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Contrôle Qualité : Diagnostics moléculaires

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 22

Vue générale Prélèvement, transport, et traitement de l’échantillon maintenir l’intégrité des acides nucléique à travers tous le processus

Contrôle de la contamination établir un circuit unidirectionnel de la zone de préparation des réactifs (ADN free) à la zone de traitement de l’échantillon, à la zone d’amplification et de détection

Contrôles positif et négatif Référence: CLSI MM3-A (Méthode de diagnostic moléculaire pour les maladies infectieuses)

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 33

Contrôle Qualité: diagnostics moléculaires

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 55

Real Time-PCR (temps réel)

ECHANTILLON

PRIMER

Taq polymeraseCible AN

amplifiée

SYBR Green

Fluorescence Quantitative

+ - In

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 66

Réactions d’amplification

Amplification / Temps

POSITIVE

PAS d’ AMPLIFICATION

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 77

Real Time-PCR (temps réel)

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 88

A/H3

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 99

A/H5

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 1111

Risques avec la PCR

La plupart des RT-PCR sont faîtes « sur place » les primers ne sont pas nécessairement optimisés pour le test

les contrôles positifs sont « maison »les contrôles négatifs sont « maison »

L’interprétation des tests a besoin d’être faite prudemment