelle la ligne de dép(t- &lacer (au crayon papier) sur la ligne de dép/t autant de croix "ue de dép/ts réaliser et noter les initiales

des su#stances analyser.- 0 l$aide d$un pic déposer sur cette ligne une goutte de cha"ue su#stance analyser - &longer la pla"ue dans la cue élution de %aon ce "u$elle trempe dans l$éluant %an% recou)rir  la ligne

de dép(t- +ermer la cue chromatographie- 1topper l$élution lors"ue le %ront de l$éluant est 2 cm du #ord de la pla"ue 'e nieau atteint par l$éluant est

appelé ligne de #ront de l$éluant.- 1ortir la pla"ue, repérer la ligne de %ront de l$éluant. 'aisser sécher et o#serer.

Remarque : 'ors"ue les su#stances analyser sont incolores il est nécessaire de rééler la pla"ue chromatographie sousune lampe ultra iolet (UV). Mar"uer alors au crayon papier les tches o#tenues.

Tom a suii le protocole ci-dessus a%in d$analyser la composition des 3 colorants alimentaires Vert, Marron etViolet. 4l a pris comme ré%érences un colorant Cyan (C), un colorant Magenta (Mag.) et un colorant 5aune (5).

'ors"ue sur un chromatogramme deux tchesont m6me rapport %rontal alors ces deuxesp!ces chimi"ues sont I*+N,I-.+S

Ligne de dépôt

Front de l’éluant

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7/23/2019 216_S_3.2_CCM

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 Seconde 216 Santé 3 2013_2014

Voici le schéma représentant le chromatogramme "u$il a o#tenu

7emar"ue oir la idéo 8 chromatographie de colorants 9 surchimphys.oila.net

2&me  P/",I+ : Prou)on% la pré%ence de ca#éine 'e :uronsan, médicament anti-%atigue a été retiré en 2;;< de la liste des produits dopants. 1a présence danscette liste était liée la présence de ca%éine dans ce médicament.=ans les la#oratoires d$analyse anti-dopage, on utilise des techni"ues d$analyse. 'a techni"ue d$analyse la plussimple est la chromatographie sur couche mince.Tom sait "ue le coca cola contient également de la ca%éine et il a extrait, comme ous lors de la derni!reséance de T& aant les acances, la ca%éine du ca%é.

Sa mission est triple. En utilisant un seul protocole expérimental, il doit :

-prouver la présence de caféine dans le Guronsan.- prouver la présence de caféine dans le coca.- vérifier qu’à la séance dernière de T, lors de l’extraction liquide-liquide, il a !ien récupéré la caféine du 

café, que l’on appellera extrait recueilli.

1 &roposer le protocole "ue doit réaliser Tom permettant de prouer la présence de ca%éine dansces trois su#stances (:uronsan (:), coca, extrait recueilli)

INFO 2: Cette %ois Tom réalise la chromatographie sur une couche mince de silice déposée sur une pla"ued$aluminium. >lle est %ragile il ne %aut pas décoller la silice en %aisant les dép/ts et il ne %aut mettre les doigtsdessus, on n$a pas #esoin d$analyser les traces de doigts ?

&ar ailleurs les dép/ts réalisés sont incolores* 4l utilisera donc une lampe UV pour rééler le chromatogramme.

Voici le schéma représentant le chromatogramme "u$il a o#tenu

1 Vous alle interpréter le chromatogramme o#tenu pour le colorantert

a) @u$o#sere-t-on pour ce dép/t A#) @u$a permis de %aire l$élution Ac) =onner la composition du colorant ert, apr!s aoir calculé lesdi%%érents rapports %rontaux.

2 @ue peut-on dire d$une su#stance si elle se décompose en plusieurstches A

3 @ue peut-on dire d$une su#stance si l$on n$o#sere "u$une seuletche A

4 @ue peut-on dire des distances parcourues par cha"ue colorant, "u$ilsoit pur ou dans un mélange A &roposer une explication.

Conclure "uant la composition des 3 colorants analysés endéterminant, dans chacun des cas les rapports %rontaux.

prou)ant la

pré%ence de ca#éine

INFO 1 : 'a ca%éine n$est pas toxi"ue en %ai#le "uantité. Mais le %lacon de ca#éine commerciale 

(ca%éine pure) dont il dispose %er)ant de ré#érence, en contient d$énormes "uantités. Be surtout

pas la goter ? Ci-contre, oici le pictogramme "ue l$on troue sur la ca%éine commerciale.

) Calculer les rapports %rontaux des tches o#tenues.2) Conclure "uant la présence de ca%éine dans ces trois su#stances.

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