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Culture cellulaire

Pr Pierre JeannessonCNRS UMR 6237

UFR de Pharmacie

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Quelques points de repère dans le développement de la culture tissulaire et cellulaire

• Début 20ème - Des cellules embryonnaires de poulet peuvent être maintenues en vie dan une solution saline hors du corps de l’animal- Culture de moelle épinière d’amphibien dans un caillot de lymphe: preuve que les axones sont produits sous forme d’extension de cellules nerveuses isolées

• 1940 - 1960- Développement des milieux de culture- Première lignée cellulaire humaine: lignée HeLa

• 1970 – 2000 : Premières applications- Mise au point des hybridomes et des anticorps monoclonaux- Production de cellules transfectées à l’échelle industrielle et de biomolécules (protéines recombinantes)

• 2000 +: - Culture de cellules souches embryonnaires- Développement de l’ingénierie cellulaire et tissulaire, de la thérapie cellulaire

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Primary explantMouse squamous cell carcinoma of skin with epithelial outgrowth

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NeuronsFive-day old rat olfactoy bulb cells 4 days in vitro

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Skeletal muscle cells

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Human leukemia cells

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Trypsinization (1)

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Trypsinization (2)

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Applications de la culture cellulaire (1): dans le domaine de la recherche fondamentale

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Applications de la culture cellulaire (2): dans le domaine biomédical et industriel

1. Domaine du diagnostic - Cytogénétique - Production d’anticorps monoclonaux

2. Domaine des biotechnologies et de la pharmacie - Elaboration de vaccins - Production de médicaments Criblage Effets toxiques Protéines recombinantes -Ingénierie cellulaire et tissulaire: cytocompatibilité des biomatériaux,

immunothérapie cellulaire, cellules épidermiques, cellules souches embryonnaires

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Evolution des cellules en culture

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Finite cell line (green)Continuous cell lines (blue, red)

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Transformation cellulaire

Focus formation in 3T3 cells. Focus of transformed cells formed spontaneously in dense culture of 3T3 cells

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Finite cell line (green)Continuous cell lines from transformed glia (blue) and metastatic melanoma (red)

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Voies métaboliques des cellules

Glycolyse

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Plastic substrate (polystyrene): Culture vessels

Petri dishes

Culture flasks

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Multiwell plates

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Transwells

w/o matrix with matrix (blue)

Epithelial cells alone

Transfilter coculture

Separated coculture

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Nano carriers

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Treated surfaces

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Types of microbial contamination

Fungal contamination

Bacterial contamination

Yeast contamination

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Mycoplasma contamination

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Antibiotics used in cell culture

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Constituents of serum